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2020—2023年福建省鼠及环境中钩端螺旋体调查及病原特征分析
1
作者 刘维俊 韩腾伟 +6 位作者 杨劲松 肖方震 吴生根 曾志伟 刘菁 黄玲琼 徐国英 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期866-872,共7页
目的探究福建省鼠和环境中钩端螺旋体(简称钩体)携带状况及分离株病原特征,为钩体病防控提供数据支持。方法选取福建省9地市19个县区作为调查点,捕鼠后采集鼠肾标本进行钩体分离培养和核酸检测,并采集水样用于钩体分离培养。分离株经血... 目的探究福建省鼠和环境中钩端螺旋体(简称钩体)携带状况及分离株病原特征,为钩体病防控提供数据支持。方法选取福建省9地市19个县区作为调查点,捕鼠后采集鼠肾标本进行钩体分离培养和核酸检测,并采集水样用于钩体分离培养。分离株经血清凝集试验、16S rRNA扩增和多位点序列分析确定其血清群、基因种和ST型,并通过Mega6.0和BioNu⁃merics软件构建系统进化树及进行UPGMA聚类分析。结果共捕获鼠标本723只,优势鼠种为黄毛鼠,占35.82%(259/723),而后依次是褐家鼠(20.06%,145/723)、黄胸鼠(19.64%,142/723)和针毛鼠(13.97%,101/723)。检测到钩体阳性样本144份,占19.92%(144/723),野栖鼠钩体阳性率高于家栖鼠(χ^(2)=8.48,P<0.05),成年鼠高于幼年鼠(χ^(2)=14.19,P<0.05)。不同鼠种阳性率不同(χ^(2)=46.11,P<0.05),不同地区钩体阳性率也存在差异(χ^(2)=32.113,P<0.05)。从440份鼠标本中共分离获得10株分离株,分离率2.27%(10/440)。基因种鉴定显示10株分离株中,L.borgpetersenii占7株,L.interrogans占3株。MLST分型将10株分离株分为3个ST型,分别为ST1、ST16和ST143。31份水样标本中共分离获得5株分离株,分离率16.13%,均为非致病钩体L.mtsangambouensis。结论虽未在水体中分离获得致病性钩体,但福建省各地区鼠类普遍感染致病性钩体,不同地区鼠类携带钩体型别存在差异,应加强环境和鼠类动物中的钩体监测工作。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 鼠类 感染率 基因种 MLST
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深圳市1例本地钩端螺旋体病例流行病学调查
2
作者 曹丽明 孔东锋 +7 位作者 刘威 陈戊申 旷翠萍 黄燕飞 江仕清 陈霖祥 古伟志 万佳 《新发传染病电子杂志》 2025年第5期64-68,共5页
目的对深圳市1例本地钩端螺旋体病患者进行现场流行病学调查分析,为城市钩端螺旋体病防控提供参考依据。方法对2024年11月13日深圳市南山区上报的1例钩端螺旋体患者开展流行病学调查和实验室检测,对患者疑似暴露风险点开展鼠密度监测。... 目的对深圳市1例本地钩端螺旋体病患者进行现场流行病学调查分析,为城市钩端螺旋体病防控提供参考依据。方法对2024年11月13日深圳市南山区上报的1例钩端螺旋体患者开展流行病学调查和实验室检测,对患者疑似暴露风险点开展鼠密度监测。采用荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法对患者血液、尿液样本和所捕获鼠类的血液、肝脾肾组织、尿液样本以及溪水样本进行钩端螺旋体核酸检测。结果患者早期症状不明显,发病后第6天因赫氏反应拟诊钩端螺旋体病疑似病例,后经宏基因组测序和核酸检测确诊为流感伤寒型钩端螺旋体病。经流行病学调查,患者发病前1个月内曾3次前往W景区徒步溯溪,其间被树枝划伤和戳伤,伤口浸泡溪水。调查组在W景区溪水两岸有效布笼203个,捕获老鼠19只,钩端螺旋体阳性率为36.84%(7/19)。未发现其他感染者。结论此钩端螺旋体患者为本地感染病例证据较充分,推测感染地点为W景区,感染途径为伤口接触被患钩端螺旋体病的鼠类尿液污染的溪水。 展开更多
关键词 钩端螺旋体病 赫氏反应 城市防控 流行病学调查
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山西省中部及南部地区鼠类病原体携带调查
3
作者 牛靖蓉 刘益萍 +8 位作者 程红兵 任飞 赵超 崔佳 白育瓒 赵雨馨 栗冬梅 于娟 饶华祥 《中国热带医学》 北大核心 2025年第8期1011-1015,共5页
