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慢性低氧通过肝因子ANGPTL3介导的线粒体损伤与脂肪产热抑制降低耐寒能力
1
作者 黄榆杰 黄玲芳 +2 位作者 郑明海 熊坤 谭小玲 《陆军军医大学学报》 北大核心 2026年第1期54-62,共9页
目的探讨肝因子血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like 3,ANGPTL3)在慢性低氧暴露导致耐寒能力下降中的作用及机制。方法①7~8周龄、体质量220~260 g的雄性SD大鼠随机分为(n=20):常氧组[N组,海拔308 m、(24.0±0.5)℃常氧环境饲养]... 目的探讨肝因子血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like 3,ANGPTL3)在慢性低氧暴露导致耐寒能力下降中的作用及机制。方法①7~8周龄、体质量220~260 g的雄性SD大鼠随机分为(n=20):常氧组[N组,海拔308 m、(24.0±0.5)℃常氧环境饲养]和低氧组[H组,模拟海拔5800 m、(24.0±0.5)℃低压氧舱饲养],每组选取12只大鼠在腹腔埋入可测体温的植入子用于后续测核心体温(core body temperature,Tc)。②雄性SD大鼠随机分为(n=20):低氧(H)组和低氧+ANGPTL3抑制剂(每周Vupanorsen 2 mg/kg腹腔注射1次)干预(H+V)组,每组选取12只大鼠在腹腔埋入可测体温的植入子用于后续测Tc,大鼠均于模拟海拔5800 m、(24.0±0.5)℃低压氧舱饲养。6周后,每组取未埋入植入子的8只大鼠采集血液及肝组织,自动生化分析仪测定血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,ELISA法检测血液肝因子水平,透射电镜观察肝细胞线粒体形态,Western blot检测肝组织ANGPTL3蛋白水平。每组埋入植入子的12只大鼠分别置于低氧寒冷环境(模拟海拔5800 m、6℃)下24 h或置于常氧寒冷环境(海拔308 m、-10℃)下6 h,用生理信号遥测系统检测Tc以评价耐寒能力,Western blot检测皮下白色脂肪组织的解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)蛋白水平以评估白色脂肪棕色化程度。结果①与低氧常温环境(5800 m、24℃)暴露相比,H组大鼠在低氧寒冷环境(5800 m、6℃)暴露后的Tc显著降低(P<0.05)。②常氧寒冷环境下(308 m、-10℃、6 h),N组和H组大鼠Tc均显著下降,且H组Tc显著低于N组(P<0.05)。③与N组相比,H组大鼠血清ANGPTL3水平显著增加(t=7.3,df=10,95%CI:2.553~2.687,P<0.0001),肝脏ANGPTL3蛋白水平也显著增加(t=6.532,df=10,95%CI:26.98~54.92,P<0.0001)。④与H组相比,H+V组大鼠血清ANGPTL3水平显著降低(t=7.803,df=10,95%CI:-196.8~-109.4,P=0.0004),肝脏ANGPTL3蛋白水平也显著降低(t=3.514,df=10,95%CI:-66.14~-14.81,P=0.006)。⑤在常氧寒冷环境暴露(308 m、-10℃、6 h),H组和H+V组大鼠Tc均显著下降,且H+V组Tc显著高于H组(95%CI:-0.629~-0.452,P=0.0004)。⑥在低氧寒冷环境暴露(5800 m、6℃、24 h),H组和H+V组大鼠Tc均显著下降,且H+V组Tc显著高于H组(95%CI:-0.568~-4.431,P=0.0181)。⑦与N组相比,H组大鼠肝细胞线粒体形态结构明显损伤、血清AST水平显著升高(t=14.15,df=14,95%CI:51.61~70.04,P<0.0001)。⑧与H组相比,H+V组大鼠肝细胞线粒体形态结构显著改善、血清AST水平显著下降(t=4.879,df=14,95%CI:-47.24~-18.39,P=0.0002)。⑨在低氧寒冷环境暴露(5800 m、6℃、24 h)后,与H组相比,H+V组大鼠皮下白色脂肪组织中UCP1蛋白水平显著增加(t=2.26,df=10,95%CI:0.849~118.1,P=0.047)。结论慢性低氧暴露可促使肝脏ANGPTL3水平增加并释放入血,进而通过损伤肝细胞线粒体以及抑制白色脂肪棕色化潜能,导致耐寒能力下降。 展开更多
关键词 ANGPTL3 低氧 耐寒能力 线粒体 白色脂肪棕色化
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RIP3参与的线粒体DNA-cGAS-STING信号通路在HK-2细胞缺氧-复氧模型中的作用
2
作者 孔亚坤 王焕 +4 位作者 尹俊杰 熊承云 吴苏豫 张莹 赵建林 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期603-608,共6页
