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350株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药特征及基于头孢他啶/阿维巴坦的联合药敏试验报告
1
作者 孙淑红 胡晓峰 +2 位作者 李春芝 彭善鑫 高春海 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2026年第1期6-10,共5页
目的 了解医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药情况,探索CRKP联合药敏方式。方法 收集临沂市人民医院临床标本中分离的350株CRKP菌株,采用全自动微生物分析仪、改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和乙二胺四乙酸(EDTA)协同碳青霉烯灭活试验(e... 目的 了解医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药情况,探索CRKP联合药敏方式。方法 收集临沂市人民医院临床标本中分离的350株CRKP菌株,采用全自动微生物分析仪、改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和乙二胺四乙酸(EDTA)协同碳青霉烯灭活试验(eCIM)、免疫层析法及聚合酶链反应分析其耐药特征,采用常规纸片扩散法、纸片优加法和微量肉汤稀释棋盘法对产NDM菌株进行基于头孢他啶/阿维巴坦的联合药敏试验。结果 CRKP对替加环素和多黏菌素耐药率较低(0.57%,2.44%);285株携带bla_(KPC)耐药基因的CRKP对头孢他啶/阿维巴坦耐药率0.35%,12株携带bla_(OXA)基因菌株对其完全敏感,而53株携带blaNDM基因菌株对其完全耐药;与携带bla_(KPC)耐药基因菌株相比,携带blaNDM基因菌株对阿米卡星、氨曲南、环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星等耐药率较低(P<0.05)。联合药敏结果显示,头孢他啶/阿维巴坦与氨曲南联合时全部具有协同作用,与磷霉素联合仅有1株有协同作用,与左氧氟沙星、替加环素、阿米卡星和美罗培南联合时均无协同作用。结论 CRKP抗感染治疗的抗菌药物选择有限,产丝氨酸酶菌株感染可选择头孢他啶/阿维巴坦,产金属酶的菌株感染建议选择头孢他啶/阿维巴坦联合氨曲南;用药过程中应根据实验室结果精准治疗、及时调整用药。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌 耐药基因 头孢他啶/阿维巴坦 联合药敏试验
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纳米孔靶向测序技术检测支气管肺泡灌洗液对非结核分枝杆菌肺病的诊断价值
2
作者 张新宝 张妍蓓 +1 位作者 姚超 刘盛盛 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2026年第1期72-76,共5页
目的探讨纳米孔靶向测序技术(NTS)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)对非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值。方法收集2022年1月—2025年4月安徽省胸科医院收治的89例疑似NTM肺病患者。对患者肺泡灌洗液行NTS检测、PCR荧光探针检测、BACTEC MGI... 目的探讨纳米孔靶向测序技术(NTS)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)对非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值。方法收集2022年1月—2025年4月安徽省胸科医院收治的89例疑似NTM肺病患者。对患者肺泡灌洗液行NTS检测、PCR荧光探针检测、BACTEC MGIT 960分枝杆菌全自动快速液体培养(BD960法)检测,并对3种检测技术诊断效能进行比较。结果89例疑似NTM肺病患者最终确诊76例。NTS检测、PCR荧光探针法、BD960法诊断NTM的灵敏度分别为:86.8%(66/76)、52.6%(40/76)、26.3%(20/76),NTS分别与PCR荧光探针、BD960比较,χ^(2)分别为:21.073、56.665,P均<0.05,差异有统计学意义。NTS检测时间明显短于PCR和BD960液体培养法,差异有统计学意义(t=11.94、t=117.65,P均<0.05)。3种检测方法的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别是0.93、0.76和0.63,NTS检测的AUC明显高于其他两种。结论NTS检测技术对NTM肺病的诊断具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 纳米孔靶向测序技术 非结核分枝杆菌 支气管肺泡灌洗液 诊断技术
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不同核酸提取方法对幽门螺杆菌23S rRNA基因检测结果的影响
3
作者 徐文莉 谢怡婷 +3 位作者 廖长征 王嘉宝 段媛玲 陈思祖 《检验医学》 2026年第2期193-195,共3页
