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基孔肯雅病毒感染性克隆的构建与鉴定 被引量:1
1
作者 林启晗 郑张琦 +5 位作者 顾天梦 李川 杜珊珊 朱武洋 王世文 李建东 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期428-436,共9页
基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)主要经伊蚊叮咬可在人间快速传播,引发大范围规模性疫情,此外,病毒适应性突变可对病毒传播特征造成显著影响。本研究通过分步克隆的方法,以我国本地传播病毒分离株(CHIKV-GD133)基因组为模板,以... 基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)主要经伊蚊叮咬可在人间快速传播,引发大范围规模性疫情,此外,病毒适应性突变可对病毒传播特征造成显著影响。本研究通过分步克隆的方法,以我国本地传播病毒分离株(CHIKV-GD133)基因组为模板,以商业化质粒pSMART为载体骨架,分4步利用TOP10F、和EPI300两种感受态细胞构建了分别在T7和CMV启动子驱动下的CHIKV的全长感染性克隆,分别转染表达有T7聚合酶的BHK细胞系(BHK/T7-9)和Vero细胞后,通过显微镜观察、RT-PCR、IFA和噬斑滴定等方法,检测细胞病变效应、结构蛋白的表达、子代病毒粒子基因组序列、病毒基因组复制水平等,确认所构建2种感染性克隆在转染相应细胞系后,能够有效复制、装配形成有感染性的病毒颗粒,且该病毒颗粒可在Vero细胞内传代增殖,其感染复制特征与亲本野毒株无显著性差异。本研究为进一步探索影响CHIKV感染、复制、传播和致病等关键机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 基孔肯雅病毒 感染性克隆 反向遗传 T7 RNA聚合酶
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中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎病毒疫苗株VP1区基因变异的研究 被引量:51
2
作者 张勇 祝双利 +6 位作者 赵蓉 李杰 陈立 侯晓辉 王东艳 张礼璧 许文波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期28-33,共6页
为研究中国急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中脊髓灰质炎 (简称脊灰 )病毒分离株的分子特征 ,为中国继续维持“无脊灰野毒状态”提供理论依据 ,对 2 0 0 2年所有省级疾病预防控制中心送检的脊灰分离株 ,用PCR RFLP法及ELISA法进行型内鉴定。用... 为研究中国急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中脊髓灰质炎 (简称脊灰 )病毒分离株的分子特征 ,为中国继续维持“无脊灰野毒状态”提供理论依据 ,对 2 0 0 2年所有省级疾病预防控制中心送检的脊灰分离株 ,用PCR RFLP法及ELISA法进行型内鉴定。用PCR RFLP法筛查出与疫苗株相比有异常酶切图谱的毒株共 2 4株 ,其中Ⅰ型毒株 1株 ,Ⅱ型毒株 2 1株 ,Ⅲ型毒株 2株 ;用ELISA法筛查出与疫苗株相比有不同的抗原抗体反应的毒株共 2 2株 ,其中Ⅰ型毒株 7株 ,Ⅱ型毒株 4株 ,Ⅲ型毒株 1 1株 ,在 7株Ⅰ型毒株中有 3株为非疫苗类似株 (NSL) ,其余为双反应毒株 (DRV)。随后对这 4 6株毒株进行了全VP1区的基因序列分析。结果表明 :2 0 0 2年脊灰分离株都是疫苗株或疫苗衍生株 ,没有发现野毒株 ,中国继续保持着“无脊灰野毒状态” ;口服减毒活疫苗 (OPV)株与其它野毒株在稳定性性质方面是类似的 ,即通常是不稳定的 ,在人体肠道内有很强的选择性 ;在人体肠道内 ,病毒复制产生的基因变异导致毒力升高 ,是引起疫苗相关麻痹病例 (VAPP)的重要原因 ,但宿主本身的因素也有很大的作用 ;在局部地区有疫苗株的循环或脊灰疫苗衍生株 (VDPV)的存在 ;最终消除疫苗株引起的AFP病例可能还需要脊灰灭活疫苗(IPV)的介入。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 口服减毒活疫苗 0PV 基因变异 脊髓灰质炎疫苗衍生株 VDPV
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鸡卵抗体(IgY)理化特性的研究 被引量:50
3
作者 王炯 龚春梅 +1 位作者 赵树栋 宋霞 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期140-143,共4页
本文研究了抗脊髓灰质炎病毒Ⅲ型鸡卵抗体(IgY)的理化特性,实验证明IgY在室温条件下能保持活性6个月,经巴氏消毒后抗体活性不丧失,并且具有很好的耐酸性,研究结果提示特异性IgY可作为良好的婴幼儿食品添加剂。
关键词 IGY 鸡卵抗体 脊髓灰质炎病毒 Ⅲ型