目的:探究RIP3参与的线粒体DNA(mtDNA)-cGAS-STING信号通路在HK-2缺氧-复氧(H-R)细胞模型中的作用机制。方法:构建H-R细胞模型,取对数生长期HK-2细胞,于无葡萄糖和血清的特殊培养基中缺氧培养3、6和12 h后复氧,同时设置对照组,采用MTT... 目的:探究RIP3参与的线粒体DNA(mtDNA)-cGAS-STING信号通路在HK-2缺氧-复氧(H-R)细胞模型中的作用机制。方法:构建H-R细胞模型,取对数生长期HK-2细胞,于无葡萄糖和血清的特殊培养基中缺氧培养3、6和12 h后复氧,同时设置对照组,采用MTT法检测细胞存活率,Western blot检测RIP3、cGAS、STING、TBK1、IRF3、IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1β、NF-κB蛋白表达水平,RT-qPCR检测RIP3、cGAS、STING mRNA表达水平。细胞转染及加入RU.521(cGAS抑制剂)、Mito-TEMPO(线粒体ROS特异性清除剂)和溴化乙锭(EtBr)验证cGAS-STING信号通路激活机制,免疫荧光染色法测定mtDNA水平。结果:与对照组相比,H-R 3、6、12组细胞存活率均降低,mtDNA-cGAS-STING信号通路中相关蛋白RIP3、cGAS、STING、TBK1、IRF3、IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1β、NF-κB及RIP3、STING mRNA表达水平均上升,H-R 6、12组cGAS mRNA表达水平均上升(P<0.05)。与H-R 12+si-NC组相比,H-R 12+si-cGAS组细胞存活率升高,RIP3、cGAS、STING mRNA表达水平均降低;与H-R 12组相比,H-R 12+RU.521组与H-R 12+Mito-TEMPO组RIP3、cGAS、STING、TBK1、IRF3、IFN-β和IL-1β蛋白表达水平均降低(P<0.05)。H-R处理12 h可增加胞质双链DNA且其与线粒体共定位,而EtBr处理可减少胞质mtDNA(P<0.05)。结论:H-R可影响HK-2细胞活力及mtDNA-cGAS-STING信号通路,cGAS在其中起重要作用,且胞质mtDNA对cGAS-STING轴有调节作用。 展开更多
关键词 缺氧-复氧 HK-2细胞 RIP3 线粒体DNA-cGAS-STING信号通路
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高原低氧改善肿瘤免疫微环境并抑制结直肠癌皮下肿瘤生长 被引量：2
3
作者 赵思洁 王猛 +3 位作者 高源 杨芳 胡绍凡 缪洪明 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第1期38-50,共13页
目的探究高原低氧环境对结直肠癌体内生长及肿瘤微环境的影响。方法采用随机数字表法将雄性6周龄BALB/C与C57BL/6小鼠(体质量18~20 g)各自分为2组,分别置于低压氧仓(10%氧气,海拔约5600 m,高原低氧组)和SPF级动物实验中心(21%O_(2),海拔... 目的探究高原低氧环境对结直肠癌体内生长及肿瘤微环境的影响。方法采用随机数字表法将雄性6周龄BALB/C与C57BL/6小鼠(体质量18~20 g)各自分为2组,分别置于低压氧仓(10%氧气,海拔约5600 m,高原低氧组)和SPF级动物实验中心(21%O_(2),海拔约300 m,平原常氧组)饲养,C57BL/6小鼠每组8只,BALB/C小鼠每组7只。对C57BL/6小鼠皮下接种MC38、对BALB/C小鼠皮下接种CT26以构建结直肠癌皮下肿瘤模型。观察C57BL/6与BALB/C小鼠肿瘤大小并统计肿瘤质量。收集C57BL/6小鼠的肿瘤、外周血以及脾脏中的免疫细胞,流式细胞术对巨噬细胞、T淋巴细胞、IFN-γ^(+)T淋巴细胞以及髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)进行检测,分析这些免疫细胞在平原常氧和高原低氧环境下的变化情况。结果与平原常氧组C57BL/6与BALB/C小鼠相比,高原低氧组2种小鼠皮下肿瘤生长都被显著抑制(0.17 vs 0.09 g,1.38 vs 0.51 g,P<0.01)与平原常氧组C57BL/6小鼠相比,高原低氧组C57BL/6小鼠肿瘤微环境中的M2巨噬细胞比例显著降低(22.13%vs 15.90%,P<0.05);MDSC比例减少(2.06%vs 1.05%,P<0.01),其中单核性MDSC(M-MDSC:Ly6C^(+))亚群比例显著降低(60.97%vs 41.13%,P<0.01),而粒性MDSC(PMN-MDSC:Ly6G^(+))比例无显著差异(10.97%vs 9.70%,P>0.05);CD8^(+)T细胞比例显著升高(41.25%vs 51.18%,P<0.01),CD4^(+)T细胞比例降低(48.70%vs 41.93%,P<0.05);IFN-γ^(+)T、IFN-γ^(+)CD4^(+)T、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞比例均显著增高(28.58%vs 59.65%,23.33%vs 53.65%,36.9%vs 66.48%,P<0.01);外周血中CD4^(+)T淋巴细胞和M1巨噬细胞比例都降低(84.98%vs 78.43%,5.86%vs 4.01%,P<0.01),MDSC及PMN-MDSC(Ly6G^(+))比例增高(4.47%vs 16.43%,36.56%vs 62.97%,P<0.01);脾脏中CD8^(+)T淋巴细胞比例和IFN-γ^(+)CD8^(+)T淋巴细胞比例都显著降低(33.05%vs 27.68%,5.13%vs 1.58%,P<0.01)。结论高原低氧可以增强肿瘤微环境内免疫应答并抑制结直肠癌皮下肿瘤的生长,但却抑制全身性免疫应答。 展开更多
关键词 高原 低氧 肿瘤微环境 结直肠癌 免疫应答
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急、慢性低氧对雄性大鼠心脏功能的影响
4