目的 分析不同核酸提取方法对幽门螺杆菌23S rRNA基因检测结果的影响。方法 收集2022年12月—2023年2月深圳市龙岗中心医院20例行胃镜检查且幽门螺杆菌呼气试验结果已知患者术中采集的胃黏膜组织。分别采用基因突变检测试剂盒(手工法)... 目的 分析不同核酸提取方法对幽门螺杆菌23S rRNA基因检测结果的影响。方法 收集2022年12月—2023年2月深圳市龙岗中心医院20例行胃镜检查且幽门螺杆菌呼气试验结果已知患者术中采集的胃黏膜组织。分别采用基因突变检测试剂盒(手工法)和全自动核酸提取仪(仪器法)配套核酸提取试剂提取幽门螺杆菌核酸,比较2种方法提取核酸耗时差异。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测幽门螺杆菌23S rRNA基因,比较2种核酸提取方法幽门螺杆菌23S rRNA基因突变结果差异。比较呼气试验和2种核酸提取方法幽门螺杆菌阳性率差异。结果 2种核酸提取方法RT-qPCR检测幽门螺杆菌阳性例数均高于呼气试验,但3组差异无统计学意义(P=0.931)。2种核酸提取方法A2142G、A2142C基因检测结果均为阴性,A2143G阳性各6例,差异无统计学意义(P=1.000)。仪器法提取核酸耗时45 min,远低于手工法(150 min)。结论 仪器法提取核酸的质量、浓度均可以满足幽门螺杆菌23S rRNA基因检测要求,且耗时远低于手工法。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 核酸 23S rRNA基因 仪器法 手工法
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靶向BacA的抗结核辅助药物筛选及活性评价
4
作者 王潇 刘忆霜 蒙建州 《中国医药生物技术》 2026年第3期171-175,共5页
目的靶向结核分枝杆菌(MTB)摄取营养物质的ABC转运蛋白(BacA)开展抑制剂筛选以获得抗结核辅助药物。方法以博来霉素(BLM)为探针建立靶向MTB BacA抑制剂的高通量筛选模型,并对化合物库L4000亚库中的5183个化合物进行筛选,测定阳性化合物... 目的靶向结核分枝杆菌(MTB)摄取营养物质的ABC转运蛋白(BacA)开展抑制剂筛选以获得抗结核辅助药物。方法以博来霉素(BLM)为探针建立靶向MTB BacA抑制剂的高通量筛选模型,并对化合物库L4000亚库中的5183个化合物进行筛选,测定阳性化合物对BLM的抗结核作用的逆转情况,进一步测定阳性化合物对临床抗结核药物作用效果的影响以及对利福平(RIF)细胞内抗菌作用的影响。结果从化合物库L4000亚库中筛选得到在10μmol/L浓度下抑制率大于50%的化合物19个,其中3个化合物能剂量依赖地抑制BacA活性。活性最强的化合物野黄芩素对MTB的最低抑菌浓度大于100μmol/L,但能不同程度增强链霉素(8倍)、环丙沙星(2倍)、阿米卡星(4倍)、左氧氟沙星(4倍)、异烟肼(2倍)和D-环丝氨酸(2倍)的抑菌效果,增强RIF的细胞内抗菌活性36.3%。结论MTB营养物质摄取通道蛋白BacA将有可能成为新型药物靶标,其抑制剂能作为辅助药物改善现有抗结核药物的治疗效果。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 博来霉素 ABC转运蛋白 辅助药物
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基于CMI的多重耐药菌感染精准防控对策研究
5
作者 刘寅初 周晓明 《现代医院》 2026年第1期61-63,67,共4页
目的探讨基于病例组合指数(CMI)的多重耐药菌(MDRO)感染精准防控对策的应用效果,为优化医院感染管理模式、降低MDRO感染负担提供解决方案。方法选取2023年1月—12月安福县中医院医院院感科32例MDRO感染患者为研究对象,通过CMI对科室MDR... 目的探讨基于病例组合指数(CMI)的多重耐药菌(MDRO)感染精准防控对策的应用效果,为优化医院感染管理模式、降低MDRO感染负担提供解决方案。方法选取2023年1月—12月安福县中医院医院院感科32例MDRO感染患者为研究对象,通过CMI对科室MDRO感染率进行标准化调整,筛选出重症监护病房、呼吸内科等6个高风险科室。于2024年1月—6月开展基线调查,通过根因分析明确感染发生率高的影响因素,于2024年7月—12月实施包含硬件升级、培训考核、智能监测及信息化管控等多维度的干预方案。观察CMI调整前后MDRO感染发生率、防控措施执行情况及抗菌药物使用指标的变化,并进行科室亚组分析。结果CMI调整后,6个高风险科室MDRO感染总发生率从3.62%(17/469)降至1.61%(9/559)(P<0.05),其中重症监护病房降幅最大;接触隔离措施落实率、手卫生依从率、手卫生正确率均显著提高,棉拭子采样标本阳性率显著降低(P<0.05);抗菌药物使用率和使用强度均显著降低(P<0.05)。亚组分析显示,不同科室干预效果存在差异,呼吸内科手卫生依从率提升最显著,重症监护病房抗菌药物使用强度降幅最大。结论基于CMI的MDRO精准防控对策可显著降低感染发生率,提升防控措施执行率,促进抗菌药物合理使用,且能体现不同科室的干预响应差异,为医院感染精细化管理提供科学、有效的新方法。 展开更多
关键词 病例组合指数 多重耐药菌 感染防控
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脓肿分枝杆菌复合群感染导致肺损伤的机制研究进展
6
作者 倪盛 沙巍 王丽 《中国防痨杂志》 北大核心 2026年第3期419-425,共7页
