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多模态磁共振成像鉴别肝吸虫病合并肝内胆管癌及肝脏炎性肉芽肿的研究
1
作者 黄策 韦玉琛 廖锦元 《右江民族医学院学报》 2025年第5期776-781,共6页
目的探讨多模态MRI在鉴别肝吸虫病合并肝内胆管癌(ICC)及炎性肉芽肿的诊断价值。方法回顾分析比较38例肝吸虫病合并ICC与21例肝吸虫病合并肝脏炎性肉芽肿患者的临床及影像学资料。评价各指标在鉴别诊断中的敏感性及特异性。结果两组患... 目的探讨多模态MRI在鉴别肝吸虫病合并肝内胆管癌(ICC)及炎性肉芽肿的诊断价值。方法回顾分析比较38例肝吸虫病合并ICC与21例肝吸虫病合并肝脏炎性肉芽肿患者的临床及影像学资料。评价各指标在鉴别诊断中的敏感性及特异性。结果两组患者的肿块内胆管截断、肝包膜皱缩、CA19-9升高差异均有统计学意义(P均<0.01),胆管树扩张、渐进性强化、胆道结石和淋巴结增大差异无统计学意义(P均>0.05);肿块内胆管截断、肝包膜皱缩、CA19-9升高鉴别ICC和炎性肉芽肿的敏感性、特异性和95%可信区间分别为(0.909、1.000、0.909;0.833、0.722、0.944;0.794~0.969、0.724~0.998、0.812~0.985),ROC曲线下面积分别为0.871、0.861、0.927。结论多模态MRI征象可有效区分肝吸虫病合并ICC和肝脏炎性肉芽肿。 展开更多
关键词 肝片形吸虫 胆管肿瘤 肉芽肿 浆细胞 磁共振成像
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利什曼病治疗药物靶点研究进展
2
作者 康志强 沃晓辉 魏伟 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第16期2551-2555,共5页
利什曼原虫是一种原生动物寄生虫,可导致热带地区流行的利什曼病的发生。内脏利什曼病,在亚洲国家也被称为黑热病,与皮肤利什曼病世界各地均有分布。葡萄糖酸锑钠及两性霉素B的化疗效果显著。但目前的利什曼病治疗方法存在多种副作用、... 利什曼原虫是一种原生动物寄生虫,可导致热带地区流行的利什曼病的发生。内脏利什曼病,在亚洲国家也被称为黑热病,与皮肤利什曼病世界各地均有分布。葡萄糖酸锑钠及两性霉素B的化疗效果显著。但目前的利什曼病治疗方法存在多种副作用、治疗时间延长、不同地区的疗效差异以及耐药性的出现等缺陷。为了解决这一迫切需求,必须确定更安全、更有效的替代治疗方法、寻找适当的药理学靶点。本综述讨论了代表潜在药理靶点的关键代谢途径以及利什曼病新兴的治疗方案。 展开更多
关键词 利什曼病 治疗 靶点 研究进展 综述
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从塔里木兔体内首次分离出婴儿利什曼原虫 被引量：15
3
作者 廖力夫 燕顺生 +5 位作者 乌守巴特 吴敏 徐兵 张勇 侯岩岩 雷刚 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2009年第1期45-47,共3页
目的调查塔里木盆地荒漠型黑热病的保存宿主。方法开展动物与传播媒介及其环境的调查。冬季采集动物样品,用ELISA筛选抗体阳性动物;接种草原兔尾鼠和液体培养基培养分离利什曼原虫;分子生物学方法测定从当地黑热病患者、动物和传播媒介... 目的调查塔里木盆地荒漠型黑热病的保存宿主。方法开展动物与传播媒介及其环境的调查。冬季采集动物样品,用ELISA筛选抗体阳性动物;接种草原兔尾鼠和液体培养基培养分离利什曼原虫;分子生物学方法测定从当地黑热病患者、动物和传播媒介分离出的利什曼原虫特定基因序列。结果塔里木兔和家犬有抗利什曼原虫抗体;从44只抗体阳性塔里木兔中分离出3株利什曼原虫;塔里木兔、黑热病患者和吴氏白蛉分离出的利什曼原虫测定的NAGT核基因序列相同,与GenBank注册的婴儿利什曼原虫AF205934一致。结论塔里木兔是塔里木盆地荒漠型黑热病的野生宿主之一。 展开更多
关键词 婴儿利什曼原虫 荒漠型黑热病 塔里木兔 吴氏白蛉 宿主
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克拉玛依地区的利什曼病XIV．硕大白蛉吴氏亚种自然感染前鞭毛体的鉴定 被引量：12
4
