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广州市2021-2023年鱼生虾生病原微生物污染状况及影响因素分析 被引量:1
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作者 刘览 李海麟 +5 位作者 曾锦衡 王燕燕 张玉华 张维蔚 李燕 吴新伟 《热带医学杂志》 2025年第7期987-991,共5页
目的了解广州特色食品鱼生虾生中病原微生物的污染状况,探讨其影响因素,为鱼生虾生食品安全风险管理提供参考。方法2021-2023年在广州市餐饮环节采集市售鱼生、虾生样品674份,采用国家标准方法进行副溶血性弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、... 目的了解广州特色食品鱼生虾生中病原微生物的污染状况,探讨其影响因素,为鱼生虾生食品安全风险管理提供参考。方法2021-2023年在广州市餐饮环节采集市售鱼生、虾生样品674份,采用国家标准方法进行副溶血性弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌等致病菌和华支睾吸虫检测,分析病原微生物污染状况,并采用多因素logistic回归分析食源性致病菌污染的可能影响因素。结果广州市售鱼生虾生中华支睾吸虫检出率为0.15%(1/674);食源性致病菌检出率为41.84%(282/674),主要检出致病菌为副溶血性弧菌和创伤弧菌。多因素logistic回归分析显示,虾生较鱼生受食源性致病菌污染风险更高(OR=7.50,95%CI:4.88~11.54),海水产品更易被食源性致病菌污染(OR=1.95,95%CI:1.07~3.55),非中心城区采集鱼生虾生比中心城区采集的被食源性致病菌污染风险更高(OR=1.56,95%CI:1.05~2.31)。结论广州市鱼生虾生中华支睾吸虫检出率较低,虾生、海产品食源性致病菌污染风险高。应进一步加强对非中心城区和中小型餐厅的鱼生虾生监测与监管,保障本地特色食品安全,有效防控食源性疾病的暴发。 展开更多
关键词 鱼生虾生 华支睾吸虫 食源性致病菌 污染 影响因素
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云南省香格里拉市犬棘球绦虫感染因素分析
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作者 李奔福 肖丹 +9 位作者 陆春花 史帅 严信留 字金荣 彭佳 李建雄 王正青 徐倩 吴方伟 杨亚明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第2期281-285,共5页
从传染病网络直报系统、医院等收集香格里拉市有既往病例,以本地感染病例为线索,选择患病率高的建塘、小中甸和格咱镇为调查点。根据2019—2021年香格里拉市三个乡镇传染源犬监测数据,行政村的犬粪抗阳性率分为高、中、低3层,每层随机抽... 从传染病网络直报系统、医院等收集香格里拉市有既往病例,以本地感染病例为线索,选择患病率高的建塘、小中甸和格咱镇为调查点。根据2019—2021年香格里拉市三个乡镇传染源犬监测数据,行政村的犬粪抗阳性率分为高、中、低3层,每层随机抽取1~3个自然村作为研究点。2022年6月采用整群随机抽样法,每户采集1条犬粪样,随机采集路边无主犬/流浪犬粪样,每个乡(镇)调查犬200只以上,采用ELISA法犬粪抗原检测,家犬进行感染因素分析。共调查犬1587只,阳性64只,阳性率为4.03%(64/1587),其中家犬和无主犬或流浪犬棘球绦虫抗原阳性率分别为3.16%(35/1107)和6.04%(29/480)(χ^(2)=6.265,P<0.05)。建塘、小中甸和格咱镇阳性率分别为4.60%(41/891)、3.18%(14/440)和3.52%(9/256),各乡镇棘球绦虫粪抗原阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=12.030,P<0.05)。家犬感染以及其因素分析中,家犬公母阳性率分别是3.48%和2.68%,犬年龄组10周岁以上阳性率为4.11%,家犬性别和年龄组差异无统计学意义(χ^(2)=1.184、2.384,均P>0.05)。狼狗阳性率为5.56%,放养犬阳性率为36.36%,近3个月内没有驱虫犬阳性率为3.79%,投喂过病变脏器犬阳性率为17.20%。家犬品种、犬饲养方式和近3个月内是否驱过虫的犬和是否投喂过病变脏器的犬阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=15.431、49.121、5.291、65.391,均P<0.05),Logistic回归分析显示4个因素均与犬棘球绦虫感染有显著关系。香格里拉市犬棘球绦虫感染率处于较高水平,应当着重强化对传染源犬的防控工作。 展开更多
关键词 棘球绦虫 感染因素 分析 云南省 香格里拉市
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人工智能识螺系统识别湖北钉螺滇川亚种与拟钉螺的效能评价
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作者 周济华 白少文 +8 位作者 施亮 张键锋 杜春红 宋静 张宗亚 颜嘉琦 吴安东 董毅 杨坤 《中国血吸虫病防治杂志(中英文)》 北大核心 2025年第1期55-60,68,共7页