作者 山婷 谢发龙 +5 位作者 张欢 张景宣 卡毛加 王梦涵 袁周阳 张伟 《中国高原医学与生物学杂志》 2025年第4期264-272,共9页
目的本研究就急、慢性低氧对雄性大鼠心脏功能的影响开展相关评价研究。方法应用压力-容积环(pressure volume-loops,PV-loops)法评价。将8周龄雄性SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为对照组(N组。海拔2260 m)、急性低氧1天组(H-1d组。模... 目的本研究就急、慢性低氧对雄性大鼠心脏功能的影响开展相关评价研究。方法应用压力-容积环(pressure volume-loops,PV-loops)法评价。将8周龄雄性SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为对照组(N组。海拔2260 m)、急性低氧1天组(H-1d组。模拟海拔7000 m)、急性低氧3天组(H-3d组。模拟海拔7000 m)、急性低氧7天组(H-7d组。模拟海拔7000 m)、慢性低氧42天组(H-42d组。模拟海拔5000 m)。实时监测雄性大鼠左心室压力容积情况,同时阻断下腔静脉,降低左心室前负荷,记录PV-loops和血流动力学参数;采用ELISA法检测雄性大鼠血清心肌酶含量,采用HE染色法观察雄性大鼠心肌组织。结果与对照组相比,H-1d组左心室收缩末期压力容积曲线斜率(Ees)略有升高,H-3d、H-7d组降低(P<0.05);H-1d组左心室压力上升最大速率(+dP/d_(tmax))升高(P<0.05),H-7d组降低(P<0.05);H-3d组、H-7d组左心室舒张末期压力容积曲线斜率(Eed)升高(P<0.05);H-1d组松弛时间常数(Tau)降低,左心室压力下降最大速率(-dP/d_(tmax))升高,H-7d组Tau升高(P<0.05);H-1d、H-3d、H-7d组的压力容积面积(PVA)、潜在能量(PE)增高,心脏效率(CE)降低(P<0.05)。与对照组相比,H-42d组的Ees、+dP/d_(tmax)降低(P<0.05),Eed、Tau升高(P<0.05),PVA、PE增高(P<0.05),CE降低(P<0.05)。H-7d、H-42d组的PV-loops向右移位。与对照组相比,H-3d、H-7d、H-42d组的乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)均升高(P<0.05)。结论本研究应用PV-loops法评价急、慢性低氧对雄性大鼠心脏功能的影响发现,急性低氧应激初期雄性大鼠心肌的收缩功能暂时性升高,随着低氧的持续,心肌收缩及舒张功能均减退,心肌酶含量升高,心肌结构损伤加重;慢性低氧雄性大鼠心肌的收缩、舒张功能减退,血清LDH、cTnI、CK-MB含量显著增高,心肌结构损伤。 展开更多
关键词 急性 慢性 低氧 压力-容积环 心肌酶 心脏 损伤
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补阳还五汤改善低氧诱导的肺动脉高压雄性大鼠的肺血管重构机制
5
作者 魏民敏 邹小云 +5 位作者 黄攀 邓鑫 马有刚 王小波 王亚婷 马兰 《中国高原医学与生物学杂志》 2025年第3期166-174,共9页
目的探讨补阳还五汤改善低氧诱导的肺动脉高压雄性大鼠的肺血管重构机制。方法采用随机数字表法,将60只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、低氧模型组、低氧+补阳还五汤低剂量组[0.774mg(kg·d)^(-1)]、低氧+补阳还五汤中剂量组[1.549mg&#... 目的探讨补阳还五汤改善低氧诱导的肺动脉高压雄性大鼠的肺血管重构机制。方法采用随机数字表法,将60只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、低氧模型组、低氧+补阳还五汤低剂量组[0.774mg(kg·d)^(-1)]、低氧+补阳还五汤中剂量组[1.549mg·(kg·d)^(-1)]、低氧+补阳还五汤高剂量组[3.097mg·(kg·d)^(-1)]、低氧+西地那非组[30mg·(kg·d)^(-1)]。自造模开始将低氧模型组和低氧+药物组置于低压氧舱(模拟5000m海拔),低氧模型组用0.5%CMC-Na灌胃,低氧+药物组分别用低、中、高剂量补阳还五汤和西地那非灌胃,每天1次,连续28d;对照组置舱外常规饲养。上述实验结束后,使用小动物超声成像仪检测各组大鼠的肺动脉加速时间和射血时间;采用右心导管术检测各组大鼠平均肺动脉压;采用苏木素-伊红染色法观察肺组织及右心室切片;采用蛋白免疫印迹法检测肺动脉组织中与细胞凋亡、增殖相关的蛋白表达。结果与对照组比较,低氧模型组的肺动脉加速时间和射血时间比值下降,平均肺动脉压、右心室肥厚指数、肺血管壁厚度增加(P<0.05),肺组织中增殖细胞核抗原的表达升高,抗凋亡相关蛋白的表达降低(P<0.05)。当予以不同剂量的补阳还五汤及西地那非干预后,HPH大鼠肺动脉加速时间和射血时间比值升高,平均肺动脉压、右心室肥厚指数及肺血管壁厚度降低(P<0.05),增殖细胞核抗原及抗凋亡相关蛋白的表达显著下降(P<0.05),肺组织促凋亡相关蛋白表达上调(P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过抑制低氧性肺动脉高压雄性大鼠肺血管细胞增殖,调节促凋亡和抗凋亡蛋白之间的平衡达到改善肺血管重构的作用。 展开更多
关键词 低氧 肺动脉高压 补阳还五汤 肺 血管 重构