作者 管立人 杨元清 +5 位作者 许永湘 瞿靖琦 左新平 王革 吕洪刚 钟力 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期257-261,共5页
硕大白蛉吴氏亚种是新疆克拉玛依地区的主要蛉种之一，具有强的亲人性，在野外和居民点内常能查见该蛉有前鞭毛体的自然感染。本文结果表明，白蛉自然感染的前鞭毛体能使仓鼠及ＢＡＬＢ／ｃ小鼠发生内脏利什曼病；在感染仓鼠内脏涂片上... 硕大白蛉吴氏亚种是新疆克拉玛依地区的主要蛉种之一，具有强的亲人性，在野外和居民点内常能查见该蛉有前鞭毛体的自然感染。本文结果表明，白蛉自然感染的前鞭毛体能使仓鼠及ＢＡＬＢ／ｃ小鼠发生内脏利什曼病；在感染仓鼠内脏涂片上的无鞭毛体，由蛉体而来的明显较由大沙鼠而来的都兰利什曼原虫为小；白蛉自然感染的前鞭毛体在ＮＮＮ培养基内生长不良；用￣（３２）Ｐ标记的ｇｐ￣（６３）基因为探针，与婴儿利什曼原虫、都兰利什曼原虫及白蛉自然感染的前鞭毛体的ＤＮＡ进行杂交，证实蚌体自然感染的原虫与婴儿利什曼原虫同源。克拉玛依无内脏利什曼病人，但人群中有皮肤利什曼病流行。关于硕大白蛉吴氏亚种自然感染的来源以及当地的皮肤利什曼病究竟是由都兰利什曼原虫抑或婴儿利什曼原虫所致，尚待阐明。 展开更多
关键词 白蛉 感染 自然感染 利什曼原虫 鉴定 克拉玛依
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硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白的基因克隆与序列分析 被引量：16
5
作者 成军 斯崇文 +4 位作者 王勤环 刘妍 钟彦伟 杨继珍 洪卫国 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期30-32,共3页
[目的 ]克隆硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白 (amastin)的编码基因序列。 [方法 ]应用核苷酸序列数据库 (GenBank)和表达序列末端片段数据库 (dbEST)的计算机检索与DNA文库的杂交筛选方法。 [结果 ]从dbEST数据库中获得一段 30 9nt的来源于... [目的 ]克隆硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白 (amastin)的编码基因序列。 [方法 ]应用核苷酸序列数据库 (GenBank)和表达序列末端片段数据库 (dbEST)的计算机检索与DNA文库的杂交筛选方法。 [结果 ]从dbEST数据库中获得一段 30 9nt的来源于硕大利什曼原虫的基因片段 ,据此设计探针 ,筛选硕大利什曼原虫的DNA文库 ,获得硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因。其开放读码框架由 5 5 2个核苷酸组成 ,编码产物由183个氨基酸残基组成。序列分析表明 ,硕大利什曼原虫与锥虫无鞭毛体蛋白一级结构的同源性为 2 3 5 %。 [结论 ]克隆的基因系硕大利什曼原虫表面蛋白编码基因 ,即无鞭毛体蛋白的编码基因。 展开更多
关键词 利什曼原虫 无鞭毛体 基因文库 基因克隆
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氢化物发生-原子荧光法测定细胞内痕量锑 被引量：22
6
作者 解清 王京宇 +3 位作者 王晓燕 王耐芬 Christian Brochu Marc Ouellette 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期347-349,共3页
为了配合研究利什曼原虫 (Leishmania)的金属抗药性 ,本文建立了一种氢化物发生 -原子荧光法测定细胞内痕量锑的方法。在选定最佳仪器条件下测定 ,锑的线性范围达到 0～ 2 0 μg L ,检出限为 0 0 8μg L ,加标回收率为 92 8% - 10 3 ... 为了配合研究利什曼原虫 (Leishmania)的金属抗药性 ,本文建立了一种氢化物发生 -原子荧光法测定细胞内痕量锑的方法。在选定最佳仪器条件下测定 ,锑的线性范围达到 0～ 2 0 μg L ,检出限为 0 0 8μg L ,加标回收率为 92 8% - 10 3 6 %。此方法操作简便、灵敏度高、费用低廉。所获结果与电感耦合等离子体质谱 (ICP MS)测试结果进行了比较 ,经配对t检验t=0 0 0 1<t0 0 5,10 =2 2 2 8(P >0 0 5 ) ,两者无显著性差异。该方法已应用于寄生虫的金属抗药性研究 ,获得满意的结果。 展开更多