目的评价人工智能(artificial intelligence,AI)识螺系统识别云南省血吸虫病流行区湖北钉螺滇川亚种与拟钉螺的效能。方法2024年5月,于云南省选取丽江市永胜县永北镇采集湖北钉螺滇川亚种和拟钉螺样本各50只,通过智能手机拍摄100张螺样... 目的评价人工智能(artificial intelligence,AI)识螺系统识别云南省血吸虫病流行区湖北钉螺滇川亚种与拟钉螺的效能。方法2024年5月,于云南省选取丽江市永胜县永北镇采集湖北钉螺滇川亚种和拟钉螺样本各50只,通过智能手机拍摄100张螺样图像,包括25只湖北钉螺滇川亚种和25只拟钉螺壳口向上的正面图像及25只湖北钉螺滇川亚种和25只拟钉螺壳口向下的背面图像。由具有副高级及以上职称的血吸虫病防治专家根据图像质量和形态特征将螺样鉴别为“湖北钉螺滇川亚种”或“拟钉螺”,建立螺类图像分类标准数据集,并将该鉴别结果作为“金标准”。采用基于智能手机微信小程序的AI识螺系统对100张螺样图像进行识别。于云南省18个血吸虫病流行县(市、区)血吸虫病防治站、疾病预防控制中心随机选取血吸虫病防治专业技术人员对100张螺样图像进行人工识别测评,并按照查螺年限中位数将其分为两组,分析查螺年限对钉螺识别的影响。将AI识螺系统及人工识别结果分别与“金标准”进行比较,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,计算灵敏度、特异度、准确率、约登指数及曲线下面积(area under the curve,AUC)以评价识别结果与“金标准”的一致性。采用克朗巴哈α系数评价人工识别结果的内部一致性。结果累计选取54名血吸虫病防治专业技术人员进行人工识别测评,应答率为100%(54/54);人工识别准确率、灵敏度、特异度、约登指数、AUC分别为90%、86%、94%、0.80和0.90。人工测评结果内部总体一致性克朗巴哈α系数为0.768,其中湖北钉螺滇川亚种和拟钉螺图像内部一致性克朗巴哈α系数分别为0.916和0.925。螺样图像人工识别准确率为90%,其中湖北钉螺滇川亚种(86%)与拟钉螺识别准确率(94%)差异无统计学意义(χ^(2)=1.778,P>0.05)。壳口向上(88%)与壳口向下螺样图像人工识别准确率(92%)差异无统计学意义(χ^(2)=0.444,P>0.05);查螺年限≤6年组和>6年组人工识别螺样图像准确率分别为75%和90%,差异有统计学意义(χ^(2)=7.792,P<0.05)。AI识螺系统识别湖北钉螺滇川亚种准确率为88%,与人工识别差异无统计学意义(χ^(2)=0.204,P>0.05),灵敏度为100%、特异度为76%、AUC为0.88;对壳口向上和壳口向下螺样图像识别准确率分别为90%和86%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.379,P>0.05)。AI识螺系统识别准确率高于查螺年限≤6年组人员(χ^(2)=5.604,P_(校正)<0.025)。结论AI识螺系统对螺样图像的识别准确性与专业技术人员人工识别水平接近,可应用于云南省湖北钉螺滇川亚种与拟钉螺识别。 展开更多
关键词 湖北钉螺滇川亚种 拟钉螺 人工智能 智能识别 云南省
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苏北地区蜱源性立克次氏体目细菌及相关新发病毒鉴定及种系进化特征
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作者 陈国清 梅伟 +7 位作者 姜尚德 陶璐秋 季羽茜 崔倩 张红军 安然 徐兵 汪伟 《中国血吸虫病防治杂志(中英文)》 北大核心 2025年第4期380-386,414,共8页
目的了解苏北地区丘陵、沿海滩涂生境蜱种属及其携带的立克次氏体目细菌以及近年新发蜱源性病毒种类,从而为该地区蜱传热带病防控提供参考。方法2025年4月,在江苏省淮安市盱眙县丘陵和盐城市亭湖区江苏盐城湿地珍禽国家级自然保护区沿... 目的了解苏北地区丘陵、沿海滩涂生境蜱种属及其携带的立克次氏体目细菌以及近年新发蜱源性病毒种类,从而为该地区蜱传热带病防控提供参考。方法2025年4月,在江苏省淮安市盱眙县丘陵和盐城市亭湖区江苏盐城湿地珍禽国家级自然保护区沿海滩涂湿地两个生境采集蜱虫,经种属鉴定后,无菌提取蜱虫组织核酸。采用巢式和半巢式PCR法检测蜱虫携带的立克次体、埃立克体、无形体、虾夷病毒、阿龙山病毒、松岭病毒、北极内罗病毒、湿地病毒等病原体。对PCR扩增产物进行测序,对测序结果进行种系进化及遗传特征分析。结果共采集154只蜱虫,其中自淮安市采集114只、盐城市采集40只,153只为长角血蜱、1只为褐黄血蜱。经半巢式PCR法共检出5只阳性蜱虫(3.25%),其中自淮安市盱眙县采集的4只蜱虫检出无形体、盐城市采集的1只蜱虫检出立克次体,未检出埃立克体及近年新发的虾夷病毒、阿龙山病毒、北极内罗病毒、松岭病毒和湿地病毒。经BLASTn比对及种系进化分析,1种牛无形体、4株牛无形体出现了一定程度遗传分化,形成了两个进化小分支;1种为日本立克次体变异株,与山东日本立克次体核苷酸序列高度同源。结论苏北地区丘陵、沿海滩涂生境蜱虫分布广泛,携带的病原体遗传多样性高,无形体和立克次体具备致人兽共患病能力。 展开更多
关键词 立克次氏体 新发病毒 分子鉴定 种系进化 苏北地区
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福建省牛片形吸虫感染调查及空间分布
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作者 江典伟 蔡武卫 +2 位作者 郑丹 谢汉国 高澜琳 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第4期588-591,共4页