脓肿分枝杆菌复合群(Mycobacterium abscessus complex,MABC)具有高毒力、高耐药性,其导致肺损伤的机制较为复杂,主要由宿主免疫应答失衡及组织修复异常共同驱动。笔者对近年来有关MABC导致肺损伤的机制进行综述,重点聚焦于过度炎症反... 脓肿分枝杆菌复合群(Mycobacterium abscessus complex,MABC)具有高毒力、高耐药性,其导致肺损伤的机制较为复杂,主要由宿主免疫应答失衡及组织修复异常共同驱动。笔者对近年来有关MABC导致肺损伤的机制进行综述,重点聚焦于过度炎症反应及异常修复,以厘清疾病发展的关键节点,为未来针对特定环节的深入研究奠定基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 脓肿 感染 免疫 综述
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灌胃口饲法构建高毒力肺炎克雷伯菌肝脓肿小鼠模型
7
作者 蔡海燕 陈云飞 +2 位作者 台萃 杨滨 赵旭 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2026年第1期82-88,共7页
目的采用灌胃口饲法构建高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKP)肝脓肿小鼠模型,并与传统的腹腔注射法进行比较,以期为hvKP的致病机制研究和临床防治提供可靠的动物模型。方法采用灌胃口饲法和腹腔注射法分别构... 目的采用灌胃口饲法构建高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKP)肝脓肿小鼠模型,并与传统的腹腔注射法进行比较,以期为hvKP的致病机制研究和临床防治提供可靠的动物模型。方法采用灌胃口饲法和腹腔注射法分别构建hvKP肝脓肿小鼠模型。灌胃口饲法通过口饲接种hvKP标准菌株RJF293,观察小鼠死亡率、肝脏菌落计数及肝组织病理学变化。而腹腔注射法作为对照,接种相同菌株,观察肝脏菌落计数和病理变化。并且通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肝脏组织中促炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果灌胃口饲法成功构建了hvKP肝脓肿模型,感染后48 h造模成功率为66.7%,且肝脏菌落计数在感染后48 h达到峰值(1.73×10^(4)CFU/g组织),肝脏组织出现明显的脓肿和炎症反应。腹腔注射法造模成功率为83.3%,肝脏菌落计数在感染后72 h达到峰值(2.46×10^(8)CFU/g组织)。ELISA结果显示,小鼠在感染后24~72 h,肝脏中IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度显著升高,提示hvKP感染激活了其肝脏局部的炎症反应。结论灌胃口饲法成功构建了符合人体自然感染途径的hvKP肝脓肿小鼠模型,适用于hvKP致病机制和宿主免疫反应的研究;腹腔注射法则更适合用于新抗菌药物的筛选和动物PK/PD研究。该研究为hvKP的基础研究提供了稳定且具有临床相关性的动物模型。 展开更多
关键词 高毒力肺炎克雷伯菌 灌胃口饲 腹腔注射 肝脓肿 动物模型
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血管内皮细胞对皮肤结核的影响及形成机制的研究进展
8
作者 曹学婷 蒋丽娜 肖漓 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期72-76,共5页
皮肤结核(CTB)是由结核分枝杆菌(Mtb)引起的一种皮肤病理表现。研究表明,多种免疫细胞参与其发病机制,早期观点认为,Mtb主要侵袭固有免疫细胞,但近年来研究发现,适应性免疫细胞在感染过程中同样发挥关键作用,并显著影响炎症部位的变化... 皮肤结核(CTB)是由结核分枝杆菌(Mtb)引起的一种皮肤病理表现。研究表明,多种免疫细胞参与其发病机制,早期观点认为,Mtb主要侵袭固有免疫细胞,但近年来研究发现,适应性免疫细胞在感染过程中同样发挥关键作用,并显著影响炎症部位的变化。作为血管内皮层的主要组成部分,内皮细胞(EC)在Mtb感染时可分泌多种炎症介质和趋化因子,招募和激活免疫细胞,促进机体抗结核免疫反应,并参与结核性肉芽肿的形成。氧化应激反应增强EC的促炎状态,同时通过模式识别受体如Toll样受体(TLR)识别Mtb抗原,介导抗原提呈。此外,EC驱动血管生成以维持感染部位微循环,平衡血管屏障作用与免疫防御,共同抵御Mtb感染,具备重要免疫调节功能。本文综述了Mtb引发CTB的机制,重点探讨血管EC在其中的作用,分析Mtb与EC之间的相互作用及其对疾病发生发展的贡献,旨在为开发新的治疗靶点和策略提供理论依据。 展开更多
关键词 内皮细胞(EC) 皮肤结核(CTB) 结核分枝杆菌(Mtb) 血管生成 综述
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宁波地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌对头孢他啶/阿维巴坦耐药性及碳青霉烯酶基因分析
9
作者 乔晓涵 郑琳 +5 位作者 张鹤 徐瑶 曹婷 王若冰 邓欣宇 梁伟 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2026年第1期22-26,共5页