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运动训练对慢性低氧雄性大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响
6
作者 谢发龙 山婷 +4 位作者 张欢 张景宣 卡毛加 王梦涵 张伟 《中国高原医学与生物学杂志》 2025年第2期111-117,共7页
目的本文旨在研究运动训练对慢性低氧雄性大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/R)的影响。方法将雄性SD大鼠分为常氧对照组(NC组。海拔2260 m)、常氧运动组(NT组。海拔2260 m)、慢性低氧对照组(CHC组。模拟海拔5000 m)和慢性低氧运动组(CHT组... 目的本文旨在研究运动训练对慢性低氧雄性大鼠离体心脏缺血再灌注损伤(I/R)的影响。方法将雄性SD大鼠分为常氧对照组(NC组。海拔2260 m)、常氧运动组(NT组。海拔2260 m)、慢性低氧对照组(CHC组。模拟海拔5000 m)和慢性低氧运动组(CHT组。模拟海拔5000 m)。运动组进行4 w的运动训练[适应性训练1 w,规范性训练(26 m/min,40 min/d,6 d/w)3 w]。慢性低氧处理:置于低压氧舱(模拟海拔5000 m,22 h/d,持续4 w)。采用Langendorff离体心脏灌流系统制备缺血再灌注模型,采集各组大鼠离体心脏稳定期和再灌注30 min时的心功能变化情况,收集大鼠血清及再灌注10 min时的灌流液检测心肌酶含量,并观察心脏组织形态。结果(1)较NC组,NT组力竭时间增加(P<0.05);较NT组,CHT组力竭时间降低(P<0.05)。(2)各组停灌前离体心脏跳动平稳,稳定期各组心功能指标无明显差异;较稳定期,各组复灌期心功能指标降低(P<0.05);较对照组,运动组复灌期心功能指标增高(P<0.05);较常氧组,低氧组复灌期心功能指标降低(P<0.05);较稳定期,低氧组复灌期心率降低(P<0.05)、灌注压升高(P<0.05)。(3)较对照组,运动组灌流液CK、LDH含量降低(P<0.05);较常氧组,低氧组灌流液CK、LDH含量增加(P<0.05)。(4)较NC组,NT组血清cTnI、CK-MB含量降低(P<0.05);较CHC组,CHT组血清cTnI、CK-MB含量降低(P<0.05);较对照组,低氧组血清cTnI、CK-MB含量升高(P<0.05)。(5)较NC组,NT组心肌纤维排列更为紧密且增粗,结构更完整;较CHC组,CHT组心肌结构有一定程度的改善。结论运动训练能够使慢性低氧雄性大鼠离体心脏的心肌收缩能力增强,减轻I/R的影响。 展开更多
关键词 低氧 运动 训练 离体心脏 缺血再灌注损伤
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单细胞转录组学结合生物信息学综合分析缺血性脑卒中巨噬细胞亚群及枢纽基因 被引量：1
7
作者 徐敬尧 王小璐 +3 位作者 侯帅 庞萌 王刚 王炎强 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期505-513,共9页
目的利用单细胞转录组(scRNA-seq)数据分析,高维加权基因共表达网络分析(hdWGCNA)探索缺血性脑卒中(IS)巨噬细胞亚群。方法基于单细胞测序数据获得不同细胞类型的转录组信息,并选择巨噬细胞进行亚群鉴定。利用hdWGCNA、细胞通讯和拟时... 目的利用单细胞转录组(scRNA-seq)数据分析,高维加权基因共表达网络分析(hdWGCNA)探索缺血性脑卒中(IS)巨噬细胞亚群。方法基于单细胞测序数据获得不同细胞类型的转录组信息,并选择巨噬细胞进行亚群鉴定。利用hdWGCNA、细胞通讯和拟时序分析等方法探讨IS后巨噬细胞的亚群特征,并结合芯片数据筛选出与IS相关的枢纽基因进行接收者操作特征(ROC)分析验证其诊断价值,通过基因集富集分析(GSEA)探究其潜在功能。结果scRNA数据分析显示IS后巨噬细胞的亚群组成显著变化,其中一个巨噬细胞亚群在卒中组中富集,命名为MCAO-特异性巨噬细胞(MSM)。拟时序分析表明,MSM处于巨噬细胞分化的中间阶段。细胞通讯分析揭示MSM与其他细胞间存在复杂相互作用,CC基序趋化因子配体6/CC基序趋化因子受体1(CCL6/CCR1)信号轴可能在神经炎症中发挥重要作用。hdWGCNA识别出与MSM相关的两个基因模块,显著富集于核苷酸结合寡聚结构域样受体(NLR)和抗原加工等信号通路。通过筛选MSM差异基因与常规转录组数据,识别精氨酸酶1(Arg1)、C型凝集素结构域家族4成员D(CLEC4D)和C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)这3个与IS相关的枢纽基因。结论本研究揭示了IS后巨噬细胞亚群的特征及其功能,筛选出3个具有潜在诊断价值的枢纽基因,可能为完善IS的病理机制提供了新的见解。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中(IS) 巨噬细胞 拟时序分析 高维加权基因共表达网络分析(hdWGCNA) 细胞通讯
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高原低氧条件下雄性大鼠心脏骤停-心肺复苏后HIF-1α和脑损伤相关因子的动态变化
8
作者 伊晓青 刘洁 +2 位作者 齐笑茹 罗中添 张斌 《中国高原医学与生物学杂志》 2025年第4期280-288,共9页