关键词 氢化物发生-原子荧光 细胞 锑 利什曼原虫
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用McAb-AST及骨髓涂片法对四川省汶川县犬感染利什曼原虫的调查研究 被引量：14
7
作者 胡孝素 林芳清 +7 位作者 阚兵 吴远祥 张安治 李国茹 陈明 张先钦 蒋能富 张显林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第4期5-7,共3页
作者等用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)及骨髓穿刺涂片法对汶川县125只犬进行感染利什曼原虫调查,骨髓涂片法查出原虫的阳性犬46只,感染率为36.8％,较之历年来陇南、川北报道的犬感染率为高,不但查明了当地犬感染利什曼原虫的严重... 作者等用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)及骨髓穿刺涂片法对汶川县125只犬进行感染利什曼原虫调查,骨髓涂片法查出原虫的阳性犬46只,感染率为36.8％,较之历年来陇南、川北报道的犬感染率为高,不但查明了当地犬感染利什曼原虫的严重性,且为本年在白蛉繁殖季节前消除这些传染源提供了确切依据。为了研究对犬利什曼病的简易、准确的调查方法,我们同时用McAb-AST对该125只犬的血清,检测其循环抗原,结果与骨髓涂片阳性符合率为97.8％,总符合率95.2％,可望取代骨髓涂片法。 展开更多
关键词 利什曼原虫 单克隆抗体 抗原斑点法
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三种免疫层析试条检测甘肃犬利什曼原虫感染效能的评价 被引量：6
8
作者 余大为 李凡 +4 位作者 冯宇 杨成明 杨俊克 刘林林 张永福 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期792-795,共4页
对来自犬源型内脏利什曼病流行区甘肃省文县和迭部县的537只家犬血样和来自非流行区天祝县的37只家犬血样,分别采用人用rk39试条、犬用rk39试条和循环抗原(CA)试条进行平行测试,以PCR检测结果为标准比较3种试条的敏感性和特异性。结果显... 对来自犬源型内脏利什曼病流行区甘肃省文县和迭部县的537只家犬血样和来自非流行区天祝县的37只家犬血样,分别采用人用rk39试条、犬用rk39试条和循环抗原(CA)试条进行平行测试,以PCR检测结果为标准比较3种试条的敏感性和特异性。结果显示,574份犬血样中,221份PCR检测结果为阳性,阳性率为38.5%(221/574)。CA试条与犬用、人用rk39试条检测221份PCR阳性血样的敏感度分别为90.0%(199/221)、65.2%(144/221)和64.3%(142/221),三者与PCR检测结果的差异具有统计学意义(χ^2=141.76、20.31、17.96,P<0.05)。CA试条与犬用、人用rk39试条检测316份流行区非内脏利什曼病感染犬血样,特异度分别为95.3%(301/316)、99.7%(315/316)和99.4%(314/316),三者与PCR检测结果的差异具有统计学意义(χ^2=258.85、312.01、308.05,P<0.05)。CA试条与犬用、人用rk39试条检测流行区有症状犬的结果与PCR检测阳性的符合率分别为88.5%(23/26)、88.5%(23/26)和84.6%(22/26),三者与PCR检测的差异有统计学意义(χ^2=23.22、23.22、20.50,P<0.05);检测流行区无症状犬的结果与PCR检测阳性的符合率分别为91.8%(179/195)、62.1%(121/195)和61.5%(120/195),3种试条与PCR检测结果的差异有统计学意义(χ^2=136.25、11.33、10.39,P<0.05)。运用曲线下面积(AUC)方法评估3种试条,其准确性均在0.8以上。kappa一致性检验系数为0.671~0.857,表明3种试条均适用于利什曼感染犬的初筛,CA试条优于犬用、人用rk39试条,是流行地区开展利什曼感染犬筛查较好的检测方法。 展开更多
关键词 利什曼原虫 免疫层析试条 犬 效果评价 甘肃
