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基于经典单核苷酸多态性和多位点可变数目串联重复序列分析的中国炭疽芽胞杆菌基因遗传特征分析
1
作者 张恩民 张慧娟 +2 位作者 贺金荣 李伟 魏建春 《疾病监测》 北大核心 2025年第1期92-97,共6页
目的分析中国炭疽芽胞杆菌基因型多态性,掌握中国炭疽芽胞杆菌基因遗传特征。方法收集中国20个省份的炭疽芽胞杆菌菌株,采用经典单核苷酸多态性(canSNP)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)进行基因型鉴定,分析不同分离来源菌株基... 目的分析中国炭疽芽胞杆菌基因型多态性,掌握中国炭疽芽胞杆菌基因遗传特征。方法收集中国20个省份的炭疽芽胞杆菌菌株,采用经典单核苷酸多态性(canSNP)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)进行基因型鉴定,分析不同分离来源菌株基因型的分布特征;采用Bionumerics 5.1软件进行聚类分析,并计算各位点的Simpson指数。结果533株中国炭疽芽胞杆菌均属于全球炭疽菌基因谱系中的A群,并具有全球12种亚群中的6种亚群,分别为A.Br.001/002、A.Br.Ames、A.Br.Aust94、A.Br.008/009、A.Br.Vollum和A.Br.005/006,其中A.Br.001/002亚群(60.98%)是中国的主要流行谱系,各地区均有分布,A.Br.Aust94(14.26%)、A.Br.008/009(11.82%)和A.Br.Vollum(4.69%)3个亚群主要分离自1980和1990年代的新疆维吾尔自治区(新疆),A.Br.Ames亚群菌株主要来自内蒙古自治区,主要分离自2010年代,A.Br.005/006亚群菌株最少,分离自2019年后。canSNP亚群在中国的地理分布不均衡,新疆、广西壮族自治区、青海省、内蒙古自治区、河北省等具有4~5种亚群,而四川省等10省仅有1种亚群,新疆以A.Br.Aust94和A.Br.008/009为优势亚群,其他地区均以A.Br.001/002为优势亚群。不同分离年代菌株的亚群分布有差异,在以A.Br.001/002为主要流行亚群的基础上,1980和1990年代A.Br.008/009、A.Br.Vollum和A.Br.Aust94相继出现并流行传播,2000年后A.Br.Ames亚群逐渐传播扩散,2019年A.Br.005/006亚群被检测到,显示了炭疽菌株基因型的传播和变异趋势。通过MLVA15分型研究菌株具有91个基因型,结果与canSNP亚群基本一致,且各亚群内MLVA15的分型能力均较好。结论本研究建立了中国炭疽芽胞杆菌canSNP和MLVA基因型数据库,掌握了中国炭疽杆菌基因型分布特征及其传播扩散趋势,为炭疽疫情防控及分子溯源技术提供了参考依据。 展开更多
关键词 炭疽芽胞杆菌 基因分型 经典单核苷酸多态性 多位点可变数目串联重复序列分析 遗传特征 中国
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基于单个记忆B细胞测序技术构建毒素蛋白Hcp免疫组库及抗体表达
2
作者 周金锐 王文皓 +6 位作者 顾亚茹 欧阳雪 刘碧霞 左厚义 杜烨湘 张睿 左钱飞 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第15期1782-1791,共10页
目的基于单个记忆B细胞测序技术制备针对鲍曼不动杆菌的人源化单克隆抗体,构建出Hcp蛋白的免疫组库,表达具有结合活性的单克隆抗体。方法构建带有pGEX-6p-1-Hcp重组质粒的BL21-Hcp菌液,采用蛋白质表达和蛋白质亲和层析技术获得目的蛋白H... 目的基于单个记忆B细胞测序技术制备针对鲍曼不动杆菌的人源化单克隆抗体,构建出Hcp蛋白的免疫组库,表达具有结合活性的单克隆抗体。方法构建带有pGEX-6p-1-Hcp重组质粒的BL21-Hcp菌液,采用蛋白质表达和蛋白质亲和层析技术获得目的蛋白Hcp;6~8周龄雌性SPF级的BALB/c小鼠(体质量18~20 g),Hcp抗原肌肉注射免疫小鼠产生特异性记忆B细胞;采用流式细胞术分选单个特异性记忆B细胞;采用单细胞测序技术构建Hcp的免疫组库,并对测序结果进行生物信息学分析;采用抗体人源化改造技术获得单克隆抗体;采用ELISA实验检测抗体体外结合活性。