为了解福建省牛片形吸虫感染情况及流行地区分布,于2023年5月—2024年5月在福建省9个市及1个综合实验区各选取2~3个县作为牛粪样采集点,按各县牛数量在全省牛总数中占比分配采样数量,每头牛取1份粪样。沉淀法收集牛粪样中的片形吸虫虫... 为了解福建省牛片形吸虫感染情况及流行地区分布,于2023年5月—2024年5月在福建省9个市及1个综合实验区各选取2~3个县作为牛粪样采集点,按各县牛数量在全省牛总数中占比分配采样数量,每头牛取1份粪样。沉淀法收集牛粪样中的片形吸虫虫卵并进行形态学鉴定。各市(区)阳性粪样中随机选取10个虫卵,提取DNA,PCR扩增片形吸虫虫卵核糖体内转录间隔区2(ITS2)。采用SPSS20.0软件进行统计分析。共收集牛粪样502份,其中110份检出片形吸虫虫卵,感染率为21.9%(110/502)。检出的片形吸虫虫卵呈长椭圆形,淡黄褐色,卵一端有小盖。10个市(区)片形吸虫感染率由高到低依次是平潭区(52.8%,19/36)、福州市(42.5%,34/80)、龙岩市(37.9%,25/66)、宁德市(23.5%,8/34)、莆田市(16.0%,8/50)、漳州市(12.8%,6/47)、泉州市(10.3%,6/58)、厦门市(9.3%,3/32)、三明市(1.7%,1/59)、南平市(0,0/40),10个市(区)感染率差异有统计学意义(Fisher精确检验,P<0.01)。9个市(区)阳性粪样均在550 bp处扩增出特异性条带。福建省牛片形吸虫在地理分布上较为分散,覆盖率较高,分布上呈现“西北高、东南低”的格局,其中以平潭区、福州市、龙岩市片形吸虫感染率较高,为高感染核心区域(感染率为>36.0%~54.0%)。福建省牛片形吸虫流行地区分布广,家畜牛感染率较高。福建人群存在片形吸虫感染风险。 展开更多
关键词 片形吸虫 流行地区 流行特征 调查 福建
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人体寄生美丽筒线虫1例及近10年相关文献复习
6
作者 唐凤 孙晓峰 +2 位作者 徐祥珍 茅范贞 刘耀宝 《中国血吸虫病防治杂志(中英文)》 北大核心 2025年第3期332-336,共5页
本文报道了1例口腔黏膜寄生美丽筒线虫病例的诊治过程,以及寄生虫形态学检查和基因检测结果。此外,本文对近10年我国学者发表的美丽筒线虫感染相关文献进行了复习,并对感染病例特征、虫体寄生情况、诊治过程及相关流行病学调查结果进行... 本文报道了1例口腔黏膜寄生美丽筒线虫病例的诊治过程,以及寄生虫形态学检查和基因检测结果。此外,本文对近10年我国学者发表的美丽筒线虫感染相关文献进行了复习,并对感染病例特征、虫体寄生情况、诊治过程及相关流行病学调查结果进行了分析,旨在提高临床医生对该病的诊断能力。 展开更多
关键词 美丽筒线虫 筒线虫病 口腔 基因检测 文献复习
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国家卫生行业标准《蛔虫病诊断》(WS/T 565—2017)在安徽省和四川省实施情况的跟踪评价
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作者 金伟 刘道华 +5 位作者 刘阳 吴小红 俞铖航 郑彬 张光明 操治国 《寄生虫与医学昆虫学报》 2025年第2期73-77,111,共6页
目的了解《蛔虫病诊断》(WS/T 565—2017)的实施情况,为该标准的推广和进一步修订、完善提供科学依据。方法采取便利抽样方法从安徽和四川2省分别抽取省、市、县及乡镇四级从事寄生虫病防治或诊疗工作的专业技术人员作为调查对象,每省... 目的了解《蛔虫病诊断》(WS/T 565—2017)的实施情况,为该标准的推广和进一步修订、完善提供科学依据。方法采取便利抽样方法从安徽和四川2省分别抽取省、市、县及乡镇四级从事寄生虫病防治或诊疗工作的专业技术人员作为调查对象,每省的调查人数不少于150人。调查方式为调查对象自填问卷。结果问卷的有效回收率为91.90%(386/420)。该标准的知晓率和使用率分别为81.87%和49.22%,且这两项指标均随年龄的增加而升高(χ_(趋势)^(2)=7.977,19.016;P<0.01)。其中具有大专学历的调查对象知晓率较高,为90.72%(χ^(2)=8.619,P<0.05)。使用率方面,男性(58.38%)、具有大专学历者(67.01%)、省级单位工作人员(77.78%)和医疗机构人员(71.43%)的使用率较高(χ^(2)=13.486,17.166,8.426,5.956;P<0.05)。调查显示,57.77%的调查对象所在单位开展过宣传工作,53.89%的调查对象所在单位曾派员参加过培训,且这一比例随着单位级别的降低而增加(χ_(趋势)^(2)=9.403,14.729;P<0.01)。医疗机构在宣传和培训方面的参与度(89.29%)显著高于疾控机构(分别为55.31%和51.12%,χ^(2)=12.290,15.225,P<0.01)。此外,参加培训是提高知晓率的一个重要因素。共有368名调查对象(95.34%)所在单位开展过蛔虫病检测工作。共有378人(97.92%)认为该标准“适用”或“基本适用”,有369人(95.60%)认为该标准不需要修订。结论本研究结果表明,该标准仍然适用于当前蛔虫病的诊断需求,建议继续使用并加强宣传和贯彻。 展开更多
关键词 蛔虫病 诊断 卫生行业标准 跟踪评价 四川 安徽
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四川彭州一水域铁线虫的鉴定
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作者 叶勇刚 陈晓娣 +7 位作者 易延富 刘云飞 黎文维 魏勇 吴学婧 于吉锋 肖璐 康润敏 《热带医学杂志》 2025年第4期477-479,500,共4页