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四川省1984-2005年黑热病发病情况分析 被引量：20
9
作者 张富南 李国茹 +1 位作者 雷杨 陈漪澜 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第1期79-80,共2页
1984-2005年全省共报告黑热病836例，每年均有发病。近年来随着流行区饲养犬数量的增加，发病呈上升和扩散趋势，非流行区各年发病数与流行区基本一致。流行区发病以学龄儿童和学龄前幼儿为主，非流行区以中青年为主。连续3～5年全县范... 1984-2005年全省共报告黑热病836例，每年均有发病。近年来随着流行区饲养犬数量的增加，发病呈上升和扩散趋势，非流行区各年发病数与流行区基本一致。流行区发病以学龄儿童和学龄前幼儿为主，非流行区以中青年为主。连续3～5年全县范围内灭犬和禁养家犬的流行区，远期效果巩固；未灭犬或灭犬不彻底的流行区出现回升趋势。各流行县应加强联防，防止病犬转移使流行区扩大。 展开更多
关键词 黑热病 流行 四川省
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杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的比较蛋白质组学分析 被引量：8
10
作者 敬保迁 邓世山 +1 位作者 张仁刚 张洁 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期102-106,共5页
目的应用蛋白质组学技术分析杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体蛋白质表达状况。方法分别提取和纯化杜氏利什曼原虫四川SC6株前鞭毛体与纯培养无鞭毛体的总蛋白,分别经pH3～10的预制胶条进行双向电泳分离,凝胶用考马斯亮蓝染色,凝胶图像... 目的应用蛋白质组学技术分析杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体蛋白质表达状况。方法分别提取和纯化杜氏利什曼原虫四川SC6株前鞭毛体与纯培养无鞭毛体的总蛋白,分别经pH3～10的预制胶条进行双向电泳分离,凝胶用考马斯亮蓝染色,凝胶图像以PDQuest1.0软件分析,并对主要差异表达蛋白点用电喷雾质谱法进行鉴定。结果等量的前鞭毛体与纯培养的无鞭毛体总蛋白经双向电泳分离后均可获近700个蛋白点,其中超过90%的蛋白点的分布和相对强度基本一致。与前鞭毛体比较,6个蛋白点在无鞭毛体蛋白中明显高表达,3个蛋白点低表达。6个明显高表达的蛋白点中有5个为已知功能蛋白,分别为Reiske铁硫蛋白前体、α微管蛋白、过氧化物酶1、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶前体和甘露糖-1-磷酸瓜氨酸转移酶;3个低表达的蛋白点中有2个为已知功能蛋白,分别为热休克蛋白70和β微管蛋白。这些差异调节表达蛋白与碳水化合物/能量代谢,应激反应,细胞膜和细胞骨架形成相关。结论前鞭毛体与无鞭毛体蛋白质的表达存在差异。 展开更多
关键词 杜氏利什曼原虫 前鞭毛体 无鞭毛体 比较蛋白质组学
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杜氏利什曼原虫cDNA文库的构建 被引量：8
11
作者 敬保迁 胡孝素 +1 位作者 陈建平 刘洪斌 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期370-372,共3页
目的 :建立杜氏利什曼原虫 c DNA文库 ,以获取个体基因表达产物和研究基因结构。方法 :以杜氏利什曼原虫四川人分离株 m RNA为模板 ,体外合成 c DNA,以噬菌体λgt11DNA为载体构建文库。结果 :共获 2× 10 6重组子 ,插入比例为 4 8%... 目的 :建立杜氏利什曼原虫 c DNA文库 ,以获取个体基因表达产物和研究基因结构。方法 :以杜氏利什曼原虫四川人分离株 m RNA为模板 ,体外合成 c DNA,以噬菌体λgt11DNA为载体构建文库。结果 :共获 2× 10 6重组子 ,插入比例为 4 8%。文库经抗杜氏利什曼原虫前鞭毛体全虫兔抗血清筛选 ,共筛 2× 10 4重组子 ,获 3个阳性表达克隆 ,表达产物的分子量分别为 :136k Da、160 k Da和 148k Da。结论 :已构建成的表达型杜氏利什曼原虫 c DNA文库 ,其插入比例和表达效率均较高。 展开更多
