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基于细胞焦亡途径研究槲皮素对小鼠酒精性肝损伤的保护作用 被引量：1
1
作者 苏艳宾 王立娟 +2 位作者 朱明轮 朱海东 祝芳 《营养学报》 北大核心 2025年第2期164-169,共6页
目的探究槲皮素对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及可能机制。方法将48只小鼠随机分成6组,分别为正常对照(NC)组、酒精性肝损伤(ALI)组、还原型谷胱甘肽(GSH)组、槲皮素低(Que-L)、中(Que-M)、高剂量(Que-H)组,每组8只。各干预组灌胃给药(1... 目的探究槲皮素对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及可能机制。方法将48只小鼠随机分成6组,分别为正常对照(NC)组、酒精性肝损伤(ALI)组、还原型谷胱甘肽(GSH)组、槲皮素低(Que-L)、中(Que-M)、高剂量(Que-H)组,每组8只。各干预组灌胃给药(12.5 ml/kg),NC组及ALI组灌胃给予等体积生理盐水,连续14 d后,ALI组及各药物组采用52%vol衡水老白干(12.5 ml/kg)灌胃,每日1次,连续3次,诱导急性肝损伤,NC组处理同前14 d;末次灌胃结束,禁食不禁水16 h后小鼠称重、采集血液、处死小鼠采集肝组织;采用微板法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,ELISA法检测肝组织乳酸脱氢酶(LDH)、TBA法检测肝组织丙二醛(MDA)水平,HE染色后光镜下观察肝组织病理改变情况,Westernblot法检测细胞焦亡相关蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶(Caspase)-1、Caspase-11、白介素(IL)-1β的表达。结果与NC组相比,ALI组血清ALT、AST、肝组织LDH、MDA水平及焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、Caspase-11、IL-1β表达均显著升高(P<0.01);肝组织出现明显病理改变;与ALI组相比,各干预组血清ALT、AST、肝组织LDH、MDA水平及焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、Caspase-11、IL-1β表达均显著降低(P<0.05~0.01),肝组织病理损伤明显改善。结论槲皮素可能通过下调细胞焦亡途径相关蛋白的表达而对酒精性肝损伤起到保护作用。 展开更多
关键词 槲皮素 酒精性肝损伤 细胞焦亡 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3
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精神分裂症患者血清细胞因子与临床疗效的关系
2
作者 丁敏利 史晗 +2 位作者 李文强 杨勇锋 吕路线 《临床心身疾病杂志》 2025年第5期7-10,24,共5页
目的 分析精神分裂症患者血清细胞因子与临床疗效的关系。方法 选取93例精神分裂症急性发作期患者予以单一抗精神病药物治疗6周。治疗前后,采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估患者的精神症状,采用酶联免疫吸附技术检测患者的血清细胞因... 目的 分析精神分裂症患者血清细胞因子与临床疗效的关系。方法 选取93例精神分裂症急性发作期患者予以单一抗精神病药物治疗6周。治疗前后,采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估患者的精神症状,采用酶联免疫吸附技术检测患者的血清细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-4(IL-4)以及干扰素-γ(IFN-γ)]水平。比较不同疗效患者治疗前精神症状及治疗前后的血清细胞因子水平;对治疗前血清细胞因子水平与精神症状、临床疗效间的关系采用偏相关分析。结果 93例患者治疗有效43例,无效50例。不同疗效患者治疗前PANSS评分及血清细胞因子水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同疗效患者治疗后血清IL-6、IL-17、IL-4、IFN-γ水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但治疗有效患者血清TNF-α、IL-1β水平低于治疗无效患者(P<0.05或0.01)。相关分析结果显示,患者治疗前血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、IL-4、IFN-γ水平与PANSS总分、各分量表评分及总分减分率均无显著相关性(P>0.05)。结论 精神分裂症患者血清TNF-α和IL-1β在急性发作期显著升高,且在治疗有效患者中下降更明显,二者可作为反映疾病发作期的状态性标志物。血清细胞因子与临床疗效之间无明显关联。 展开更多