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PCR方法检测我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型野毒株的研究 被引量:14
4
作者 方肇寅 温乐英 +13 位作者 章菁 晋圣瑾 王碧锦 谢秋莲 王树声 赵月萍 张振国 马玉杰 郑焕英 郑渡平 孟宪坤 秦明晖 刘复林 陈丽娟 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期51-56,共6页
用聚合酶链反应试验(PCR)检测我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型(PVI)野毒株,仅需5μlPVI细胞培养液,方法简便、快速、敏感、特异,用本法对我国14个省市79份PVI分离株的检测结果,能与检定sabinⅠ相关株的SI/P... 用聚合酶链反应试验(PCR)检测我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型(PVI)野毒株,仅需5μlPVI细胞培养液,方法简便、快速、敏感、特异,用本法对我国14个省市79份PVI分离株的检测结果,能与检定sabinⅠ相关株的SI/PCR法的检测结果相印证,与其中31份核苷酸测序判断为野毒株的结果相一致。其检测阳性率为84.4%,基本能检测我国流行过的5个PVI基因型野毒株。另外,从检测结果看,除北京市未发现野毒株外,其它13个省区都有野毒株流行,表明当前我国消灭脊灰的任务还很重。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 病毒 野毒株 PCR
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北京市昌平区脊髓灰质炎灭活疫苗与口服脊髓灰质炎减毒活疫苗不同序贯免疫程序的基础及加强免疫效果的评价 被引量:12
5
作者 张丽文 许颖 +3 位作者 邢海鹰 王海红 苑新海 朱宗龙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第10期1283-1287,共5页
目的 评价脊髓灰质炎灭活疫苗(inactived polio vaccine,IPV)与口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral polio vaccine,OPV)不同序贯免疫程序的基础及加强免疫效果。方法 选择逸2月龄婴儿,分为4组:1剂IPV和2剂OPV序贯(I-O-O组);2剂IPV和1... 目的 评价脊髓灰质炎灭活疫苗(inactived polio vaccine,IPV)与口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral polio vaccine,OPV)不同序贯免疫程序的基础及加强免疫效果。方法 选择逸2月龄婴儿,分为4组:1剂IPV和2剂OPV序贯(I-O-O组);2剂IPV和1剂OPV序贯(I-I-O组);3剂IPV(I-I-I组);3剂OPV(O-O-O组),以O-O-O组为对照组,分别于2、3、4月龄各接种1剂,IPV每剂悬液0.5 ml,经大腿前外侧中部肌肉注射,OPV每剂口服1 g糖丸。均采集免疫前、完成基础免疫后1个月、满18月龄后及I-O-O组接种第1剂IPV后1个月、I-I-O组接种第2剂IPV后1个月、I-I-I组加强免疫1剂IPV后1个月受试者的静脉血,分离血清,由北京市CDC脊髓灰质炎实验室采用WHO推荐的微量中和试验方法检测脊髓灰质炎中和抗体水平,计算各组抗体保护率及几何平均滴度(GMT)。结果 各组研究对象的体重、性别构成比差异无统计学意义(P跃0.05),年龄差异有统计学意义(P约0.05)。免疫前各组脊髓灰质炎Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体水平均低于1:8,其中以Ⅲ型最低。完成3剂基础免疫后,I-O-O和I-I-O组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体GMT在889.20-1 193.99之间,I-I-I和O-O-O组在243.22-831.76之间;O-O-O组的Ⅰ型和Ⅲ型抗体保护率均为96.67%,I-O-O组的Ⅲ型为97.18%,其余均为100%。I-O-O组接种第1剂IPV后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体GMT分别为21.73、39.63和26.49,抗体保护率分别为88.10%、97.62%和84.52%;I-I-O组接种第2剂IPV后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体GMT分别为234.96、247.74和416.87,抗体保护率均为100%。基础免疫后1年,I-O-O、I-I-O和O-O-O组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体GMT均高于I-I-I组(P约0.05),抗体保护率均为100%;I-I-I组加强1剂IPV后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体GMT均为1 819.70,抗体保护率均为100%。结论 序贯接种组抗体较单独接种IPV或OPV组高。基础免疫1年后抗体保护率仍较高,但I-I-I组需1年后加强1剂,以保持较高水平的抗体滴度。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎灭活疫苗 脊髓灰质炎减毒活疫苗 免疫活性 序贯程序
