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布鲁氏菌猪种标准株外膜蛋白OMP25的原核表达
被引量:
3
1
作者
江洁华
骆利敏
+3 位作者
李明
芮勇宇
廖伟娇
徐军
《中国热带医学》
CAS
2006年第10期1747-1749,共3页
目的克隆布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因并构建基因的原核表达系统。方法用聚合酶链反应技术扩增得到布鲁氏菌基因组,得Omp25基因片段,T-A克隆后测定核苷酸序列,将目的基因定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,经双酶切和DNA测序测定,将构建的重...
目的克隆布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因并构建基因的原核表达系统。方法用聚合酶链反应技术扩增得到布鲁氏菌基因组,得Omp25基因片段,T-A克隆后测定核苷酸序列,将目的基因定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,经双酶切和DNA测序测定,将构建的重组质粒转化大肠杆菌(E.coliHB101,TOP10),经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白rOmp25表达情况。结果经DNA测序显示Omp25DNA序列和插入位点正确,成功构建了重组质粒pGEX-4T-1-Omp25,经IPTG诱导,特异性表达出以包涵体形式存在48kDa的Omp25融合蛋白。结论制备、克隆了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因片段,并在大肠杆菌中表达出Omp25融合蛋白。
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关键词
布鲁氏菌
外膜蛋白Omp25
免疫
诊断
暂未订购
感染猪布鲁菌S_2株死亡的巨噬细胞碎片启动抗布鲁菌感染的免疫应答
2
作者
戎瑞雪
王蓓
+6 位作者
郑培
高微
陈昉
冯璐
王梦
曹志然
王家鑫
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期914-917,共4页
目的研究猪布鲁菌S2株感染后死亡的巨噬细胞在启动抗布鲁菌感染免疫应答中的作用。方法以猪布鲁菌S2株体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,感染1 h后,饥饿培养5 d致细胞死亡;细胞碎片与骨髓源性树突状细胞(DC)共培养24、48、72 h,ELISA检测细胞...
目的研究猪布鲁菌S2株感染后死亡的巨噬细胞在启动抗布鲁菌感染免疫应答中的作用。方法以猪布鲁菌S2株体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,感染1 h后,饥饿培养5 d致细胞死亡;细胞碎片与骨髓源性树突状细胞(DC)共培养24、48、72 h,ELISA检测细胞上清中白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α);以S2株体外感染羧基荧光黄二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的小鼠巨噬细胞,饥饿避光培养,将细胞碎片与藻红蛋白标记的DC避光共培养1 h后,激光共聚焦显微镜检测DC摄取巨噬细胞碎片情况;以S2株感染后死亡的巨噬细胞碎片接种于BALB/c小鼠腹腔,1周后加强免疫1次;加强免疫3 d后,ELISA检测血清中IL-4、IL-2和γ干扰素(IFN-γ)水平。结果负载S2株感染后死亡巨噬细胞碎片的DC TNF-α的分泌水平明显高于未感染组,但不分泌IL-12;且S2株感染后死亡的巨噬细胞能被DC摄取到细胞内;接种S2株感染后死亡的巨噬细胞的小鼠血清中IL-2、IL-4和IFN-γ水平明显高于对照组。结论感染猪布鲁菌S2株死亡的巨噬细胞可激活DC、使其提呈抗原、并诱导机体产生抗感染免疫。
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关键词
猪布鲁菌
巨噬细胞
树突状细胞
细胞因子
原文传递
2005~2012年鄂尔多斯市布鲁氏杆菌病流行动态及疫情分析
被引量:
1
3
作者
其其格
王新刚
+1 位作者
祁爱民
邬虎成
《内蒙古医学杂志》
2013年第5期576-577,共2页
布鲁氏菌病(Brucellosis简称布病)是由布鲁氏杆菌引起的严重危害人民群众身体健康和畜牧业发展的人畜共患传染病。鄂尔多斯市人间布病在二十世纪五六十年代曾经出现过较大范围的流行,在各级政府的积极支持与关怀下,在广大防疫人员的...