结果表达并纯化出纯度大于95%的目的蛋白Hcp;成功构建了Hcp的免疫组库,分析得到了该免疫组库的BCR克隆型鉴定和分析结果、CDR3区域特征分析结果、V-J基因配对特征分析结果;人源化改造了7种单克隆抗体(IgG1-1、IgG1-2、IgG2-1、IgG2-2、IgG3-1、IgG4-1、IgG4-2);ELISA结果显示,IgG1-1、IgG3-1、IgG4-1、IgG4-2抗体结合效价均为1∶1280,IgG2-2的抗体效价为1∶10240,IgG2-1的抗体效价为1∶5120,IgG1-2的抗体效价为1∶160。结论利用单细胞测序技术可以快速、准确、高效率地构建含有大量抗体信息的Hcp蛋白免疫组库,利用免疫组库可以表达具有结合活性的单克隆抗体。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 溶血素共调节蛋白 免疫组库 单细胞测序 单克隆抗体
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流行性脑脊髓膜炎暴发型伴细胞形态学异常的1例报道
3
作者 高莉梅 陈丽娜 +1 位作者 马娟 沈立松 《检验医学》 2025年第5期515-518,共4页
流行性脑脊髓膜炎是由脑膜炎奈瑟菌经呼吸道传播的一种急性化脓性脑膜炎,临床主要表现为突然高热、剧烈头痛、呕吐、皮肤黏膜瘀点和脑膜刺激症状,部分可有败血症休克和脑实质损伤。冬末春初为流脑流行高峰期,儿童免疫力较弱,一旦感染,... 流行性脑脊髓膜炎是由脑膜炎奈瑟菌经呼吸道传播的一种急性化脓性脑膜炎,临床主要表现为突然高热、剧烈头痛、呕吐、皮肤黏膜瘀点和脑膜刺激症状,部分可有败血症休克和脑实质损伤。冬末春初为流脑流行高峰期,儿童免疫力较弱,一旦感染,发病率相对较高,尤其是6月龄~2岁的婴幼儿[1]。脑膜炎奈瑟菌初次分离营养要求高,对低温和干燥极为敏感,外界抵抗力弱,有自溶现象,离体后极易死亡,故脑膜炎奈瑟菌培养阳性率较低,且培养耗时。近年来,脑膜炎奈瑟菌感染明显减少,尤其是脑膜奈瑟菌血源性感染致骨髓侵犯更鲜见报道,临床对脑膜炎奈瑟菌感染认识不足,一旦延误诊治,往往后果严重,甚至危及患儿生命。本文报道1例脑膜炎奈瑟菌感染致流行性脑脊髓膜炎暴发型的脓毒症休克患儿,通过细胞形态学检查为临床提供了有效的病原学诊断证据。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟菌 流行性脑脊髓膜炎 脓毒症休克:细胞形态学 儿童
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灿烂类芽孢杆菌致肺部感染1例
4
作者 陆旭之 施瑜 +2 位作者 马小梅 封伟奇 何权 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第1期78-80,共3页
灿烂类芽孢杆菌(P. lautus)属于芽孢杆菌科(Paenibacillus)、芽孢杆菌属,是一类能产生抗力内生孢子的革兰阳性菌。该属的细菌已在各种环境中被分离出来,如土壤、水、植物、昆虫幼虫以及临床样本^([1])。目前明确报道的有可引起人类假体... 灿烂类芽孢杆菌(P. lautus)属于芽孢杆菌科(Paenibacillus)、芽孢杆菌属,是一类能产生抗力内生孢子的革兰阳性菌。该属的细菌已在各种环境中被分离出来,如土壤、水、植物、昆虫幼虫以及临床样本^([1])。目前明确报道的有可引起人类假体髋关节感染、蜂窝织炎和眼内炎的肺泡类芽孢杆菌,以及引起脑脓肿、导管相关感染和伤口感染的多黏性类芽孢杆菌。芽孢杆菌引起的临床感染非常少见,而灿烂类芽孢杆菌引起的肺部感染,目前未检索到国内外报道,本文报道镇江市中西医结合医院1例2型糖尿病患者灿烂类芽孢杆菌肺炎的诊治过程,总结分析该病的临床表现和诊治,以期提高临床对其认识。 展开更多
关键词 灿烂类芽孢杆菌 肺部感染 免疫
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2024年陕西省靖边县一起炭疽疫情调查及病原学分析
5
作者 梁爽 王彩乔 +6 位作者 栾阳 钟瑞 李慎 马琳 朱妮 邱琳 刘东立 《疾病监测》 北大核心 2025年第7期962-968,共7页