目的 分析宁波地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)对头孢他啶/阿维巴坦(CZA)的耐药现状、临床相关特征、耐碳青霉烯类基因分布,为本地区CRPA感染的防控与治疗提供依据。方法 收集宁波大学附属第一医院2022年1月-2024年10月临床首次分... 目的 分析宁波地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPA)对头孢他啶/阿维巴坦(CZA)的耐药现状、临床相关特征、耐碳青霉烯类基因分布,为本地区CRPA感染的防控与治疗提供依据。方法 收集宁波大学附属第一医院2022年1月-2024年10月临床首次分离的非重复CRPA菌株279株,采用纸片扩散法测定CRPA对CZA的敏感性,根据测定结果将菌株分为CZA耐药组(n=68)和CZA敏感组(n=211)。分析分离株患者临床资料,采用聚合酶链反应(PCR)检测CRPA菌株的碳青霉烯酶基因。结果 CRPA对CZA耐药率为24.37%,CZA耐药组菌株主要来源于呼吸道分泌物(51株,75.00%),主要分布于重症监护室(30株,44.12%);CZA耐药组患者近期外伤史、皮肤软组织感染史、侵入性操作(留置引流管、中心静脉插管)及抗菌药物暴露比例更高(P<0.05);药敏结果显示,CZA耐药组对头孢他啶、氨曲南、美罗培南、妥布霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均高于CZA敏感组(P<0.05),且其多重耐药(MDR)率高达94.12%,高于CZA敏感组(P<0.05)。耐药组bla_(NDM)基因检出率(7.35%)高于敏感组(P<0.05)。结论 宁波地区CRPA对CZA的耐药率较高,与侵入性操作及抗菌药物暴露等密切相关。CZA耐药菌株多呈MDR表型,bla_(NDM)可能是关键耐药机制。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 碳青霉烯酶 头孢他啶/阿维巴坦 耐药机制
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全基因组测序和Xpert MTB/XDR检测分析利福平耐药结核分枝杆菌耐药突变基因特征
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作者 胡春扬 孙峰 +4 位作者 任通萍 李碟 王娅 杨芳 张云桂 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2026年第1期89-94,共6页
目的通过全基因组测序分析利福平耐药结核病(RR-TB)菌株耐药基因突变类型和特点,同时将测序结果与Xpert MTB/XDR检测结果进行对比。方法选择2020年9月至2023年9月期间,云南省传染病医院均进行了全基因组测序和Xpert MTB/XDR检测的69例RR... 目的通过全基因组测序分析利福平耐药结核病(RR-TB)菌株耐药基因突变类型和特点,同时将测序结果与Xpert MTB/XDR检测结果进行对比。方法选择2020年9月至2023年9月期间,云南省传染病医院均进行了全基因组测序和Xpert MTB/XDR检测的69例RR-TB患者的菌株进行耐药突变情况分析。结果69株RR-TB菌株的异烟肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、链霉素、氟喹诺酮类药物的耐药突变率分别为65.2%、52.2%、21.7%、47.8%、33.3%。45株异烟肼耐药菌株中katG基因突变率最高(86.7%,39株);36株乙胺丁醇耐药菌株中embB基因突变率最高(91.7%,33株);15株吡嗪酰胺耐药菌株中均发生了pncA基因突变;33株链霉素耐药菌株中rpsL基因突变率最高(72.7%,24株);23株氟喹诺酮类耐药菌株中均发生了gyrA基因突变;未发现阿米卡星耐药突变。主要突变类型分布为katG S315T、embB基因的306位点、pncA、rpsL K43R和gyrA基因90、91、94位点。以全基因组测序检测结果为标准,Xpert MTB/XDR检测对异烟肼耐药有较好的灵敏度;对检测氟喹诺酮类药物耐药的灵敏度和特异度均较好。结论RR-TB患者对氟喹诺酮类药物耐药率较高,Xpert MTB/XDR检测氟喹诺酮类药物耐药有较好的灵敏度和特异度,可用于快速诊断。 展开更多
关键词 全基因组测序 Xpert MTB/XDR 利福平耐药结核病 耐药突变基因
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2022-2024年杭州市郊县地区结核分枝杆菌耐药特征及影响因素分析
11
作者 吴亦斐 李清春 +3 位作者 黄银燕 贾庆军 白雪欣 程庆林 《结核与肺部疾病杂志》 2026年第1期49-58,共10页
目的:分析杭州市郊县地区结核分枝杆菌的耐药情况及其影响因素。方法:采用回顾性研究方法,收集2022—2024年杭州市周边全部8个郊县地区结核病定点医院临床诊断为肺结核的2456例患者相关临床资料[包括年龄、性别、就诊登记时间、户籍地... 目的:分析杭州市郊县地区结核分枝杆菌的耐药情况及其影响因素。方法:采用回顾性研究方法,收集2022—2024年杭州市周边全部8个郊县地区结核病定点医院临床诊断为肺结核的2456例患者相关临床资料[包括年龄、性别、就诊登记时间、户籍地、治疗分类、分枝杆菌痰培养、菌种鉴定及药物敏感性试验结果(包括异烟肼、利福平、乙胺丁醇、左氧氟沙星和莫西沙星)],采用单因素和多因素logistic回归模型分析不同人群的耐药特征及其影响因素。结果:2456株分枝杆菌菌株中,2165株(88.15%)为结核分枝杆菌复合群,291株(11.85%)为非结核分枝杆菌;初治患者2254例(91.78%),复治患者202例(8.22%);1910株(88.22%)对5种抗结核药物均敏感,255株(11.78%)为耐药菌株;总耐药率、一线药物耐药率、单耐药率、耐多药率、准广泛耐药率分别为11.78%(255/2165)、8.36%(181/2165)、6.28%(136/2165)、1.94%(42/2165)、0.42%(9/2165);异烟肼耐药率最高[7.62%(165/2165)],其次依次为左氧氟沙星和莫西沙星[均为4.02%(87/2165)]、利福平[2.59%(56/2165)]和乙胺丁醇[1.15%(25/2165)];且异烟肼、利福平、乙胺丁醇耐药率及总耐药率和耐多药率均明显低于2017—2019年[分别为10.53%(306/2907)、4.02%(117/2907)、2.03%(59/2907)、14.90%(433/2907)、3.06%(89/2907)],差异均有统计学意义(χ^(2)=12.431,P=0.005;χ^(2)=7.790,P=0.005;χ^(2)=5.831,P=0.016;χ^(2)=10.281,P=0.001;χ^(2)=6.204,P=0.013)。