目的了解山西省中部及南部地区鼠类伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体、莫氏立克次体和恙虫病东方体的携带情况,为当地鼠传疾病的防控提供参考依据。方法2024年7月,采用夹夜法在山西省晋中市、阳泉市及运城市的7个镇(乡)捕获鼠类,无菌收集... 目的了解山西省中部及南部地区鼠类伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体、莫氏立克次体和恙虫病东方体的携带情况,为当地鼠传疾病的防控提供参考依据。方法2024年7月,采用夹夜法在山西省晋中市、阳泉市及运城市的7个镇(乡)捕获鼠类,无菌收集其肝脏、脾脏和肾脏组织,采用荧光定量PCR法对4种病原体进行检测。以χ^(2)检验或Fisher确切概率法比较不同鼠种、性别、组织、生境和采样点的病原体检出率差异。结果捕获黑线姬鼠、苛岚绒鼠、中华姬鼠、小家鼠、北社鼠、长尾仓鼠、黄胸鼠和大仓鼠8种鼠类共301只。采用实时荧光定量PCR对301只鼠的肝、脾和肾脏标本进行伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体、莫氏立克次体和恙虫病东方体检测。结果显示伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体检出率分别为16.94%(51/301)、3.99%(12/301),莫氏立克次体和恙虫病东方体未检出。伯氏疏螺旋体的检出率高于问号钩端螺旋体(χ^(2)=117.430,P<0.01)。伯氏疏螺旋体在中华姬鼠、黑线姬鼠、小家鼠和北社鼠4种鼠类检出,问号钩端螺旋体在黑线姬鼠、岢岚绒鼠、小家鼠和北社鼠4种鼠类检出,伯氏疏螺旋体在肾脏组织中检出率最高,为13.62%,高于肝脏和脾脏中的检出率(χ^(2)=35.999,P<0.01);问号钩端螺旋体三种组织中的检出率差异均无统计学意义(χ^(2)=3.426,P=0.180)。伯氏疏螺旋体和问号钩端螺旋体在村庄生境捕获的2只鼠中未检出,在林区、田地及退耕林地捕获鼠均被检出。伯氏疏螺旋体在退耕林地检出率最高(21.28%),问号钩端螺旋体在田地中检出率居首(7.50%)。结论山西省中部及南部地区鼠类存在伯氏疏螺旋体和问号钩端螺旋体感染,提示应开展人群感染调查。 展开更多
关键词 鼠类 鼠传病原体 伯氏疏螺旋体 问号钩端螺旋体 中华姬鼠 黑线姬鼠
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云南省三市县鼠形动物携带钩端螺旋体及犬血清钩端螺旋体抗体调查 被引量：1
4
作者 韦蓉 尹家祥 +4 位作者 黎文鸿 罗云燕 李紫薇 李进春 卢江丽 《中国热带医学》 北大核心 2025年第5期594-598,共5页
目的调查云南三市县鼠形动物携带钩端螺旋体状况及检测犬血清钩端螺旋体抗体阳性情况。方法2019年7—8月,在云南省梁河县、芒市和弥勒市选取自然村进行野外捕鼠,经鼠形动物形态学鉴定后采集肾脏组织并提取DNA;采用常规PCR扩增钩端螺旋体... 目的调查云南三市县鼠形动物携带钩端螺旋体状况及检测犬血清钩端螺旋体抗体阳性情况。方法2019年7—8月,在云南省梁河县、芒市和弥勒市选取自然村进行野外捕鼠,经鼠形动物形态学鉴定后采集肾脏组织并提取DNA;采用常规PCR扩增钩端螺旋体SecY目的基因片段,对检出样本进行测序,所得序列做同源性比对和构建系统发育树。并在调查区采集犬股动脉血,收集其血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测犬血清钩端螺旋体IgG抗体;应用卡方检验分析不同影响因素下犬血清钩端螺旋体抗体情况。结果捕获鼠形动物490只,经常规PCR检出钩端螺旋体携带,携带率为0.41%(2/490),其中分别在梁河县1只黄胸鼠和1只斯氏家鼠经常规PCR检出钩端螺旋体携带,芒市和弥勒市未检出。同源进化分析显示2份钩端螺旋体菌株均为致病性博氏钩端螺旋体(Leptospira borgpetersenii)。采集犬血清305份,16份犬血清钩端螺旋体IgG抗体阳性,阳性率为5.25%。结论云南省三市县鼠形动物和犬血清均有钩端螺旋体感染,对人类有一定的致病风险,需进一步加强监测并采取预防控制措施。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 钩端螺旋体抗体 钩端螺旋体病 鼠形动物 犬
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问号钩端螺旋体感染对C3H/HeJ小鼠自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B、P62表达的影响
5
作者 杜诚 谭燕 +3 位作者 谢玲 谷媛媛 唐东 陈旭 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期832-837,共6页
