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布鲁氏菌超快速荧光PCR方法建立与临床应用 被引量:2
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作者 徐振娜 吴志鹏 +9 位作者 洪伟彬 管知深 林其明 莫钻兰 叶毅飞 谢海燕 李敏 朱燕秋 李小军 张险朋 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期278-283,共6页
目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、... 目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、重复性,绘制标准曲线,与荧光PCR方法检测临床样品比较符合率。结果 该方法检测时间短,10 min即可完成。标准曲线Y=-3.410 7x+38.357,R^(2)=0.998 5,线性关系良好,最低检测限为10 copies/μL。该方法具有良好的特异性,对布鲁氏菌以外的几个临床常见细菌均无特异性扩增。检测3种浓度的阳性质粒,CV值为0.20%~0.91%,说明该方法具有极好的重复性。与荧光PCR方法同时检测140份临床样品,结果完全一致,符合率100%。结论 本研究建立了一种用时短、特异性强、灵敏度高、重复性好布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,可用于布鲁氏菌临床检测和疫情紧急排查,对布鲁氏菌早期诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 超快速荧光PCR 外源性内参 实时荧光PCR
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布鲁氏菌病诊断外泌体microRNA生物标志物的筛选和潜在miRNA-mRNA调控网络的构建
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作者 赵进 陈志强 +5 位作者 王冰丽 李书灵 朱晓玉 贾金彤 柳叶子 李智伟 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期269-277,共9页
目的 探索布鲁氏菌病新型辅助诊断生物标志物及其潜在的miRNA-mRNA调控网络。方法 通过高通量测序比较布鲁氏菌病患者和健康对照组血清外泌体中miRNA的表达差异。利用RT-qPCR验证显著上调的外泌体miRNA的表达。采用ROC曲线评估这些miRN... 目的 探索布鲁氏菌病新型辅助诊断生物标志物及其潜在的miRNA-mRNA调控网络。方法 通过高通量测序比较布鲁氏菌病患者和健康对照组血清外泌体中miRNA的表达差异。利用RT-qPCR验证显著上调的外泌体miRNA的表达。采用ROC曲线评估这些miRNA的诊断价值,并结合生物信息学分析miRNA在布鲁氏菌病感染中的潜在作用。结果 ROC曲线显示外泌体hsa-miR-11400(P<0.05)、hsa-miR-199a-5p(P<0.05)和hsa-miR-148a-5p(P<0.05)的曲线下面积分别为0.79、0.81和0.74。预测了465个差异表达基因,其中包括25个免疫相关靶基因,其中大多数与癌症蛋白多糖、NF-kappa B信号网络和IL-17信号通路密切相关。通过构建差异表达基因网络,PLXNA2、IL17RA、PRKCA、CD22、ACVR1B和CBL免疫基因可能分别受到hsa-miR-199a-5p和hsa-miR-148a-5p的调控。结论 表明外泌体miRNA可作为布鲁氏菌病的辅助诊断指标,且外泌体miRNA-mRNA调控网络为布鲁氏菌病的发病机制及治疗提供了新的见解。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 外泌体微小核糖核酸 生物标志物 miRNA-mRNA调控网络
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布鲁氏菌性脊柱炎危险因素分析 被引量:1
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作者 赵娜娜 张美刚 +2 位作者 陈湘磊 赵利 吴翠萍 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期284-289,共6页