255株耐药菌株共计14种耐药组合,其中,52.94%(135株)的耐药株仅对1种药物耐药,以异烟肼耐药为主(45.88%,117株);37.25%(95株)的耐药株对2种药物耐药,以左氧氟沙星+莫西沙星为优势组合(27.84%,71株),其次为异烟肼+利福平耐多药组合(8.24%,21株);仅5.49%(14株)的耐药株对3种药物耐药。8个郊县地区的总耐药率[临安区最高(18.62%),临平区最低(8.99%)]、利福平耐药率[余杭区最高(5.47%),淳安县最低(0.54%)]和耐多药率[余杭区最高(5.47%),淳安县最低(0.54%)]的差异均有统计学意义(χ^(2)=14.556,P=0.042;χ^(2)=17.551,P=0.014;χ^(2)=16.177,P=0.024)。多因素logistic回归分析结果显示,服务行业(OR=7.887,95%CI:3.046~20.775)、干部职员(OR=5.143,95%CI:1.385~17.420)、复治患者(OR=3.313,95%CI:2.176~4.959)和>60岁人群(OR=1.801,95%CI:1.029~3.255)均是结核分枝杆菌发生耐药的危险因素。结论:杭州市郊县地区耐药结核分枝杆菌控制情况总体良好,但仍应加强复治患者的管理和规范化治疗,重视其耐药筛查工作,并加强服务行业、干部职员人群及高龄人口的结核病主动筛查工作,以有效控制耐药结核病的传播。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 结核 抗多种药物性 数据说明 统计 因素分析 统计学 小地区分析
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MinION测序技术快速检测结核分枝杆菌复合群的敏感度和特异度评估
12
作者 夏良华 于圣铭 +3 位作者 谢伶 晏亮 陈开森 谢荣慧 《广东医学》 2026年第1期23-28,共6页
目的通过与抗酸染色显微镜检、荧光定量PCR技术对比,评估MinION测序技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌复合群的敏感度、特异度及诊断效能,观察MinION测序技术是否具有较好的稳定性及重复性,能否更准确地应用于临床结核病的直接诊断。方... 目的通过与抗酸染色显微镜检、荧光定量PCR技术对比,评估MinION测序技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌复合群的敏感度、特异度及诊断效能,观察MinION测序技术是否具有较好的稳定性及重复性,能否更准确地应用于临床结核病的直接诊断。方法通过模拟不同浓度结核分枝杆菌H37Rv标准株感染的临床痰液样本,进行抗酸染色镜检、结核分枝杆菌qPCR检测及MinION测序分析,以确定MinION测序技术检测结核分枝杆菌的敏感度。配置不同种类非结核分枝杆菌模拟感染的临床痰液样本,提取痰液DNA,进行MinION测序,以确定该技术的特异度。结果MinION测序技术检测到结核分枝杆菌复合群的最低检出限为10^(4)cfu/mL,特异度为100%。结论MinION测序技术可直接检测痰液标本中结核分枝杆菌复合群,但其检出结果重复性较差、检测阈值较高,推荐到临床常规使用需要更多的数据支持。 展开更多
关键词 MinION测序 结核分枝杆菌复合群检测 敏感度 特异度
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抗结核潜在靶标IspD蛋白的筛选及其多克隆抗体的制备
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作者 董利军 祁慧 +6 位作者 杨玉玛 马昊 张殊铭 林希婷 古秀敏 穆慧慧 杨延辉 《中国生物制品学杂志》 2026年第1期22-30,共9页
目的采用抗体芯片筛选抗结核先导化合物M6的潜在靶标,在E.coli中表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)靶标蛋白甲基-D-赤藓醇4-磷酸-胞嘧啶转移酶(2-C-methy1-D-erythriol 4-phosphate cytidylyl-transferase,IspD),并制备其... 目的采用抗体芯片筛选抗结核先导化合物M6的潜在靶标,在E.coli中表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)靶标蛋白甲基-D-赤藓醇4-磷酸-胞嘧啶转移酶(2-C-methy1-D-erythriol 4-phosphate cytidylyl-transferase,IspD),并制备其多克隆抗体,以期为深入研究该蛋白功能和开发新型抗结核药物提供实验依据。方法测定M6对Ms和谷氨酸棒状杆菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。采用抗体芯片捕获并分析经M6处理的谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum,Cg)的蛋白样品,结合质谱鉴定技术鉴定筛选差异靶标。