目的了解陕西省靖边县一起炭疽疫情的流行病学特征,以及炭疽芽孢杆菌分离株的病原学特征和全基因组溯源情况,以期为该病的防治提供参考。方法2024年8月陕西省靖边县发生1起炭疽疫情,采集涉疫生物、环境样本,进行核酸鉴定和细菌分离,对... 目的了解陕西省靖边县一起炭疽疫情的流行病学特征,以及炭疽芽孢杆菌分离株的病原学特征和全基因组溯源情况,以期为该病的防治提供参考。方法2024年8月陕西省靖边县发生1起炭疽疫情,采集涉疫生物、环境样本,进行核酸鉴定和细菌分离,对分离株进行药物敏感性试验和全基因组测序,对耐药基因、毒力基因作出分析,进行核心基因组多位点序列(cgMLST)分析、核心基因组单核苷酸变异(cgSNP)分析。结果本起炭疽疫情共报告3例皮肤炭疽病例,时间跨度为2024年8月2—21日,共获得3株炭疽芽孢杆菌,分离率为12.00%(3/25);分离株对临床首选药物青霉素、四环素、环丙沙星敏感;全基因组分析发现携带毒力基因capA、capB、capC、dep/capD、capE、cya、inhA、lef和pagA;携带β-内酰胺类(bla)、碳青霉烯类(bla2)、磷霉素(fosB2)、链丝菌素(satA)抗生素耐药基因;cgMLST及cgSNP分析显示3株菌聚为一个Cluster,与2018年西安市鄠邑区、2021年渭南市蒲城县、2020年渭南市临渭区、渭南市澄城县分离株遗传距离较近,与2021年华阴市、2015年延安市甘泉县分离株遗传距离较远。结论本起炭疽疫情是由同一炭疽传染源引起,但与陕西省历史分离株无明显关联,靖边县历史上鲜有炭疽疫情发生,可认定为一个新发现的疫源地,为今后炭疽疫情的长期监测与防治提供依据。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 抗生素耐药分析 全基因组测序 核心基因组多位点序列分型 核心基因组单核苷酸多态性分析
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2024年山西省长治市屯留区一起皮肤炭疽疫情流行病学调查及病原学分析
6
作者 申旭燕 杨红霞 +6 位作者 原超普 万晋霞 侯莹 王方 李玲玲 樊荣 张慧娟 《疾病监测》 北大核心 2025年第7期957-961,共5页
目的对2024年山西省长治市屯留区首例疑似皮肤炭疽疫情进行流行病学分析及实验室诊断,为炭疽疫情防控提供重要的数据支撑。方法采用现场流行病学调查方法对炭疽疑似病例和密切接触者进行个案调查;对采集样本进行炭疽芽胞杆菌分离、鉴定... 目的对2024年山西省长治市屯留区首例疑似皮肤炭疽疫情进行流行病学分析及实验室诊断,为炭疽疫情防控提供重要的数据支撑。方法采用现场流行病学调查方法对炭疽疑似病例和密切接触者进行个案调查;对采集样本进行炭疽芽胞杆菌分离、鉴定、实时荧光定量聚合酶链式反应检测和经典单核苷酸多态性(canSNP)分子分型检测。结果本次疫情为人间皮肤炭疽散发疫情,传染源为病死牛,病例因屠宰病死牛感染炭疽。从病死牛相关环境样本中分离到炭疽芽胞杆菌,病例样本及环境样本均检出炭疽芽胞杆菌特异基因,且canSNP分型均为A.Br.Ames基因型。结论根据流行病学调查和实验室诊断结果,该次疫情是因人接触了患有炭疽的病死牛导致的一起聚集性炭疽疫情,建议相关部门加强传染源追踪管理和疫点消毒,并进一步开展相关监测,防止新的炭疽疫源地的形成和扩散。 展开更多
关键词 流行病学调查 炭疽芽胞杆菌 细菌学检测 分子分型
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2019-2023年宁夏皮肤炭疽流行病学特征分析 被引量：1
7
作者 李涛 李文玉 +3 位作者 王秀琴 张文霞 龚瑞 杨聪 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1049-1054,1072,共7页
目的分析2019-2023年宁夏皮肤炭疽流行病学特征,为持续开展疫情防控和策略措施制定提供依据。方法数据来源于中国传染病监测报告管理系统,个案流调报告来源于各市、县(区)疾控中心上报,将上述资料整理建立数据库,运用SPSS 26.00进行统... 目的分析2019-2023年宁夏皮肤炭疽流行病学特征,为持续开展疫情防控和策略措施制定提供依据。方法数据来源于中国传染病监测报告管理系统,个案流调报告来源于各市、县(区)疾控中心上报,将上述资料整理建立数据库,运用SPSS 26.00进行统计分析。