目的探讨布鲁氏菌性脊柱炎的危险因素。方法回顾性收集2018年1月至2024年4月潍坊市益都中心医院布鲁氏菌病患者的电子病历数据,包括一般资料、临床特征和实验室检查,根据是否有脊柱受累,将其分为脊柱受累组和无脊柱受累组,通过多因素log... 目的探讨布鲁氏菌性脊柱炎的危险因素。方法回顾性收集2018年1月至2024年4月潍坊市益都中心医院布鲁氏菌病患者的电子病历数据,包括一般资料、临床特征和实验室检查,根据是否有脊柱受累,将其分为脊柱受累组和无脊柱受累组,通过多因素logistic回归模型分析确定布鲁氏菌性脊柱炎的危险因素。结果124例布鲁氏菌病患者中,布鲁氏菌性脊柱炎患者59例,单纯布鲁氏菌病患者65例。脊柱受累组患者年龄≥55岁(χ^(2)=17.71)、从发病到确诊时间≥30 d(χ^(2)=26.17)、腰痛(χ^(2)=52.71)多于无脊柱受累组,差异有统计学意义(P均<0.001);无脊柱受累组头痛患者多于脊柱受累组,差异有统计学意义(χ^(2)=8.34,P<0.05);脊柱受累组中性粒细胞百分比(NEU%)(t=2.94)、血小板计数(PLT)(t=122.00)、血沉(ESR)(Z=-6.74)、C反应蛋白(CRP)(Z=-5.74)、白介素-6(IL-6)(Z=-2.08)均高于无脊柱受累组,且差异均有统计学意义(P均<0.05);脊柱受累组乳酸脱氢酶(LDH)低于无脊柱受累组,差异有统计学意义(t=-2.04,P<0.042)。通过多因素logistic回归分析得到院外症状时间≥30 d(OR=6.265,95%CI 1.181~33.241)、有腰痛症状(OR=14.885,95%CI 3.144~70.472)、PLT升高(OR=1.013,95%CI 1.004~1.023),ESR升高(OR=1.053,95%CI 1.008~1.100)是布鲁氏菌性脊柱炎的危险因素(P均<0.05)。ROC分析的最佳截断值为PLT>278.5×10^(9)/L(灵敏度为89.2%,特异度为59.3%),ESR>16.5 mm/h(灵敏度为69.2%,特异度为86.4%),二者联合诊断时,AUROC为0.891(95%CI 0.831~0.950),灵敏度为86.2%,特异度为84.7%。结论当布鲁氏菌病患者出现腰痛症状、从发病到确诊时间≥30 d并伴ESR、PLT明显升高时,建议完善腰椎磁共振检查排除布鲁氏菌性脊柱炎,尽早诊断,及时治疗,改善患者预后,缩短患者病程,提高患者生活质量。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 布鲁氏菌性脊柱炎 临床特征 独立临床危险因素
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2020-2022年河南省部分县(区)利什曼原虫感染情况分析
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作者 杨成运 王丹 +8 位作者 贺志权 纪鹏慧 鲁德岭 钱丹 刘颖 李素华 周瑞敏 邓艳 张红卫 《疾病监测》 北大核心 2025年第3期346-351,共6页
目的 分析河南省部分县(区)利什曼原虫感染情况,评估河南省内脏利什曼病传播风险,为制定科学合理的防控措施提供依据。方法 收集整理国家传染病报告信息系统中2020—2022年河南省洛阳市新安县、孟津区、安阳市林州市报告病例信息,同时收... 目的 分析河南省部分县(区)利什曼原虫感染情况,评估河南省内脏利什曼病传播风险,为制定科学合理的防控措施提供依据。方法 收集整理国家传染病报告信息系统中2020—2022年河南省洛阳市新安县、孟津区、安阳市林州市报告病例信息,同时收集2022年新安县、孟津区、林州市、修武县和博爱县捕获的白蛉样本,提取DNA,聚合酶链式反应(PCR)检测利什曼原虫动基体靶基因,检测白蛉体内利什曼原虫感染情况。对2020—2022年5个县(区)犬只利什曼原虫抗体检测数据进行收集并做统计学分析。采用PCR方法对患者、阳性犬只和阳性白蛉DNA扩增内转录间隔区1基因并进行序列比对,构建系统进化树。结果 林州市自2016年首先出现本地感染病例,2020—2022年共有17例本地感染病例。新安县和孟津区自2020年出现本地感染病例,2020—2022年分别有4和1例本地感染病例。修武县和博爱县目前还未出现本地感染病例。2022年在新安县、孟津区、林州市、博爱县和修武县共捕获白蛉3 778只,最低感染率为0.16%(6/3 778),新安县、孟津区和林州市白蛉最低感染率分别为0.44%(2/457)、1.46%(2/137)和1.52%(2/132),修武县和博爱县的白蛉均为阴性。新安县、孟津区和林州市3个县(区)白蛉利什曼原虫感染率差异无统计学意义(χ^(2)=2.277,P=0.532)。2020—2022年5个县(区)共检测犬只1 025只,平均阳性率为14.24%(146/1 025)。其中,博爱县未进行犬只检测,修武县所有犬只检测均为阴性,新安县、孟津区和林州市犬只阳性率分别为15.50%(40/258)、17.24%(5/29)和15.17%(101/666),新安县、孟津区和林州市3县(区)的犬只阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=0.102,P=0.950),患者、阳性犬只和阳性白蛉ITS1基因序列一致,与婴儿利什曼原虫和杜氏利什曼原虫聚为一类。结论 河南省部分县区存在内脏利什曼病的完整传播链,需采取综合性防控措施从“人类–动物–媒介”整体进行内脏利什曼病的防控,争取早日阻断内脏利什曼病在河南省的传播。 展开更多
关键词 白蛉 内脏利什曼原虫 内转录间隔区1基因 系统发育 河南省