关键词 精神分裂症 血清细胞因子 临床疗效
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原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白70在肝癌转移亚细胞中表达上调 被引量：14
3
作者 叶丽虹 秦宵然 +5 位作者 张晓东 齐众 钱令嘉 侯志波 王洪辉 徐少峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期244-249,共6页
建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ... 建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ,从多个差异蛋白质点中选择出 3个在M H74 0 2细胞中表达明显上调的蛋白质点进行ESI QUAD TOF质谱分析 ,并在MSDB公共蛋白数据库中进行同源比较和分析鉴定 .初步确定这 3个蛋白质分别为原肌球蛋白 (tropomyosin) ,波形纤维蛋白 (vimentin)和热休克蛋白 70 (heatshock 70protein ,HSP70 ) .这些蛋白质参与细胞骨架构成、蛋白质折叠和蛋白质相互作用等许多正常生理活动 ,并有报道原肌球蛋白和波形纤维蛋白与肿瘤转移有关 .利用蛋白质组学方法发现 ,在肝癌转移亚细胞M H74 0 2中 ,原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白 70表达明显上调 ,进一步揭示它们在肿瘤转移中具有重要的作用 . 展开更多
关键词 肝癌 蛋白质组学 肿瘤转移相关蛋白 原肌球蛋白 波形纤维蛋白 热休克蛋白70
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高转移倾向乳腺癌细胞中p-ERK促进增殖和迁移作用的信号转导途径 被引量：15
4
作者 尤嘉琮 汪宏斌 +2 位作者 杨宗伟 张晓东 叶丽虹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1007-1012,1013,共7页
在建立乳腺癌细胞MCF-7高转移倾向亚克隆LM-MCF-7细胞株的基础上,为阐明LM-MCF-7细胞具有更强增殖和迁移能力的分子机制,对其相关分子及其信号转导途径进行了探讨.免疫印迹结果显示,与MCF-7细胞相比,LM-MCF-7细胞中p-ERK1/2水平显著升高... 在建立乳腺癌细胞MCF-7高转移倾向亚克隆LM-MCF-7细胞株的基础上,为阐明LM-MCF-7细胞具有更强增殖和迁移能力的分子机制,对其相关分子及其信号转导途径进行了探讨.免疫印迹结果显示,与MCF-7细胞相比,LM-MCF-7细胞中p-ERK1/2水平显著升高.流式细胞术和“伤口愈合”实验结果表明,ERK1/2的特异性抑制剂PD98059可明显抑制LM-MCF-7细胞的高增殖和高迁移能力.免疫印迹检测发现,与MCF-7细胞相比,LM-MCF-7细胞中与增殖和迁移相关的因子,如β-catenin、细胞周期蛋白D1、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的水平呈明显增高,PD98059对这些因子水平的增高具有抑制作用.免疫荧光染色显示,LM-MCF-7细胞中β-catenin分布在细胞核中,应用PD98059处理后,β-catenin主要分布在胞浆中.上述研究结果表明,在LM-MCF-7细胞中活化的ERK1/2水平升高,是导致该细胞增殖和迁移能力增强的重要原因之一,与ERK1/2-MLCK-p-MLC和ERK1/2-β-catenin-细胞周期蛋白D1等信号转导途径有密切的关系. 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞增殖 细胞迁移 ERK1/2 信号转导途径
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灵芝制剂治疗APP/PS-1阿尔茨海默病转基因小鼠模型的病理学改变 被引量：11
5
作者 秦川 吴善球 +14 位作者 陈保生 吴小闲 屈焜耀 刘军民 张桂芳 徐艳峰 舒顺利 孙丽华 李彦红 朱华 黃澜 马春梅 徐玉环 韩云林 卢耀增 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期552-561,共10页