关键词 杜氏利什曼原虫 CDNA文库 免疫筛选 利什曼原虫
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我国不同疫区杜氏利什曼原虫ITS-1片段序列的多态性分析 被引量：8
12
作者 赵桂华 屈金辉 +4 位作者 王洪法 仲维霞 李瑾 崔勇 孔凡红 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第7期520-523,共4页
目的确定rDNA的内转录间隔区Ⅰ(ITS-1)是否可作为我国杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)分类的分子遗传标记。方法对我国不同疫区杜氏利什曼原虫分离株(L.d.SD1、L.d.SC7、L.d.XJ3、L.d.JS12)的ITS-1进行PCR扩增、克隆、测序,并分析... 目的确定rDNA的内转录间隔区Ⅰ(ITS-1)是否可作为我国杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)分类的分子遗传标记。方法对我国不同疫区杜氏利什曼原虫分离株(L.d.SD1、L.d.SC7、L.d.XJ3、L.d.JS12)的ITS-1进行PCR扩增、克隆、测序,并分析它们的ITS-1序列多态性。结果 4个不同疫区的利什曼原虫分离株(L.d.SD1、L.d.SC7、L.d.XJ3、L.d.JS12)经PCR均扩增出一条约320bp的ITS-1片段,其序列大小分别为:317bp、323bp、317bp、316bp。序列分析表明:序列之间在多处位点发生了不同类型的突变,存在明显的序列多态性,其中伽师县突变的频率最为频繁,序列多态性最为显著。结论 ITS-1可以作为Leishmania donovani种内分类的分子遗传标记,有利于我国内脏利什慢原虫病的防治、诊断和治疗。 展开更多
关键词 杜氏利什慢原虫 PCR 内转录间隔区Ⅰ 序列多态性分析
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基于荧光重组酶介导等温扩增技术的利什曼原虫核酸检测方法的建立 被引量：5
13
作者 林红 赵松 +3 位作者 刘燕红 邵雷 应清界 杨坤 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期452-456,463,共6页
目的建立一种基于荧光重组酶介导等温扩增(recombinase-aided isothermal amplification,RAA)技术的检测利什曼原虫核酸的方法。方法针对利什曼原虫内转录间隔基因序列1(ITS1)基因设计用于RAA检测的特异性引物和探针,通过引物配对筛选... 目的建立一种基于荧光重组酶介导等温扩增(recombinase-aided isothermal amplification,RAA)技术的检测利什曼原虫核酸的方法。方法针对利什曼原虫内转录间隔基因序列1(ITS1)基因设计用于RAA检测的特异性引物和探针,通过引物配对筛选、引物和探针浓度优化,建立检测利什曼原虫核酸的荧光RAA法。分别以构建的含利什曼原虫ITS1基因序列的不同拷贝数重组质粒和不同浓度利什曼原虫基因组DNA为模板进行RAA扩增,评估其检测灵敏度;以田鼠巴贝西虫、刚地弓形虫、间日疟原虫、卵形疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫、杜氏利什曼原虫、婴儿利什曼原虫等其他经输血传播的寄生虫基因组DNA为模板进行RAA扩增,评价其检测特异度。结果从9对引物组合中筛选出1对最佳引物对后,引物和探针终浓度经优化分别确定为0.3μmol/L和0.08μmol/L。所建立的荧光RAA法在39℃等温条件下20 min内可完成样本核酸检测。采用建立的RAA法对田鼠巴贝西虫、刚地弓形虫、间日疟原虫、卵形疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫、杜氏利什曼原虫、婴儿利什曼原虫等8种寄生虫基因组DNA进行检测,杜氏利什曼原虫、婴儿利什曼原虫基因组DNA在5 min内即出现明显荧光信号,与田鼠巴贝西虫、刚地弓形虫、间日疟原虫、卵形疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫无交叉反应。以含利什曼原虫ITS1基因序列的重组质粒为模板,荧光RAA法最低检测限为10拷贝/μL;以利什曼原虫基因组DNA为模板,荧光RAA法最低检测限为1 fg/μL。结论成功建立了一种基于荧光RAA法的利什曼原虫核酸检测技术,该方法反应快速、操作简便、灵敏度和特异度均较高,可用于利什曼原虫病流行区现场筛查。 展开更多