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2013-2023年新疆维吾尔自治区内脏利什曼病疫情特征分析
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作者 亚里昆·买买提依明 买买提江·吾买尔 +3 位作者 张海亭 史光忠 赵江山 阿迪力·司马义 《疾病监测》 北大核心 2025年第1期84-91,共8页
目的了解2013—2023年新疆维吾尔自治区(新疆)内脏利什曼病疫情特点,为制定有效的防控策略和措施提供科学依据。方法收集中国疾病预防控制信息管理系统2004—2023年新疆内脏利什曼病监测数据(不包括新疆生产建设兵团),并剔除疑似、重复... 目的了解2013—2023年新疆维吾尔自治区(新疆)内脏利什曼病疫情特点,为制定有效的防控策略和措施提供科学依据。方法收集中国疾病预防控制信息管理系统2004—2023年新疆内脏利什曼病监测数据(不包括新疆生产建设兵团),并剔除疑似、重复报告以及皮肤利什曼病例,其中2004—2012年各县(市)报告病例用于定义流行县(区)、潜在流行县(区)和非流行县(区),2013—2023年报告病例依据我国提出内脏利什曼病流行病学分类,按现住址划分为流行区(人源型、荒漠型和砾漠型)和非流行区报告病例,并且采用Excel 2021和Qgis 3.28软件对报告病例三间分布分别进行描述流行病学分析。结果2013—2023年新疆内脏利什曼病波及12个人源型、11个荒漠型、2个砾漠型流行县(区)和8个非流行县(区),发现1个人源型、3个荒漠型、4个砾漠型潜在流行县(市),累计报告内脏利什曼病846例,年均发病率0.34/10万,0~68岁人群均有病例报告,其中2岁以下散居婴幼儿占新疆累计报告病例数的87.12%,男性年均发病率0.41/10万,女性年均发病率0.33/10万,男女性别比1.28∶1;荒漠型流行区累计报告病例数占新疆累计报告病例数的85.34%,其中,伽师县占新疆累计报告病例数的74.94%。结论新疆内脏利什曼病以2岁以下散居婴幼儿众多,男性高于女性,荒漠型流行区疫情较其他流行区和非流行区严重。 展开更多
关键词 内脏利什曼病 疫情分析 白蛉 新疆
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布鲁氏菌双抗夹心ELISA检测方法的建立与初步验证
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作者 姚梦欣 彭泽宇 +5 位作者 任文浩 徐艺玫 郭伟 陈创夫 马忠臣 王勇 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期255-262,共8页
目的 建立灵敏、特异的布鲁氏菌双抗体夹心ELISA检测方法。方法 筛选用于布鲁氏菌检测的单克隆捕获抗体和检测抗体,优化并确定最佳抗体包被时间和浓度,最佳封闭液、封闭时间和阴阳性临界值;通过检验其他易与布鲁氏菌发生交叉反应的细菌... 目的 建立灵敏、特异的布鲁氏菌双抗体夹心ELISA检测方法。方法 筛选用于布鲁氏菌检测的单克隆捕获抗体和检测抗体,优化并确定最佳抗体包被时间和浓度,最佳封闭液、封闭时间和阴阳性临界值;通过检验其他易与布鲁氏菌发生交叉反应的细菌来验证该方法的特异性;通过对灭活布鲁氏菌梯度稀释液的检测,验证该方法的灵敏性;将该夹心ELISA检测结果与试管凝集和qPCR检测结果进行比较。结果 筛选出的捕获抗体为4A12,检测抗体为6C12。试验分析显示,捕获抗体4A12的最佳包被浓度为5μg/mL,检测抗体6C12的最佳稀释比为1∶2 000。该研究的最佳包被条件为4℃过夜、5%脱脂奶粉封闭、封闭时间2 h。该研究建立的双抗体夹心ELISA方法只与布鲁氏菌发生反应,与其他细菌未发生反应;布鲁氏菌灭活菌液浓度稀释到1×10^(5) CFU/mL时仍能检测出。批内、批间变异系数均小于10%。结论 该研究成功建立了布鲁氏菌双抗夹心ELISA检测方法,该方法具有良好的特异性与灵敏性,为布鲁氏菌病的精确诊断和有效防控提供有效途径。 展开更多
关键词 单克隆抗体 布鲁氏菌 双抗夹心ELISA法 诊断
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粗糙型布鲁氏菌疫苗的研究进展
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作者 王倩 皮向成 +2 位作者 冯宇 那仁毕力格 蒋卉 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期263-268,共6页