目的探讨灵芝制剂对APP/PS-1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的病理学改变。方法选用4月龄APP/PS-1转基因小鼠,分为AD模型组、灵芝高剂量[2250 mg/(kg·d)]组和灵芝中剂量[750 mg/(kg·d)]组,阳性对照组用盐酸多奈哌齐药物[2 mg/(kg... 目的探讨灵芝制剂对APP/PS-1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的病理学改变。方法选用4月龄APP/PS-1转基因小鼠,分为AD模型组、灵芝高剂量[2250 mg/(kg·d)]组和灵芝中剂量[750 mg/(kg·d)]组,阳性对照组用盐酸多奈哌齐药物[2 mg/(kg·d)],正常组选用C57BL/6J野生鼠。动物给药4个月后解剖观察组织病理,应用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学、特殊染色及电子显微镜超微结构观察并比较各组组织病理形态及结构差异。结果病理形态学改变:灵芝制剂组小鼠脑内老年斑降解、减少或消失;神经元纤维缠结减少或消失;淀粉样蛋白血管病明显减少;海马和齿状核的幼稚神经细胞数量比AD模型组显著增多(海马:F=1.738,P=0.016;齿状核:F=1.924,P=0.026);灵芝制剂高、中剂量组小鼠小脑浦肯野细胞较模型组丢失少(F=9.46,P=0.007;F=9.46,P=0.010);灵芝制剂组DCX免疫组织化学染色阳性显示小脑神经干细胞出现早而且数量多。电镜观察灵芝制剂组小鼠海马神经细胞较AD模型小鼠完整,核膜完好,胞质内的线粒体、内质网、高尔基体、微管结构、突触完整。小胶质细胞无异常。灵芝制剂治疗组小鼠在整个实验中未见到细胞和组织学的毒性表现。结论灵芝制剂可使AD小鼠脑内老年斑和神经元纤维缠结降解、减少或消失及淀粉样蛋白血管病变减少。 展开更多
关键词 灵芝制剂 阿尔茨海默病 老年斑 神经元纤维缠结 神经干细胞
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雷公藤多甙对老年大鼠肾小球肾炎的疗效及炎症指标的影响 被引量：18
6
作者 刘珊 刘伦志 +1 位作者 覃智慧 杨晓芬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期627-629,共3页
目的：观察雷公藤多甙对老年大鼠肾小球肾炎的疗效及炎症指标的影响。方法：将老年清洁级Wistar大鼠（18月龄）随机分为雷公藤组、对照组、模型组，在雷公藤组及模型组大鼠上建立系膜增生性肾小球肾炎模型，雷公藤组采用雷公藤干预。结... 目的：观察雷公藤多甙对老年大鼠肾小球肾炎的疗效及炎症指标的影响。方法：将老年清洁级Wistar大鼠（18月龄）随机分为雷公藤组、对照组、模型组，在雷公藤组及模型组大鼠上建立系膜增生性肾小球肾炎模型，雷公藤组采用雷公藤干预。结果：实验12周后，模型组及雷公藤组大鼠24 h尿蛋白均显著高于实验前及对照组水平（ P＜0．05）；雷公藤组24 h尿蛋白显著小于模型组（P＜0．05）。实验12周后，模型组及雷公藤组TG、TC均显著高于对照组（P＜0．05），同时ALB显著低于对照组（P＜0．05）。雷公藤组大鼠TG及TC显著低于模型组（P＜0．05），但ALB显著高于模型组（P＜0．05）。实验12周后，雷公藤组大鼠肾脏病理分级为0～1级的比例显著高于模型组（χ^2＝6．667，P＝0．010）。实验12周后，与对照组及雷公藤组相比较，模型组肾小球系膜TNF-α及IL-6表达量显著升高（P＜0．05）。结论：雷公藤多甙可以抑制老年肾小球肾炎大鼠肾小球系膜内炎症因子的表达，改善组织学表现及临床症状。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 老年大鼠 雷公藤多甙 炎症因子
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应用基因表达谱芯片从不同转移能力的乳腺癌细胞中筛选转移相关基因 被引量：9
7
作者 叶丽虹 尤嘉琮 +7 位作者 乔玲 蔡娜 王长晔 刘毅 吴晶辉 吴莲英 王洪辉 张晓东 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期421-428,共8页
人乳腺癌细胞系MCF-7及其转移亚克隆LM-MCF-7为肿瘤转移分子机制的研究提供了细胞模型.应用基因芯片技术比较两种具有不同转移能力细胞系基因表达谱的差异,寻找乳腺癌转移相关基因.提取两种细胞总RNA,分别用Cy5-dCTP、Cy3-dCTP标记LM-MC... 人乳腺癌细胞系MCF-7及其转移亚克隆LM-MCF-7为肿瘤转移分子机制的研究提供了细胞模型.应用基因芯片技术比较两种具有不同转移能力细胞系基因表达谱的差异,寻找乳腺癌转移相关基因.提取两种细胞总RNA,分别用Cy5-dCTP、Cy3-dCTP标记LM-MCF-7和MCF-7的cDNA,并与含有21329个基因的芯片进行杂交并扫描,利用GenePixPro4.0图像分析软件处理数据判断基因是否在两个细胞中存在表达差异.经互换荧光标记物重复两次实验,共筛选出差异表达基因67个,其中41个在LM-MCF-7细胞中表达上调,26个在LM-MCF-7细胞中表达下调.应用实时定量RT-PCR对7个表达差异明显的基因进行了验证.生物信息学分析结果提示,上述发现的差异基因编码产物与细胞内信号转导、转录调节、应激反应、新陈代谢、发育、细胞运动、细胞凋亡和细胞粘连等功能有关.据文献报道,这些差异表达的基因中有35个与肿瘤有关,其中9个与乳腺癌转移有关,6个可能参与肿瘤浸润和转移过程.根据基因芯片检测的结果,从功能上对LM-MCF-7细胞和MCF-7细胞与细胞凋亡的关系进行了研究,发现具有高转移倾向的LM-MCF-7细胞与MCF-7细胞相比,抗凋亡能力较强.上述与肿瘤转移相关基因在肿瘤转移中的作用及其分子机理有待深入研究. 展开更多