目的阐明高原低氧条件下雄性大鼠心脏骤停-心肺复苏(Cardiac arrest-cardiopulmonary resuscitation,CA-CPR)后缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在海马组织中的时相表达规律;揭示CA-CPR后HIF-1α和脑损伤相关因... 目的阐明高原低氧条件下雄性大鼠心脏骤停-心肺复苏(Cardiac arrest-cardiopulmonary resuscitation,CA-CPR)后缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在海马组织中的时相表达规律;揭示CA-CPR后HIF-1α和脑损伤相关因子S100β蛋白(S100βprotein,S100β)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)、髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)在血清中的动态变化情况;评估CA-CPR后各时间点海马神经元的病理损伤与凋亡情况。方法构建高原大鼠CA-CPR模型。采用qRT-PCR、Western Blot及IHC法检测海马组织中HIF-1α的时相表达水平;采用ELISA法检测血清中S100β、NSE、MBP及HIF-1α的浓度;采用HE、TUNEL染色法评估海马神经元病理损伤程度与凋亡率。结果成功构建高原大鼠CA-CPR模型。海马组织中HIF-1αmRNA及蛋白表达在恢复自主循环(Return of spontaneous circulation,ROSC)2 h时升高(P<0.05),在ROSC12 h时达峰(P<0.05),在ROSC 48 h时下降(P<0.05);IHC实验结果显示,HIF-1α主要定位于神经元胞质。血清S100β在ROSC 6 h时达峰(P<0.05),NSE、MBP在ROSC 12 h时同步达峰(P<0.05),三者在ROSC 48 h时下降(P<0.05);血清中的HIF-1α变化趋势与海马组织中的一致。HE染色结果显示,神经元皱缩、深染,胞质空泡化;在ROSC 24 h时凋亡率达峰(P<0.05)。结论高原CA-CPR后HIF-1α的表达呈现“ROSC 2 h升高—12 h达峰—48 h下降”的时相特征,并在早期过表达;血清S100β、NSE、MBP的达峰时间存在时相差异;海马神经元损伤程度随时间进展而加重,凋亡率随时间进展而提高。 展开更多
关键词 高原 复苏 缺氧诱导因子-1Α S100Β蛋白 神经元特异性烯醇化酶 髓鞘碱性蛋白
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硫化氢对缺氧诱导肝细胞损伤的影响及机制
9
作者 廖家万 黄富平 +5 位作者 王奕 杨易明 吴方庆 王凌霄 江嘉陵 魏楚蓉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2025年第1期1-8,共8页
目的探讨硫化氢对缺氧诱导肝损伤的影响及机制。方法用化学缺氧剂氯化钴处理大鼠肝细胞BRL构建缺氧模型,以硫氢化钠作为硫化氢供体,用活性氧探针DCFH-DA检测细胞活性氧含量;采用Rh123检测线粒体膜电位;用Hoechst33342荧光探针检测肝细... 目的探讨硫化氢对缺氧诱导肝损伤的影响及机制。方法用化学缺氧剂氯化钴处理大鼠肝细胞BRL构建缺氧模型,以硫氢化钠作为硫化氢供体,用活性氧探针DCFH-DA检测细胞活性氧含量;采用Rh123检测线粒体膜电位;用Hoechst33342荧光探针检测肝细胞凋亡率。结果缺氧使肝细胞变圆,失去正常形态,部分细胞漂浮,细胞密度下降,硫氢化钠预处理可减轻上述变化;硫氢化钠预处理减少缺氧诱导活性氧含量的增加,抑制缺氧引起线粒体膜电位的降低和减轻缺氧所致肝细胞的凋亡。结论硫化氢通过抑制活性氧的增加和线粒体膜电位的降低减轻缺氧诱导的肝损伤。 展开更多
关键词 缺氧 硫化氢 细胞凋亡 活性氧 线粒体膜电位
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维替泊芬对脑缺血损伤早期脑组织和星形胶质细胞的影响
10
作者 蔡康希 孙建宇 +2 位作者 邢帅 程宽 付伟伟 《青岛大学学报(医学版)》 2025年第2期165-168,共4页
目的探讨维替泊芬(VP)对脑缺血损伤早期脑组织和星形胶质细胞的影响。方法将36只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、大脑中动脉闭塞模型组(MCAO组)和VP组(MCAO+VP组),各12只。MCAO组和MCAO+VP组建立MCAO模型,MCAO+VP组建立MCAO模型后每... 目的探讨维替泊芬(VP)对脑缺血损伤早期脑组织和星形胶质细胞的影响。方法将36只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、大脑中动脉闭塞模型组(MCAO组)和VP组(MCAO+VP组),各12只。MCAO组和MCAO+VP组建立MCAO模型,MCAO+VP组建立MCAO模型后每日侧脑室注射VP(0.1 mg/kg),Sham组仅进行假手术。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色方法观察各组大鼠脑组织梗死情况,免疫荧光方法观察各组大鼠星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及Yes相关蛋白(YAP)变化。结果TTC染色结果显示,脑缺血损伤3 d时,MCAO组、MCAO+VP组的脑组织梗死比例高于Sham组,MCAO+VP组脑梗死比例较MCAO组明显降低(F=201.00,P<0.05)。免疫荧光结果显示,MCAO组的GFAP+细胞数量多于Sham组,MCAO+VP组GFAP+细胞数量较MCAO组明显降低(F=8.51,P<0.05),GFAP+细胞中的YAP+细胞数量明显减少(F=78.41,P<0.01)。结论VP可在脑缺血早期发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 维替泊芬 星形细胞 YAP信号蛋白质类