布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患传染病,能引起动物和人类持续性感染。该病不仅严重影响畜牧业的健康发展,对人类健康和社会公共卫生安全也存在着很大的威胁。目前疫苗接种是预防动物布鲁氏菌病最为有效的方法。与光滑型菌株... 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患传染病,能引起动物和人类持续性感染。该病不仅严重影响畜牧业的健康发展,对人类健康和社会公共卫生安全也存在着很大的威胁。目前疫苗接种是预防动物布鲁氏菌病最为有效的方法。与光滑型菌株相比,粗糙型菌株不含有O链抗原,免疫动物具有毒力低、安全性高、不干扰临床诊断等优点,因此粗糙型布鲁菌疫苗在布鲁氏菌病的防控中具有良好的开发前景。目前研究者将开发粗糙型布鲁氏菌疫苗作为布病疫苗研发的重要方向,该领域对开发粗糙型布鲁氏菌疫苗的需求十分迫切。本文对目前已开发出的粗糙型布鲁氏菌疫苗及候选株的研究现状进行简要梳理,总结已开发出的疫苗应用及其效果,以期为布鲁氏菌的防控以及粗糙型布鲁氏菌疫苗的后续开发提供参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 粗糙型 布鲁氏菌 疫苗
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一种潜在输入性人兽共患病:恰加斯病(美洲锥虫病)的传播途径与全球扩散现状
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作者 吴小嫩 谢彬彬 +2 位作者 侯志颖 陈军虎 周晓农 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期494-500,共7页
恰加斯病(美洲锥虫病)是由克氏锥虫感染引起的一种严重危害公共卫生安全的人兽共患病。近年来,随着经济全球化和人口流动的增加,逐渐从局限于拉丁美洲流行区域向非流行区域欧洲等区域扩散,主要传播途径已从经媒介锥蝽传播向输血传播、... 恰加斯病(美洲锥虫病)是由克氏锥虫感染引起的一种严重危害公共卫生安全的人兽共患病。近年来,随着经济全球化和人口流动的增加,逐渐从局限于拉丁美洲流行区域向非流行区域欧洲等区域扩散,主要传播途径已从经媒介锥蝽传播向输血传播、母婴传播、经口传播等途径转变,从而使恰加斯病呈向全球持续扩散趋势,使更多人群暴露于感染风险。本文对美洲锥虫病传播途径研究进行回顾性总结,分析传播途径变化趋势,并以One Health视角为防控恰加斯病扩散策略的制定与优化提供科学依据。 展开更多
关键词 美洲锥虫病 传播途径 扩散 锥蝽
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甘肃文县婴儿利什曼原虫无症状感染犬的检测 被引量:29
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作者 汪俊云 陈生邦 +7 位作者 高春花 金长发 冯宇 张丑吉 何慧娴 杨成明 杨涛 包意芳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期734-737,共4页
目的评价PCR法、ELISA法和试条法检测我国婴儿利什曼原虫无症状感染犬的潜能。方法用两组PCR引物RV1-RV2和K13A-K13B检测动物源型黑热病疫区健康犬静脉血和骨髓中利什曼原虫特异DNA,以利什曼原虫可溶性抗原为包被抗原的ELISA法和rk39-di... 目的评价PCR法、ELISA法和试条法检测我国婴儿利什曼原虫无症状感染犬的潜能。方法用两组PCR引物RV1-RV2和K13A-K13B检测动物源型黑热病疫区健康犬静脉血和骨髓中利什曼原虫特异DNA,以利什曼原虫可溶性抗原为包被抗原的ELISA法和rk39-dipstick试条法分别检测利什曼原虫特异抗体,并比较各种检测方法的敏感性差异。结果PCR法检测抗凝静脉血和骨髓的阳性率分别为50.63%(40/79)和69.62%(55/79),两种样本总检出率为77.21%(61/79);ELISA法检测的阳性率为22.22%(16/72),而rk39-dipstick试条检测的阳性率为33.33%(19/57)。结论我国动物源性黑热病疫区利什曼原虫无症状感染犬的比例相当高,以骨髓为样本的PCR检测法为较精确的犬无症状感染检测方法。 展开更多
关键词 婴儿利什曼原虫 无症状感染 PCR ELISA rk39-dipstick
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中国贾第虫感染流行病学现况 被引量:39
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作者 蒋则孝 许隆祺 +7 位作者 余森海 李宝山 方悦怡 李远璧 刘常华 许贤让 陈思礼 张雪强 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1997年第7期407-408,共2页
1988~1991年对全国30个省(区、市)中726个县的1477742人进行的贾第虫感染调查,总感染率为2.52%,呈全国性分布,以新疆(9.26%)、西藏(8.22%)和河南(7.18%)为高,而吉林、辽宁、内蒙... 1988~1991年对全国30个省(区、市)中726个县的1477742人进行的贾第虫感染调查,总感染率为2.52%,呈全国性分布,以新疆(9.26%)、西藏(8.22%)和河南(7.18%)为高,而吉林、辽宁、内蒙古等则甚低。人体感染率在2%以内的县占49.8%,高于10%的县仅占5.5%。年龄以5~9岁组(4.97%)为最高,次之为10~14岁组(4.17%)。男性(2.79%)高于女性(2.52%)。职业以牧民、儿童为高。新疆、广东、河北、四川、福建的感染有家庭聚集性。饮用水以涝坝水的感染率最高(13.94%)。 展开更多