关键词 基因芯片 基因表达谱 乳腺癌 肿瘤转移
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人间充质干细胞抑制肝癌细胞增殖的作用及其基因表达谱分析 被引量：8
8
作者 乔玲 赵铁军 +2 位作者 山长亮 叶丽虹 张晓东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1037-1044,共8页
干细胞移植治疗肿瘤具有重要的临床价值.应用人间充质干细胞条件培养液作用H7402肝癌细胞,拟探讨间充质干细胞对肿瘤细胞的抑制作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的Z3间充质干细胞和胎儿骨... 干细胞移植治疗肿瘤具有重要的临床价值.应用人间充质干细胞条件培养液作用H7402肝癌细胞,拟探讨间充质干细胞对肿瘤细胞的抑制作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的BMMS-03间充质干细胞的条件培养液作用于H7402肝癌细胞,采用软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪技术、基因芯片技术和免疫印迹技术观察H7402细胞的克隆形成、增殖和基因表达谱变化.结果显示,H7402细胞在间充质干细胞条件培养液作用下,克隆形成和增殖受到了明显抑制;基因芯片检测结果显示,H7402细胞在间充质干细胞条件培养液作用下有23个基因上调表达,17个基因下调表达,这些差异表达的基因与细胞的转录调控、新陈代谢、信号转导、细胞周期、应激反应和细胞粘附等功能相关.本实验结果表明,人间充质干细胞对H7402肝癌细胞的克隆形成和增殖具有抑制作用,并有多种基因的表达发生改变,这些基因表达的改变可能参与了对上述肿瘤细胞的抑制. 展开更多
关键词 间充质干细胞 肝癌细胞 克隆形成 增殖 基因表达
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应用SCID鼠筛选肝癌转移性亚克隆及M-H7402亚细胞系的建立 被引量：4
9
作者 叶丽虹 秦宵然 +7 位作者 张晓东 王洪辉 蒋斯明 王长晔 吴晶辉 朱惠芳 赵轼轩 蔡兵 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期120-124,共5页
本研究应用人肝癌细胞SCID鼠转移模型,筛选和建立肝癌转移细胞系,旨在为肝癌转移研究提供实验材料.采用人肝癌细胞H7402,腋后背部皮下接种SCID鼠,接种后66天时,在荷瘤鼠羸弱时引颈处死,取其肺组织,进行原代细胞培养和传代培养,获得肝癌... 本研究应用人肝癌细胞SCID鼠转移模型,筛选和建立肝癌转移细胞系,旨在为肝癌转移研究提供实验材料.采用人肝癌细胞H7402,腋后背部皮下接种SCID鼠,接种后66天时,在荷瘤鼠羸弱时引颈处死,取其肺组织,进行原代细胞培养和传代培养,获得肝癌细胞H7402的亚细胞克隆,命名为M-H7402.然后,对M-H7402细胞进行了生物学鉴定,检测了细胞形态、染色体、细胞动力学、细胞周期、甲胎蛋白表达、癌基因表达和转移相关基因表达等指标.结果显示,M-H7402细胞的生长、增殖和形态等与亲本细胞H7402十分相近,其染色体形态仍为人类核型,众数维持在72～80之间,占75.0%.RT-PCR检测结果显示,M-H7402细胞甲胎蛋白表达为阳性.Western blot检测结果显示,与亲本细胞H-7402相比,癌基因C-myc表达水平较高,转移抑制基因nm23的表达水平明显下调.从肺组织中获得的肝癌转移细胞系M-H7402,在体外可连续传代培养,细胞形态不变.应用SCID鼠筛选获得的亚细胞克隆,与亲本细胞形成配对关系,可为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料. 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤转移 SCID鼠 细胞系 染色体 癌基因
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芍药内酯苷对放射线辐照法致血虚免疫抑制小鼠的补血作用及机制研究 被引量：9
10
作者 王成龙 王林元 +5 位作者 朱映黎 瞿研 吴丽 王莎 费文婷 张建军 《环球中医药》 CAS 2017年第7期782-787,共6页