布鲁氏菌病(Brucellosis简称布病)是由布鲁氏杆菌引起的严重危害人民群众身体健康和畜牧业发展的人畜共患传染病。鄂尔多斯市人间布病在二十世纪五六十年代曾经出现过较大范围的流行,在各级政府的积极支持与关怀下,在广大防疫人员的努力下,于1993年达到稳定控制标准。然而,随着经济的发展和产业结构的调整,鄂尔多斯市畜牧业快速发展,牲畜大量引进,畜间疫情没能得到有效的控制。从2005年以来,我市人间布病病例成倍增加。
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关键词
布鲁氏菌病
流行动态
疫情分析
数据收集
暂未订购
题名
布鲁氏菌猪种标准株外膜蛋白OMP25的原核表达
被引量:
3
1
作者
江洁华
骆利敏
李明
芮勇宇
廖伟娇
徐军
机构
广州医学院附属第一医院
南方医科大学生物技术学院
南方医科大学南方医院检验科
广州市呼吸疾病研究所
出处
《中国热带医学》
CAS
2006年第10期1747-1749,共3页
基金
国家973课题资助项目(No.2002CB513201)
文摘
目的克隆布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因并构建基因的原核表达系统。方法用聚合酶链反应技术扩增得到布鲁氏菌基因组,得Omp25基因片段,T-A克隆后测定核苷酸序列,将目的基因定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,经双酶切和DNA测序测定,将构建的重组质粒转化大肠杆菌(E.coliHB101,TOP10),经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白rOmp25表达情况。结果经DNA测序显示Omp25DNA序列和插入位点正确,成功构建了重组质粒pGEX-4T-1-Omp25,经IPTG诱导,特异性表达出以包涵体形式存在48kDa的Omp25融合蛋白。结论制备、克隆了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因片段,并在大肠杆菌中表达出Omp25融合蛋白。
关键词
布鲁氏菌
外膜蛋白Omp25
免疫
诊断
Keywords
BruceUa
Outer membrane protein 25 ( OMP25 )
Recombinant plasmid
Immunodiagnosis
分类号
R378.53 [医药卫生—病原生物学]
暂未订购
题名
感染猪布鲁菌S_2株死亡的巨噬细胞碎片启动抗布鲁菌感染的免疫应答
2
作者
戎瑞雪
王蓓
郑培
高微
陈昉
冯璐
王梦
曹志然
王家鑫
机构
河北大学基础医学院
河北农业大学
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期914-917,共4页
基金
河北省自然科学基金(C2010000243)
河北大学国家级大学生创新训练计划(201410075028)
文摘
目的研究猪布鲁菌S2株感染后死亡的巨噬细胞在启动抗布鲁菌感染免疫应答中的作用。方法以猪布鲁菌S2株体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,感染1 h后,饥饿培养5 d致细胞死亡;细胞碎片与骨髓源性树突状细胞(DC)共培养24、48、72 h,ELISA检测细胞上清中白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α);以S2株体外感染羧基荧光黄二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的小鼠巨噬细胞,饥饿避光培养,将细胞碎片与藻红蛋白标记的DC避光共培养1 h后,激光共聚焦显微镜检测DC摄取巨噬细胞碎片情况;以S2株感染后死亡的巨噬细胞碎片接种于BALB/c小鼠腹腔,1周后加强免疫1次;加强免疫3 d后,ELISA检测血清中IL-4、IL-2和γ干扰素(IFN-γ)水平。结果负载S2株感染后死亡巨噬细胞碎片的DC TNF-α的分泌水平明显高于未感染组,但不分泌IL-12;且S2株感染后死亡的巨噬细胞能被DC摄取到细胞内;接种S2株感染后死亡的巨噬细胞的小鼠血清中IL-2、IL-4和IFN-γ水平明显高于对照组。结论感染猪布鲁菌S2株死亡的巨噬细胞可激活DC、使其提呈抗原、并诱导机体产生抗感染免疫。
关键词
猪布鲁菌
巨噬细胞
树突状细胞
细胞因子
Keywords
Brucella
macrophages
dendritic cells
cytokine
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
R378.53 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
2005~2012年鄂尔多斯市布鲁氏杆菌病流行动态及疫情分析
被引量:
1
3
作者
其其格
王新刚
祁爱民
邬虎成
机构
鄂尔多斯市疾病预防控制中心
出处
《内蒙古医学杂志》
2013年第5期576-577,共2页
文摘
布鲁氏菌病(Brucellosis简称布病)是由布鲁氏杆菌引起的严重危害人民群众身体健康和畜牧业发展的人畜共患传染病。鄂尔多斯市人间布病在二十世纪五六十年代曾经出现过较大范围的流行,在各级政府的积极支持与关怀下,在广大防疫人员的努力下,于1993年达到稳定控制标准。然而,随着经济的发展和产业结构的调整,鄂尔多斯市畜牧业快速发展,牲畜大量引进,畜间疫情没能得到有效的控制。从2005年以来,我市人间布病病例成倍增加。
关键词
布鲁氏菌病
流行动态
疫情分析
数据收集
分类号
R378.53 [医药卫生—病原生物学]
暂未订购
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁氏菌猪种标准株外膜蛋白OMP25的原核表达
江洁华
骆利敏
李明
芮勇宇
廖伟娇
徐军
《中国热带医学》
CAS
2006
3
暂未订购
2
感染猪布鲁菌S_2株死亡的巨噬细胞碎片启动抗布鲁菌感染的免疫应答
戎瑞雪
王蓓
郑培
高微
陈昉
冯璐
王梦
曹志然
王家鑫
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
原文传递
3
2005~2012年鄂尔多斯市布鲁氏杆菌病流行动态及疫情分析
其其格
王新刚
祁爱民
邬虎成
《内蒙古医学杂志》
2013
1
暂未订购
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