结果2019-2023年累计报告皮肤炭疽132例,年平均报告发病率为0.37/10万,2020年以来报告发病率呈逐年上升(χ_(趋势)^(2)=29.954,P<0.05),在乙类传染病中发病顺位呈上升趋势,在自然疫源及虫媒传染病中构成占比及发病顺位逐年上升(χ_(趋势)^(2)=42.336,P<0.05)。报告病例范围涉及全区72.73%的县(区),其中永宁县、贺兰县、西夏区、利通区、原州区、灵武市和海原县报告发病率超过全区平均报告发病水平;银川市病例占全区67.42%,永宁县病例占银川市46.07%。7-9月份报告病例占65.91%,男性报告发病高于女性,主要集中35~59岁(62.12%),农民占82.57%。三级和传染病医院报告占77.27%。报告病例中所有临床标本任一项检出阳性121份(91.67%),其中核酸检测阳性率最高(88.80%)。结论近年来宁夏皮肤炭疽疫情处于广泛持续高发水平,流行病学特征及暴露方式与全国无异,建议开展自然疫源地调查研究,丰富标本采集类型,提升人畜间疫情判定能力,为今后应对可能的暴发流行和干预策略措施制定及评价提供科学依据。 展开更多
关键词 宁夏 皮肤炭疽 流行特征
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土壤样本中炭疽芽孢杆菌检测的免疫磁珠富集前处理研究 被引量：1
8
作者 张益铜 徐健皓 +3 位作者 袁兵 王妍 王景林 袁媛 《疾病监测》 北大核心 2025年第5期610-618,共9页
目的建立基于免疫磁珠分离技术(IMS)的土壤样本中炭疽芽孢杆菌的快速富集方法。方法培养炭疽疫苗株芽孢并制备兔多克隆抗体与免疫磁珠(IMBs),通过菌落计数法检测不同种类IMBs对芽孢稀释液与模拟土壤样本中炭疽疫苗株芽孢的富集灵敏度;... 目的建立基于免疫磁珠分离技术(IMS)的土壤样本中炭疽芽孢杆菌的快速富集方法。方法培养炭疽疫苗株芽孢并制备兔多克隆抗体与免疫磁珠(IMBs),通过菌落计数法检测不同种类IMBs对芽孢稀释液与模拟土壤样本中炭疽疫苗株芽孢的富集灵敏度;通过比较模拟土壤样品中炭疽疫苗株芽孢提取效率,确定芽孢抽提液最佳浓度与体积;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)评价IMS技术对模拟土壤样本与炭疽芽孢阳性土壤样本中炭疽芽孢的富集与检测效果。结果使用含0.5%Triton X-100的质量体积浓度为200g/100mL的蔗糖-磷酸盐缓冲液(PBS)作为芽孢抽提液,抽提液与土壤样本悬液体积比为4∶1时,采用差速离心法对芽孢的提取效率最高;DynabeadsTM抗体偶联试剂盒制备的IMBs对稀释液与模拟土壤样本中炭疽疫苗株芽孢的捕获灵敏度可达到10^(2)菌落形成单位(CFU)/mL;qPCR法对炭疽疫苗株芽孢杆菌染色体特异基因BA_5345检测结果表明,模拟土壤样本经IMS法处理后,IMS处理组(K+)Ct值比两个磁珠分离对照组(K-、K0)提前4~8个循环;将该方法应用于炭疽芽孢阳性土壤样本的检测,结果显示IMS处理组其3个靶标基因BA_5345、pagA和capC的检测Ct值比对应的磁珠分离对照组(K-、K0)提前约5~8个循环。结论芽孢抽提液预处理结合IMS技术能够快速有效富集纯化土壤样本中的炭疽芽孢。该方法简单有效,可为应对炭疽疫情的快速检测与溯源分析提供有效的技术支持。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 兔多克隆抗体 免疫磁珠分离技术 土壤样本 实时荧光定量聚合酶链式反应
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黄腻苔结直肠癌患者肠道微环境代谢特征研究
9
作者 刘雪丽 吕琨 +2 位作者 蒋寒冰 朱跃坤 徐巍 《中医肿瘤学杂志》 2025年第2期30-42,共13页
目的本研究试图分析黄腻苔结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肠道肿瘤微环境的代谢特征。方法随机选取经舌诊仪判读为黄腻苔的CRC患者12例、白腻苔的CRC患者9例,取上述病例术中的癌组织、癌旁组织行代谢组学和转录组学分析。另外后... 目的本研究试图分析黄腻苔结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肠道肿瘤微环境的代谢特征。方法随机选取经舌诊仪判读为黄腻苔的CRC患者12例、白腻苔的CRC患者9例,取上述病例术中的癌组织、癌旁组织行代谢组学和转录组学分析。另外后续收集6例黄腻苔和6例白腻苔CRC患者,通过油红O染色、Western blot、PCR、检测MDA、检测ROS实验验证前述结果。结果经代谢组学和转录组学分析发现腻苔CRC患者有脂代谢紊乱特征,其中黄腻苔区别于白腻苔表现为显著的脂肪酸降解途径下调,酰基肉碱是脂肪酸代谢的关键中间产物,其表达水平的上调是黄腻苔CRC患者脂肪酸降解紊乱的反映。结论黄、白腻苔结直肠癌舌苔变化能反映出肠道微环境的代谢特征。 展开更多
