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静脉及腹腔感染途径对BALB/c小鼠巴贝虫感染及脾脏免疫细胞的影响
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作者 杨汉银 蔡玉春 +4 位作者 闫书宁 辛怡 莫子冉 徐斌 郑彬 《中国血吸虫病防治杂志(中英文)》 北大核心 2025年第1期61-68,共8页
目的观察经静脉和腹腔接种田鼠巴贝虫后,BALB/c小鼠田鼠巴贝虫染虫率及脾形态和脾免疫细胞占比变化,为巴贝虫感染免疫调控机制相关研究提供参考。方法利用实验室保种田鼠巴贝虫虫株制备染虫率为10%的全血血样,将75只BALB/c小鼠随机分为... 目的观察经静脉和腹腔接种田鼠巴贝虫后,BALB/c小鼠田鼠巴贝虫染虫率及脾形态和脾免疫细胞占比变化,为巴贝虫感染免疫调控机制相关研究提供参考。方法利用实验室保种田鼠巴贝虫虫株制备染虫率为10%的全血血样,将75只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、静脉接种组和腹腔接种组,每组25只。腹腔接种组和静脉接种组小鼠分别经腹腔和静脉接种染虫率为10%的全血100μL,接种当天记为d0;正常对照组为健康小鼠,不作任何处理。分别于d7、d14、d21、d28、d35采集各组小鼠尾尖血样制作薄血膜血片,观察并比较红细胞染虫情况。此外,分别于d7、d14、d21、d28、d35从各组随机选择5只小鼠,剖杀后取脾脏,测量脾脏大小和质量;分离脾细胞,使用流式细胞仪检测脾脏CD3e^(+)T细胞、CD45R^(+)B细胞、CD49b^(+)自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)和巨噬细胞(MФ细胞)(F4/80)等免疫细胞占CD45^(+)淋巴细胞的比例。结果静脉接种组和腹腔接种组小鼠染虫率均于d7达到高峰,染虫率分别为22.80%、44.82%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.141,P<0.01);随后两组染虫率均迅速下降,至d35时血涂片中已无法观察到虫体。静脉接种组小鼠脾脏长度[(32.91±2.20)mm]、宽度[(9.82±0.43)mm]及质量[(0.78±0.10)g]均于d14达最大值,腹腔接种组小鼠脾脏长度[(32.42±3.21)mm]、宽度[(10.25±0.73)mm]及质量[(0.73±0.09)g]分别在d21、d7、d14达最大值。d21时,静脉接种组、腹腔接种组、正常对照组小鼠脾脏长度、宽度和质量差异均有统计学意义(F=10.310、9.824、10.672,P均<0.05);腹腔接种组小鼠脾脏长度、宽度和质量均大于静脉接种组(P均<0.05)。静脉接种组和腹腔接种组小鼠脾脏CD3e^(+)T细胞[(60.60±6.20)%和(39.68±7.62)%]、CD45R^(+)B细胞[(43.32±2.08)%)和(49.53±4.90)%]、CD49b^(+)NK细胞[(6.88±1.34)%和(7.71±1.59)%]、MФ细胞(F4/80)占比[(2.21±0.29)%和(3.80±0.35)%]分别于d14、d21、d21、d14达峰值。d14时,静脉接种组、腹腔接种组、正常对照组小鼠脾脏CD3e^(+)T细胞和MФ细胞(F4/80)占比差异均有统计学意义(F=16.730、15.941,P均<0.05);静脉接种组小鼠脾脏CD3e^(+)T细胞占比高于腹腔接种组,MФ细胞(F4/80)占比低于腹腔接种组(P均<0.01)。d21时,3组小鼠脾脏CD3e^(+)T细胞、CD45R^(+)B细胞、CD49b^(+)NK细胞和MФ细胞(F4/80)占比差异均有统计学意义(F=9.252、14.349、13.436、8.180,P均<0.05);静脉接种组小鼠脾脏CD3e^(+)T细胞占比高于腹腔接种组,CD45R^(+)B细胞和MФ细胞(F4/80)占比均低于腹腔接种组(P均<0.01)。d28时,3组小鼠脾脏CD3e^(+)T细胞占比差异有统计学意义(F=9.772,P<0.05);静脉接种组CD3e^(+)T细胞占比低于腹腔接种组(P<0.01)。结论腹腔接种和静脉接种均可致BALB/c小鼠感染田鼠巴贝虫,且腹腔接种后小鼠染虫率高于静脉接种。腹腔接种和静脉接种田鼠巴贝虫对小鼠脾脏形态和免疫细胞占比造成的影响存在差异,提示不同接种方式对小鼠免疫应答机制具有不同影响。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 腹腔接种 静脉接种 脾脏 免疫细胞 小鼠
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改良DMEM培养基对人芽囊原虫的培养效果观察 被引量:1
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作者 朱名超 朱娅 +3 位作者 原慧真 郭飞波 王俊 舒玲 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2024年第2期72-77,共6页
目的探讨改良DMEM培养基培养人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的效果。方法选取了329例临床样本分别用改良DMEM培养法与普通DMEM培养法和碘液染色涂片法对B.h的检出率进行比较;普通DMEM培养法与改良DMEM培养法中B.h形态、最低检出... 目的探讨改良DMEM培养基培养人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的效果。方法选取了329例临床样本分别用改良DMEM培养法与普通DMEM培养法和碘液染色涂片法对B.h的检出率进行比较;普通DMEM培养法与改良DMEM培养法中B.h形态、最低检出限、生长曲线等进行比较。结果329例临床样本中改良DMEM培养B.h检出阳性率为5.17%(17/329),碘液染色涂片法阳性率1.52%(5/329),差异有统计学意义(P<0.01)。B.h在两种培养基中均以空泡型为主,但改良DMEM更易见到颗粒型和二分裂型,生长高峰期为第72 h,达高峰期后维持时间较普通DMEM培养长。结论改良DMEM培养法优于普通DMEM培养法,可用于人芽囊原虫的体外增殖培养。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 改良DMEM培养法 碘液染色 形态观察