关键词 杜氏利什曼原虫 婴儿利什曼原虫 荧光重组酶介导的等温扩增 核酸检测 内转录间隔基因序列1 检测效果
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我国内脏利什曼病山丘疫区与平原疫区利什曼原虫SSUrDNA多变区序列分析 被引量：7
14
作者 卜玲毅 胡孝素 +1 位作者 敬保迁 易桃林 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期321-324,共4页
[目的 ]分析我国内脏利什曼病 (VL)山丘疫区与平原疫区利什曼原虫 (L .d )分离株小亚基核糖体DNA (SSUrDNA)多变区的序列差异。 [方法 ]nDNA进行PCR扩增 ,将扩增出的SSUrDNA基因的特异片段克隆于 pGEMR TEasyVector上 ,采用通用引物M 1... [目的 ]分析我国内脏利什曼病 (VL)山丘疫区与平原疫区利什曼原虫 (L .d )分离株小亚基核糖体DNA (SSUrDNA)多变区的序列差异。 [方法 ]nDNA进行PCR扩增 ,将扩增出的SSUrDNA基因的特异片段克隆于 pGEMR TEasyVector上 ,采用通用引物M 13进行PCR扩增 ,全自动测序仪测序。 [结果 ]序列分析显示 ,扩增的 5株利什曼原虫SSUrDNA序列大小均为 392bp ;序列差异均发生在两个独特序列区 (UQ Ⅰ和UQ Ⅱ ) ;山丘疫区L .d甘肃分离株和四川分离株均在UQ Ⅱ区上有 2个相同的碱基突变 ,L .d甘肃分离株UQ Ⅰ区上有 1个碱基突变 ;无移码突变。 [结论 ]山丘疫区分离株与平原疫区分离株之间的碱基序列有差异 ,平原疫区L .d山东分离株与婴儿利什曼原虫 (L .infantum) 展开更多
关键词 内脏利会曼病 利会曼原虫 SSUrDNA 序列分析
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我国山丘疫区与平原疫区利什曼原虫分离株分子核型分析 被引量：5
15
作者 吕芳丽 胡孝素 +3 位作者 汤海妹 曾凡亚 张义正 戴保民 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期181-184,共4页
目的：分析我国山丘疫区和平原疫区利什曼原虫分离株分子核型。方法：脉冲场电泳。采用１％琼脂糖凝胶，电压６Ｖ／ｃｍ，０．５×ＴＢＥ，１４℃，脉冲时间６０ｓ，电泳１５ｈ和脉冲时间９０ｓ，电泳９ｈ。结果：各个分离株均分离... 目的：分析我国山丘疫区和平原疫区利什曼原虫分离株分子核型。方法：脉冲场电泳。采用１％琼脂糖凝胶，电压６Ｖ／ｃｍ，０．５×ＴＢＥ，１４℃，脉冲时间６０ｓ，电泳１５ｈ和脉冲时间９０ｓ，电泳９ｈ。结果：各个分离株均分离出分子量范围在２００ｋｂ－２２００ｋｂ的ＥＢ染色条带为１５条左右，其中６个山丘疫区分离株之间的核型相似，且犬株与人株的亦相似，并与Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ的核型接近；２个平原疫区分离株之间的核型相似；山丘疫区与平原疫区分离株之间的核型不同。结论：山丘疫区分离株之间和平原疫区分离株之间均各自存在着同源性，山丘疫区分离株与Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ之间存有部分同源性，但两个疫区分离株之间存在着异源性；保虫宿主——家犬，是我国山丘疫区内脏利什曼病的重要传染源。 展开更多
关键词 利什曼原虫 山丘疫区 平原疫区 分子核型
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陕西株利什曼原虫ITS-1基因片段序列多态性分析 被引量：6
16
作者 刘东立 王凤萍 +5 位作者 王安礼 张铮 王天海 石一 关蓉晖 李文涓 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期282-286,共5页