关键词 结直肠癌 舌苔 代谢组学 转录组学
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皖北地区一起输入性皮肤炭疽聚集性疫情调查分析
10
作者 侯赛 陈晴晴 +7 位作者 高学欢 祝茜 杨康 李淮彪 孙良 赵玉峰 龚磊 吴家兵 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1083-1087,共5页
目的分析皖北地区一起皮肤炭疽聚集性疫情的发生原因和流行病学特征,提出有针对性防控建议。方法在疫情发生后,对皮肤炭疽病例进行流行病学调查,同时采集病例标本及环境样本开展实验室检测。结果此次疫情共报告皮肤炭疽病例11例,其中确... 目的分析皖北地区一起皮肤炭疽聚集性疫情的发生原因和流行病学特征,提出有针对性防控建议。方法在疫情发生后,对皮肤炭疽病例进行流行病学调查,同时采集病例标本及环境样本开展实验室检测。结果此次疫情共报告皮肤炭疽病例11例,其中确诊病例2例、临床诊断病例6例、疑似病例3例;分布在阜阳颍州区某屠宰场5例、亳州利辛县某村庄6例;病例均从事牛只养殖、屠宰、销售等工作,感染来源均指向自外省某牲畜交易市场购买的牛只。结论本次疫情为一起由省外输入染疫动物引起的本地人间疫情,直接接触染疫牛只是导致感染的主要原因。 展开更多
关键词 皮肤炭疽 输入性疫情 流行病学调查
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白喉毒素突变体CRM197重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达及免疫原性分析
11
作者 张泽月 马骉 +2 位作者 厉佳丽 许梦琪 张明洲 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期816-823,共8页
目的探究白喉毒素无毒突变体CRM197的可溶性表达,制备出安全有效的CRM197重组蛋白。方法将密码子优化后的CRM197基因序列克隆到pColdⅡ、pET-28a(+)原核表达载体中,筛选成功克隆的重组质粒并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,... 目的探究白喉毒素无毒突变体CRM197的可溶性表达,制备出安全有效的CRM197重组蛋白。方法将密码子优化后的CRM197基因序列克隆到pColdⅡ、pET-28a(+)原核表达载体中,筛选成功克隆的重组质粒并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,诱导表达后通过SDS-PAGE分析确定蛋白表达形式,同时优化重组蛋白的可溶性表达条件,再经两次Ni-NTA亲和层析纯化重组CRM197蛋白,将纯化后的重组蛋白进行小鼠免疫,使用ELISA方法测定血清中的抗体水平。结果序列优化后的密码子适应指数(CAI)由原来的0.72提高到0.93。通过菌液PCR及双酶切鉴定,重组质粒pET-28a(+)-CRM197、pColdⅡ-CRM197均构建成功。表达鉴定结果显示,pET-28a(+)-CRM197主要为包涵体表达,pColdⅡ-CRM197主要为可溶性表达。优化pColdⅡ-CRM197可溶性表达条件,接种量为3%,IPTG浓度为0.4 mmol/L时,20℃诱导表达24 h,可显著提高可溶性目的蛋白表达量。利用Ni-NTA亲和层析纯化pColdⅡ-CRM197重组蛋白上清液,得到的目的蛋白纯度均高于98%。小鼠3次免疫后的ELISA结果显示,免疫小鼠血清中IgG、IgM、IgG1和IgG2a抗体水平均高于对照组。结论利用pColdⅡ载体实现了CRM197重组蛋白在大肠杆菌表达系统中的可溶性表达,其纯度高、免疫原性良好,为蛋白的推广应用奠定了基础。 展开更多
关键词 CRM197蛋白 可溶性蛋白 免疫原性 纯化 大肠杆菌 结合疫苗