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驽巴贝虫metacaspase基因的克隆、表达、反应原性鉴定和生物信息分析 被引量:1
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作者 任冀超 甘露 +8 位作者 郑会珍 冯秀娟 崔泽云 李佳欣 金依璇 张伟 郭庆勇 巴音查汗·盖力克 李永畅 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2024年第3期325-331,共7页
目的 克隆、表达驽巴贝虫精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(BcMC),鉴定其反应原性并分析其生物学信息。方法 根据驽巴贝虫部分基因序列设计并合成Bcmc基因扩增引物,采用PCR扩增Bcmc基因并克隆至原核表达载体pET-28a,提取质粒p... 目的 克隆、表达驽巴贝虫精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(BcMC),鉴定其反应原性并分析其生物学信息。方法 根据驽巴贝虫部分基因序列设计并合成Bcmc基因扩增引物,采用PCR扩增Bcmc基因并克隆至原核表达载体pET-28a,提取质粒pET-28a-Bcmc进行双酶切、PCR和测序鉴定,将重组质粒转入感受态细胞大肠埃希菌BL21 (DE3),优化诱导条件后,选择最适异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导温度和时间诱导,采用12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况。用His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组蛋白后,以驽巴贝虫感染阳性马血清为一抗,Western blotting分析重组蛋白的反应原性。采用ProtParam等生物信息学在线软件预测Bcmc基因的理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、抗原表位、二级和三级结构、蛋白互作网络,对比BcMC与疟原虫属MC-1 (PsMC-1)和泰氏锥虫MC (TtMC)的三级结构。Bcmc序列在NCBI上进行BLAST比对,使用Mega 7.0软件,采用邻接法构建基于mc基因序列的系统进化树。结果Bcmc基因PCR扩增产物约为996 bp,与预期片段一致。重组质粒pET-28a-Bcmc经双酶切、PCR和测序鉴定表明插入的目的基因正确。诱导条件优化结果显示,BcMC重组蛋白在IPTG终浓度为0.8 mmol/L、37℃培养5 h时的表达量最高。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量(Mr)约为36 000。Western blotting结果表明,纯化后的BcMC可与驽巴贝虫感染阳性马血清发生特异性反应。生物信息学分析结果显示,BcMC的Mr为36 956.72;具有25个磷酸化点位;亚细胞定位预测位于线粒体的比例为10%;B细胞抗原表位分析发现该蛋白含有12个潜在抗原表位;BcMC蛋白的二级结构中,无规则卷曲占50.30%、α-螺旋占23.19%;BcMC的三级结构与PsMC-1和TtMC相似;蛋白互作网络预测结果显示,与BcMC相互作用的蛋白及BcMC参与的生物过程均与细胞凋亡有关。BLAST比对结果和系统进化树分析结果显示,Bcmc与马泰勒虫(CP099439)、马泰勒虫WA株(XM_004830992)的mc基因序列一致性均为99.90%,进化树上聚为一支,亲源关系较近。结论 BcMC原核表达蛋白具有良好的反应原性,生物信息学分析表明BcMC参与驽巴贝虫凋亡的生物过程。 展开更多
关键词 驽巴贝虫 精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 反应原性 生物信息分析
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2020年安徽省羊群无浆体感染调查 被引量:1
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作者 吴星华 王继谱 +6 位作者 高思潮 罗昕雨 李乔乔 陈东前 刘欣超 顾有方 李文超 《中国血吸虫病防治杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期620-625,共6页