关键词 贾第虫 地理分布 感染率 家庭聚集性 流行因素
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临床腹泻患者贾第虫感染和分子特征研究 被引量:12
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作者 刘华 沈玉娟 +3 位作者 张玉梅 王斌 刘晖 曹建平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期152-155,共4页
目的初步了解临床腹泻患者贾第虫的感染情况及分子特征。方法以2014年5-7月上海市某医院临床腹泻患者为研究对象,收集粪便样本95份,进行卢戈氏碘液染色,用光学显微镜检查贾第虫包囊。采用巢式PCR法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(tpi),... 目的初步了解临床腹泻患者贾第虫的感染情况及分子特征。方法以2014年5-7月上海市某医院临床腹泻患者为研究对象,收集粪便样本95份,进行卢戈氏碘液染色,用光学显微镜检查贾第虫包囊。采用巢式PCR法扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶基因(tpi),扩增产物测序后用BLAST、Clustal X 1.83和MEGA6.0软件进行同源性和系统发育分析。结果形态学观察发现1例腹泻患者感染贾第虫,阳性检出率为1.05%。其粪便样本经卢戈氏碘液染色后显微镜下可见清晰的包囊。对样本进行PCR检测,扩增片段大小约为530 bp,测序结果显示为贾第虫。经序列比对分析,并以tpi基因构建系统发育树,分析鉴定该分离株为集聚体B,与已报道的人源贾第虫分离株(KF271445)同源性为100%。结论临床腹泻患者中存在贾第虫感染,本研究结果可为了解贾第虫基因型特点及贾第虫病流行病学研究提供参考。 展开更多
关键词 腹泻 感染 贾第虫 形态学 分子特征 巢式PCR 系统进化树
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新疆喀什地区黑热病暴发的危险因素分析 被引量:12
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作者 赵桂华 王洪法 +4 位作者 仲维霞 崔勇 尹昆 徐超 肖婷 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期592-596,共5页
目的探讨新疆喀什地区黑热病暴发流行的危险因素。方法采用病例对照研究,自制调查问卷,以基于利什曼原虫kDNA保守区PCR扩增的分子方法检测呈阳性感染的为病例组,按1∶3匹配选择年龄、性别、营养状况、职业、家庭收入与消费、受教育程度... 目的探讨新疆喀什地区黑热病暴发流行的危险因素。方法采用病例对照研究,自制调查问卷,以基于利什曼原虫kDNA保守区PCR扩增的分子方法检测呈阳性感染的为病例组,按1∶3匹配选择年龄、性别、营养状况、职业、家庭收入与消费、受教育程度等方面差别无统计学意义(P>0.05),且利什曼原虫感染检测呈阴性的健康人为对照组,对性别、环境和行为等10个潜在危险因素进行单因素和多因素logistic回归分析。结果75份易感人血样感染利什曼原虫阳性率为82.67%(62/75)。单因素分析显示:户外被叮咬、户外露宿习惯、邻居有黑热病患者、蚊帐及趋避剂杀虫剂的使用与当地易感人群感染利什曼原虫关系密切,危险比(RH)值和95%可信区间(95%CI)依次为7.296,(3.102,1.16)、15.429(5.876,8.995)、75.6(26.6,214.9)、0.311(0.132,0.733)、0.491(0.292,0.672);多因素分析显示:户外被叮咬、邻居有黑热病患者是感染利什曼原虫的危险因素,使用蚊帐是保护性因素,RH值和95%CI为12.56(3.476,45.38)、140.987(37.59,528.8)、0.185(0.05,0.68)。结论在该地区易感人群感染利什曼原虫率较高的情况下,对当地居民普及黑热病的危害及防御措施,及时确诊并彻底诊治黑热病患者,尽量避免户外被叮咬,养成使用蚊帐习惯是预防控制当地人源型黑热病感染暴发的有效措施。 展开更多
关键词 黑热病 暴发 危险因素 LOGISTIC回归分析
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山东省1例人粒细胞无形体病的确认与调查 被引量:17
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作者 李忠 丁淑军 +3 位作者 吕慧 陈勇 侯配强 王显军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期397-400,共4页