通过PCR法扩增获得Ms的ispD基因,并将其克隆至载体pET28a(+),构建重组质粒pET28a-ispD。将重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,通过优化诱导温度(16、25、33、37℃)和IPTG浓度(0~1.5 mmol/L),确定蛋白表达的最佳条件,并经镍柱亲和层析纯化重组IspD蛋白。以纯化的重组IspD蛋白为免疫原,联合弗氏不完全佐剂免疫11只雌性BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。采用间接ELISA法测定抗血清效价,并通过Western blot法检测抗体的特异性。利用制备的多克隆抗体,通过Western blot法分析M6处理对Ms IspD蛋白表达水平的影响。结果M6对Cg和Ms的MIC分别为0.5和32μg/mL。IspD蛋白为M6作用的显著差异靶标蛋白之一。经双酶切鉴定,证明重组质粒pET28a-ispD构建正确,并在E.coli中表达了IspD蛋白。确定最佳诱导条件为1.0 mmol/L IPTG,16℃诱导14 h。纯化后重组IspD蛋白纯度达95%,且可与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合。IspD蛋白多克隆抗体效价高达1∶102400,可特异性识别重组菌裂解液中的IspD蛋白。经M6处理后,Ms IspD蛋白的表达水平未发生明显变化。结论本研究通过抗体芯片成功筛选到M6的潜在靶标IspD蛋白,并在E.coli中表达了Ms IspD蛋白,经免疫小鼠制备了其多克隆抗体,为深入研究IspD蛋白的功能和开发新型抗结核药物提供了实验依据。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 抗体芯片 甲基-D-赤藓醇4-磷酸-胞嘧啶转移酶 多克隆抗体 药物靶标
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高毒力肺炎克雷伯菌wzc基因敲除株的构建及其生物学特性分析
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作者 王庆 杨蕊 +8 位作者 曾洁 余泓鹏 陆守一 梁馨云 林华胜 张薇 金敏 李璐 赵祖国 《广东医科大学学报》 2026年第1期29-36,共8页
目的构建高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)KPN234的wzc基因敲除株,研究wzc基因对细菌荚膜及毒力的影响。方法设计靶向wzc中的sgRNA,构建CRISPR/Cas9基因敲除载体并采用电击转KPN234,经安普霉素和卡那霉素双抗筛选及质粒丢失后,获得wzc基因敲除... 目的构建高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)KPN234的wzc基因敲除株,研究wzc基因对细菌荚膜及毒力的影响。方法设计靶向wzc中的sgRNA,构建CRISPR/Cas9基因敲除载体并采用电击转KPN234,经安普霉素和卡那霉素双抗筛选及质粒丢失后,获得wzc基因敲除株;采用PCR及全基因组测序确认基因敲除及无脱靶后,Western blot确认敲除菌株不再表达Wzc蛋白。绘制wzc基因敲除菌株的生长曲线,以判断基因敲除对细菌生长的影响。采用拉丝、黏度半定量、荚膜多糖定量试验评估基因敲除对细菌荚膜多糖合成的影响;以大蜡螟幼虫感染试验评估细菌的毒力。结果经基因敲除操作后,hvKP KPN234丢失了wzc基因,且并未发生其他位点突变,表明基因敲除成功。wzc基因敲除株菌落黏液性和荚膜多糖合成能力显著降低(P<0.001),大蜡螟幼虫感染试验显示wzc基因敲除株的毒力显著降低(P<0.001)。结论成功构建了hvKP wzc基因敲除株,为进一步研究wzc基因在hvKP的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9 肺炎克雷伯菌 wzc 基因敲除
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吉安市临床感染肺炎克雷伯菌耐药性和分子同源性分析
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作者 朱端昊 罗青 +3 位作者 周信云 王平兴 罗滢娟 周蓉 《江苏卫生保健》 2026年第1期72-74,共3页
目的了解吉安市医院临床样本的肺炎克雷伯菌耐药情况和分子同源性。方法收集吉安市医院2021—2022年临床疑似细菌感染病例样本558份,采用MALDI-TOF MS技术鉴定后,对分离的肺炎克雷伯菌株做耐药性分析和凝胶脉冲场电泳(PFGE)分子分型。... 目的了解吉安市医院临床样本的肺炎克雷伯菌耐药情况和分子同源性。方法收集吉安市医院2021—2022年临床疑似细菌感染病例样本558份,采用MALDI-TOF MS技术鉴定后,对分离的肺炎克雷伯菌株做耐药性分析和凝胶脉冲场电泳(PFGE)分子分型。结果共分离21株肺炎克雷伯菌株,全部分离自痰液样本。对氨苄西林、阿奇霉素、多粘菌素E的非敏感性比率为100%;对阿米卡星、头孢他啶/阿维巴坦、美罗培南、厄他培南4种药物均表现为敏感。对其中13株进行PFGE检测和条带聚类分析,其分子分型呈多态性,其中同源性最高的为78.8%。结论吉安市肺炎克雷伯菌流行以多重耐药性菌株为主,其基因分型呈多态性,未发现明显分子聚集簇。要持续监测耐药性,进一步了解其分子同源性,为制定更好的防控措施提供理论参考。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 细菌耐药性 分子同源性