目的了解2020年安徽省羊群无浆体感染率和分子特征,为羊群无浆体病防控提供科学依据。方法2020年6—12月,从安徽省阜阳市临泉县、亳州市利辛县、六安市裕安区、安庆市望江县、芜湖市南陵县、滁州市天长市和滁州市凤阳县的7个羊场共采集... 目的了解2020年安徽省羊群无浆体感染率和分子特征,为羊群无浆体病防控提供科学依据。方法2020年6—12月,从安徽省阜阳市临泉县、亳州市利辛县、六安市裕安区、安庆市望江县、芜湖市南陵县、滁州市天长市和滁州市凤阳县的7个羊场共采集355份羊新鲜血液样本,采用基于牛无浆体和嗜吞噬细胞无浆体16S核糖体RNA(16S ribosomal RNA,16S r RNA)基因、绵羊无浆体主要表面蛋白4(major surface protein 4,MSP4)基因、山羊无浆体柠檬酸合酶(citric acid synthase,glt A)基因的PCR技术对所有血液样本进行扩增,统计羊群中牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、绵羊无浆体和山羊无浆体感染率,并对获得的PCR阳性扩增产物进行测序和遗传进化分析。结果355份羊血液样本中,无浆体总感染率为17.5%(62/355),其中牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、绵羊无浆体和山羊无浆体感染率分别为2.8%(10/355)、2.5%(9/355)、2.5%(9/355)和7.0%(25/355),牛无浆体和嗜吞噬细胞无浆体、嗜吞噬细胞无浆体和绵羊无浆体、嗜吞噬细胞无浆体和山羊无浆体以及牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、绵羊无浆体合并感染率分别为0.8%(3/355)、1.1%(4/355)、0.3%(1/355)和0.3%(1/355)。除凤阳县羊场未检出无浆体外,其他羊场均检出至少3种无浆体,且存在多种无浆体合并感染。355份羊血液样品中,山羊羊群和绵羊羊群无浆体感染率分别为14.7%(24/163)和19.8%(38/192),<6月龄和≥6月龄羊群无浆体感染率分别为31.0%(31/100)和12.2%(31/255),不同品种和年龄羊群中均存在上述4种无浆体感染。结论2020年安徽省羊群普遍存在多种无浆体感染,尤其是嗜吞噬细胞无浆体、绵羊无浆体和山羊无浆体,具有人兽共患风险;应加强羊群无浆体感染监测和防控。 展开更多
关键词 无浆体 嗜吞噬细胞无浆体 绵羊无浆体 山羊无浆体 牛无浆体 山羊 绵羊 安徽省
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人芽囊原虫对实验感染昆明小鼠肠黏膜超微结构的影响 被引量:10
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作者 张红卫 李文 +2 位作者 颜秋叶 贺丽君 苏云普 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期187-191,共5页
目的观察昆明小鼠感染人芽囊原虫后肠黏膜超微结构的改变,探讨人芽囊原虫的致病机制。方法20只昆明小鼠随机分为4组:A和D组为接受免疫抑制剂(地塞米松)处理,B组不用地塞米松处理,C组为正常对照组。A组和B组经口感染204人芽囊原虫包囊等,... 目的观察昆明小鼠感染人芽囊原虫后肠黏膜超微结构的改变,探讨人芽囊原虫的致病机制。方法20只昆明小鼠随机分为4组:A和D组为接受免疫抑制剂(地塞米松)处理,B组不用地塞米松处理,C组为正常对照组。A组和B组经口感染204人芽囊原虫包囊等,C组和D组灌注等量Locke氏液作为对照。感染6d后,剖杀各组小鼠取回盲部肠黏膜处理后,扫描和透射电镜下观察其超微结构。结果扫描电镜下见A、B两组人芽囊原虫寄生在小鼠回盲部肠腔和肠黏膜表面,个别虫体入侵肠黏膜及肠黏膜皱襞,部分肠黏膜微绒毛呈局灶性破坏;透射电镜下见部分吸收细胞表面微绒毛数目减少,吸收细胞和杯状细胞线粒体水肿,粗面内质网扩张、脱颗粒,间质内淋巴细胞浸润及嗜酸粒细胞增多。A组病变程度比B组重,C组和D组未见异常。结论感染人芽囊原虫的昆明小鼠回盲部肠黏膜超微结构有严重的损害,肠黏膜损伤程度受机体免疫状态的影响。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 小鼠 肠黏膜 透射电镜 扫描电镜 超微结构
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腹泻患者及培养基中人芽囊原虫的各期形态研究 被引量:10
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作者 张旭 乔继英 +3 位作者 董小惠 李亚青 李小琪 李琛 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期116-118,共3页
目的 研究光镜下各期人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)形态,以进一步研究其生活史及致病性,并为临床检验提供形态依据。方法 使用洛克氏液-鸡蛋-血清培养基,对腹泻患者粪便的B.h进行体外连续培养,经碘液染色及铁苏木素染色,在光镜... 目的 研究光镜下各期人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)形态,以进一步研究其生活史及致病性,并为临床检验提供形态依据。方法 使用洛克氏液-鸡蛋-血清培养基,对腹泻患者粪便的B.h进行体外连续培养,经碘液染色及铁苏木素染色,在光镜下研究其各期形态、结构。结果 通过形态学研究观察到空泡型、颗粒型、阿米巴型及包囊型以及各型之间的相互转化。结论 B.h形态多样,临床多见空泡型和颗粒型。空泡型可成囊。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 腹泻 粪便培养 形态学 空泡型 颗粒型
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上海市不同人群人芽囊原虫感染调查 被引量:25
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作者 张小萍 李兰花 +7 位作者 朱倩 傅英华 马晓疆 吕山 洪国宝 何艳燕 王真瑜 马杏宝 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第9期693-694,710,F0003,共4页