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中国首例iVDPVs病例粪便标本中病毒血清型分布和Ⅲ型iVDPVs VP1区基因特征 被引量:17
6
作者 许文波 张勇 +14 位作者 严冬梅 赵月萍 冷红英 王东艳 赵蓉 李黎 陈晓琴 胡莹 祝双利 李崇山 温宁 安洪秋 李杰 严旭玲 梁晓峰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期159-165,共7页
分析中国首例免疫缺陷疫曲衍生脊髓灰质炎病毒(immunodeficient vaccine-derived polioviruses,iVDPVs)急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例(实验室编号为9230)12份便标本中病毒血清型分布和分离物中Ⅲ型VP1区的... 分析中国首例免疫缺陷疫曲衍生脊髓灰质炎病毒(immunodeficient vaccine-derived polioviruses,iVDPVs)急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例(实验室编号为9230)12份便标本中病毒血清型分布和分离物中Ⅲ型VP1区的基因特征。31个省的疾病预防控制中心脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络,在2005年采用细胞培养、病毒分离和微量中和试验从5231例AFP病例中的293例的便标本中分离到脊灰病毒,其中从1例编号为9230的AFP病例发病2~150天的12份便标本中分离到17株脊灰病毒株,包括Ⅱ型12株,Ⅲ型5株。用PCR-RFLP和ELISA两种方法对送检的293例AFP病例中分离的病毒进行型内鉴定,VP1区序列测定和分析发现:从9230号病例粪便标本中分离的12株Ⅱ型为混合不同变异数目的Ⅱ型iVDPVs,5株Ⅲ型病毒为单一Ⅲ型iVDPVs;除9230号病例外未发现其它iVDPVs或疫苗衍生脊灰病毒(vaccine-derived polioviruses,VDPVs)。5株Ⅲ型iVDPVs的VP1基因和SabinⅢ相比有22~24个碱基突变,同源性为97.33%~97.56%,是中国至今发现变异最大的Ⅲ型VDPVs。9230号病例临床诊断为X-连锁低/无丙种球蛋白血症,是在中国首次发现的iVDPVs病例,该病例的病毒分离物中同时存在Ⅱ型和Ⅲ型iVDPVs,Ⅲ型iVDPVs在患者体内至少复制2.5年以上,iVDPVs病例的持续排毒已经给中国维持无脊灰状态提山了新的挑战。 展开更多
关键词 免疫缺陷疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(iVDPVs) VP1编码区 序列测定和分析
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中国脊髓灰质炎病毒疫苗株基因变异的分析 被引量:17
7
作者 李杰 张礼壁 +5 位作者 米山彻夫 侯晓辉 郑红 方勇 原稔 荻原昭夫 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期291-298,共8页
从急性弛缓性麻痹(AFP)病例分离的32株脊髓灰质炎(脊灰)病毒,在WP1编码区,经PCR-RFLP方法鉴定,并经核酸测序进一步证实为疫苗株。其中5株为Ⅰ型疫苗株,16株Ⅱ型疫苗株,11株Ⅲ型疫苗株。以同样的分析方法... 从急性弛缓性麻痹(AFP)病例分离的32株脊髓灰质炎(脊灰)病毒,在WP1编码区,经PCR-RFLP方法鉴定,并经核酸测序进一步证实为疫苗株。其中5株为Ⅰ型疫苗株,16株Ⅱ型疫苗株,11株Ⅲ型疫苗株。以同样的分析方法检测这些毒株基因组的3D聚合酶编码区,发现2株Ⅰ型疫苗株在3D区的431个核苷酸序列为野毒序列,即这2株为Sabunl因型(VP1)与野毒基因型(3D)重组株;其余3株Ⅰ型疫苗株未发现基因重组,16株Ⅱ型疫苗株中11株为Sabin2基因型(VP1)与Sabin3基因型(3D)重组株,3株为Saibn2基因型(VP1)与(Sabin1+Sabin2)基因型(3D)重组株,其余2株未发现基因重组。11株Ⅲ型疫苗株中只有1株发生重组,为Sabin3基因型(VP1)与Non-Sabin基因型(3D)重组株。另外,对5'末端非编码区与神经毒力相关的关键位点(Ⅰ型的480-G和525-U,Ⅱ型的481-A及Ⅲ型的422-U)基因的检测发现,5株Ⅰ型疫苗株中,1株在位点525-U突变,碱基C置换U;3株在位点480-G突变,碱基A置换G;另1株未发现突变。16株Ⅱ型疫苗株均在位点481-A突变,碱基G置换A。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 基因重组 点突变