目的分析陕西株利什曼原虫rRNA内转录间隔区间I(ITS-1)序列多态性,探讨利什曼原虫ITS-1分子遗传规律。方法陕西省韩城市犬、白蛉以及人体利什曼原虫阳性标本7份,提取核酸,PCR法扩增ITS-1片段,双向测序、拼接后与文献发表的代表株进行序... 目的分析陕西株利什曼原虫rRNA内转录间隔区间I(ITS-1)序列多态性,探讨利什曼原虫ITS-1分子遗传规律。方法陕西省韩城市犬、白蛉以及人体利什曼原虫阳性标本7份,提取核酸,PCR法扩增ITS-1片段,双向测序、拼接后与文献发表的代表株进行序列比对,构建系统发育树,进行系统发育分析。结果 7份标本均扩增出约320bp的片段,ITS-1序列之间同源性>99%,与国内山丘型疫区虫株高度一致,与荒漠型遗传距离较远。系统发育分析陕西株与婴儿利什曼原虫和杜氏利什曼原虫聚为一类。结论陕西省韩城市分离自病犬、传播媒介白蛉及黑热病患者的利什曼原虫ITS-1序列同源,应为犬源型婴儿利什曼原虫。 展开更多
关键词 利什曼原虫 ITS-1 序列多态性分析 陕西
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一例输入性皮肤利什曼病病原体的鉴定 被引量：11
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作者 赖德华 吴娜 +4 位作者 谢祎婷 洪晓昆 陈允甫 廖力夫 伦照荣 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期295-296,F0003,共3页
对广州一例未知病原体感染引起的皮肤病患者血样进行免疫学和分子生物学鉴定,以确定其病原体。取静脉血,用Leish r K39 dipstick金标试纸检测利什曼原虫抗体情况。取皮损处组织,75%乙醇固定后,提取基因组DNA。用两对利什曼原虫种特异性... 对广州一例未知病原体感染引起的皮肤病患者血样进行免疫学和分子生物学鉴定,以确定其病原体。取静脉血,用Leish r K39 dipstick金标试纸检测利什曼原虫抗体情况。取皮损处组织,75%乙醇固定后,提取基因组DNA。用两对利什曼原虫种特异性引物LITSR-L5.8S和NAGTL1-NAGTL4分别PCR扩增利什曼原虫核糖体DNA内转录间隔区1和N-乙酰氨基葡萄糖苷转移酶的基因片段,扩增产物进行测序和BLAST序列分析。Leish r K39 dipstick金标试纸检测结果呈弱阳性。PCR结果显示,引物LITSR-L5.8S和NAGTL1-NAGTL4分别扩增出约404 bp和1 405 bp的片段,两片段序列与硕大利什曼原虫(Leishmania major)相应序列的相似性均为99.7%。其序列Gen Bank登录号分别为KU975160和KX150476。确诊该皮肤病患者为输入性皮肤利什曼病病例,病原体为硕大利什曼原虫。 展开更多
关键词 皮肤利什曼病 金标试纸 分子标记 硕大利什曼原虫
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我国不同流行区内脏利什曼原虫分离株kDNA的PCR-SSCP分析 被引量：14
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作者 郑学礼 胡孝素 陈建平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期346-349,共4页
目的： 分析我国不同类型流行区内脏利什曼原虫 （Ｌ．ｄ．） 分离株ｋＤＮＡ。方法： 应用利什曼原虫属特异引物１３Ａ， １３Ｂ及据杜氏利什曼原虫四川人分离株ｋＤＮＡ 微环特异片段序列设计合成的引物Ⅰ、引物Ⅱ， ＰＣＲ扩增不同... 目的： 分析我国不同类型流行区内脏利什曼原虫 （Ｌ．ｄ．） 分离株ｋＤＮＡ。方法： 应用利什曼原虫属特异引物１３Ａ， １３Ｂ及据杜氏利什曼原虫四川人分离株ｋＤＮＡ 微环特异片段序列设计合成的引物Ⅰ、引物Ⅱ， ＰＣＲ扩增不同流行区利什曼原虫分离株ｋＤＮＡ， 获特定片段， 进行ＳＳＣＰ分析。结果： 用引物Ⅰ和引物ⅡＰＣＲ扩增内脏利什曼原虫分离株ｋＤＮＡ， 在同样试验条件下， 山丘地区和荒漠地区Ｌ．ｄ． 分离株扩增出２９７ ｂｐ 特定片段， 而平原地区Ｌ．ｄ．分离株及新疆皮肤利什曼原虫未扩增出２９７ ｂｐ 特定片段。将上述各虫株的２９７ ｂｐ 特定片段进行ＳＳＣＰ分析， 可见两个山丘地区的Ｌ．ｄ．分离株ｓｓＤＮＡ 迁移率相同， 而与荒漠地区新疆７７１分离株则相差较大。用引物１３Ａ， １３ＢＰＣＲ 扩增平原地区的Ｌ．ｄ．山东分离株和Ｌ．ｄ．江苏分离株、山丘地区的Ｌ．ｄ．汶川分离株、Ｌ．ｄ．甘肃分离株，均扩增出１２０ ｂｐ 特定片段。经ＳＳＣＰ分析，平原地区的Ｌ．ｄ．山东分离株和Ｌ．ｄ．江苏分离株的ｓｓＤＮＡ迁移率完全相同； 山丘地区的Ｌ．ｄ．汶川分离株和Ｌ．ｄ． 甘肃分离株ｓｓＤＮＡ迁移率相同， 但与平原地区者明显不同； 展开更多