目的对四川彭州水域中的不明线虫进行鉴定,破解麦地那龙线虫传闻。方法对采自四川省彭州市某水域的6条疑似线虫进行了形态学检测,并对其18S核糖体核糖核酸(18S rRNA)保守序列进行扩增测序。结果6条线虫外观形态基本一致,虫体细长,呈圆线... 目的对四川彭州水域中的不明线虫进行鉴定,破解麦地那龙线虫传闻。方法对采自四川省彭州市某水域的6条疑似线虫进行了形态学检测,并对其18S核糖体核糖核酸(18S rRNA)保守序列进行扩增测序。结果6条线虫外观形态基本一致,虫体细长,呈圆线状,如一细长植物根须,质地坚硬,呈棕色或棕褐色,长12.00~28.00 cm,宽0.06~0.10 cm。其中有3条线虫尾部尖钝,呈圆锥形;3条尾部卷曲,末端分叉,呈倒“V”字形,且分叉部分的前腹面有明显泄殖孔和新月形褶皱,分别符合雌、雄铁线虫形态特征。此外,18S rRNA扩增序列与NCBI数据库中Gordius-JPN1同源性高达98.33%;进化树分析进一步显示该线虫与Gordius sp.属于同一分支。结论本次在四川彭州水域发现的6条线虫为铁线虫。 展开更多
关键词 铁线虫 水域 彭州
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2023年北京市昌平区人群土源性线虫病认知行为调查分析
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作者 王瑞琴 李飒 +4 位作者 金莹莹 蔡旭 纪宇欣 刘金月 李夏男 《疾病预防控制通报》 2025年第2期58-62,共5页
目的分析2023年北京市昌平区人群对土源性线虫病的认知及行为状况,为控制及阻断土源性线虫病传播提供参考。方法根据昌平区地理方位随机抽取东、西、南、北、中5个片区的5个调查点,每个调查点选取13岁及以上常住人群作为调查对象。利用... 目的分析2023年北京市昌平区人群对土源性线虫病的认知及行为状况,为控制及阻断土源性线虫病传播提供参考。方法根据昌平区地理方位随机抽取东、西、南、北、中5个片区的5个调查点,每个调查点选取13岁及以上常住人群作为调查对象。利用结构式调查问卷,采用集中询问自填式方法调查。结果共收回有效问卷912份,94.53%的调查对象听说过土源性线虫病,总体知识知晓率为81.05%,不同地区(χ^(2)=45.395)、性别(χ^(2)=4.436)、年龄(χ^(2)=42.496)、文化程度(χ^(2)=27.230)和职业(χ^(2)=72.904)知晓率差异均有统计学意义(P<0.05);卫生行为形成率为57.04%,不同地区(χ^(2)=167.002)、年龄(χ^(2)=139.579)、文化程度(χ^(2)=19.001)和职业(χ^(2)=43.254)形成率差异均有统计学意义(P<0.001)。饭前便后洗手形成率最高为93.86%,不喝生水形成率为63.82%,不赤脚下地形成率为78.51%;认知态度形成率普遍高于90.00%。结论2023年昌平区人群土源性线虫病知识知晓率、认知态度形成率较高,但卫生行为形成率较低;知识掌握片面,喝生水、赤脚下地等不良行为占一定比例。应针对性开展宣传教育,持续开展土源性线虫病感染状况监测,推动土源性线虫病传播控制与阻断进程。 展开更多
关键词 土源性线虫病 认知行为 现况调查
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寄生性蠕虫钙网蛋白及其在免疫中作用的研究进展
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作者 赵昱源 王思睿 +3 位作者 王梦奇 段蕊 何沛霞 孙树民 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第3期416-422,共7页
钙网蛋白是一种主要存在于内质网中的可溶性Ca2+结合蛋白,具有参与Ca2+信号转导、蛋白质折叠、抗原递呈等多种生物学功能。寄生性蠕虫的钙网蛋白由虫体分泌或表达于虫体表面,在虫体运动和生长发育中发挥重要作用,部分蠕虫钙网蛋白还与... 钙网蛋白是一种主要存在于内质网中的可溶性Ca2+结合蛋白,具有参与Ca2+信号转导、蛋白质折叠、抗原递呈等多种生物学功能。寄生性蠕虫的钙网蛋白由虫体分泌或表达于虫体表面,在虫体运动和生长发育中发挥重要作用,部分蠕虫钙网蛋白还与其免疫逃避过程密切相关。本文阐述了钙网蛋白的结构及功能,并围绕钙网蛋白调节宿主的Th1/Th2型免疫应答以及对宿主免疫细胞、免疫分子和补体系统的调控机制进行深入探讨,旨在为蠕虫病的防控和治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 寄生性蠕虫 钙网蛋白 免疫应答 免疫逃避
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为铁而生:日本血吸虫为何要摄取宿主红细胞
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作者 孙军 孙嘉 《科学》 2025年第3期49-52,4,共5页
日本血吸虫病在中国大地上肆虐了数千年,而当今科技的发展和社会的进步正将它送入历史。但是,作为自然界中的一种寄生生物,日本血吸虫在危害人类健康的同时,也在我们的生命科学研究中留下了珍贵的启示。例如,它为什么要吸血的问题,答案... 日本血吸虫病在中国大地上肆虐了数千年,而当今科技的发展和社会的进步正将它送入历史。但是,作为自然界中的一种寄生生物,日本血吸虫在危害人类健康的同时,也在我们的生命科学研究中留下了珍贵的启示。例如,它为什么要吸血的问题,答案将出人意料。 展开更多
关键词 血吸虫 日本血吸虫 色素 宿主 红细胞
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乳酸乳球菌介导的结核分枝杆菌ESAT-6重组抗原的构建、表达及鉴定
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作者 李文桂 欧兴坤 何爱琳 《热带医学杂志》 2025年第3期343-346,350,共5页