目的研究芍药内酯苷对放射线辐照诱导血虚小鼠的补血作用及调控机制。方法采用放射线辐照法复制小鼠血虚模型,以四物颗粒和芍药苷为阳性对照药,灌胃芍药内酯苷,检测外周血象、脾脏指数及分离血清,用放射免疫法检测其白细胞介素-1、粒细... 目的研究芍药内酯苷对放射线辐照诱导血虚小鼠的补血作用及调控机制。方法采用放射线辐照法复制小鼠血虚模型,以四物颗粒和芍药苷为阳性对照药,灌胃芍药内酯苷,检测外周血象、脾脏指数及分离血清,用放射免疫法检测其白细胞介素-1、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)的含量变化并采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测脾脏中GM-CSF和TNF-α的基因表达。结果与模型组比较,芍药内酯苷30 mg/kg组对白细胞数、脾脏指数均有升高作用(P<0.05),对GM-CSF含量水平亦有升高作用(P<0.05),但降低TNF-α的含量水平(P<0.01)及脾脏中TNF-αmRNA的表达(P<0.01)。结论芍药内酯苷作为白芍的特征性有效成分,通过对造血细胞因子的调控作用对抗放射线辐照所致的血虚状态,提示其为白芍养血敛阴功效的物质基础之一。 展开更多
关键词 芍药内酯苷 放射线辐照法 血虚证 造血细胞因子
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ⅢA期食管癌组织肿瘤转移相关蛋白1表达与预后的相关性 被引量：6
11
作者 刘涛 张瑜红 +5 位作者 郭建极 孙宇 陈铭伍 冼磊 胡松 周华富 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期3670-3673,共4页
目的探讨食管癌组织肿瘤转移相关蛋白1(MTA1)表达与临床特征及预后的关系。方法采用转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测106例ⅢA期食管癌患者和75例食管良性病变组织MTA1表达的相对水平,分析MTA1表达与临床特征的关系,采用Kap... 目的探讨食管癌组织肿瘤转移相关蛋白1(MTA1)表达与临床特征及预后的关系。方法采用转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测106例ⅢA期食管癌患者和75例食管良性病变组织MTA1表达的相对水平,分析MTA1表达与临床特征的关系,采用Kaplan-Meier进行生存分析了解MTA1表达与食管癌预后的关系。结果 106例食管癌组织中MTA1蛋白43例表达,表达率40.6%,75例食管良性病变表达9例,表达率12.0%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);MTA1蛋白表达水平与食管癌T分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别、病理类型、分化程度、淋巴结转移个数、肿瘤最大径、肿瘤位置等均无关(P>0.05);Kaplan-Meier生存分析显示MTA1蛋白表达出现复发转移中位时间10.0个月,无表达者出现复发转移中位时间13.0个月,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);MTA1蛋白表达中位生存期16.0个月,无表达者中位生存期18.0个月,两者比较无统计学意义(P>0.05)。结论 MTA1表达水平与食管癌T分期关系密切,参与ⅢA期食管癌复发转移,但不影响食管癌患者总生存期。 展开更多
关键词 肿瘤转移相关蛋白1 食管癌 总生存期
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氧化苦参碱干预TGF-β1诱导A549细胞上皮-间质转化作用研究 被引量：9
12
作者 刘蕾 马壮 +1 位作者 谢华 孙文武 《陕西医学杂志》 CAS 2016年第11期1441-1444,共4页
目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化的干预作用,期望为肺纤维化治疗提供新的候选药物。方法:选用0.25、0.5、1mg/ml氧化苦参碱预处理A549细胞30min后,再给与(5ng/ml)TGF-β1共孵育培养48h,MT... 目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化的干预作用,期望为肺纤维化治疗提供新的候选药物。方法:选用0.25、0.5、1mg/ml氧化苦参碱预处理A549细胞30min后,再给与(5ng/ml)TGF-β1共孵育培养48h,MTT法检测细胞增殖变化,光镜下观察细胞形态变化,Western blot检测TGF-β1下游信号分子Smad2/3磷酸化变化和EMT标志分子E-candherin、N-cadherin和Vimentin表达变化。结果:氧化苦参碱能有效干预TGF-β1诱导A549细胞细胞增殖、细胞形态变化,抑制TGF-β1介导的Smad2/3磷酸化和E-candherin表达下调、N-cadherin和Vimentin表达上升。结论:氧化苦参碱能有效抑制TGF-β1诱导A549细胞上皮-间质转化,氧化苦参碱可以作为抗肺纤维化治疗的候选药物。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 肺纤维化/病理生理学 转化生长因子Β1 上皮细胞 细胞系 转化