目的了解上海市不同人群人芽囊原虫感染情况。方法在上海市6个区收集居民新鲜粪便,采用Ringer溶液37℃恒温条件下培养人芽囊原虫,计算人芽囊原虫感染率。结果检查居民2984人,人芽囊原虫阳性者88人,感染率2.95%。上海市各区人群感... 目的了解上海市不同人群人芽囊原虫感染情况。方法在上海市6个区收集居民新鲜粪便,采用Ringer溶液37℃恒温条件下培养人芽囊原虫,计算人芽囊原虫感染率。结果检查居民2984人,人芽囊原虫阳性者88人,感染率2.95%。上海市各区人群感染率间差异无统计学意义(χ^2=9.90,P〉0.05);青浦区男性感染率为5.56%,女性感染率1.57%,差异有统计学意义(χ^2=5.38,P〈0.05),其他5个区男、女性感染率差异无统计学意义(χ^2=0.08~0.54,P均〉0.05);农民感染率为6.87%,与其他职业人群比较差异有统计学意义(χ^2=18.57,P〈0.05)。结论上海市人群对人芽囊原虫普遍易感,以农民感染率最高。体外培养法敏感性较高,可用于人芽囊原虫感染的流行病学调查。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 感染率 体外培养 上海
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安徽阜阳HIV阳性者合并人芽囊原虫感染及其影响因素分析 被引量:13
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作者 田利光 陈家旭 +9 位作者 程国金 汪峰峰 郭俭 尹晓梅 蔡玉春 周莉 童小妹 王珍丽 汪天平 周晓农 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2012年第3期303-306,310,共5页
目的了解安徽省阜阳市HIV阳性者合并人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法采用横断面调查的方法对安徽省阜阳市开发区309名HIV阳性者进行问卷调查,并采集其粪便和血液样本用于人芽囊原虫、CD4+T淋巴细胞和细胞因子检测。采用单因素分析... 目的了解安徽省阜阳市HIV阳性者合并人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法采用横断面调查的方法对安徽省阜阳市开发区309名HIV阳性者进行问卷调查,并采集其粪便和血液样本用于人芽囊原虫、CD4+T淋巴细胞和细胞因子检测。采用单因素分析和Logistic回归分析对影响HIV和人芽囊原虫合并感染的因素进行分析。结果在309名参与调查的HIV阳性者中,302人参与粪样检测,286人参与问卷调查,同时参与2项检测者263人。调查发现,HIV阳性者合并人芽囊原虫感染率为17.11%,其中女性感染率为21.90%,明显高于男性(11.90%)(P<0.05)。在HIV合并人芽囊原虫感染影响因素Logistic回归模型分析中,仅营养状况良好(OR=0.263,95%CI:0.073,0.945)有统计学意义。结论HIV阳性者合并人芽囊原虫感染率较高,营养状况好坏可能是影响合并感染的原因之一。 展开更多
关键词 HIV 人芽囊原虫 合并感染 影响因素 阜阳市
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福建省部分地区鼠类巴贝虫感染调查与基因鉴定 被引量:10
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作者 肖方震 彭秀卿 +3 位作者 徐国英 陈阳 林代华 邓艳琴 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期63-67,共5页
目的了解福建省部分地区鼠类巴贝虫(Babesia)的感染状况以及基因特征。方法 2014-2015年采用笼日法在福建省邵武、清流、顺昌、永安、长乐和尤溪等6地捕鼠,现场鉴定鼠种,记录鼠类釆集时间、地点、鼠种、性别等资料。采集各鼠心脏血,采用... 目的了解福建省部分地区鼠类巴贝虫(Babesia)的感染状况以及基因特征。方法 2014-2015年采用笼日法在福建省邵武、清流、顺昌、永安、长乐和尤溪等6地捕鼠,现场鉴定鼠种,记录鼠类釆集时间、地点、鼠种、性别等资料。采集各鼠心脏血,采用PCR扩增巴贝虫18S r RNA片段,取阳性PCR产物送测序并进行序列比对分析,构建系统进化树分析同源性。PCR检测阳性率间的比较采用χ2检验或Fisher精确检验法。结果共捕获209只鼠,其中家鼠71只,野鼠138只。PCR检测结果显示,巴贝虫阳性率为9.6%(20/209)。家鼠的阳性率为2.8%(2/71),其中褐家鼠(Rattus norvebicus)和黄胸鼠(R.flavipectus)各有1只阳性;野鼠的阳性率为13.0%(18/138),其中大板齿鼠(Bandicota indica)、黄毛鼠(R.losea)、社鼠(R.confucianus)和针毛鼠(R.fulvescens)等4个鼠种的阳性数分别为13、1、2和2只;野鼠的阳性率高于家鼠(P<0.05)。6地中,尤溪的鼠类阳性率最高,为14.9%(13/87),其次为永安,阳性率为13.6%(3/22),清流的鼠类未检出巴贝虫感染阳性。雄鼠的阳性率为7.9%(9/114),雌鼠为11.6%(11/95)。成年鼠的阳性率最高,为10.4%(18/173),其次为幼年鼠,阳性率为6.3%(2/32),捕获的4只老年鼠均未检出巴贝虫感染阳性。不同地区、不同性别和不同鼠龄的巴贝虫阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。PCR阳性产物测序和同源性分析结果显示,样品序列相似性达100%。BLAST结果显示,血样感染的为田鼠巴贝虫(Babesia microti)。系统进化树结果显示,样品序列与源自浙江的田鼠巴贝虫的序列同源性(Gen Bank登录号:JQ609305)最高。结论福建省部分地区鼠类存在田鼠巴贝虫感染,野鼠的阳性率高于家鼠。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 鼠类 基因特征 福建