目的 构建乳酸乳球菌(LL)为载体的结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)疫苗,并研究其表达效率,为结核病的防治提供参考。方法 以pGEX-ESAT-6为模板扩增ESAT-6基因,采用XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-ESAT-6,... 目的 构建乳酸乳球菌(LL)为载体的结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)疫苗,并研究其表达效率,为结核病的防治提供参考。方法 以pGEX-ESAT-6为模板扩增ESAT-6基因,采用XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-ESAT-6,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒进行双酶切鉴定;电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株,构建结核分枝杆菌重组LL-ESAT-6(rLL-ESAT-6)疫苗,抽提质粒进行PCR鉴定。结果用XbaⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒pMG36e-ESAT-6,呈现3 600 bp的载体条带和288 bp的目标条带;PCR显示,rLL-ESAT-6疫苗可以扩增出288 bp的ESAT-6基因;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,rLL-ESAT-6可表达6×10^(3) Mr的ESAT-6蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的20%;免疫印迹表明表达蛋白可被结核病患者的血清所识别。结论 成功构建了结核分枝杆菌rLL-ESAT-6疫苗,表达的ESAT-6蛋白具有特异的抗原性。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 结核分枝杆菌 早期分泌性抗原靶6 疫苗
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Eg Innexin-unc9重组蛋白的表达纯化及诊断价值
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作者 吴军 范宇 +4 位作者 黎飞海 李军 张文宝 郭宝平 杨梅 《新疆医科大学学报》 2025年第4期421-425,431,共6页
目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化... 目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同温度下诱导表达,利用镍亲和层析柱纯化重组Eg Inx蛋白(r Eg Inx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)验证其特异性;制备多克隆抗体进行免疫组化;采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay,BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清,初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化r Eg Inx,WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明,在胆盐诱导后Eg Inx在原头蚴头节及体表皮层高表达,成虫则表达在生殖系统,主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论r Eg Inx具有高诊断特异性,其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控,可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 重组蛋白 免疫诊断
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MyD88信号通路抑制对M2型巨噬细胞极化及泡型棘球蚴病肝纤维化的影响
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作者 孟·孟根 马玉玉 +4 位作者 朱江 朱时雨 刘玉梅 马秀敏 王亮 《新疆医科大学学报》 2025年第4期438-446,共9页
目的探讨阻断髓样分化因子-88(Myeloid differentiation factor-88,MyD88)信号通路后泡型棘球蚴病(Alveolar echinococcosis,AE)肝脏组织中巨噬细胞浸润程度、炎症及纤维化的相关性。方法保种沙鼠肝脏组织中获得泡型棘球蚴原头节(Protos... 目的探讨阻断髓样分化因子-88(Myeloid differentiation factor-88,MyD88)信号通路后泡型棘球蚴病(Alveolar echinococcosis,AE)肝脏组织中巨噬细胞浸润程度、炎症及纤维化的相关性。方法保种沙鼠肝脏组织中获得泡型棘球蚴原头节(Protoscoleces,PSC),肝脏穿刺PSC分别建立泡型棘球蚴感染组(Em组)和MyD88信号通路阻断的泡型棘球蚴小鼠组(Em+TJ-M2010-5组)。通过免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)和qRT-PCR分析MyD88、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和巨噬细胞极化标志物的表达情况。