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人胎儿骨髓间充质干细胞的分离及生物学鉴定 被引量：3
13
作者 张晓东 徐治立 +7 位作者 叶丽虹 东楠 赵春华 蔡兵 王洪辉 吴晶辉 王长晔 蔡娜 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期107-110,共4页
通过原代细胞培养,从引产胎儿骨髓组织中分离干细胞,然后进行生物学鉴定,旨在体外建立培养胎儿骨髓干细胞的有效方法,为进一步研究干细胞奠定基础．本研究对四个月的引产胎儿骨髓组织进行原代细胞培养,采用贴壁筛选法,在含有15％胎牛血... 通过原代细胞培养,从引产胎儿骨髓组织中分离干细胞,然后进行生物学鉴定,旨在体外建立培养胎儿骨髓干细胞的有效方法,为进一步研究干细胞奠定基础．本研究对四个月的引产胎儿骨髓组织进行原代细胞培养,采用贴壁筛选法,在含有15％胎牛血清的L-DMEM／IMDM(1:1)混和培养液中培养,7 d后细胞可长满瓶底．显微镜下观察,细胞形态均一,呈长梭形．传代后,在8代以内的细胞贴壁能力较强,生长速度较快．将其命名为BMMS-03．在第3代时,对培养的细胞进行了于细胞标志物的生物学鉴定,采用流式细胞仪对经免疫荧光染色的细胞进行检测．结果显示:97．2％的细胞呈CD105阳性反应,66．0％的细胞呈CD106阳性反应, 9．2％的细胞呈CD34阳性反应．阴性对照组阳性反应为0．5％．生物学鉴定的初步结果提示,从胎儿骨髓组织中分离培养成功的细胞为骨髓间充质干细胞,其细胞形态学特征、CD105+、CD106+和CD34-的检测结果均符合间充质干细胞的特征．本研究成功地建立了体外培养胎儿骨髓间充质干细胞的有效方法,所获得的间充质干细胞纯度较高,增殖较快,适用于干细胞生物学和组织工程学的研究． 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 胎儿 流式细胞术 干细胞标志物
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小鼠肺间质树突状细胞的分离、纯化与鉴定 被引量：3
14
作者 王宏伟 陆江阳 +4 位作者 田光 刘茜 赵敏 杨毅 康佳蕊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期814-817,831,共5页
目的：建立肺间质树突状细胞（DCs）的分离与纯化方法,为肺间质DCs的相关研究提供实验基础。方法：雄性BALB/c小鼠肺组织经Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心、CD11c＋免疫磁珠分选纯化DCs,流式细胞术鉴定分选DCs纯度,倒置相差显微镜观察孵... 目的：建立肺间质树突状细胞（DCs）的分离与纯化方法,为肺间质DCs的相关研究提供实验基础。方法：雄性BALB/c小鼠肺组织经Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心、CD11c＋免疫磁珠分选纯化DCs,流式细胞术鉴定分选DCs纯度,倒置相差显微镜观察孵育细胞生长状态,扫描电镜和透射电镜观察DCs超微形态,流式细胞术检测肺间质DCs的CD11c、CD11b、CD86和I-Ab表型。结果：分选获得的肺间质DCs经鉴定,纯度为92.59%±5.62%,在RPMI1640培养基中生长状态良好,少数细胞形成小细胞集落。DCs超微形态观察显示细胞表面多见长1~2μm密集的树枝状突起,细胞器不发达,细胞核形不规则。90%以上肺间质DCs为未成熟状态或前体DCs,低表达成熟标志物I-Ab和CD86,并具有异质性,近40%起源于髓系细胞分化。结论：密度梯度离心和免疫磁珠分选是分离、纯化肺间质DCs的理想方法,获得的DCs纯度高、活性好、免疫表型稳定,但操作步骤比较复杂,技术要求高。 展开更多
关键词 肺 树突状细胞 免疫磁珠 CD11C
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白细胞介素10的免疫调节作用研究新进展 被引量：8
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作者 陈建粮 李晓玫 王海燕 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 1998年第2期147-151,共5页
白细胞介素１０的免疫调节作用研究新进展陈建粮李晓玫王海燕综述关键词细胞因子白细胞介素１０免疫调节免疫调节异常在免疫相关性疾病的发生和发展中起着重要的作用。参与免疫调节的因素众多，其中包括各种细胞因子。近年来的研究发现... 白细胞介素１０的免疫调节作用研究新进展陈建粮李晓玫王海燕综述关键词细胞因子白细胞介素１０免疫调节免疫调节异常在免疫相关性疾病的发生和发展中起着重要的作用。参与免疫调节的因素众多，其中包括各种细胞因子。近年来的研究发现，白细胞介素１０（Ｉｎｔｅｒｌｅｕ... 展开更多
关键词 细胞因子 免疫调节 信号转导机制 IL-10 分泌