目的了解问号钩端螺旋体(简称问号钩体)感染对自噬相关蛋白肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)和泛素结合蛋白62(P62)表达的影响及差异。方法采用问号钩体赖株感染C3H/HeJ小鼠构建钩体病动物模型,并运用组织... 目的了解问号钩端螺旋体(简称问号钩体)感染对自噬相关蛋白肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)和泛素结合蛋白62(P62)表达的影响及差异。方法采用问号钩体赖株感染C3H/HeJ小鼠构建钩体病动物模型,并运用组织镀银染色法检测小鼠肺、肝、肾组织内问号钩体侵袭情况。采用HE染色法检测小鼠肺、肝、肾组织病理变化。采用透射电镜法检测小鼠肺、肝、肾组织内自噬小体及钩体形态。采用免疫组化法检测问号钩体感染小鼠肺、肝、肾组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B和P62表达水平。结果组织镀银染色检测结果显示在感染的C3H/HeJ小鼠肺、肝、肾组织内均观察到入侵的问号钩体。病理检测结果显示,问号钩体感染小鼠后肺、肝、肾组织均出现典型的钩体病病理变化,如肺出血、肝细胞坏死、肾小球和肾小管坏死、炎性细胞浸润等。透射电镜检测结果显示小鼠肺、肝、肾组织内出现包裹有钩体的自噬小体。免疫组化检测结果显示,问号钩体感染C3H/HeJ小鼠后,肺、肝、肾组织内Beclin-1和LC3B蛋白表达水平增加(P<0.05),P62蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论问号钩体感染可诱导小鼠肺、肝、肾组织内Beclin-1、LC3B和P62自噬相关蛋白表达水平发生变化,激活自噬的发生。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体 感染 自噬 BECLIN-1 LC3B P62
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福建省鼠感染钩端螺旋体调查和分离株基因种的鉴定 被引量：9
6
作者 徐国英 潘敏楠 +6 位作者 刘维俊 林代华 韩腾伟 周淑姮 王加熊 刘菁 肖方震 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期175-181,共7页
目的了解福建省鼠感染钩端螺旋体(钩体)现状及分离株基因种的特征,为钩体病防控提供科学依据。方法2015-2019年根据疫情选取14个调查点,采用笼夜法捕鼠并采集心血或肾脏标本进行钩体培养,测定血清抗体;对鼠中分离保存的23株钩体菌株提取... 目的了解福建省鼠感染钩端螺旋体(钩体)现状及分离株基因种的特征,为钩体病防控提供科学依据。方法2015-2019年根据疫情选取14个调查点,采用笼夜法捕鼠并采集心血或肾脏标本进行钩体培养,测定血清抗体;对鼠中分离保存的23株钩体菌株提取DNA,PCR扩增16S rRNA基因、PCR产物纯化测序,与GenBank数据库收录的钩体17种基因型进行比对确定基因种,并用Mega 6.0软件构建系统进化树并进行序列分析。结果福建省鼠种以黄毛鼠为主要优势鼠种,占40.87%(499/1221)、其次依次是黄胸鼠19.57%(239/1221)、针毛鼠16.79%(205/1221)和褐家鼠8.85%(108/1221),钩体血清抗体阳性率为29.32%(207/706),以黄毛鼠最高,为42.16%(121/287),不同地区鼠种构成及鼠钩体感染率不同。23株菌株均扩增出16S rRNA基因的目标条带1484 bp,测序及序列分析属于致病性的基因种有13株,其中L.borgpetersenii(伯氏)占8株,L.interrogans(问号)占5株,属于非致病的基因种10株。钩体菌株分离自福建省的优势鼠种(黄毛鼠、黄胸鼠、针毛鼠)及不同地区(闽东、闽南、闽西和闽北)。结论福建省鼠类感染钩体普遍,以致病性基因种(L.borgpetersenii和L.interrogans)为主,也携带非致病性基因种,需加强钩体病传染源啮齿动物的监测工作。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 鼠类 感染率 基因种
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福建省鼠类钩端螺旋体感染状况的调查 被引量：12
7
作者 徐国英 林代华 +5 位作者 肖方震 韩腾伟 刘维俊 周淑姮 刘菁 邓艳琴 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期599-602,共4页