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中国脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的PCR-RFLP法分析 被引量:9
8
作者 张礼壁 李杰 +5 位作者 原稔 郑红 侯晓辉 陆群 方勇 吉仓广 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期145-153,共9页
近年来我国流行地区分离的脊髓灰质炎病毒多为Ⅰ型野毒。本文报导对我国一些省、自治区防疫站从急性驰缓性麻痹病人粪便中分离的77株Ⅰ型野毒株,经PCR-RFLP法分析结果,发现不同地区分离的野毒株在电泳图像上有明显差异。根... 近年来我国流行地区分离的脊髓灰质炎病毒多为Ⅰ型野毒。本文报导对我国一些省、自治区防疫站从急性驰缓性麻痹病人粪便中分离的77株Ⅰ型野毒株,经PCR-RFLP法分析结果,发现不同地区分离的野毒株在电泳图像上有明显差异。根据电泳图像所显示的三种酶切条带的数目,可分为14个类型,而且同一省、自治区内不同地区(如新疆),或同一地区不同年份(如广东)的毒株也存在着明显差异。但在某些相邻省份如广东省与海南省,92年流行毒株电泳图像完全一致。说明本法虽不如核酸序列分析精确,但在一定程度上也能反映毒株间的差异,有助于说明流行株的亲疏关系,可用于研究毒株的分子流行病学。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 病毒 I型毒株 RFLP
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重组人抗狂犬病病毒单抗SO57、SOJB对不同狂犬病病毒毒株中和作用的研究 被引量:8
9
作者 贾茜 徐葛林 +2 位作者 赵伟 吴杰 郑新雄 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期256-261,共6页
用不同的动物模型研究了具有专利的重组人抗狂犬病病毒单克隆抗体SO57、SOJB对不同狂犬病病毒株的中和作用,100IU/kg的SO57能100%保护被中国街毒株SBD攻击的中国仓鼠;首次用小鼠模型模拟人体被狂犬病病毒攻击后的治疗情况,在小鼠被CVS... 用不同的动物模型研究了具有专利的重组人抗狂犬病病毒单克隆抗体SO57、SOJB对不同狂犬病病毒株的中和作用,100IU/kg的SO57能100%保护被中国街毒株SBD攻击的中国仓鼠;首次用小鼠模型模拟人体被狂犬病病毒攻击后的治疗情况,在小鼠被CVS及中国街毒代表株攻击后,SO57与HRIG具有相近的对小鼠的暴露后保护作用;同时结果显示HRIG对SBD株攻击的保护率不能到达100%,仅使用疫苗是不能对感染病毒的小鼠百分之百的保护;SOJB与SO57 1:1联合使用未显示比SO57单独使用更好的保护效果。SO57极有可能在中国代替HRIG用于狂犬病病毒暴露后治疗。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 单克隆抗体 中和作用 狂犬病病毒暴露后治疗
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中国脊髓灰质炎病毒疫苗株基因特征及其神经毒力的初步观察 被引量:10
10
作者 李杰 米山彻夫 +5 位作者 张礼壁 侯晓辉 郑红 方勇 原稔 荻原昭夫 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期208-214,共7页
中国脊髓灰质炎(脊灰)病毒疫苗株普遍存在基因变异的现象,如重组、点突变等〔1〕。我们选出10株有代表性的变异株,在具有人脊灰病毒受体基因的转基因小鼠PVR-Tg21〔2〕中做毒力分析,发现Sabin1基因型(VP1)... 中国脊髓灰质炎(脊灰)病毒疫苗株普遍存在基因变异的现象,如重组、点突变等〔1〕。我们选出10株有代表性的变异株,在具有人脊灰病毒受体基因的转基因小鼠PVR-Tg21〔2〕中做毒力分析,发现Sabin1基因型(VP1)与野毒基因型(3D)的重组株显示很强的神经毒力,其PD50inTCID50(简称PD50)值为4.5,而Sabin1标准株的PD50值大于8.0。另外两株Ⅰ型疫苗株只在关键性核苷酸位点发生突变,只在位点525-U发生突变的一株,其PD50值为5.0,另一株在位点480-G及2795-A突变,其PD50值为5.8,均显示较强的神经毒力。一株Sabin2基因型(VP1)与Sabin3基因型(3D)的重组株,其神经毒力(PD50≥5.9)亦明显高于Sabin2标准株(PD50>7.5);而1株Sabin2基因型(VP1)与(Sabin1+Sabin2)基因型(3D)重组株的神经毒力(PD50=7.50)无明显提高。对Ⅲ型疫苗株的神经毒力分析发现,1株Sabin3基因型(VP1)与Non-Sabin基因型(3D)重组株的神经毒力,高于仅在核苷酸位点472-U突变的一株疫苗株。值得提出的是,另一株Ⅲ型疫苗? 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒疫苗株 基因特征 神经毒力
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Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗纯化工艺的建立 被引量:10