关键词 利什曼原虫 kDNA PCR-SSCP
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杜氏利什曼原虫平原和荒漠疫区分离株LACK基因克隆及序列分析 被引量：4
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作者 马莹 胡孝素 +1 位作者 王雅静 王子龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期197-200,共4页
目的　测定我国平原疫区和荒漠疫区杜氏利什曼原虫分离株活性蛋白激酶 C受体同源物 (L ACK)基因序列 ,并与山丘疫区分离株及国外利什曼原虫分离株进行比较。　方法　应用 RT- PCR扩增 L ACK基因 ,将其克隆入p UC18载体后用双脱氧链末端... 目的　测定我国平原疫区和荒漠疫区杜氏利什曼原虫分离株活性蛋白激酶 C受体同源物 (L ACK)基因序列 ,并与山丘疫区分离株及国外利什曼原虫分离株进行比较。　方法　应用 RT- PCR扩增 L ACK基因 ,将其克隆入p UC18载体后用双脱氧链末端终止法测序 ,并与 Gen Bank中相关数据进行比较。　结果　用 RT- PCR成功扩增出约95 0 bp的 L ACK基因片段 ,测序结果表明其片段大小均为 94 2 bp,与 Gen Bank中多种利什曼原虫 L ACK基因的核苷酸序列一致性达 97%以上。我国山丘、平原和荒漠 3个不同疫区杜氏利什曼原虫分离株的 L ACK基因序列的一致性达95 %以上。　结论　获得了我国平原和荒漠疫区杜氏利什曼原虫 L ACK基因序列。我国 3个不同疫区杜氏利什曼原虫分离株的 L ACK基因具有高度同源性。 展开更多
关键词 杜氏利什曼原虫 荒漠疫区 基因克隆 序列分析 平原疫区 活性蛋白激酶C受体同源物 对比分析
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杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶-2C的基因克隆化与序列分析 被引量：6
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作者 成军 夏小兵 +4 位作者 王刚 刘妍 钟彦伟 王琳 杨继珍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期37-39,共3页
目的　克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。... 目的　克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫 (Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照 ,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果　以杜氏利什曼原虫的基因组为模板 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明 ,杜氏利什曼原虫 1S株PP2C基因序列长度为 1317bp ,开放读码框架由 12 2 1bp组成 ,编码产物为 40 6个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫 1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为 95 % (387/ 40 6 )。结论　本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因 。 展开更多
关键词 杜氏利什曼原虫 蛋白磷酸酶2C 基因疫苗 T细胞抗原 基因克隆化 序列分析
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