目的了解福建省钩端螺旋体(钩体)病主要宿主动物的密度、种类、感染率和感染菌群的分布情况,为钩体病防控提供科学依据。方法 2011-2016年根据疫情选取14个调查点,采用笼夜法捕获鼠类并采集血液或肾脏标本进行钩体培养,测定血清抗体,分... 目的了解福建省钩端螺旋体(钩体)病主要宿主动物的密度、种类、感染率和感染菌群的分布情况,为钩体病防控提供科学依据。方法 2011-2016年根据疫情选取14个调查点,采用笼夜法捕获鼠类并采集血液或肾脏标本进行钩体培养,测定血清抗体,分析感染状况和感染菌群。结果共捕获鼠1 312只,鼠密度为6.29%,闽东最高(9.98%),闽中最低(3.25%)。鼠种以黄毛鼠、黄胸鼠、褐家鼠和针毛鼠为主,占87.57%,不同地区鼠种构成不同。分离10株钩体,血清抗体阳性率为26.42%,感染菌群以秋季群、爪哇群为主,占73.50%。不同地区鼠感染率不同,闽北最高(45.00%),闽中最低(15.56%)。黄胸鼠、青毛鼠和黄毛鼠感染率较高,依次为35.53%、31.58%、27.57%。结论福建省鼠种构成复杂,黄毛鼠、黄胸鼠、褐家鼠和针毛鼠为优势鼠种,鼠类钩体感染水平较高,不同地区鼠种及感染率不同。 展开更多
关键词 钩端螺旋体属 宿主动物 感染率
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中国钩端螺旋体宿主动物及其地理分布调查 被引量：12
8
作者 于恩庶 梁中兴 +4 位作者 屠云人 李庆俊 徐慧栋 杨文映 时曼华 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1995年第5期368-371,共4页
我国迄今已发现钩端螺旋体宿主动物６５种，其中啮齿目２９种，两栖蛙类８种，食虫目和家畜各６种，食肉目和实验动物各３种，兔形目、鸟类、偶蹄目和爬行动物各２种，鱼类和节肢动物各１种。除鸟类和昆虫外，其它动物既带菌又能排菌，... 我国迄今已发现钩端螺旋体宿主动物６５种，其中啮齿目２９种，两栖蛙类８种，食虫目和家畜各６种，食肉目和实验动物各３种，兔形目、鸟类、偶蹄目和爬行动物各２种，鱼类和节肢动物各１种。除鸟类和昆虫外，其它动物既带菌又能排菌，不仅为储存宿主，也是传染源。鼠类是我国稻田型钩体的主要宿主动物，黑线姬鼠、黄胸鼠、黄毛鼠尤为重要；猪和犬是洪水型和雨水型钩体的主要传染源，长江流域及其以南地区鼠类密度大，带菌率高；黄河流域及其以北地区猪和犬的带菌率相对高，牛作为七日热型钩体的传染源意义值得进一步调查。由此表明，我国钩体的宿主动物种类多、分布广，且主要宿主动物分布不平衡。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 宿主动物 地理分布
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问号钩端螺旋体溶血素基因特征分析 被引量：8
9
作者 张怡轩 郭晓奎 +1 位作者 吴春福 赵国屏 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期10-16,共7页
目的　预测问号钩端螺旋体黄疸出血型赖株致病因子———溶血素基因 ,并对其编码蛋白结构特征进行深入分析。方法　使用NCBI ,Swissprot/TrEMBL ,ProDom ,Pfam ,Jpred2 ,TMpred ,SignalP ,ClustW对问号钩端螺旋体黄疸出血型赖株溶血素... 目的　预测问号钩端螺旋体黄疸出血型赖株致病因子———溶血素基因 ,并对其编码蛋白结构特征进行深入分析。方法　使用NCBI ,Swissprot/TrEMBL ,ProDom ,Pfam ,Jpred2 ,TMpred ,SignalP ,ClustW对问号钩端螺旋体黄疸出血型赖株溶血素基因诠释 ,所编码蛋白进行在线分析 ,并使用Bioedit软件进行氨基酸同源性比较分析。结果　确定了问号钩端螺旋体黄疸出血型赖株 9个溶血素基因 ,分为两大类 :鞘磷脂酶类溶血素基因和非鞘磷脂酶类溶血素基因。并对溶血素基因编码蛋白二级结构、结构域、跨膜区域、信号肽及进化等进行了分析。结论　多种类型多条溶血素基因同时存在于钩端螺旋体菌中 ,暗示溶血素基因和钩端螺旋体致病性之间有密切的关系 。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 溶血素 基因特征 细胞毒性 生物信息学
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福建省2012年钩端螺旋体病监测和感染菌群分析 被引量：9
10
作者 徐国英 林代华 +8 位作者 潘敏楠 李述杨 王加熊 周淑姮 何似 刘菁 韩腾伟 陈阳 邓艳琴 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2014年第5期456-458,共3页