11
作者 衡燮 高娜 +7 位作者 伍胤杰 林小瑞 周武刚 王微 唐聪 姜述德 杨净思 孙明波 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期394-395,402,共3页
目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)纯化工艺。方法采用Sepharose CL-6B凝胶过滤和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析两步纯化法纯化脊髓灰质炎病毒,进行各项检定后再经除菌过滤和灭活。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒纯化后的蛋白去除... 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)纯化工艺。方法采用Sepharose CL-6B凝胶过滤和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析两步纯化法纯化脊髓灰质炎病毒,进行各项检定后再经除菌过滤和灭活。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒纯化后的蛋白去除率均不低于98.81%,病毒滴度分别为8.75、8.50和8.63lgCCID50/ml,DNA残留量均<100pg/ml。除菌过滤和灭活后,D抗原含量略有下降。结论已建立了Sabin株IPV的纯化工艺,纯化后制备出了高纯度的Sabin株IPV。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎灭活疫苗 凝胶过滤层析 离子交换层析
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Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原国家标准品的建立 被引量:9
12
作者 英志芳 江征 +4 位作者 蔡玮 周健 王剑锋 徐康维 李长贵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期52-54,58,共4页
目的制备Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原国家标准品,并进行协作标定及稳定性检测。方法委托中国医学科学院医学生物学研究所按照国家批准工艺制备分装三价候选国家标准品,并考察其均匀性;组织5家实验室采用统一的D抗原ELISA检测方法对... 目的制备Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原国家标准品,并进行协作标定及稳定性检测。方法委托中国医学科学院医学生物学研究所按照国家批准工艺制备分装三价候选国家标准品,并考察其均匀性;组织5家实验室采用统一的D抗原ELISA检测方法对候选标准品协作标定,确定D抗原标示值,并对其稳定性进行初步检测。结果候选标准品分装精度变异系数(CV)为0.21%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型CV值分别为7.39%、6.21%、7.75%;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型在不同实验室间D抗原含量的CV值分别为4.03%~5.90%、3.48%~4.00%、3.03%~4.53%,抗原含量均一性良好;确定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型最终标准品效价分别为180、191、243 DU/m L。将标准品于4及-20℃放置4个月,3个血清型的D抗原含量均未发生较大变化;25℃放置约7周时,各血清型D抗原含量才出现下降趋势;37℃放置1周时开始下降,尤以Ⅰ型最为明显。结论制备的候选标准品满足国家生物标准物质的要求,可应用于Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗体外效力检测。 展开更多
关键词 Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗 D抗原 标准品
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不同脊髓灰质炎疫苗免疫程序基础免疫后的血清学反应 被引量:9
13
作者 刘洪波 林嘉鹏 +1 位作者 吴衍恒 梁洪 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第11期1641-1643,共3页