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结核分枝杆菌调控巨噬细胞死亡的作用研究进展
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作者 马涛 乐林芝 +4 位作者 代禹美 杜文雅 方统锐 王国富 吴利先 《中国比较医学杂志》 北大核心 2026年第2期138-146,共9页
巨噬细胞作为固有免疫细胞,是先天免疫的重要组成部分,在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染免疫中发挥着重要作用。Mtb感染机体后主要寄生于巨噬细胞,可在巨噬细胞内存活和繁殖,并且诱导其发生不同方式的细胞死亡,包括细胞凋亡、自噬、焦亡、铁... 巨噬细胞作为固有免疫细胞,是先天免疫的重要组成部分,在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染免疫中发挥着重要作用。Mtb感染机体后主要寄生于巨噬细胞,可在巨噬细胞内存活和繁殖,并且诱导其发生不同方式的细胞死亡,包括细胞凋亡、自噬、焦亡、铁死亡以及坏死性凋亡。不同的细胞死亡方式在Mtb感染过程中发挥着不同的作用,本文就Mtb感染后巨噬细胞不同的死亡方式途径及其作用进行综述,以期加深Mtb感染期间对宿主免疫潜在影响的认识,为进一步研究Mtb的致病机制及抗结核治疗策略提供参考。 展开更多
关键词 巨噬细胞 结核分枝杆菌 凋亡 自噬 焦亡 铁死亡 坏死性凋亡
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基于MALDI-TOF MS与机器学习算法建立 KPC-2型CRKP快速鉴定模型
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作者 王楠 周婷 +2 位作者 吴昶毅 苏歆 邓超 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2026年第1期16-21,共6页
目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合机器学习算法,建立携带KPC-2基因耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的快速鉴定模型。方法 收集2023年1月-2023年12月广东省第二中医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌(KP)菌株... 目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合机器学习算法,建立携带KPC-2基因耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的快速鉴定模型。方法 收集2023年1月-2023年12月广东省第二中医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌(KP)菌株,碳青霉烯酶抑制剂增强试验及PCR法筛选验证得到携带KPC-2基因CRKP菌株。采用质谱配套的EX-Smartspec软件和卷积神经网络算法,结合特征峰分析,构建携带KPC-2基因CRKP和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的鉴定模型,并对模型进行验证。结果 筛选验证得到携带KPC-2基因CRKP菌株110株;质谱的蛋白质聚合峰矩阵分析结果,于4 438.1、6 151.3 m/z处发现携带KPC-2基因CRKP两个特征峰,于7 317.7 m/z处发现CSKP的1个特征峰,作为携带KPC-2基因CRKP和CSKP的鉴别标志;分型训练建立的模型在训练和内部验证阶段均展现高准确率(约0.97和0.98)和低损失值(约0.05和0.04);选取建模以外的15株KP菌株进行外部验证,携带KPC-2基因CRKP和CSKP的准确率均为100.00%。结论 利用MALDI-TOF MS联合机器学习算法初步建立携带KPC-2基因CRKP快速鉴定模型,为临床快速、合理治疗CRKP和控制医院感染提供依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 机器学习算法 肺炎克雷伯菌 模型 快速鉴定
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肺炎克雷伯菌脑脊液分离株临床与分子流行病学特征
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作者 陈曦 刘斯梦 +2 位作者 熊理雯 杨小娟 杜芳玲 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2026年第1期11-15,共5页
目的 探究脑脊液分离的肺炎克雷伯菌的临床及耐药、毒力和分子流行病学特征。方法 收集2021年8月-2024年8月南昌大学第一附属医院脑脊液标本分离的肺炎克雷伯菌菌株21株,分析感染患者临床资料,菌株药敏试验结果,聚合酶链式反应(PCR)扩... 目的 探究脑脊液分离的肺炎克雷伯菌的临床及耐药、毒力和分子流行病学特征。方法 收集2021年8月-2024年8月南昌大学第一附属医院脑脊液标本分离的肺炎克雷伯菌菌株21株,分析感染患者临床资料,菌株药敏试验结果,聚合酶链式反应(PCR)扩增耐药和毒力基因,多位点序列分型(MLST)、荚膜血清分型(K分型)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析其同源性。结果 21株肺炎克雷伯菌脑脊液分离株来自神经外科和ICU,感染患者多合并颅内基础疾病及颅脑手术操作,总体预后不良率为76.19%。