体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,棘球蚴蛋白(Echinococcus-multilocularis-Protein,Emp)刺激RAW264.7后使用TJ-M2010-5阻断MyD88信号通路,通过蛋白印记实验(Western blot,WB)和qRT-PCR检测各组巨噬细胞极化标志物和MyD88的蛋白及mRNA的表达水平,流式细胞术检测阻断MyD88信号通路后M1型巨噬细胞(F4/80++CD86++)、M2型巨噬细胞(F4/80++CD206++)比例动态变化情况。结果与Em组相比,Em+TJ-M2010-5组MyD88 IHC阳性区域面积减少(P<0.001),α-SMA和CD163阳性区域面积增加(P均<0.001),诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,INOS)和CD86阳性区域面积减少(P均<0.001)。在体外细胞实验中,与空白对照组相比,泡球蚴蛋白刺激后,MyD88通路激活,MyD88和精氨酸酶-1(Arginine-1)蛋白及mRNA表达水平均升高(P<0.01~0.05),TJ-M2010-5干预后,MyD88及INOS的蛋白及mRNA表达水平均下降(P均<0.05),流式细胞术检测M2型巨噬细胞(F4/80++CD206++)比例由(7.76±0.44)%升高为(17.24±0.47)%(P<0.01),M1巨噬细胞(F4/80++CD86++)比例由(42.16±0.56)%降低为(32.35±1.15)%(P<0.01)。结论在泡型棘球蚴病中抑制MyD88信号通路后,巨噬细胞向M2型巨噬细胞方向极化并加重肝脏纤维化。 展开更多
关键词 纤维化 MyD88/NF-κB 巨噬细胞极化
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细粒棘球绦虫钙网蛋白的原核表达及功能初步鉴定
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作者 普娜 薄新文 +5 位作者 赵文卿 陈旭珂 张玉霞 张艳艳 孙艳 王正荣 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第2期223-230,共8页
目的原核表达细粒棘球绦虫钙网蛋白,并对其功能进行初步探索。方法以细粒棘球绦虫原头节cDNA为模板,PCR扩增目的基因,连接至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET28a-CRT,将测序正确的重组质粒转化至表达菌BL21诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚... 目的原核表达细粒棘球绦虫钙网蛋白,并对其功能进行初步探索。方法以细粒棘球绦虫原头节cDNA为模板,PCR扩增目的基因,连接至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET28a-CRT,将测序正确的重组质粒转化至表达菌BL21诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)电泳以及蛋白质免疫印迹(Westernblotting)分析鉴定rEgCRT;应用在线生物信息学分析软件分析EgCRT表达蛋白理化性质及部分生物学功能;rEgCRT免疫小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA和Westernblotting检测其抗体效价及反应原性;应用间接免疫荧光分析CRT在原头节和成虫体内的分布以及rEgCRT与犬小肠上皮细胞的结合;应用RT-qPCR方法分析crt基因在虫体不同发育阶段转录水平及rEgCRT(实验组,PBS为对照组)对犬小肠上皮细胞凋亡、焦亡的影响。结果CRT蛋白分子式为C_(2033)H_(3051)N_(511)O_(650)S_(9),预测EgCRT蛋白α-螺旋占24.05%、无规则卷曲占60.00%,延伸链结构占15.95%。EgCRT与多房棘球绦虫和猪带绦虫的CRT在系统进化树上聚在一大分支。成功诱导表达纯化获得纯度较高且相对分子量约为50000的rEgCRT;免疫学特性鉴定表明rEgCRT具有较好的抗原特异性;间接免疫荧光试验发现EgCRT可分别定位于原头节表皮层和成虫表皮层及部分实质组织。RT-qPCR分析结果显示,成虫阶段EgCRT的表达水平(24.83±0)高于原头节阶段(27.05±0.008)(t=45.76,P<0.01)。间接免疫荧光分析结果显示,rEgCRT共孵育的犬小肠上皮细胞有绿色荧光聚集。RT-qPCR结果显示,培养24 h后实验组和对照组Bax相对转录水平分别为31.63±0.001、24.17±0.027(t=7.94,P<0.01),表达上调;Bcl-2相对转录水平分别为34.55±0.070、19.65±0.042(t=15.70,P<0.01),表达下调;IL-18相对转录水平分别为25.62±0.067、20.93±0.014(t=5.05,P<0.01),表达下调;IL-1β相对转录水平分别为28.18±0.001、28.71±0.020(t=0.26,P>0.05),表达下调。结论rEgCRT具有良好的抗原性,EgCRT在细粒棘球绦虫不同虫期均有表达,且其可能在细粒棘球绦虫固着、定植或生长发育中具有重要的作用;此外,rEgCRT与犬SIECs发生黏附并调节细胞的凋亡、焦亡,可能参与感染过程或宿主免疫应答,具有作为潜在疫苗候选分子、药物靶标的应用前景。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 钙网蛋白 克隆表达 免疫荧光 分子功能