目的比较不同脊髓灰质炎(简称脊灰)疫苗免疫程序基础免疫后的血清学反应。方法选择广东省中山市居住的无疫苗接种禁忌的健康婴儿,在其2、3、4月龄时各接种1剂脊灰灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)或口服脊灰疫苗(oral poli... 目的比较不同脊髓灰质炎(简称脊灰)疫苗免疫程序基础免疫后的血清学反应。方法选择广东省中山市居住的无疫苗接种禁忌的健康婴儿,在其2、3、4月龄时各接种1剂脊灰灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)或口服脊灰疫苗(oral polio vaccine,OPV),按照接种程序的不同,将观察对象分为全程OPV组(O-O-O)、全程IPV组(II-I)、1剂IPV+2剂OPV组(I-O-O)、2剂IPV+1剂OPV组(I-I-O)。基础免疫完成后1个月时采集静脉血,以微量中和试验测定血清中脊灰病毒中和抗体。结果 3剂疫苗免疫后,除I-O-O组1份血清标本Ⅲ型抗体为阴性外,其余标本均产生了针对3个型别脊灰病毒的中和抗体。与I-I-I组比较,I-O-O组和I-I-O组产生了更高的抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT),除与I-O-O组的Ⅲ型抗体GMT差异无统计学意义(P>0.05)外,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.001);与O-O-O组比较,除I-I-O组的Ⅰ型抗体GMT较低外(P<0.001),I-O-O组和I-I-O组均获得了相近(P>0.05)或更高(P<0.05)的抗体GMT;I-I-O组Ⅰ型中和抗体GMT明显低于I-O-O组(P<0.05),Ⅱ型和Ⅲ型中和抗体GMT高于I-O-O组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IPV/OPV序贯免疫可提供与全程OPV免疫相似或更高的针对脊灰的免疫保护;为减少OPV相关脊灰同时维持高水平的免疫屏障,推荐采用I-I-O序贯程序。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 口服脊髓灰质炎病毒活疫苗 脊髓灰质炎灭活疫苗 中和抗体
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国产脊髓灰质炎灭活疫苗和口服减毒活疫苗序贯接种基础免疫效果评价 被引量:7
14
作者 石晓娟 刘兰 +1 位作者 周莉薇 周路平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期519-522,共4页
目的评价我国国产脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin株)和口服脊髓灰质炎减毒活疫苗序贯接种基础免疫的效果。方法采用同期非随机对照实验研究方法,于2015年9~12月期间,在宁夏回族自治区吴忠市同心县选择满2月龄健康儿童180人,按照国家规定的免... 目的评价我国国产脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin株)和口服脊髓灰质炎减毒活疫苗序贯接种基础免疫的效果。方法采用同期非随机对照实验研究方法,于2015年9~12月期间,在宁夏回族自治区吴忠市同心县选择满2月龄健康儿童180人,按照国家规定的免疫程序,分别在2、3、4月龄各接种1剂次脊髓灰质炎疫苗。将上述儿童分为两组:一组采用t OPV+t OPV+t OPV的基础免疫程序(简称O-O-O组),另一组采用国产IPV(Sabin株)+t OPV+t OPV(简称I-O-O组)序贯接种的基础免疫程序。分别采集同一受种者免疫前和完成3剂次脊髓灰质炎疫苗基础免疫后30 d的血清标本,采用微量中和试验测定血清中3个脊髓灰质炎型别(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)的抗体滴度,计算GMT及抗体保护率。结果 3剂次脊髓灰质炎疫苗基础免疫程序接种完成后,I-O-O组脊髓灰质炎Ⅱ、Ⅲ型抗体滴度均高于O-O-O组;两组均获得较好的针对3种型别脊髓灰质炎病毒的抗体保护率,差异无统计学意义(P>0.05)。结论国产IPV(Sabin株)和t OPV序贯接种的免疫程序能够提供与全程接种t OPV相似甚至更高的针对脊髓灰质炎病毒的免疫保护能力。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin株) 口服脊髓灰质炎减毒活疫苗 贯序接种 抗体滴度 保护率
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生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒 被引量:6
15
作者 衡燮 李桂兰 +7 位作者 奚光跃 温嘉纳 沈伟 何秀莲 唐成丽 廖国阳 姜述德 孙明波 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1083-1084,共2页
目的应用生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒。方法用7L、75L和550L生物反应器逐级放大培养Vero细胞,每天取样进行细胞计数。在550L生物反应器中培养脊髓灰质炎病毒,观察细胞病变,并检测病毒感染性滴度。结果一级细胞培养(灌流培养法)... 目的应用生物反应器大规模培养脊髓灰质炎病毒。方法用7L、75L和550L生物反应器逐级放大培养Vero细胞,每天取样进行细胞计数。在550L生物反应器中培养脊髓灰质炎病毒,观察细胞病变,并检测病毒感染性滴度。结果一级细胞培养(灌流培养法)、二级细胞培养(循环培养法)和三级细胞培养(批培养法)的平均细胞密度分别为2.79×106、2.38×106和1.04×106个/ml,一级培养的细胞倍增数最高;病毒培养体积达350L,病毒收获液滴度大于7.625lgCCID50∕ml。结论通过三级放大工艺,可大规模培养脊髓灰质炎病毒。 展开更多