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人芽囊原虫感染小鼠试验 被引量:9
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作者 姚繁荣 乔继英 +3 位作者 赵晏 张旭 杨珺华 李小琪 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期444-448,共5页
目的通过感染不同免疫状态ICR小鼠寻求人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)对小鼠的易感途径及有效感染数量。方法①将104、105、106个培养3代的B.h分别经口及直肠感染ICR小鼠。②106个B.h经直肠感染免疫功能低下该种小鼠,观察感染后... 目的通过感染不同免疫状态ICR小鼠寻求人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)对小鼠的易感途径及有效感染数量。方法①将104、105、106个培养3代的B.h分别经口及直肠感染ICR小鼠。②106个B.h经直肠感染免疫功能低下该种小鼠,观察感染后不同时间小鼠胃肠道B.h繁殖情况及消化道组织病理改变。结果B.h经口及直肠两种途径均可使小鼠感染,免疫功能低下小鼠感染后出现行动迟缓、精神萎靡、嗜睡、体重下降等,部分小鼠出现腹泻,排粘液便等症状,个别小鼠死亡。经解剖肉眼观察见空回肠、回盲部、结肠的肠壁组织严重水肿、充血、淤血等。在小鼠胃肠道内容物中均发现B.h。病理切片显示,小肠及结肠黏膜上皮脱落,黏膜下层不同程度的炎性细胞浸润,腺体结构不完整。结论B.h经直肠比经口更易感染小鼠,B.h可寄生于小鼠整个胃肠道。小鼠免疫功能降低时,B.h可迅速繁殖、致病性增强,并引起严重的肠黏膜病理改变。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 感染 小鼠 病理变化
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皖浙两省部分地区宠物犬芽囊原虫的感染情况 被引量:7
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作者 李文超 汪凯 +4 位作者 秦勉 刘宗华 袁敢 刘德义 顾有方 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期272-276,共5页
目的了解安徽省和浙江省部分地区宠物犬感染芽囊原虫的情况。方法 2013年4-12月从安徽省合肥市包河区、宣城市宣州区、滁州市凤阳县和明光市、蚌埠市龙子湖区、宿州市泗县,以及浙江省杭州市余杭区的宠物门诊采集新鲜宠物犬粪样。采用镜... 目的了解安徽省和浙江省部分地区宠物犬感染芽囊原虫的情况。方法 2013年4-12月从安徽省合肥市包河区、宣城市宣州区、滁州市凤阳县和明光市、蚌埠市龙子湖区、宿州市泗县,以及浙江省杭州市余杭区的宠物门诊采集新鲜宠物犬粪样。采用镜检法和基于芽囊原虫SSU r DNA基因的巢式PCR和单步PCR法分别进行检测,并对扩增产物进行测序和分析,确定芽囊原虫的基因型。结果共采集315份粪样,镜检、巢式PCR和单步PCR检测,芽囊原虫的感染率分别为1.3%(4/315)、1.9%(6/315)和1.9%(6/315)。两种PCR法均显示仅滁州市和合肥市的宠物犬中检出芽囊原虫,两地的感染率分别为3.4%(1/29)和5.6%(4/72)。滁州有ST1和ST2两种基因型,合肥仅存在ST1基因型。成年犬和幼龄犬之间,雄性犬和雌性犬之间芽囊原虫感染率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论安徽省滁州市和合肥市的宠物犬粪中检测出芽囊原虫。 展开更多
关键词 芽囊原虫 基因亚型 宠物犬 安徽 浙江
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田鼠巴贝虫实验动物模型的建立 被引量:12
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作者 卢艳 蔡玉春 +7 位作者 陈韶红 陈家旭 郭俭 陈木新 艾琳 储言红 陈卓 周晓农 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期423-427,共5页
目的建立田鼠巴贝虫(Babesin microti)的实验动物模型。方法自感染田鼠巴贝虫的种鼠取血,腹腔注射接种3~4周龄雌性BALB/c小鼠(7只)、免疫抑制BALB/c小鼠(4只)、雄性SCID小鼠(4只)和NOD—SCID小鼠(4只)。感染后每天采血,... 目的建立田鼠巴贝虫(Babesin microti)的实验动物模型。方法自感染田鼠巴贝虫的种鼠取血,腹腔注射接种3~4周龄雌性BALB/c小鼠(7只)、免疫抑制BALB/c小鼠(4只)、雄性SCID小鼠(4只)和NOD—SCID小鼠(4只)。感染后每天采血,涂制薄血片,吉氏染色,油镜下观察田鼠巴贝虫的生长、增殖情况,记录红细胞的感染率。解剖3只不同红细胞感染率的BALB/c小鼠,油镜下观察心、肝、脾、肺、肾、脑和骨髓等组织的感染情况。记录各组织中红细胞的感染率.并分析与外周血红细胞感染率的关系。取红细胞感染率大于40%的BALB/c小鼠血液.冷冻保存2个月后用同样的方法接种小鼠,观察田鼠巴贝虫的增殖情况。结果BALB/c小鼠、免疫抑制BALB/c小鼠、SCID小鼠和NOD—SCID小鼠接种后,末梢血液中均检测出田鼠巴贝虫。BALB/c小鼠的红细胞感染率在d7达到峰值(82.4%).免疫抑制BALB/c小鼠的红细胞感染率在d5达到峰值(73.2%),SCID小鼠和NOD—SCID小鼠的红细胞感染率均在d8达到峰值(86.4%和72.5%)。红细胞感染率达到峰值后,BALB/c小鼠的红细胞感染率迅速下降,免疫抑制BALB/c小鼠的红细胞感染率缓慢降低.SCID小鼠和NOD—SCID小鼠的红细胞感染率则出现震荡变化。感染的BALB/c小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑和骨髓等组织内均可观察到田鼠巴贝虫,虫体主要位于红细胞内,各组织内的红细胞感染率随外周血红细胞感染率的升高而增高。冷冻保存的虫种复苏后可感染健康BALB/c小鼠,末梢血中出现虫体的时间与新鲜含虫血液感染鼠的比较滞后2d.达到感染高峰的时间滞后1d。结论成功建立田鼠巴贝虫的小鼠模型.红细胞的感染情况与机体的免疫状态相关。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 小鼠 动物模型