目的掌握福建省钩端螺旋体(钩体)感染菌群,为防治工作提供科学依据。方法根据全省疫情选取调查点,采集鼠、猪、青蛙的血或肾、尿标本进行钩体培养,采集人、鼠血清测定抗体,分析钩体感染情况和感染菌群。结果宿主动物调查显示,鼠密度为5.... 目的掌握福建省钩端螺旋体(钩体)感染菌群,为防治工作提供科学依据。方法根据全省疫情选取调查点,采集鼠、猪、青蛙的血或肾、尿标本进行钩体培养,采集人、鼠血清测定抗体,分析钩体感染情况和感染菌群。结果宿主动物调查显示,鼠密度为5.83%,以黄毛鼠、黄胸鼠和针毛鼠为主,分别占29.87%、28.19%和17.11%,首次从长泰县白腹巨鼠分离出钩体。鼠血清钩体抗体阳性率为11.04%,主要感染菌群为秋季群、澳洲群和流感伤寒群,健康人群钩体抗体阳性率为8.25%,感染菌群以秋季群、致热群、七日热群和澳洲群为主。结论福建省鼠类和人群感染钩体菌群复杂,应切实做好钩体病的监测工作。 展开更多
关键词 钩端螺旋体病 监测 感染菌群
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2001-2005年衢州市钩端螺旋体病监测研究 被引量：8
11
作者 方春福 余樟友 +4 位作者 王炜 汪垂章 雷金宝 段家福 毛辉暑 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期140-143,共4页
目的了解钩端螺旋体病(钩体病)流行病学特点与衢州市疫源地情况,为控制钩体病的暴发流行提供依据。方法运用描述流行病学方法,对1960-2005年的历史疫情进行分析。采用现场调查方法,采集鼠、水鸭、猪、青蛙的双肾标本和牛中段尿做钩体培... 目的了解钩端螺旋体病(钩体病)流行病学特点与衢州市疫源地情况,为控制钩体病的暴发流行提供依据。方法运用描述流行病学方法,对1960-2005年的历史疫情进行分析。采用现场调查方法,采集鼠、水鸭、猪、青蛙的双肾标本和牛中段尿做钩体培养分离,青蛙和水鸭血清做抗体测定,分析感染情况和感染菌群。结果1960-2005年衢州市共报告钩体病11047例,年均发病率11.58/10万,死亡72例,病死率0.65%。7-9月发病例数占全年总病例数的90.26%;农民发病例数占总病例数的88.20%;男女之比为2.74∶1;常山及开化县是衢州市最主要的疫区。2001-2005年监测点野外鼠密度为3.93%,黑线姬鼠占51.40%,动物标本培养阳性率0.49%,动物血清抗体阳性率14.02%。人血清中菌群为七日热群和黄疸出血群,动物中主要菌群为黄疸出血群、秋季热群、赛罗群、流感伤寒群。结论钩体病发病年度与地区波动十分明显,主要是受局部暴发疫情的影响。夏秋季为高发季节,青壮年农民为重点人群。近6年来的洪水低发,与动物间的低带菌率一致,但衢州市动物感染菌群复杂,多种动物均可携带,受气候影响导致暴发的危险始终存在。 展开更多
关键词 钩端螺旋体病 动物带菌 流行病学方法 监测
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问号钩端螺旋体lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因原核表达及其产物免疫原性分析 被引量：4
12
作者 罗冬娇 邱晓枫 +4 位作者 王江 严谨 王海斌 周金成 严杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第6期599-604,共6页
目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,优化目的产物表达条件并对表达产物免疫原性进行鉴定。方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因,并用常规基因工程方法建立其原... 目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,优化目的产物表达条件并对表达产物免疫原性进行鉴定。方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因,并用常规基因工程方法建立其原核表达系统。采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图象分析系统,检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2表达量。采用免疫双扩散试验及WesternBlot,鉴定rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2的免疫原性。