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乳酸代谢重编程在脓毒症免疫调控中的研究进展
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作者 许奕涵 戎叶飞 《实用临床医药杂志》 2025年第22期109-113,共5页
脓毒症是一种由宿主对感染的免疫-炎症反应失调所致的危及生命的多器官功能障碍综合征。血清乳酸水平升高被视为组织低灌注与无氧代谢的生物标志物,脓毒症患者常表现为高乳酸血症,临床上用于评估疾病严重程度及预后。近年研究表明,乳酸... 脓毒症是一种由宿主对感染的免疫-炎症反应失调所致的危及生命的多器官功能障碍综合征。血清乳酸水平升高被视为组织低灌注与无氧代谢的生物标志物,脓毒症患者常表现为高乳酸血症,临床上用于评估疾病严重程度及预后。近年研究表明,乳酸不仅是代谢终产物,更是作为一种关键的免疫代谢调节分子,在脓毒症病理进程中发挥多重作用。本文旨在整合基础与临床证据,阐明乳酸从传统灌注标志物向功能性免疫代谢介质的角色转变,为脓毒症的精准评估与干预提供新视角。 展开更多
关键词 脓毒症 乳酸 组蛋白乳酸化 免疫调节 乳酸清除率 多器官功能障碍 预后 综述
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脑红蛋白mRNA在大鼠脑内的定位 被引量：29
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作者 邓美玉 张成岗 +3 位作者 王航雁 李林 王春丽 周婉琼 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期85-89,共5页
目的　了解脑红蛋白 (NGB)mRNA在大鼠脑内的定位。　方法　用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术观察了NGBmRNA在成年大鼠脑中的正常分布。　结果　NGBmRNA在成年大鼠脑中有非常广泛的表达 ,其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑... 目的　了解脑红蛋白 (NGB)mRNA在大鼠脑内的定位。　方法　用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术观察了NGBmRNA在成年大鼠脑中的正常分布。　结果　NGBmRNA在成年大鼠脑中有非常广泛的表达 ,其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑、下丘脑、嗅球及小脑等。NGBmRNA阳性物质定位于神经元的细胞质。　结论　NGBmRNA在大鼠脑中有非常广泛的表达 。 展开更多
关键词 脑红蛋白 中枢神经系统 原位杂交组织化学 大鼠
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缺氧特异性诱导肺血管内皮细胞黏附分子3表达以促进单核细胞黏附 被引量：1
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作者 孟祥琼 陈婷 +3 位作者 谢宏晨 杨诚忠 范旭 谭小玲 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第1期51-59,共9页
目的探究细胞黏附分子3(cell adhesion molecular 3,CADM3)在肺血管内皮细胞上的表达特异性,分析其介导单核细胞特异性黏附的作用,探讨缺氧诱导肺血管外周单核细胞浸润的新机制。方法以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endotheli... 目的探究细胞黏附分子3(cell adhesion molecular 3,CADM3)在肺血管内皮细胞上的表达特异性,分析其介导单核细胞特异性黏附的作用,探讨缺氧诱导肺血管外周单核细胞浸润的新机制。方法以人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)、大鼠肺血管内皮细胞(rat pulmonary vascular endothelial cell,rPEC)和大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cell,rAEC)为细胞模型,分为常氧(21%O2)对照组和缺氧(1%O2或5%O2)处理组。通过分析缺氧8 h HUVEC的转录组数据,筛选差异表达的CADM3。通过细胞黏附实验、siRNA干扰、免疫细胞化学技术、Western blot技术和流式细胞术,分析CADM3在缺氧HUVEC与单核细胞特异性高黏附中的作用;通过铁螯合剂-去铁胺(deferoxamine,DFX)和shRNA干扰调节HIF-1α表达,分析HIF-1转录活性对CADM3表达的影响。