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免疫吸附清除循环肿瘤坏死因子-α对内毒素休克兔肠道改变的影响 被引量：8
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作者 林跃萍 张训 侯凡凡 《中国危重病急救医学》 CSCD 1999年第8期469-471,共3页
目的：用抗肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）免疫吸附法特异性清除循环ＴＮＦα，观察其对内毒素休克兔肠道改变的影响。方法：以致死剂量内毒素（８×１０９ＣＦＵ／ｋｇ）制成内毒素休克兔模型后分为对照组（ｎ... 目的：用抗肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）免疫吸附法特异性清除循环ＴＮＦα，观察其对内毒素休克兔肠道改变的影响。方法：以致死剂量内毒素（８×１０９ＣＦＵ／ｋｇ）制成内毒素休克兔模型后分为对照组（ｎ＝７）及免疫吸附组（ｎ＝１０）。６０分钟后开始体外循环免疫吸附，监测平均动脉压（ＭＡＰ），观察２组循环ＴＮＦα水平。３６０分钟活杀动物，取小肠行组织病理检查。结果：①免疫吸附组血液灌流后９０分钟ＭＡＰ开始回升〔（１１．６±１．４）ｋＰａ，１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ〕，此后一直高于对照组（Ｐ均＜０．０５）。②免疫吸附组１２０分钟以后ＴＮＦα活性均较对照组明显降低（Ｐ均＜０．０５）。③免疫吸附组肠粘膜损害程度较对照组明显减轻。结论：抗ＴＮＦαＭｃＡｂ特异性免疫吸附方法能有效清除循环ＴＮＦα，减轻肠道的病理损害。 展开更多
关键词 内毒素休克 肿瘤坏死因子 免疫吸附 肠道
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大鼠脑损伤海水浸泡后损伤脑组织小胶质细胞炎性改变 被引量：5
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作者 王伟 赵全军 +4 位作者 刘爽 王涛 史铁钧 王淑为 郭欣茹 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2016年第6期421-425,共5页
目的观察创伤性脑损伤合并海水浸泡后损伤脑组织的炎性反应及小胶质细胞的炎性改变。方法利用改良的自由落体打击模型构建重型创伤性脑损伤大鼠模型,并于损伤处持续滴注海水45min。分别于海水浸泡结束后第24、48、72、96h取脑组织,以HE... 目的观察创伤性脑损伤合并海水浸泡后损伤脑组织的炎性反应及小胶质细胞的炎性改变。方法利用改良的自由落体打击模型构建重型创伤性脑损伤大鼠模型,并于损伤处持续滴注海水45min。分别于海水浸泡结束后第24、48、72、96h取脑组织,以HE染色观察损伤脑组织病理变化,以免疫组化DAB显色,观察小胶质细胞的特异性抗体CD11b/c和CD68阳性细胞的数量及分布情况。结果 HE染色可见海水浸泡组24h可见神经细胞水肿明显,细胞核深染,核周大量空泡形成并伴有明显的出血;48h细胞水肿更加明显,细胞杂乱无章,核固缩畸形,细胞周围开始出现大空泡并伴有大量血细胞浸润;海水浸泡72h及96h组局部出血消退,脑细胞水肿不再继续加重,仍可见明显细胞核固缩畸形,细胞周围大小空泡浸润脑组织呈网格状改。DAB显色可见海水浸泡组24h时CD11b/c及CD68阳性小胶质细胞大量聚集、活化于损伤组织表面,48h时聚集于损伤脑组织内,可呈多层分布,可见明显的吞噬行为;72h及96h组细胞数目已较48h组明显减少,可见局部组织中细胞密度降低,细胞吞噬行为明显减少;相同时间点CD68阳性的细胞数目均明显多于CD11b/c阳性细胞(均P<0.01)。结论脑损伤海水浸泡后72h内脑组织炎性反应最为强烈,小胶质细胞大量聚集活化,72h及96h后逐渐减弱并趋于平稳。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 海水浸泡 炎症 小胶质细胞 CD11b/c CD68
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人间充质干细胞抑制乳腺癌细胞增殖作用的实验研究 被引量：5
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作者 乔玲 叶丽虹 张晓东 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期73-78,共6页