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微滴式数字PCR检测日本血吸虫核酸的方法建立及应用的初步评价
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作者 汤宪时 杨静 +2 位作者 曲国立 许永良 仝德胜 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期544-552,共9页
目的建立微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)检测日本血吸虫的方法,初步评价其应用价值。方法设计合成用于染料法和探针法的引物和探针,构建含靶标序列的质粒,评价两种方法检测重组质粒、感染性钉螺和混合钉螺DNA的灵敏度,采用... 目的建立微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR,ddPCR)检测日本血吸虫的方法,初步评价其应用价值。方法设计合成用于染料法和探针法的引物和探针,构建含靶标序列的质粒,评价两种方法检测重组质粒、感染性钉螺和混合钉螺DNA的灵敏度,采用阴性钉螺、曼氏血吸虫、肝吸虫、曼氏迭宫绦虫基因组DNA以及日本血吸虫虫体基因组DNA评价两种方法的特异性,应用和评价探针法检测以不同毛钉比和孵育时长接触毛蚴的钉螺早期感染情况,检测感染过量尾蚴(200条)小鼠体内童虫在不同组织器官中早期移行分布情况。结果检测质粒梯度稀释产物,绘制ddPCR标准曲线,染料法回归方程为y=-0.8399x+7.0509,相关系数R^(2)=0.9881;探针法回归方程为y=-1.0475x+7.2551,相关系数R^(2)=0.9998。探针法质粒检测下限介于38.94 cp/μL和194.74 cp/μL之间。两种方法均可在浓度不低于0.002 ng/μL感染性钉螺基因组DNA样本中和各组混合钉螺基因组DNA中检出阳性反应。探针法检测阴性钉螺、曼氏血吸虫、肝吸虫、曼氏迭宫绦虫结果与对照组比较无显著差异,而染料法检测阴性钉螺DNA(291 ng/μL)检测值为(20.3±4.39)cp/μL与对照组检测值(1.5±0.1)cp/μL比较有明显差别。探针法检测钉螺早期感染显示,在毛钉比高于5∶1的室温条件下孵育30 s即可检出钉螺体内毛蚴DNA,检测值在短时间(5 min)内达高峰,峰值随毛钉比增高呈相应倍数增高的趋势。探针法检测小鼠早期感染显示,童虫第2 d进入肺部,第4 d进入肝脏,血供丰富的脏器(脾、肾、脑)一直有移行的童虫,心脏和胰腺第9 d有异位寄生的趋势,睾丸检测值前9 d始终处于阴性对照水平。结论ddPCR探针法在检测质粒、感染性钉螺和混合钉螺中比染料法更准确可靠,特异性更强,染料法在钉螺检测中存在非特异反应。探针法有望敏感有效反映钉螺早期感染情况,及童虫在宿主小鼠体内移行和在多组织内的分布情况。 展开更多
关键词 日本血吸虫 钉螺 小鼠 微滴式数字PCR(ddPCR)
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水稻与稻田环境中吡螺脲消解动态观察及残留测定
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作者 吴欢琪 王俊敏 +5 位作者 杨孔谈 王许蜜 方楠 段李平 张昌朋 王祥云 《中国血吸虫病防治杂志(中英文)》 北大核心 2025年第2期201-208,共8页
目的建立水稻及稻田环境吡螺脲残留检测方法,测定其残留量,并观察其消解动态。方法2022年7月选取浙江省农业科学院水稻田作为试验田,将试验田分为空白对照组(不施药)、1倍施药浓度组(剂量1 kg/667 m^(2))和5倍施药浓度组(剂量5 kg/667 m... 目的建立水稻及稻田环境吡螺脲残留检测方法,测定其残留量,并观察其消解动态。方法2022年7月选取浙江省农业科学院水稻田作为试验田,将试验田分为空白对照组(不施药)、1倍施药浓度组(剂量1 kg/667 m^(2))和5倍施药浓度组(剂量5 kg/667 m^(2)),每组面积100 m^(2)。1倍和5倍施药浓度组分别在水稻分蘖初期施用20%吡螺脲硫酸盐悬浮剂1次,施药后2 h以及1、2、3、5、7、11、14、21、28、35、49 d和63 d分别采集水稻植株、稻田水、土壤样本,施药后98 d采集各组秸秆、田间土壤、糙米和稻壳样本。采用快速、简便、廉价、高效、稳定和安全(quick,easy,cheap,effective,rugged,and safe,QuEChERS)前处理方法提取和净化样本中吡螺脲,采用超高效液相色谱⁃串联质谱(ultra performance liquid chromatography⁃tandem mass spectrometry,UPLC⁃MS/MS)技术检测各样本中吡螺脲含量,配制溶剂标准工作液和基质标准工作液,以吡螺脲浓度为横坐标、峰面积为纵坐标拟合线性回归方程,计算基质标准曲线斜率k与溶剂标准曲线斜率K的斜率比值以评价吡螺脲在样本中基质效应。根据《农作物中农药残留试验准则(NY/T 788—2018)》,设置水稻植株中吡螺脲添加水平为0.005、0.050、5.000 mg/kg和1000.000 mg/kg,稻田水中吡螺脲添加水平为0.005、0.050、2.000 mg/kg和10.000 mg/kg,土壤中吡螺脲添加水平为0.005、0.050 mg/kg和2.000 mg/kg,糙米、稻壳吡螺脲添加水平为0.005、0.050 mg/kg和5.000 mg/kg,计算吡螺脲添加回收率和相对标准偏差(relative standard deviation,RSD),评价UPLC⁃MS/MS技术检测吡螺脲含量的有效性。对不同时间采样的各样本中吡螺脲的浓度进行一级动力学方程拟合,分析吡螺脲在水稻植株、稻田水和土壤中的降解趋势,计算不同样本中吡螺脲半衰期。