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人芽囊原虫滋养体的形态及其与致病的关系 被引量:7
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作者 申继清 田春林 +5 位作者 卢作超 万孝玲 刘登宇 刘晓泉 王静 黎学铭 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期137-139,142,共4页
为了解人芽囊原虫滋养体的形态及其与致病关系,于2011年3月至2012年3月采集就诊患者新鲜粪便686份(无症状者粪便标本663份,有症状者粪便标本23份),直接涂片法和碘染色法制作玻片标本,光镜下观察人芽囊原虫感染情况和形态。从阳性的无症... 为了解人芽囊原虫滋养体的形态及其与致病关系,于2011年3月至2012年3月采集就诊患者新鲜粪便686份(无症状者粪便标本663份,有症状者粪便标本23份),直接涂片法和碘染色法制作玻片标本,光镜下观察人芽囊原虫感染情况和形态。从阳性的无症状者粪便中分离人芽囊原虫,分别接种到洛克氏液-鸡蛋-血清培养基(LES培养基)和10只6-8周龄雌性昆明小鼠腹腔中,观察体内外不同环境中人芽囊原虫滋养体的形态变化。结果显示,686份粪便标本中阳性者103份,其中无症状者粪便标本阳性80份,有症状者粪便标本阳性23份。光镜下可见,无症状者粪便标本人芽囊原虫的颗粒型和空泡型滋养体较小,呈卵圆形,内含多个颗粒,平均直径为(13.2±0.2)μm;有症状者粪便标本人芽囊原虫的颗粒型与空泡型滋养体较大,易见分裂相虫体,可查见阿米巴型滋养体,外形多样,颗粒数十个,体积较大,平均直径为(28.0±0.3)μm。无症状者粪便标本人芽囊原虫经体外培养后,颗粒型和空泡型滋养体形态变化不大;而接种于小鼠腹腔后,两型滋养体的形态结构发生改变,虫体增大,颗粒变多,外形多样,其形态与有症状者粪便标本的人芽囊原虫相似。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 滋养体 形态 致病
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田鼠巴贝虫隐性感染鼠再感染、免疫抑制或盲传后的虫密度消长规律研究 被引量:6
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作者 蔡玉春 陈韶红 +3 位作者 卢艳 艾琳 杨春利 陈家旭 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期327-332,共6页
目的观察田鼠巴贝虫(Babesia microti)隐性感染期小鼠经再感染、免疫抑制或盲传健康小鼠后的外周血红细胞内虫体密度的消长规律。方法取1只感染种鼠的外周血(虫密度为20%),腹腔接种6周龄雌性BALB/c健康小鼠12只,100μl/只,用随机数字表... 目的观察田鼠巴贝虫(Babesia microti)隐性感染期小鼠经再感染、免疫抑制或盲传健康小鼠后的外周血红细胞内虫体密度的消长规律。方法取1只感染种鼠的外周血(虫密度为20%),腹腔接种6周龄雌性BALB/c健康小鼠12只,100μl/只,用随机数字表法分为对照组、再感染组、免疫抑制组和盲传组,每组3只。4组感染小鼠连续28 d尾部采血,吉氏染色法观察田鼠巴贝虫形态变化,并计算红细胞染虫率,构建隐性感染小鼠模型。再感染组隐性感染小鼠再次腹腔接种相同剂量的田鼠巴贝虫感染种鼠血;免疫抑制组隐性感染小鼠腹腔注射地塞米松,0.5 mg/只,连续注射5 d;盲传组3只隐性感染小鼠取眼眶血,分别腹腔盲传接种健康雌性BALB/c小鼠各3只,100μl/只。3组小鼠继续尾部采血28 d,镜下计数感染红细胞,计算染虫率,并观察田鼠巴贝虫形态变化。结果对照组、再感染组、免疫抑制组和盲传组小鼠外周血均于感染后第3天查见田鼠巴贝虫体,第7天红细胞染虫率最高,分别为73.2%、78.0%、76.2%及79.0%,随后染虫率逐渐下降,至第28天外周血镜检阴性,进入隐性感染阶段。再感染组小鼠再次感染后28 d内,每天染虫率均为0。免疫抑制组小鼠在免疫抑制后第2天查见虫体,第12天染虫率再次达到高峰,为65.2%,随后逐渐下降,至第22天再次进入隐性感染期。盲传组新感染的9只小鼠在感染后第4天查见虫体,第9~10天染虫率达到高峰,为35.0%~39.0%,随后逐渐下降,至第28天小鼠进入隐性感染阶段。各组感染的田鼠巴贝虫形态变化基本一致,染虫初期以小环状体居多;染虫高峰期多见大环状体和长丝状体;有多虫寄生现象。结论田鼠巴贝虫隐性感染期小鼠有带虫免疫现象,并可作为传染源;经免疫抑制后虫体被激化,可出现与首次感染相同的虫体密度消长规律。 展开更多
关键词 巴贝虫病 田鼠巴贝虫 隐性感染 输血感染 免疫抑制
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赣州市人芽囊原虫感染的流行病学调查分析 被引量:16
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作者 苏子林 苏水莲 +4 位作者 吴中发 廖华 廖勇 谢琼珺 张青生 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第2期142-143,共2页