目的对1例可疑人粒细胞无形体病病例进行病原学实验诊断与流行病学个案调查。方法按照卫生部下发的《人粒细胞无形体病流行病学调查方案(试行)》进行个案调查。采用套式-聚合酶链反应(nested-PCR)技术检测病例血液中人粒细胞无形体16Sr... 目的对1例可疑人粒细胞无形体病病例进行病原学实验诊断与流行病学个案调查。方法按照卫生部下发的《人粒细胞无形体病流行病学调查方案(试行)》进行个案调查。采用套式-聚合酶链反应(nested-PCR)技术检测病例血液中人粒细胞无形体16SrRNA基因。结果人粒细胞无形体DNA检测为阳性,测序分析显示与浙江、吉林野鼠检出的无形体相应序列同源性99%以上。结论该病例为山东省2008年疫情网络直报首起人粒细胞无形体病突发公共卫生事件报告病例,并经实验室检测确诊,符合卫生部下发的《人粒细胞无形体病预防控制技术指南(试行)》中的病例诊断标准。证明山东省存在人粒细胞无形体感染病例,进一步开展自然疫源地调查工作十分必要。 展开更多
关键词 人粒细胞无形体病 流行病学 调查
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一株芽孢杆菌16SrRNA的基因序列测定和系统进化分析 被引量:12
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作者 李瑞芳 赵玉峰 +2 位作者 薛雯雯 田泱源 张长付 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期121-122,125,共3页
从河南黄河稻区土壤中分离出一株具有较强稻瘟病菌拮抗活性的芽孢杆菌菌株BS501,经过形态观察、生理生化特性检测和电镜技术,确定其为芽孢杆菌属细菌。为进一步确定其分类学地位,扩增了BS501基因组的16S rDNA,并将测序结果提交GenBank... 从河南黄河稻区土壤中分离出一株具有较强稻瘟病菌拮抗活性的芽孢杆菌菌株BS501,经过形态观察、生理生化特性检测和电镜技术,确定其为芽孢杆菌属细菌。为进一步确定其分类学地位,扩增了BS501基因组的16S rDNA,并将测序结果提交GenBank数据库(登录号:FJ755787)。利用BLAST软件将该序列与枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等芽孢菌属细菌及大肠杆菌16S rDNA序列进行同源性比对。系统进化树表明,BS501与芽孢菌属细菌在进化关系上组成一个大的分支,与枯草芽孢杆菌最为接近,与大肠杆菌较远。同源性分析表明该序列与枯草芽孢杆菌PRE23同源性达99%,证实该菌株的分类学地位为枯草芽孢杆菌。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 16SrDNA 基因测序 系统进化分析
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华支睾吸虫成虫全长基因表达文库的构建和基因表达谱的建立 被引量:20
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作者 徐劲 胡旭初 +4 位作者 应康 吴忠道 陈守义 谢毅 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期383-386,393,共5页
目的 获得尽可能多的华支睾吸虫UNIGENE及全长基因 ,建立成虫基因表达谱 ,为华支睾吸虫发育过程中基因表达的规律和功能基因组学研究奠定基础。方法 构建 pBluescriptⅡSK全长cDNA质粒文库 ,先对 5’端进行随机EST大量测序 ,生物信息... 目的 获得尽可能多的华支睾吸虫UNIGENE及全长基因 ,建立成虫基因表达谱 ,为华支睾吸虫发育过程中基因表达的规律和功能基因组学研究奠定基础。方法 构建 pBluescriptⅡSK全长cDNA质粒文库 ,先对 5’端进行随机EST大量测序 ,生物信息分析后归并UNIGENE ,并对归并的结果进行了 3’端的序列测定 ,根据 3’端测序结果 ,再次进行UNI GENE归并 ,对能够拼接上的克隆进行了序列拼接。对预测为完整基因且未测通的序列 ,进行了引物设计 ,walking反应测序 ,将得到的UNIGENE用点样法制备基因芯片。结果 获得 5’端有效EST序列 4 0 6 6个 ,测序结果UNIGENE分析 ,归并获得1775个UNIGENE ,5’端预测的全长基因为 377个。共获得测通的cDNA序列 2 77个 ,其中全长基因 198个。目前制备的华支睾成虫基因表达谱芯片含有 1775个基因。结论 所构建的华支睾吸虫成虫全长cDNA文库质量较好 ,采用的技术路线获取全长基因建立基因表达谱的效率较高。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 基因表达谱 生物信息学
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广西南部沿海地区居民人芽囊原虫感染情况调查 被引量:27