应用人间充质干细胞作用肿瘤细胞,拟揭示间充质干细胞对肿瘤细胞的作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的 Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的 BMMS-03间充质干细胞的条件培养液作用于乳腺癌 MCF-... 应用人间充质干细胞作用肿瘤细胞,拟揭示间充质干细胞对肿瘤细胞的作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的 Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的 BMMS-03间充质干细胞的条件培养液作用于乳腺癌 MCF-7细胞,观察 MCF-7细胞增殖和迁移能力的变化.结果显示,应用 BrdU 掺入分析和流式细胞仪测定等方法发现,在间充质干细胞条件培养液的作用下,MCF-7细胞的增殖受到了明显抑制;应用划痕实验和琼脂糖滴实验发现,MCF-7细胞的迁移能力也受到明显抑制.结果表明,人间充质干细胞对乳腺癌细胞的增殖和迁移具有抑制作用。 展开更多
关键词 间充质干细胞 乳腺癌细胞 增殖 迁移
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宫颈癌人乳头瘤病毒感染与CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的相关性研究 被引量：8
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作者 侯友翔 张园 +1 位作者 钟薇 古丽娜.库尔班 《新疆医科大学学报》 CAS 2013年第12期1749-1752,共4页
目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒(HPV)感染与T细胞亚群、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组(40例)、正常对照组(20例)的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4+CD25+Foxp3+T... 目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒(HPV)感染与T细胞亚群、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组(40例)、正常对照组(20例)的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率。结果 HPV阳性的患者外周血T细胞亚群与HPV阴性的患者比较,差异无统计学意义(P>0.05),但调节性T细胞(Treg)在HPV阳性与阴性组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞呈显著正相关(r=0.613,P<0.05)。结论宫颈癌患者免疫功能与正常人无明显差异,Treg细胞与宫颈癌患者HPV持续感染、肿瘤免疫逃避密切相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 调节性T细胞 人乳头瘤病毒
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Bcl-2家族蛋白和乙肝病毒x蛋白在肝癌组织中的表达和意义 被引量：2
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作者 张晓东 东楠 +9 位作者 叶丽虹 殷丽辉 汪宁 张航 尤嘉琮 王洪辉 沈中阳 孙智才 魏国红 梅兴明 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期84-88,共5页
应用免疫组织化学方法检测了34例肝癌组织及其相对应的癌旁组织,探讨了Bcl-2家族中七种基因(包括促凋亡基因Bak、Bad、Bid、Bax和Bcl-xs及抑凋亡基因Bcl-2、Bcl-w)和乙肝病毒三种抗原(包括HBsAg、HBcAg和HBxAg)在肝癌组织中的表达及意义... 应用免疫组织化学方法检测了34例肝癌组织及其相对应的癌旁组织,探讨了Bcl-2家族中七种基因(包括促凋亡基因Bak、Bad、Bid、Bax和Bcl-xs及抑凋亡基因Bcl-2、Bcl-w)和乙肝病毒三种抗原(包括HBsAg、HBcAg和HBxAg)在肝癌组织中的表达及意义,结果显示:在肝癌组织中HBsAg、HBcAg和HBxA的阳性率分别为58.8％、26.5％和76.5％、Bcl-2七种蛋白的阳性率分别为58.8％(Bak)、55.9％(Bad)、44.1％(Bid)、41.2％(Bax)、29.4％(Bcl-xs)、35.3％(Bcl-w)和41.2％(Bcl-2)。这七种Bcl-2蛋白的表达均位于肝癌细胞的胞浆,多呈弥漫性分布,少数阳性颗粒呈散在性分布,研究发现,Bcl-2家族中抑凋亡基因Bcl-w和Bcl-2在癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁组织(P<O.05),本结果表明,Bcl-2家族蛋白在HBV感染的肝癌组织中过量表达,参与肝细胞的凋亡调控,与肝癌的发生和发展有关, 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 乙肝病毒X蛋白 BCL-2家族 细胞凋亡 免疫组化
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