结果缺氧HUVEC中CADM3表达增加,在缺氧6~8 h达到最高,随后下降;靶向CADM3的siRNA转染后,与阴性对照组比较,CADM3的表达降低,缺氧HUVEC和U937细胞的黏附率显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与常氧(21%O2)溶剂对照组比较,DFX(100μmol/L)处理的HUVEC中HIF-1α及其靶蛋白STC2蛋白水平增加;靶向HIF-1α的shRNA转染后,与阴性对照组比较,HIF-1α及其靶蛋白STC2蛋白水平下降,但CADM3蛋白表达均无变化。缺氧rPEC中CADM3的蛋白水平及其在细胞膜上的分布均增加,与rPEC细胞比较,rAEC细胞中未检测到CADM3的蛋白表达;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(5μg/mL)处理后,常氧或缺氧培养的rPEC细胞中HIF-1α和CADM3表达均无明显变化。缺氧rPEC与外周血白细胞中CD11b+细胞的黏附比率最高,差异具有统计学意义(P<0.01)。抗CADM3抗体孵育后,与Blank组比较,缺氧rPEC与U937细胞的黏附显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧以特异地非HIF-1依赖的方式诱导肺血管内皮细胞中CADM3的表达,促进缺氧诱导的肺血管内皮细胞与单核细胞的特异性黏附。 展开更多
关键词 缺氧 细胞黏附 肺血管内皮细胞 单核细胞 细胞黏附分子3
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降钙素基因相关肽对缺氧时大鼠海马培养神经元c—fos表达的影响 被引量：23
14
作者 丁爱石 王福庄 +2 位作者 杨宏 陈正英 王良友 《神经科学》 SCIE CAS 1997年第3期110-114,共5页
采用免疫组化（ABC）方法，观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c-fos的表达及降钙素基因相关肽（CGRP）的影响。结果显示，缺氧后海马神经元中Fos-免疫反应（Fos—IR）阳性胞核百分率随缺氧时间的延长而逐渐增多，图像分析的结果显示... 采用免疫组化（ABC）方法，观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c-fos的表达及降钙素基因相关肽（CGRP）的影响。结果显示，缺氧后海马神经元中Fos-免疫反应（Fos—IR）阳性胞核百分率随缺氧时间的延长而逐渐增多，图像分析的结果显示，缺氧后Fos—IR阳性胞核的平均失密度亦随缺氧时间的延长而逐渐增强。经CGRP孵育的海马神经元缺氧后Fos-IR阳性胞核的百分率和Fos-IR阳性胞核的平均光密度均明显低于非CGRP孵育组。本结果表明，缺氧能诱导体外培养海马神经元。c-fos的表达，神经肽CGRP能抑制缺氧海马神经元c-fos的表达。提示CGRP对海马神经元缺氧损伤可能具有一定保护作用。 展开更多
关键词 C-FOS 降钙素 基因相关肽 缺氧 海马 神经元
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应用孕妇外周血胎儿有核红细胞数量及胎儿脐动脉血流变化预测胎儿慢性缺氧 被引量：10
15
作者 杨晓菊 叶元华 +2 位作者 赵金霞 陈燕秋 吴洪婧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期466-470,共5页
目的探讨母血中胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)数量及胎儿脐动脉血流改变与胎儿慢性缺氧的关系。方法对78例孕妇(正常妊娠组30例、胎儿急性缺氧组18例、胎儿慢性缺氧组30例)的外周血分别进行单密度梯度离心、FN... 目的探讨母血中胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)数量及胎儿脐动脉血流改变与胎儿慢性缺氧的关系。方法对78例孕妇(正常妊娠组30例、胎儿急性缺氧组18例、胎儿慢性缺氧组30例)的外周血分别进行单密度梯度离心、FNRBC计数;同时行彩色多普勒超声检测胎儿脐动脉血流搏动指数(pulsatility indexes,PI)、阻力指数(resistance indexes,RI)及收缩期最大血流速度与舒张末期血流速度的比值(systolic/diastolic,S/D);比较单法检测及二法联检的灵敏度、特异度及诊断正确率等。并通过病理证实胎盘变化。结果胎儿慢性缺氧组、急性缺氧组、正常妊娠组孕妇外周血中FNRBC计数分别为(15.42±4.11)、(6.92±2.17)、(5.95±1.76)个/6ml,慢性缺氧组FNRBC计数明显高于其他2组(P<0.05),而后两组间比较无显著性差异(P>0.05)。慢性缺氧组脐血流S/D、PI、RI值分别为(3.27±0.66)、(1.12±0.15)和(0.71±0.07),均显著高于正常妊娠组的(2.16±0.25)、(0.69±0.10)和(0.55±0.06)(P<0.05)。慢性缺氧组孕妇外周血中FNRBC计数与脐动脉血流参数S/D及PI值呈正相关(r=0.815、r=0.587,P<0.05),而正常妊娠组孕妇外周血中FNRBC计数与脐动脉血流各参数之间均无相关性。与单独检测相比,2种方法联合检测预测胎儿慢性缺氧的灵敏度、诊断正确率最高。结论胎儿慢性缺氧时母血中FNRBC计数、脐动脉S/D、PI值升高,二者呈正相关;二法联检能提高预测胎儿慢性缺氧的灵敏度及诊断正确率。 展开更多
关键词 孕妇 胎儿 脐动脉 红细胞计数 血流动力学 缺氧 产前诊断
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缺氧应激对肝癌细胞代谢信号通路的调节作用 被引量：10
16