结果:获得了序列正确的lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统E.coliBL21DE-3pET42a-lipL32/1-lipL21-ompL1/2。表达条件优化后的rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2产量为37.78mg/L,是优化前的3.7倍。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清免疫双扩效价为1∶4。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2抗血清能识别rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2以及rLipL32/1、rLipL21、rOmpL1/2。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2能与问号钩体56601株全菌兔抗血清以及黄疸出血群、流感伤寒群、波摩那群、秋季群问号钩体感染患者血清出现阳性杂交信号。结论:成功地构建了lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,表达产物具有良好的抗原性和交叉免疫反应性,可作为研制通用型问号钩体基因工程疫苗及通用型钩体病血清学检测的抗原。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 问号 抗原 细菌/分析 聚合酶链反应/方法 属特异性抗原 lipL32基 因/lipL21基因/OmpL1/2 融合基因/构建 原核表达 免疫原性/鉴定
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赖型钩端螺旋体OmpA膜蛋白Loa22基因的克隆分析及蛋白表达 被引量：6
13
作者 朱海龙 鲍朗 +2 位作者 张会东 王晓樱 李岩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期294-297,共4页
目的分析赖型钩端螺旋体OmpA膜蛋白Loa22的结构特征,并对其进行克隆表达。方法分别以问号状赖型钩体017株、56601株及双曲状钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因。构建Loa22基因与质粒pGEX-4T-1的重组原核表达质粒,克隆筛选并测序... 目的分析赖型钩端螺旋体OmpA膜蛋白Loa22的结构特征,并对其进行克隆表达。方法分别以问号状赖型钩体017株、56601株及双曲状钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因。构建Loa22基因与质粒pGEX-4T-1的重组原核表达质粒,克隆筛选并测序。利用Bioedit、Dnaman、PSIPRED、NCBI及SignaIP等对其结构进行分析。最后在大肠杆菌JM109中诱导表达目的蛋白。结果不同毒力赖型钩体均能扩增出约600bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;PCR、双酶切及测序证实pGEX-Loa22构建成功:分析显示不同赖型钩体的Loa22的同源性很高,C末端都具有同OmpA一致的保守序列及肽聚糖相关基序,都有信号肽序列;表达产物经SDS-PAGE检测证明是目的蛋白。结论赖型钩体具有编码OmpA膜蛋白的Loa22基因,可能与赖型钩体毒力和免疫原性存在某种相关性。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 OmpA基因 克隆 表达
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问号钩端螺旋体检测基因芯片的研制 被引量：7
14
作者 唐雨德 陶开华 +3 位作者 李越希 金慧英 张锦海 郭恒彬 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期311-314,共4页
目的　制备一种用于快速检测、鉴定问号钩端螺旋体的DNA微阵列芯片。方法　从Genbank中选取钩体 2 3SrDNA序列 ,设计一对种特异性引物和DNA探针 ,通过Blast的基因同源性比较 ,验证引物和探针的通用性与特异性。将合成的探针点样到玻片... 目的　制备一种用于快速检测、鉴定问号钩端螺旋体的DNA微阵列芯片。方法　从Genbank中选取钩体 2 3SrDNA序列 ,设计一对种特异性引物和DNA探针 ,通过Blast的基因同源性比较 ,验证引物和探针的通用性与特异性。将合成的探针点样到玻片上制备成基因芯片。用Cy3标记引物 ,通过不对称PCR反应获取荧光素标记的靶序列 ,然后与制备的芯片杂交。结果　设计的引物与探针仅同时与问号钩体 2 3srDNA完全同源。该引物可扩增我国 18个血清群的 2 5株钩体 ,均出现单一 4 82bp的扩增产物 ,而双曲钩体及其他螺旋体、病原、空白对照均无任何DNA扩增条带。芯片杂交结果与常规PCR方法结果一致 ,敏感性高于PCR。结论　基因芯片可以快速、灵敏、特异地检测问号钩端螺旋体。 展开更多