结果在0.0001~0.0200 mg/kg浓度范围内,吡螺脲在溶剂和基质条件下质量浓度与检出峰面积间存在良好线性关系(R2=0.9858~0.9997,t=-0.47~1.62,P均<0.01)。吡螺脲在水稻植株、糙米和稻壳中基质效应分别为70.26%、65.42%和65.12%,均<80%,为基质抑制效应;在土壤中基质效应为87.06%,为弱基质效应。田间试验各样本中吡螺脲添加回收率范围为77.61%~100.12%,RSD范围为1.43%~6.74%,定量限为0.005 mg/kg,添加回收率和RSD符合《农作物中农药残留试验准则(NY/T 788—2018)》要求,验证了该检测方法的有效性。施用剂量为1 kg/667 m^(2)的吡螺脲后,水稻植株和稻田水样本中吡螺脲半衰期分别为6.24 d和3.43 d;施药后98 d糙米和稻壳样本中吡螺脲最终残留低于定量限0.005 mg/kg。施用剂量为5 kg/667 m^(2)的吡螺脲后,水稻植株和稻田水样本中吡螺脲半衰期分别为15.75 d和7.62 d,施药后98 d糙米中吡螺脲最终残留低于定量限0.005 mg/kg,稻壳中吡螺脲最终残留量为0.049 mg/kg。结论本研究通过采用QuEChERS前处理方法提取和净化基质样本中吡螺脲、UPLC⁃MS/MS技术检测吡螺脲在水稻植株及稻田环境中残留量,建立了一套操作简单且准确度、精确度均较高的吡螺脲残留检测方法。在稻田中施用吡螺脲后,水稻植株及稻田水中吡螺脲浓度随时间推移逐渐下降,最终残留浓度较低。 展开更多
关键词 福寿螺 吡螺脲 农药残留 消解动态 超高效液相色谱⁃串联质谱法
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阿苯达唑-葡聚糖纳米颗粒对小鼠继发性多房棘球蚴的疗效研究
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作者 杨海山 李胜学 +5 位作者 张海霞 赵鸿昌 星通川 吴希臣 张翔 刘燕 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第1期15-22,共8页
目的使用阿苯达唑葡聚糖纳米颗粒(ABZ-GPs)和阿苯达唑(ABZ)对继发性泡型棘球蚴病小鼠进行治疗,评价ABZ-GPs对泡型棘球蚴病的体内治疗效果,进一步验证葡聚糖颗粒作为抗包虫药物载体的可行性。方法造模成功的棘球蚴病小鼠随机分为ABZ组、... 目的使用阿苯达唑葡聚糖纳米颗粒(ABZ-GPs)和阿苯达唑(ABZ)对继发性泡型棘球蚴病小鼠进行治疗,评价ABZ-GPs对泡型棘球蚴病的体内治疗效果,进一步验证葡聚糖颗粒作为抗包虫药物载体的可行性。方法造模成功的棘球蚴病小鼠随机分为ABZ组、葡聚糖纳米颗粒(GPs)组、ABZ-GPs组和对照组,各用药组以终浓度50 mg/mL灌胃给药4个疗程后,通过影像学、组织病理变化、超微结构和免疫学等多个角度对ABZ-GPs的治疗效果进行评价。结果成功构建了棘球蚴病动物模型,小鼠经ABZ-GPs和ABZ灌胃给药后,肝脏病灶组织明显坏死,大量淋巴细胞浸润。ABZ-GPs组平均囊肿湿重和ABZ组差异有统计学意义(t=7.83,P<0.05)。影像学显示ABZ-GPs靶向至肝脏组织;病理及超微结构显示对照组和GPs组肝脏上的泡状棘球蚴生长良好,囊泡体积大,半透明或透明状,充满囊液,囊壁张力高,无钙化,角质层和生发层清晰,多见可育囊及囊内不同数量的原头蚴;ABZ组囊腔塌陷,伴部分坏死及淋巴细胞浸润;ABZ-GPs组棘球蚴囊泡角质层和生发层难以识别,大泡状坏死,中心钙化,纤维组织增生,炎性细胞浸润,生发层微绒毛变粗、变短或消失,细胞核固缩、溶解或消失,胞浆微管明显扩展,髓鞘样变或空泡样变。结论ABZ-GPs对继发性泡球蚴病小鼠具有良好的靶向性和体内杀伤活性。 展开更多
关键词 阿苯达唑-葡聚糖纳米颗粒 继发性多房棘球蚴病 靶向性 杀伤活性
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内蒙古黑鹳感染裂口凯塞玛吸虫的形态学与分子鉴定
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作者 李健 李奋奇 +4 位作者 高楠 柳强 周庆安 李春福 胡薇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 北大核心 2025年第4期592-595,共4页
2024年8月自内蒙古呼和浩特市大青山野生动物保护中心黑鹳的咽部与食道采集吸虫,取形态完整的成虫10条,盐酸卡红染色后形态观察。提取3条成虫基因组DNA,PCR扩增内转录间隔区2(ITS2)序列并测序,测序结果在GenBank数据库中进行BLAST比对,... 2024年8月自内蒙古呼和浩特市大青山野生动物保护中心黑鹳的咽部与食道采集吸虫,取形态完整的成虫10条,盐酸卡红染色后形态观察。提取3条成虫基因组DNA,PCR扩增内转录间隔区2(ITS2)序列并测序,测序结果在GenBank数据库中进行BLAST比对,使用MEGA 11.0软件以邻接法构建系统进化树。在10只黑鹳咽部共采集到吸虫157条,感染强度为8~33条/只,平均约16条/只。吸虫体形呈叶片状、具分支状睾丸以及前位卵巢,形态符合裂口凯塞玛吸虫特征。PCR扩增和双向测序显示,获得的3条ITS2序列,长度均为425 bp,序列完全一致。提交GenBank,获得登录号:PQ899708。经BLAST比对发现,该序列与捷克黑鹳分离株在第365位碱基存在单一突变(C→T)。系统进化树显示,所获得的序列与GenBank中裂口凯塞玛吸虫聚为一支(自展值98%),表明其在种内具有单系性及相对稳定的遗传背景。 展开更多
关键词 裂口凯塞玛吸虫 黑鹳 DNA内转录间隔区2 种系发育分析
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