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作者 杨彦 刘晓泉 +5 位作者 唐莉莉 石焕焕 刘腾 王鸽 张小娟 何姗姗 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第2期142-143,103,共3页
目的了解广西南部沿海地区居民人芽囊原虫的感染情况。方法随机抽样调查11个自然村,以户为单位分别收集家庭各成员粪便标本,采用改良酸醚沉淀法镜检。结果在该地区的11个村抽检1 366人,粪检样品1 366份,阳性360份,人群感染率26.35%。11... 目的了解广西南部沿海地区居民人芽囊原虫的感染情况。方法随机抽样调查11个自然村,以户为单位分别收集家庭各成员粪便标本,采用改良酸醚沉淀法镜检。结果在该地区的11个村抽检1 366人,粪检样品1 366份,阳性360份,人群感染率26.35%。11个村的感染率在5.13%~44.72%之间;感染率年龄分布以0~9岁最高,为34.79%,40~49岁最低,为12.93%;职业分布以学龄前儿童感染率最高,为40.80%,农民感染率最低,为21.19%。结论广西南部沿海地区居民人芽囊原虫感染率较高,地区、年龄和职业差异明显,且有家庭聚集现象。 展开更多
关键词 广西南部沿海 人芽囊原虫 感染
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双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体蛋白质的损伤 被引量:8
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作者 余源 陈阳 +6 位作者 王卫亮 杨志宏 田玉娜 王玥 田喜凤 卢思奇 赵永强 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期995-998,1003,共5页
目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)滋养体蛋白质的损伤作用。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体;设立实验组(DHA组)和正常对照组(C组)。实验组用含双氢青蒿素的... 目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)滋养体蛋白质的损伤作用。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体;设立实验组(DHA组)和正常对照组(C组)。实验组用含双氢青蒿素的培养基(含LC50=200μg/mL的DHA)培养;对照组培养基不含药物。提取各组虫体总蛋白,经Brad-ford法进行蛋白质定量,样本经2D-电泳和硝酸银染色后,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量和种类,获取蛋白质点匹配信息,挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF MS)分析。结果经双氢青蒿素作用后虫体总蛋白质含量(0.6993μg/mL)明显低于对照组(4.8241μg/mL),二者差异有显著性(P<0.001)。蛋白质二维电泳凝胶图分析结果显示,正常对照组(C组)蛋白点密集,约1253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高(蛋白点颜色深且清晰、明亮);与此相反,实验组(DHA组)蛋白点显著减少,DHA作用6h后约617个点,作用12h后约326个点,蛋白表达量明显降低(蛋白点颜色浅,不清晰)。其次,正常对照组与双氢青蒿素组的12kDa^30kDa、等电点pI3.0~7.6范围内蛋白点表达量存在明显差异,即实验组该范围内大多数蛋白点完全消失,45kD^60kDa的蛋白点仅剩6个点。质谱分析鉴定结果显示,在正常对照组胶图所选的80个匹配良好的蛋白点中,鉴定出6种骨架蛋白(14个点),而实验组(DHA组)蛋白胶图中相对应的蛋白点消失。结论双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的蛋白质具有明显的损伤作用,其中包括细胞骨架蛋白。 展开更多
关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 双向电泳 质谱 骨架蛋白
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用PCR扩增tim基因检测蓝氏贾第鞭毛虫 被引量:9
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作者 丁慧萍 卢思奇 +2 位作者 戎煜 李凤舞 王凤云 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2002年第2期65-69,共5页
