目的了解河南省脓肿分枝杆菌复合群耐药情况及基因分型结果,为脓肿分枝杆菌复合群感染防控提供支持。方法收集河南省2019—2022年分离自各地市结核病定点防治机构送检标本32株脓肿分枝杆菌复合群菌菌株。使用微孔板法检测脓肿分枝杆菌...目的了解河南省脓肿分枝杆菌复合群耐药情况及基因分型结果,为脓肿分枝杆菌复合群感染防控提供支持。方法收集河南省2019—2022年分离自各地市结核病定点防治机构送检标本32株脓肿分枝杆菌复合群菌菌株。使用微孔板法检测脓肿分枝杆菌复合群菌对12种药物的敏感性,采用熔解曲线法和基因测序检测菌株耐药相关基因突变情况。用18位点可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeat,VNTR)方法进行基因分型,并用BioNumerics软件对分型数据进行聚类分析。结果经鉴定32株菌株包括18株脓肿分枝杆菌、13株马赛分枝杆菌和1株博莱分枝杆菌。药敏结果显示,阿米卡星、克拉霉素、替加环素、利奈唑胺和头孢西丁等药物在体外对脓肿分枝杆菌复合群有较好的抗菌效果,耐药率分别为6.25%(2/32)、15.63%(5/32)、15.63%(5/32)、25.00%(8/32)和25.00%(8/32)。菌株对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、环丙沙星、美罗培南、多西环素、妥布霉素、亚胺培南和莫西沙星的耐药率较高,分别为87.50%(28/32)、81.25%(26/32)、81.25%(26/32)、78.13%(25/32)、65.63%(21/32)、65.63%(21/32)和59.38%(19/32)。脓肿分枝杆菌对头孢西丁和14 d时克拉霉素的耐药率高于马赛分枝杆菌,差异有统计学意义(P<0.05)。18位点VNTR将32株脓肿分枝杆菌复合群菌株分为28个不同的基因型,包括来自3个簇的7株菌株和25个独特模式的分离株,HunterGaston判别指数为0.990。结论河南省脓肿分枝杆菌复合群主要由脓肿分枝杆菌和马赛分枝杆菌组成,阿米卡星、克拉霉素、替加环素、利奈唑胺和头孢西丁等药物在体外对河南省分离的脓肿分枝杆菌复合群菌株具有较好的抗菌活性,18位点的VNTR分型方法对脓肿分枝杆菌复合群菌株具有较好的分型能力。展开更多
目的:探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核-巨噬细胞THP-1后,S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A4,S100A4)通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激...目的:探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核-巨噬细胞THP-1后,S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A4,S100A4)通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调控作用。方法:采用S100A4小干扰RNA(S100A4 small interfering RNA,si-S100A4)转染或PI3K抑制剂LY294002预处理THP-1巨噬细胞,并经BCG感染,设置不同处理组和对照组,通过Western blot方法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白和自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-II(microtubule-associated protein 1 light chain 3-II,LC3-II)、自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,Atg7)和beclin-1]的表达,mRFP-GFP-LC3自噬双标腺病毒方法检测自噬流,透射电子显微镜观察细胞中自噬体和自噬溶酶体数量变化。结果:与未感染组相比,BCG感染组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.05)。与BCG感染组相比,si-S100A4+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著升高(P<0.05),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01);LY294003+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.05),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01)。与si-S100A4+BCG组相比,si-S100A4+LY294002+BCG组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.01),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01),胞内菌载量显著减少(P<0.01)。结论:干扰S100A4经由PI3K/AKT/mTOR信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬具有抑制作用。展开更多
文摘目的了解河南省脓肿分枝杆菌复合群耐药情况及基因分型结果,为脓肿分枝杆菌复合群感染防控提供支持。方法收集河南省2019—2022年分离自各地市结核病定点防治机构送检标本32株脓肿分枝杆菌复合群菌菌株。使用微孔板法检测脓肿分枝杆菌复合群菌对12种药物的敏感性,采用熔解曲线法和基因测序检测菌株耐药相关基因突变情况。用18位点可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeat,VNTR)方法进行基因分型,并用BioNumerics软件对分型数据进行聚类分析。结果经鉴定32株菌株包括18株脓肿分枝杆菌、13株马赛分枝杆菌和1株博莱分枝杆菌。药敏结果显示,阿米卡星、克拉霉素、替加环素、利奈唑胺和头孢西丁等药物在体外对脓肿分枝杆菌复合群有较好的抗菌效果,耐药率分别为6.25%(2/32)、15.63%(5/32)、15.63%(5/32)、25.00%(8/32)和25.00%(8/32)。菌株对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、环丙沙星、美罗培南、多西环素、妥布霉素、亚胺培南和莫西沙星的耐药率较高,分别为87.50%(28/32)、81.25%(26/32)、81.25%(26/32)、78.13%(25/32)、65.63%(21/32)、65.63%(21/32)和59.38%(19/32)。脓肿分枝杆菌对头孢西丁和14 d时克拉霉素的耐药率高于马赛分枝杆菌,差异有统计学意义(P<0.05)。18位点VNTR将32株脓肿分枝杆菌复合群菌株分为28个不同的基因型,包括来自3个簇的7株菌株和25个独特模式的分离株,HunterGaston判别指数为0.990。结论河南省脓肿分枝杆菌复合群主要由脓肿分枝杆菌和马赛分枝杆菌组成,阿米卡星、克拉霉素、替加环素、利奈唑胺和头孢西丁等药物在体外对河南省分离的脓肿分枝杆菌复合群菌株具有较好的抗菌活性,18位点的VNTR分型方法对脓肿分枝杆菌复合群菌株具有较好的分型能力。
文摘目的:探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核-巨噬细胞THP-1后,S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A4,S100A4)通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调控作用。方法:采用S100A4小干扰RNA(S100A4 small interfering RNA,si-S100A4)转染或PI3K抑制剂LY294002预处理THP-1巨噬细胞,并经BCG感染,设置不同处理组和对照组,通过Western blot方法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白和自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-II(microtubule-associated protein 1 light chain 3-II,LC3-II)、自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,Atg7)和beclin-1]的表达,mRFP-GFP-LC3自噬双标腺病毒方法检测自噬流,透射电子显微镜观察细胞中自噬体和自噬溶酶体数量变化。结果:与未感染组相比,BCG感染组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.05)。与BCG感染组相比,si-S100A4+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著升高(P<0.05),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01);LY294003+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.05),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01)。与si-S100A4+BCG组相比,si-S100A4+LY294002+BCG组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.01),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01),胞内菌载量显著减少(P<0.01)。结论:干扰S100A4经由PI3K/AKT/mTOR信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬具有抑制作用。