实验室检查显示外周血炎症指标及脑脊液白细胞、蛋白升高。肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦敏感,对替加环素和黏菌素表现出较高的敏感性,对β-内酰胺类、其他β-内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂和碳青霉烯类抗菌药物的耐药率均为76.19%。21株肺炎克雷伯菌中,16株为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),碳青霉烯酶耐药基因均为KPC-2;检出12株碳青霉烯耐药高毒力肺炎克雷伯菌(CR-hvKP)均为ST11-K64/25,4株CRKP均为ST15-K19和3株hvKP(1株ST1265-K1、1株ST23-K1和1株ST29-K54)。结论 脑脊液分离出肺炎克雷伯菌患者均有不同的颅内疾病和侵入性操作,伴有多种并发症,预后不良,且以ST11-K64/K25型的CR-hvKP为主,提示临床需加强对该高危克隆的监测与防控。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 脑脊液 耐药 毒力 分子流行病学
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锁环探针荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌耐药性及耐药突变基因的应用研究
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作者 朱秀兰 邓玉玲 +5 位作者 莫丽英 蒲荣 陈凤钻 韦学武 卢雪茹 张帅 《现代检验医学杂志》 2026年第1期111-115,131,共6页
目的分析锁环探针荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性及耐药突变基因的临床应用价值。方法收集2021年1月~2024年5月广东医科大学附属东莞松山湖中心医院165例涂阳肺结核患者痰液标本,均行痰涂片镜检、MTB培养/鉴定、比例法药... 目的分析锁环探针荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性及耐药突变基因的临床应用价值。方法收集2021年1月~2024年5月广东医科大学附属东莞松山湖中心医院165例涂阳肺结核患者痰液标本,均行痰涂片镜检、MTB培养/鉴定、比例法药敏试验及基于锁环探针的荧光定量PCR技术检测利福平(RFP)、异烟肼(INH)耐药性及耐药基因突变位点。以比例法药敏试验结果为参考标准,评价锁环探针荧光定量PCR技术检测耐药MTB的效能。结果经分离培养证实151株为MTB,比例法药敏试验检出RFP耐药36株,INH耐药42株。锁环探针荧光定量PCR技术检出RFP、INH耐药,与比例法药敏试验检测结果差异无统计学意义(χ^(2)=0.018、0.067,均P>0.05)。以药敏试验为参考,锁环探针荧光定量PCR技术检测RFP耐药的敏感度、特异度、准确度分别为91.67%(33/36)、98.26%(113/115)、96.69%(146/151),检测一致性Kappa值为0.895;检测INH耐药的敏感度、特异度、准确度分别为83.33%(35/42)、95.41%(104/109)、92.05%(139/151),检测一致性Kappa值为0.867。锁环探针荧光定量PCR技术检出RFP耐药菌株rpoB基因突变中96.97%为单一位点突变,以531位点突变为主约占57.58%,其次为526位点突变约占27.27%;检出INH耐药菌株katG/INH A基因突变,以katG 315位点突变为主,其中80.56%为katG单一位点突变,16.67%为INH A单一位点突变。结论涂阳肺结核患者应用锁环探针荧光定量PCR技术行痰标本RFP、INH耐药筛查具有较高的诊断效能,可作为临床快速诊断耐药基因位点突变及筛查耐药结核病的补充手段,为临床诊疗提供依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 锁环探针 荧光定量PCR技术 利福平 异烟肼 耐药性 耐药基因突变
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HIV阴性感染马萨分枝杆菌的非结核分枝杆菌肺病患者1例
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作者 陈娅 邱隆敏 +2 位作者 何毅怀 陈华 罗亚文 《贵州医药》 2026年第3期359-363,共5页
非结核分枝杆菌(NTM)可引起呼吸系统、中枢神经系统、淋巴结及血流等多部位感染,其中以肺部感染最为常见。NTM感染多见于HIV阳性等免疫缺陷患者,具有治疗周期长、治疗难度大、病死率高的特点,患者预后不佳。目前关于NTM感染的报告主要... 非结核分枝杆菌(NTM)可引起呼吸系统、中枢神经系统、淋巴结及血流等多部位感染,其中以肺部感染最为常见。NTM感染多见于HIV阳性等免疫缺陷患者,具有治疗周期长、治疗难度大、病死率高的特点,患者预后不佳。目前关于NTM感染的报告主要集中于HIV阳性人群,病原体以鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌及脓肿分枝杆菌为主,鲜有关于HIV阴性患者感染马萨分枝杆菌的报道。本文报告了1例HIV阴性患者感染马萨分枝杆菌的临床诊疗经过,旨在为类似病例的诊治提供参考。 展开更多
关键词 马萨分枝杆菌 非结核分枝杆菌 人类免疫缺陷病毒抗原抗体阴性
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