采用聚合酶链反应 (PCR)对蓝氏贾第鞭毛虫 (Giardialamblia)的磷酸丙糖异构酶 (triosephosphateisomerase ,缩写为tim)基因进行特异性扩增 ,结果扩增出 1条 6 83bp的DNA片段。此方法的特异性可高达10 0 % ,而其它DNA样本 ,如日本血吸虫 ... 采用聚合酶链反应 (PCR)对蓝氏贾第鞭毛虫 (Giardialamblia)的磷酸丙糖异构酶 (triosephosphateisomerase ,缩写为tim)基因进行特异性扩增 ,结果扩增出 1条 6 83bp的DNA片段。此方法的特异性可高达10 0 % ,而其它DNA样本 ,如日本血吸虫 (Schistosomajaponicum)、刚地弓形虫 (Toxoplasmagondii)、微小隐孢子虫 (Cryptosporidiumparvum)、溶组织内阿米巴 (Entamoebahistolytica)、旋毛虫 (Trichinellaspiralis)和阴道毛滴虫 (Trichomonasvaginalis) ,以及人体血细胞等均未出现扩增反应。本法的敏感性也很高 ,可检测到0 4pg贾第虫包囊的DNA。 13株来自不同地理位置和 或宿主的贾第虫DNA样本在PCR中均各产生 1条长为 6 83bp的目的片段。 展开更多
关键词 PCR扩增 tim基因 检测 蓝氏贾第鞭毛虫 聚酶链反应 磷酸丙糖异构酶
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拉曼镊子结合多元统计方法分析两种人体滴虫的差异性 被引量:7
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作者 黄庶识 赖钧灼 +1 位作者 梁裕芬 韦俊彬 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第4期521-527,共7页
应用单细胞激光拉曼光谱分析技术,对不同来源的阴道毛滴虫和口腔毛滴虫的拉曼光谱数据进行减背景、平滑、基线校正、归一化等处理后做主成分分析(PCA)和辨别函数分析(DFA)等多元统计分析。平均光谱和PCA分析结果表明,阴道毛滴虫和口腔... 应用单细胞激光拉曼光谱分析技术,对不同来源的阴道毛滴虫和口腔毛滴虫的拉曼光谱数据进行减背景、平滑、基线校正、归一化等处理后做主成分分析(PCA)和辨别函数分析(DFA)等多元统计分析。平均光谱和PCA分析结果表明,阴道毛滴虫和口腔毛滴虫差异最为明显是1002 cm-1峰,其次,差异相关性最大的还有9个拉曼谱峰785,888,979,1127,1287,1317,1364,1446和1465 cm-1,其中4个峰来自核酸,6个峰归属于蛋白质信号峰,反映两种滴虫的蛋白质、核酸的相对含量差异较大,可以通过PCA方法鉴别两种毛滴虫的差异。由于口腔毛滴虫或阴道毛滴虫虫株间差异并不明显,应用PCA结合DFA多元统计学方法,在保留原有数据信息基础上,通过扩大组间差异,缩小组内差距,同种毛滴虫虫株间在一定程度得到区分。口腔毛滴虫4个虫株之间有12个峰是差异最大的谱峰,阴道毛滴虫4个虫株之间有14个峰是差异最大,反映了两种毛滴虫虫株之间核酸、蛋白质、脂类及糖类等生物大分子组成相对含量差异。此外,根据DFA中虫株间欧氏距离聚类,可以确知虫株之间的差异。 展开更多
关键词 口腔毛滴虫 阴道毛滴虫 拉曼光谱 多元统计分析
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蓝氏贾第鞭毛虫中国株组蛋白H2A基因的克隆与重组表达 被引量:8
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作者 王云华 郑国侠 +2 位作者 巨红妹 张霞 李雅杰 《热带医学杂志》 CAS 2011年第10期1107-1110,1137,共5页
目的获取蓝氏贾第鞭毛虫中国株GlH2A基因及重组蛋白。方法 PCR扩增获取GlH2A基因,连接至pMD-19T并进行测序分析。连接至pET28a构建表达载体,并转化宿主菌E.coli BL21(DE3),然后进行异丙基硫代半乳糖苷酶(IPTG)诱导表达。表达产物进行亲... 目的获取蓝氏贾第鞭毛虫中国株GlH2A基因及重组蛋白。方法 PCR扩增获取GlH2A基因,连接至pMD-19T并进行测序分析。连接至pET28a构建表达载体,并转化宿主菌E.coli BL21(DE3),然后进行异丙基硫代半乳糖苷酶(IPTG)诱导表达。表达产物进行亲和层析纯化,再用Western blotting进行免疫学鉴定。结果序列测定获得蓝氏贾第鞭毛虫中国株GlH2A基因的编码序列,与美国WB株H2A(GL50803_14256,Accession:NW_001844132)序列完全一致。该基因编码124个氨基酸,预测分子量13900Mr,保留了与核小体形成相关的重要氨基酸位点,在大肠埃希菌中获得表达,纯化后纯度达90%以上。Western blotting检测表明重组蛋白能够被抗His6标签抗体识别。结论克隆得到GlH2A基因编码序列;得到了重组GlH2A蛋白,并进行了纯化,为进一步研究组蛋白及其修饰酶在基因转录调控中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 组蛋白H2A 克隆 表达
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