关键词 生物反应器 脊髓灰质炎病毒 微载体 VERO细胞
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五种常用轮状病毒检测方法的评价及应用策略 被引量:15
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作者 罗明 龚成 +5 位作者 史玲莉 吴疆 张合润 王玉梅 高志勇 黄芳 《疾病监测》 CAS 2014年第3期223-227,共5页
目的比较胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)、实时荧光定量一反转录聚合酶链反应(real—timeRT—PCR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gelelectrophoresis,PAGE)5种常... 目的比较胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)、实时荧光定量一反转录聚合酶链反应(real—timeRT—PCR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gelelectrophoresis,PAGE)5种常用的轮状病毒检测方法的准确性。方法取A组轮状病毒阳性标本,绥:1×10’~1×10。10倍系列稀释,采用上述5种方法平行检测,比较检测限;选择分别含有以下9种病原体且轮状病毒证实为阴性的粪便标本作为阴性对照:脊髓灰质炎病毒疫苗株I~Ⅲ型、肠道病毒EV71、柯萨奇病毒A16、ECHO病毒6、诺如病毒I型、诺如病毒Ⅱ型和星状病毒,采用上述5种方法平行检测,比较特异性;采用上述方法,分别对184例婴幼儿腹泻粪便标本进行检测,以PAGE检测结果作为参考标准,比较其余4种方法的灵敏度和特异性。结果上述5种方法检测A组轮状病毒的检测限相差5个数量级,分别为:real—timeRT—PCR法10^-6稀释度,胶体金法10。稀释度,ELISA和PAGE方法均为1012稀释度,RT.PCR法10。稀释度;5种方法对9种对照病原体均无交叉反应;以PAGE方法检测结果作为标准,real—timeRT—PCR、ELISA、胶体金和RT—PCR灵敏度分别为95.45%、96.97%、93.94%和62.12%,特异性分别为82.2%、86.44%、82.20%和94.07%。结论PAGE作为检测轮状病毒的经典方法,具有高特异性,可用于确认实验;real—timeRT—PCR方法检测A组轮状病毒的灵敏度优于其他4种方法,可用于轮状病毒的高通量检测;ELISA和胶体金方法具有良好的灵敏度与特异性,且胶体金方法成本低,可用于初筛检测;行业标准推荐的RT-PCR方法特异性较高,但灵敏度较低,有待改进。 展开更多
关键词 轮状病毒 实时荧光定量一反转录聚合酶链反应 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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应用二倍体细胞培养脊髓灰质炎病毒适宜条件的研究 被引量:5
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作者 廖国阳 李卫东 +5 位作者 姜述德 李华 赵玮 余华 段可谦 侯宗柳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期42-44,共3页
目的 为用KMB17细胞制备口服脊髓灰质炎减毒活疫苗提供适宜条件。方法 检测不同培养液、不同代次、不同细胞龄和不同病毒感染量等因素对病毒滴度及产量的影响。结果 细胞对脊髓灰质炎病毒的敏感性随细胞龄的增加而降低,培养后24、48、7... 目的 为用KMB17细胞制备口服脊髓灰质炎减毒活疫苗提供适宜条件。方法 检测不同培养液、不同代次、不同细胞龄和不同病毒感染量等因素对病毒滴度及产量的影响。结果 细胞对脊髓灰质炎病毒的敏感性随细胞龄的增加而降低,培养后24、48、72和96h单个细胞中脊髓灰质炎病毒产量分别为986、745、594和237 Lo-.gTCID50;细胞感染脊髓灰质炎病毒后出现细胞病变时间跨度大于48h,早期从病变细胞释放出的病毒在培养上清中不稳定,感染性滴度每24h降低0.25 LogTCID50以上。结论 KMB17细胞培养脊髓灰质炎病毒的感染性滴度和产毒量受培养液营养成分和病毒接种时细胞龄等条件的影响。 展开更多
关键词 二倍体细胞 脊髓灰质炎病毒 滴度 培养条件
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2011-2012年河北省急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒血清型的分布 被引量:5