目的了解赣州市人芽囊原虫病流行情况。方法随机抽取江西省赣州市5个县(市)20个调查点,调查不同人群、6种家禽家畜人芽囊原虫感染率,粪检采用生理盐水涂片法。采集生活污水饮用水及自然水源水样,用自然沉淀法查人芽囊原虫污染程度。结... 目的了解赣州市人芽囊原虫病流行情况。方法随机抽取江西省赣州市5个县(市)20个调查点,调查不同人群、6种家禽家畜人芽囊原虫感染率,粪检采用生理盐水涂片法。采集生活污水饮用水及自然水源水样,用自然沉淀法查人芽囊原虫污染程度。结果共检查不同人群1 336人,查出人芽囊原虫感染99人,感染率为7.41%。采集5种家禽家畜粪便628份,查出人芽囊原虫67份,平均感染率为10.67%。调查3种水体标本304份,阳性11份,占3.62%。结论赣州市人群与6种家禽家畜均存在人芽囊原虫感染,3种水体均受到人芽囊原虫污染。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 感染率 流行病学
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人芽囊原虫在不同培养基中生长状况的观察 被引量:8
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作者 答嵘 乔继英 +3 位作者 卢朝辉 李小琪 李亚青 王伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第2期132-134,F0003,共4页
目的筛选培养人芽囊原虫的最适培养基。方法将同一株人芽囊原虫阳性粪便标本以2×105细胞/管接种至RPMI1640、199和LES培养基中,加入20%小牛血清及青、链霉素,pH值为7.5,放置厌氧罐中于37℃恒温培养,每24h计数,每6d转种1次。观察人... 目的筛选培养人芽囊原虫的最适培养基。方法将同一株人芽囊原虫阳性粪便标本以2×105细胞/管接种至RPMI1640、199和LES培养基中,加入20%小牛血清及青、链霉素,pH值为7.5,放置厌氧罐中于37℃恒温培养,每24h计数,每6d转种1次。观察人芽囊原虫在3种培养基中的存活时间、虫体密度和虫体形态。结果人芽囊原虫在RPMI1640培养基中存活时间最长、虫体密度最高,虫体以空泡型多见;在LES培养基中存活时间最短、虫体密度最低,但虫体形态清晰、规则;在199培养基中存活时间和虫体密度均介于前两者之间。结论RPMI1640培养基适宜人芽囊原虫的生长繁殖,为人芽囊原虫体外培养的首选培养基;LES培养基中虫体形态清晰、规则,可用于人芽囊原虫的形态学研究;199培养基也可用于人芽囊原虫的体外培养,但不作为首选。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 RPMI1640培养基 199培养基 LES培养基 生长状况
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3种培养基中芽囊原虫生长状况观察 被引量:4
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作者 俞英昉 吴秀萍 +2 位作者 储言红 陈家旭 田利光 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期51-53,65,共4页
目的观察芽囊原虫在不同培养基中的生长状况,筛选合适的芽囊原虫培养方法。方法将10份芽囊原虫阳性粪便分别接种至Jone’s液、vitro液、1640 3种培养基中培养,选取生长情况良好、虫密度高的一份粪便传代培养后等量接种至3种不同的培养基... 目的观察芽囊原虫在不同培养基中的生长状况,筛选合适的芽囊原虫培养方法。方法将10份芽囊原虫阳性粪便分别接种至Jone’s液、vitro液、1640 3种培养基中培养,选取生长情况良好、虫密度高的一份粪便传代培养后等量接种至3种不同的培养基中,每24 h计数虫体数量一次,连续观察10 d,并观察芽囊原虫的形态学变化和生长情况。结果10份粪便分别接种至3种培养基中培养,48 h后发现1640和Jone’s液中的虫密度高于vitro液。同一份粪便接种至3种不同培养基中连续观察10 d,结果表明3种培养基中虫体生长呈规律变化,均在接种后3、6、9 d出现生长高峰;Jone’s液中芽囊原虫密度最高。vitro液中观察到的虫体形态最清晰,且富有活力;Jone’s液中能观察到虫体多种繁殖状态。结论Jone’s液适于芽囊原虫的生长繁殖,可作为首选培养基;vitro液可作为观察芽囊原虫生长情况的首选培养基。 展开更多
关键词 芽囊原虫 体外培养 生长状况 形态观察 培养基 Jone’s VITRO 1640
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隐孢子虫卵囊纯化方法的改进研究 被引量:8
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作者 黄磊 安春霞 +2 位作者 张素梅 宁长申 张龙现 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期79-80,共2页
用蒸馏水代替PBS稀释Sheather's蔗糖溶液,并测定不同稀释度的蔗糖溶液密度,使用不同密度的蔗糖溶液分离纯化安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子虫卵囊,计算纯化后的卵囊回收率和卵囊活性。安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子... 用蒸馏水代替PBS稀释Sheather's蔗糖溶液,并测定不同稀释度的蔗糖溶液密度,使用不同密度的蔗糖溶液分离纯化安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子虫卵囊,计算纯化后的卵囊回收率和卵囊活性。安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子虫卵囊纯化后的总回收率分别为47.5%、49.6%和41.7%;孔雀绿染色活性检测的活性率分别为97.9%、96.7%和95.1%;37℃水浴1h后的脱囊率分别为87.9%、80.0%和81.7%。 展开更多