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职业性炭疽知多少
12
作者 何俊秋 《中国工业医学杂志》 2025年第1期110-110,共1页
2024年8月2日,山东省聊城市某肉牛养殖场发现炭疽病例,5名直接接触病畜的工作人员诊断为皮肤炭疽。近年来,随着畜牧业的发展,牲畜交易和流动性增加,以及受异常气候因素的影响,在我国部分地区开始出现了动物及人群间炭疽疫情的传播。2023... 2024年8月2日,山东省聊城市某肉牛养殖场发现炭疽病例,5名直接接触病畜的工作人员诊断为皮肤炭疽。近年来,随着畜牧业的发展,牲畜交易和流动性增加,以及受异常气候因素的影响,在我国部分地区开始出现了动物及人群间炭疽疫情的传播。2023年1月—2024年6月,全国每月均有炭疽病例报告;2023年7—9月报告病例数分别为51、123、61例,炭疽已成为威胁我国公共卫生安全的问题之一^([1])。 展开更多
关键词 职业性炭疽 临床表现 预防 治疗
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陕西省一起炭疽暴发疫情的调查处置及病原学分析 被引量：20
13
作者 刘峰 邓勇 +14 位作者 张志成 梁旭东 张恩民 马国柱 周体操 曹磊 柴自超 石一 马琳 齐光明 贺莉 贺江 魏建春 李伟 刘东立 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期850-854,共5页
目的分析陕西省甘泉县炭疽暴发流行病学特征,提出控制措施。方法对甘泉县炭疽暴发开展流行病学调查,收集暴发地区历史疫情资料,采集病例标本及环境样本开展实验室检测,对炭疽病例个案资料进行统计学分析,描述病例三间分布,分析影响暴发... 目的分析陕西省甘泉县炭疽暴发流行病学特征,提出控制措施。方法对甘泉县炭疽暴发开展流行病学调查,收集暴发地区历史疫情资料,采集病例标本及环境样本开展实验室检测,对炭疽病例个案资料进行统计学分析,描述病例三间分布,分析影响暴发流行的自然因素与社会因素。结果甘泉县炭疽疫情暴发系一次同源感染的多点暴发,共计19例病例,以青壮年为主,分子分型为MLVA15-31基因型。结论及时发现疫情,采取扑杀病畜、隔离治疗病人、环境消毒等综合措施是快速扑灭炭疽疫情的关键。 展开更多
关键词 炭疽 暴发 流行病学调查 病原学分析
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畜舍环境中魏氏梭菌分离及基因型鉴定 被引量：23
14
作者 王海荣 唐德宏 +2 位作者 鹿道新 樊丽 柴同杰 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期985-987,共3页
目的从山东省泰安、青岛等地6个市的2个牛舍、4个猪舍、5个兔舍空气及畜舍动物粪便中分离魏氏梭菌,从空气中分离到66株,从畜舍粪便中分离到70株,通过多重聚合酶链反应(multi-PCR)对分离到的魏氏梭菌进行型别的鉴定,结果发现:分离到的魏... 目的从山东省泰安、青岛等地6个市的2个牛舍、4个猪舍、5个兔舍空气及畜舍动物粪便中分离魏氏梭菌,从空气中分离到66株,从畜舍粪便中分离到70株,通过多重聚合酶链反应(multi-PCR)对分离到的魏氏梭菌进行型别的鉴定,结果发现:分离到的魏氏梭菌均为A型。 展开更多
关键词 魏氏梭菌 多重聚合酶链反应 A型 畜舍环境
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应用Taq Man荧光PCR定性定量检测炭疽芽孢杆菌 被引量：18
15
作者 李伟 俞东征 +2 位作者 海荣 魏建春 马凤琴 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第4期312-316,共5页
目的　发展一种快速、敏感、特异的检测炭疽芽孢杆菌的方法。方法　应用基于TaqMan荧光探针的实时(real time)PCR技术,针对致病炭疽毒株的两个质粒pXO1、pXO2上的pagA ,cap基因和染色体上的ropB基因设计引物和探针定性、定量检测炭疽芽... 目的　发展一种快速、敏感、特异的检测炭疽芽孢杆菌的方法。方法　应用基于TaqMan荧光探针的实时(real time)PCR技术,针对致病炭疽毒株的两个质粒pXO1、pXO2上的pagA ,cap基因和染色体上的ropB基因设计引物和探针定性、定量检测炭疽芽孢杆菌。构造并应用上述探针的外标对照及pagA的内标对照,采用多重荧光定量PCR技术建立荧光定量方法并发现假阴性;采用UDG抗污染和ROX矫正背景噪音,提高检验能力;用该方法检测炭疽芽孢杆菌疫苗株感染的动物脾脏标本,盲法评价该方法在实际工作的应用。结论　该方法能特异、灵敏、高效地检测炭疽芽孢杆菌,该方法的推广和应用对有效防范炭疽生物恐怖袭击、提高突发事件应对能力、快速诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 荧光定量PCR TAQMAN 定量分析