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作者 崔志强 赵娜 +5 位作者 张俊棉 陈玫 丛艳丽 郭玉 张振国 李琦 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期33-36,共4页
为了解2011~2012年河北省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)的血清型分布,探讨这些病毒与AFP的关系,本研究按照世界卫生组织要求,对河北省AFP病例粪便标... 为了解2011~2012年河北省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)的血清型分布,探讨这些病毒与AFP的关系,本研究按照世界卫生组织要求,对河北省AFP病例粪便标本利用人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞和转人脊髓灰质炎病毒受体的小鼠肺(Mouse cell line expressing the gene for the human cellular receptor for poliovirus,L20B)细胞进行病毒分离。筛检出NPEV毒株后,进行VP1区核苷酸序列测定,使用分子定型方法对NPEV进行血清型别鉴定。结果显示,在2011-2012年AFP病例中分离到的82株NPEV中共鉴定出A组人肠道病毒(HEV-A)42株(55.3%),包含4个血清型;B组人肠道病毒(HEV-B)34株(44.7%),包含13个血清型别,未鉴定出c组和D组人肠道病毒。另外还有2株腺病毒,4株未定型NPEV。HEV—A组中又以肠道病毒71型(EV-A71)为主要型别,在HEV-A中比例高达85.7%。2011-2012年河北省AFP病例中分离到的NPEV以HEV-A居多,尤其是EV-A71,为AFP病例中的优势毒株。 展开更多
关键词 河北省 急性弛缓性麻痹 非脊髓灰质炎肠道病毒 血清型
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山西省2014年Ⅱ型疫苗衍生脊髓灰质炎病毒的基因特性分析 被引量:6
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作者 严冬梅 李晓嫘 +6 位作者 张勇 杨建芳 祝双利 王东燕 张创业 朱晖 许文波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期157-163,共7页
2010年世界卫生组织(World Health Organization,WHO)对Ⅱ型疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Vaccinederived Poliovirus,VDPV)定义进行了修订,为研究新定义的Ⅱ型VDPV的基因特征及进化,本研究对山西省2014年1例急性弛缓性麻痹(Acu... 2010年世界卫生组织(World Health Organization,WHO)对Ⅱ型疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Vaccinederived Poliovirus,VDPV)定义进行了修订,为研究新定义的Ⅱ型VDPV的基因特征及进化,本研究对山西省2014年1例急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例中分离到的1株Ⅱ型VDPV进行全基因组序列测定和分析。测序显示毒株的基因全长为7 439个碱基,共编码2207个氨基酸,与Sabin2疫苗株相比不存在碱基的插入和缺失。该毒株在已知的减毒位点5′非编码区nt481上发生了回复突变,而在另一个减毒位点VP1衣壳编码区nt2909位点上未发生核苷酸变异。毒株与Sabin1发生重组,重组位点位于3D非结构编码区的nt6 247~6 281之间。VP1编码区基因进化树分析表明山西Ⅱ型VDPV的进化独立于国内外至今发现的其它Ⅱ型VDPVs,按照脊灰已知的基因进化速率估算该毒株已在人群中循环约176d。本研究再次证明了中国脊灰实验室网络监测的敏感性,能够及时准确地发现VDPV,在中国维持无脊灰状态过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 山西 疫苗衍生脊髓灰质炎病毒 基因特征
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全球消灭脊髓灰质炎行动25周年的回顾与展望:消灭最后的千分之一 被引量:5
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作者 张志将 雷正龙 +2 位作者 谢铮 尹慧 郭岩 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第27期3167-3170,共4页
自1988年的第41届世界卫生大会发起"全球消灭脊髓灰质炎行动",至2013年第66届世界卫生大会已经25周年。本文总结了这25年间全球和中国在消灭脊髓灰质炎行动中所取得的成果及目前存在的主要障碍,并展望下一阶段的目标。
关键词 脊髓灰质炎 全球消灭脊髓灰质炎行动 全球健康 公共卫生
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