关键词 检测 基因芯片 研制 问号钩端螺旋体
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2009-2015年贵州省致病性钩端螺旋体分离株PFGE分型分析 被引量：7
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作者 刘英 王铭 +6 位作者 李世军 姚光海 黄荷 陈旭 王斌 唐光鹏 王定明 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期186-189,198,共5页
目的了解贵州省2009-2015年分离自鼠类宿主动物的钩端螺旋体(简称钩体)PFGE带型特征,为当地钩体病的预防和控制提供科学依据。方法对贵州省近年分离自鼠类宿主动物的56株钩体采用致病性钩体特异引物进行PCR扩增鉴定,应用血清分群PCR对... 目的了解贵州省2009-2015年分离自鼠类宿主动物的钩端螺旋体(简称钩体)PFGE带型特征,为当地钩体病的预防和控制提供科学依据。方法对贵州省近年分离自鼠类宿主动物的56株钩体采用致病性钩体特异引物进行PCR扩增鉴定,应用血清分群PCR对其进行血清群鉴定,采用包埋法提取钩体染色体DNA,利用核酸内切酶NotI对DNA进行酶切,酶切片段经PFGE电泳后采用凝胶成像系统拍照获得DNA指纹图谱,采用国家病原体分子分型实验数据分析与传输系统进行处理和聚类分析。结果致病性钩体特异性PCR和血清分群PCR鉴定显示56株钩体均为黄疸出血群钩体株,PFGE分型将其分为38个带型,聚类分析显示多数钩体株与黄疸出血群赖型具有较高的相似度,为主要流行优势带型,少部分钩体株与爪哇群和波摩那群代表菌株具有较高相似性,聚类关系相对较近。结论黄疸出血群赖型是贵州省近年流行的优势型,钩体株PFGE带型具有多样性,可为当地钩体病的监测、暴发调查和传染源追踪提供参考依据。 展开更多
关键词 贵州 钩端螺旋体 PCR 脉冲场凝胶电泳
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1993～2000年四川省钩端螺旋体菌群分布 被引量：24
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作者 黄自英 赵慕愚 +4 位作者 郭宗琪 魏敏 蔺鸿 刘伦光 徐竹清 《预防医学情报杂志》 CAS 2001年第4期229-230,共2页
目的　分析、研究四川省钩端螺旋体 (下称钩体 )菌群分布 ,掌握菌群动态 ,为钩体病的科研和防制提供科学依据 ,为钩体菌苗生产提供流行菌株。方法　按全国钩体病监测方案 ,从病人和带菌动物中分离钩体 ,按中国药品生物制品检定所的钩体... 目的　分析、研究四川省钩端螺旋体 (下称钩体 )菌群分布 ,掌握菌群动态 ,为钩体病的科研和防制提供科学依据 ,为钩体菌苗生产提供流行菌株。方法　按全国钩体病监测方案 ,从病人和带菌动物中分离钩体 ,按中国药品生物制品检定所的钩体菌种检定程序进行检定。结果　 32 4株钩体分属 8个血清群。即黄疸出血、七日热、秋季、澳州、流感伤寒、波摩那、犬、爪哇群。另从水牛尿中首次检出七日热群钩体 2株。结论　黄疸出血群钩体仍为四川省人间钩体病流行和啮齿食虫目动物携带的主要菌群 ,占 81 48%。啮齿食虫目仍为主要宿主动物 ,尤以黑线姬鼠为四川稻田型钩体病主要传染源。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 菌群 监测 四川 1993-2000年
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鼠类感染钩端螺旋体的PCR检测和基因序列分析 被引量：8
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作者 胡群 马思杰 +1 位作者 邹春颖 梅勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第5期427-429,434,共4页