关键词 隐孢子虫卵囊 纯化 蔗糖溶液
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安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染流行特征及危险因素 被引量:6
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作者 张顺先 俞英昉 +5 位作者 吴秀萍 储言红 滕雪娇 汪峰峰 陈家旭 田利光 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期498-503,509,共7页
目的调查安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染情况及其危险因素。方法2016年采用横断面调查方法对安徽省阜阳市HIV/AIDS感染者进行问卷调查,收集调查对象一般人口学信息、社会经济状况、生产生活方式信息。采集调查对象粪便,通过PC... 目的调查安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染情况及其危险因素。方法2016年采用横断面调查方法对安徽省阜阳市HIV/AIDS感染者进行问卷调查,收集调查对象一般人口学信息、社会经济状况、生产生活方式信息。采集调查对象粪便,通过PCR方法检测粪便基因组中人芽囊原虫DNA以判定感染状况;同时采集调查对象血液,检测其中CD4+T淋巴细胞数量和HIV病毒载量。采用单因素分析和多因素logistic回归分析对HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染的危险因素进行分析。结果本研究共招募398名HIV/AIDS病例,平均年龄为49.3岁、平均体重为55.9 kg、平均身高为164.4 cm。人芽囊原虫感染率为6.78%,不同性别(χ^2=1.589,P=0.207)、受教育程度(χ^2=0.508,P=0.776)、婚姻(χ^2=0.419,P=0.811)和职业(χ^2=2.744,P=0.615)患者感染率差异均无统计学意义。人芽囊原虫感染者和非感染者年龄(t=0.370,P=0.712)、身高(t=1.587,P=0.113)、体重(t=0.516,P=0.606)、CD4+T淋巴细胞数量(t=1.187,P=0.230)和HIV病毒载量(t=0.193,P=0.496)差异均无统计学意义。饮用非自来水[OR=6.554,95%CI:(1.876,22.903)]和养狗[OR=5.895,95%CI:(2.017,17.225)]是HIV/AIDS患者感染人芽囊原虫的危险因素。结论安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染率较高,饮用非自来水和养狗是该人群人芽囊原虫感染的危险因素。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 HIV/AIDS 共感染 危险因素 阜阳市
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武汉市腹泻婴幼儿隐孢子虫感染的分子流行病学调查 被引量:10
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作者 刘晓洁 毛铁波 +1 位作者 吴鹏 周蕊 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期188-191,205,共5页
目的了解武汉市2岁以下婴幼儿腹泻患者的隐孢子虫感染状况,为预防隐孢子虫感染提供分子流行病学依据。方法采集2014年8月—2015年7月在湖北省人民医院和武汉大学中南医院就诊的2岁以下婴幼儿腹泻患者粪便,过滤沉淀后于2.5%重铬酸钾溶液... 目的了解武汉市2岁以下婴幼儿腹泻患者的隐孢子虫感染状况,为预防隐孢子虫感染提供分子流行病学依据。方法采集2014年8月—2015年7月在湖北省人民医院和武汉大学中南医院就诊的2岁以下婴幼儿腹泻患者粪便,过滤沉淀后于2.5%重铬酸钾溶液中4℃保存;采用酚-氯仿法提取基因组DNA、18S rRNA巢式PCR(Nested-PCR)扩增技术检测隐孢子虫感染,并对阳性PCR产物测序;所获序列进行Blastn比对,应用MEGA软件采用邻接法构建系统进化树进行虫种鉴定。结果共收集到298份婴幼儿腹泻患者的粪便样本。经巢式PCR扩增技术检测,298份样品中有9份扩增出隐孢子虫阳性条带,阳性率为3.02%(9/298),其中1~2岁腹泻幼儿阳性率为5.93%(7/118),<1岁患儿的阳性率为1.11%(2/180),差异有统计学意义(χ~2=4.13,P<0.05)。9份阳性PCR产物经测序后与Gen Bank中的参照序列进行比对,结果显示7份样本为微小隐孢子虫感染,2份样本为微小隐孢子虫与人隐孢子虫混合感染。绘制种系发育进化树发现,9条SSU r RNA基因序列与已发表的微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)位于同一个进化支上。结论武汉地区婴幼儿腹泻患者中存在隐孢子虫感染,主要感染虫种为微小隐孢子虫。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 人隐孢子虫 婴幼儿 腹泻 巢式PCR 分子流行病学 武汉市
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