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荧光定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究 被引量：14
16
作者 张玲 翟俊辉 +3 位作者 周冬生 郭兆彪 王津 杨瑞馥 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期976-980,共5页
目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测。方法采用SYBR GreenⅠ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个... 目的利用LightCycler建立一种简便、特异的实时荧光定量PCR检测方法,用于炭疽芽孢杆菌的快速检测。方法采用SYBR GreenⅠ随机掺入法,利用本实验室建立的实时荧光定量PCR反应体系,根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子设计引物,同时检测两个毒力相关质粒的存在,检测其灵敏度和特异性,并以盲测试验进行验证;在此基础上鉴定14株炭疽芽孢杆菌,并测试该法检测土壤模拟污染标本的灵敏度,实验中设置内对照以排除假阴性结果的存在。结果炭疽杆菌基因组DNA的检测灵敏度可达每反应体系0.53pg,两个克隆株提取质粒的检测限分别为每反应体系12拷贝、140拷贝;检测14株炭疽芽孢杆菌及29株非炭疽芽孢杆菌的PCR扩增结果表明,炭疽芽孢菌DNA均出现特异的扩增结果,29株对照菌的DNA均为阴性;土壤模拟污染标本检测灵敏度可达每反应体系36个芽孢;20次重复实验结果表明其平均值与标准差为14.602±0.640。结论该方法检测炭疽芽孢杆菌具有简便、快捷、灵敏度高和特异性好的特点,为临床诊断、环境监测、卫生防疫等方面,快速检出炭疽芽孢杆菌提供了有利的手段。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 荧光定量PCR 荚膜因子 水肿因子 LIGHTCYCLER
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汞对植物生理生化的影响 被引量：18
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作者 母波 韩善华 +1 位作者 张英慧 邹琴 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期582-583,共2页
关键词 汞 植物 生理生化 影响
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2012-2015年贵州省炭疽芽胞杆菌分离鉴定及MLVA分型分析 被引量：9
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作者 马青 喻欢 +5 位作者 刘英 王铭 姚光海 唐光鹏 王定明 李世军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期624-628,共5页