目的对宁波地区鼠类携带的钩端螺旋体进行PCR检测并分析其基因序列特征。方法设计、合成钩端螺旋体的secY基因和23SrDNA基因引物,对宁波梅山口岸2014年5-12月捕获的鼠类样品进行PCR检测,并进行核苷酸序列测定与系统进化分析。结果共检... 目的对宁波地区鼠类携带的钩端螺旋体进行PCR检测并分析其基因序列特征。方法设计、合成钩端螺旋体的secY基因和23SrDNA基因引物,对宁波梅山口岸2014年5-12月捕获的鼠类样品进行PCR检测,并进行核苷酸序列测定与系统进化分析。结果共检测72只鼠类肾样品,其中5只黑线姬鼠PCR检测阳性,分离获得钩端螺旋体株DXLP1501,其secY基因扩增片段大小为285bp,23SrDNA基因扩增片段大小为484bp。系统进化分析显示,DXLP1501 23SrDNA基因与博氏螺旋体株L550位于同一分支,遗传距离为0.005;DXLP1501sec Y基因与5株博氏钩端螺旋体和1株梅氏钩端螺旋体位于同一分支,遗传距离为0.011。结论宁波地区鼠类中存在博氏钩端螺旋体感染,流行株DXLP501与致病性国际流行株高度同源。 展开更多
关键词 鼠类 钩端螺旋体 检测 基因序列分析
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问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞FasL／Fas表达上调及FasL／Fas相关细胞凋亡的研究 被引量：4
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作者 李世军 胡野 +2 位作者 严杰 毛亚飞 李立伟 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第6期551-557,共7页
目的:了解FasL/Fas途径参与问号钩端螺旋体(简称钩体)诱导细胞凋亡及其FasL/Fas表达水平变化。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核-巨噬细胞J774A.1模型。采用DAPI染色法观察问号钩体56601株感染细胞凋亡的形态学特征... 目的:了解FasL/Fas途径参与问号钩端螺旋体(简称钩体)诱导细胞凋亡及其FasL/Fas表达水平变化。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核-巨噬细胞J774A.1模型。采用DAPI染色法观察问号钩体56601株感染细胞凋亡的形态学特征,流式细胞术定量检测感染细胞的凋亡率及FasL中和抗体对细胞凋亡的阻断作用。PE标记抗小鼠FasL或Fas单克隆抗体染色法,观察问号钩体56601株感染细胞FasL/Fas表达情况。采用流式细胞术定量检测感染细胞的FasL/Fas表达水平。结果:问号钩体56601株感染J774A.1细胞4h时,部分细胞出现染色质浓缩及边缘化现象;感染24h时上述病变现象更加明显且有部分细胞核裂解。问号钩体56601株感染J774A.1细胞4h和24h的凋亡率分别为53.6%和64.31%。FasL中和抗体预处理细胞后,问号钩体56601株感染细胞4h或24h的凋亡率分别为10.27%和15.90%。J774A.1细胞被问号钩体56601株感染后4和24h,FasL表达率分别从感染前的4.19%上升至21.69%和65.70%,Fas表达率分别从感染前的12.88%上升至91.96%和88.01%。结论:诱导细胞凋亡是问号钩体56601株损伤J774A.1细胞的重要机制。问号钩体可上调靶细胞FasL/Fas表达水平,并通过FasL/Fas途径诱导J774A.1细胞凋亡。 展开更多
关键词 钧端螺旋体 问号/致病力 细胞凋亡 基因表达 J774A.1细胞 FasL/Fas 调控
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钩端螺旋体外膜菌苗的研究 被引量：6
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作者 张锦麟 秦进才 +5 位作者 谢广中 张亚达 陆世宝 赵方略 王祥初 孙文浩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期153-156,共4页
采用C－70培养基培养钩端螺旋体可提高钩体浓度4．5～11．6倍。参照Auran方法进行提纯，采用中空纤维超滤技术收集外膜制成外膜苗苗。接种一针（30μg）即可达到最低免疫水平，表明外膜苗有较强的免疫原性。尽管疫苗中残留微量SDS，但... 采用C－70培养基培养钩端螺旋体可提高钩体浓度4．5～11．6倍。参照Auran方法进行提纯，采用中空纤维超滤技术收集外膜制成外膜苗苗。接种一针（30μg）即可达到最低免疫水平，表明外膜苗有较强的免疫原性。尽管疫苗中残留微量SDS，但动物试验安全，未出现异常反应。其它检定项目结果均符合构体菌苗制检现程要求。 展开更多
关键词 钩端螺旋体 外膜菌苗 制备
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