目的了解菌株的分子流行病学特征,为贵州省炭疽疫情的预防控制提供科学依据。方法对2012-2015年贵州省间不同地区的409份标本(外环境388份、患者19份和牲畜2份)进行炭疽芽胞杆菌分离培养,采用革兰染色镜检、青霉素抑制试验和噬菌体裂解... 目的了解菌株的分子流行病学特征,为贵州省炭疽疫情的预防控制提供科学依据。方法对2012-2015年贵州省间不同地区的409份标本(外环境388份、患者19份和牲畜2份)进行炭疽芽胞杆菌分离培养,采用革兰染色镜检、青霉素抑制试验和噬菌体裂解试验对可疑炭疽菌落进行鉴定,分析菌株检出情况。运用MLVA-15技术对炭疽芽胞杆菌分离株进行基因分型获得各VNTR位点的扩增长度并计算重复单元的重复数目。结合各VNTR位点重复数目,利用NTsys 2.10e软件对不同地区菌株进行聚类分析。结果从409份标本中分离出34株炭疽芽胞杆菌,检出率为8.31%。其中341份土壤检出33株,检出率为9.68%;17份患者皮肤病灶渗出液检出1株,检出率为5.88%。2015年分离出炭疽杆菌的阳性率最高,占48.72%(19/39)。MLVA-15分析显示,34株菌株被分为3个MLVA型;聚类分析显示,34株菌株被分为A和B两簇,其中A簇又被进一步分为A1和A2分支。来自相同地区或年份的多数菌株聚类关系相对较近。结论 2012-2015年贵州省间各种疑似炭疽送检标本中,土壤的检出阳性率最高,贵州省炭疽芽胞杆菌菌株具有MLVA型别多样性,型别分布和聚类关系具有明显的地域性。 展开更多
关键词 炭疽 炭疽芽胞杆菌 MLVA-15 贵州
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应用荧光PCR检测土壤、脏器中的炭疽芽孢杆菌 被引量：8
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作者 李伟 俞东征 +2 位作者 海荣 马凤琴 张建华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期221-224,共4页
目的用荧光定量PCR方法检测土壤、动物脏器和血液中炭疽芽孢杆菌,评价并优选目标核酸纯化方法。方法采用TaqMan荧光定量PCR技术,以炭疽芽孢杆菌pagA、rpoB2引物探针和相应外标、内标为手段,比较4种从土壤中检测炭疽菌及3种从感染脏器及... 目的用荧光定量PCR方法检测土壤、动物脏器和血液中炭疽芽孢杆菌,评价并优选目标核酸纯化方法。方法采用TaqMan荧光定量PCR技术,以炭疽芽孢杆菌pagA、rpoB2引物探针和相应外标、内标为手段,比较4种从土壤中检测炭疽菌及3种从感染脏器及血液中检测炭疽菌的方法,探讨环境和组织样品中抑制因素对荧光定量PCR检测的影响,优选并确定纯化检验手段。结果应用NaI裂解glassmilk纯化炭疽菌核酸并用荧光定量PCR检验,检出底限为2·5万拷贝/g土壤(pagA),从血液样本的检出限为1000拷贝/ml。结论荧光定量PCR技术和NaI裂解glassmilk纯化制备模板的联合应用可灵敏、特异地从土壤、血液中检测炭疽芽孢杆菌。 展开更多
关键词 炭疽芽孢杆菌 荧光定量PCR 土壤 动物脏器
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一起皮肤炭疽疫情病原的实验室检测及毒力基因鉴定 被引量：6
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作者 谈忠鸣 张忠献 +7 位作者 顾玲 胡建利 朱叶飞 祁贤 董晨 汤奋扬 周明浩 鲍倡俊 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期996-999,1005,共5页
目的对2012年江苏省连云港市赣榆县一起皮肤炭疽疫情的病人临床标本及病牛肉标本进行快速分子诊断及毒力基因的鉴定。方法用Real-time PCR方法对病人的血、焦痂标本及病牛肉标本进行炭疽杆菌染色体编码的rpoB基因及质粒PXO1、PXO2上pag... 目的对2012年江苏省连云港市赣榆县一起皮肤炭疽疫情的病人临床标本及病牛肉标本进行快速分子诊断及毒力基因的鉴定。方法用Real-time PCR方法对病人的血、焦痂标本及病牛肉标本进行炭疽杆菌染色体编码的rpoB基因及质粒PXO1、PXO2上pag、capA基因的检测,并对质粒上4种毒力基因(cya,pag,lef,cap)进行扩增并测序。结果病人焦痂标本和病牛肉标本中均检测出rpoB基因和质粒PXO1、PXO2基因,4种毒力基因的测序结果证实扩增序列为炭疽杆菌质粒基因片段,病人标本与病牛肉标本的基因序列完全一致。结论实验室检测结果证实此次皮肤炭疽疫情是由当地村民宰杀携带炭疽杆菌强毒株的病牛引起。 展开更多
关键词 炭疽疫情 分子检测 real—time PCR 毒力基因
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