作者 施冬云 刘珊林 +4 位作者 李浩然 沈新南 俞培忠 程建 龚兴国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第9期869-876,共8页
通过实验阐明在缺氧条件下糖酵解相关基因表达的变化规律及对肿瘤细胞和正常细胞增殖的影响,并探索活性氧(ROS)介导肝癌细胞代谢途径及对相关基因表达和酶活性的调节作用.以SMMC-7721人肝癌细胞和L02正常肝细胞作为研究对象,分别在单纯... 通过实验阐明在缺氧条件下糖酵解相关基因表达的变化规律及对肿瘤细胞和正常细胞增殖的影响,并探索活性氧(ROS)介导肝癌细胞代谢途径及对相关基因表达和酶活性的调节作用.以SMMC-7721人肝癌细胞和L02正常肝细胞作为研究对象,分别在单纯缺氧及加葡萄糖缺氧条件下,观察细胞生长,并检测糖代谢关键酶:丙酮酸激酶(pyruvate-kinase,PK)、己糖激酶(hexokinase,HK)、琥珀酸脱氢酶(succinic dehydrogenase,SDH)、异柠檬酸脱氢酶(isocitric dehydrogenase,IDH)mRNA表达水平和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性.还检测了pkb基因及缺氧诱导因子hif-1的表达.实验结果说明:a.肿瘤细胞较正常细胞具有更强的缺氧耐受性;b.缺氧条件下,糖酵解途径的增强是保证肿瘤细胞能快速增殖的机制之一;c.ROS通过HIF-1介导了糖代谢通路相关酶的基因表达,参与肝癌细胞缺氧信号通路调节,用抗氧化剂干预可以降低肿瘤细胞的缺氧耐受能力. 展开更多
关键词 缺氧 糖酵解 活性氧 缺氧诱导凶子-1 肝癌
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红景天苷对缺氧复氧星形胶质细胞细胞损伤的影响 被引量：16
17
作者 许德超 方丽丽 +1 位作者 陈辉 王颖怡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1325-1330,共6页
目的:研究红景天苷对缺氧复氧星形胶质细胞分泌炎症因子及氧化损伤得的影响。方法:分离培养大鼠皮质星形胶质细胞,构建缺氧复氧星形胶质细胞损伤模型,在缺氧复氧前给予红景天苷预处理,CCK8测定细胞活力,二硝基苯肼法检测乳酸脱氢酶(LDH... 目的:研究红景天苷对缺氧复氧星形胶质细胞分泌炎症因子及氧化损伤得的影响。方法:分离培养大鼠皮质星形胶质细胞,构建缺氧复氧星形胶质细胞损伤模型,在缺氧复氧前给予红景天苷预处理,CCK8测定细胞活力,二硝基苯肼法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,改良二硫双硝基苯甲酸定量法检测还原型谷胱甘肽(GSH)活性,代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)和活化型Caspase-9(Cleaved Caspase-9)蛋白表达水平,用罗丹明123法检测细胞线粒体膜电位变化。结果:缺氧复氧处理星形胶质细胞后细胞活力降低,LDH漏出率升高,细胞SOD活性、GSH活性降低,MDA含量升高,细胞分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6增多,细胞凋亡率升高,Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白水平也升高,线粒体膜电位降低。红景天苷处理后的缺氧复氧星形胶质细胞,细胞活力升高,细胞LDH漏出率降低,细胞SOD活性、GSH活性升高,MDA含量降低,细胞分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6减少,细胞凋亡率降低,Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平降低,线粒体膜电位升高。结论:红景天苷对缺氧复氧星形胶质细胞氧化损伤、炎症因子分泌及细胞凋亡均有抑制作用,红景天苷具有减轻缺氧复氧星形胶质细胞损伤作用。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 缺氧复氧 红景天苷 氧化损伤 炎症因子
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一氧化氮在缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 被引量：8
18
作者 王培勇 刘健 +3 位作者 罗德成 许蜀闽 孙秉庸 陈兆珍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期476-477,共2页
关键词 一氧化氮 缺氧 肺动脉 平滑肌细胞 增殖 PASM
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HIF-1α与VEGF在动脉粥样硬化闭塞症患者缺血下肢血管及肌组织中的表达及意义 被引量：9
19
作者 孙晓峰 所剑 +6 位作者 王琦 刘婷 崔阳 王中英 杨学明 方艳秋 谭岩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期337-340,397,398,共6页
目的:研究缺氧诱导因子1(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在动脉粥样硬化闭塞症(ASO)患者缺血下肢的表达及分布规律,为应用HIF-1α基因治疗缺血性疾病提供实验依据。方法:应用免疫组织化学SP法对15例ASO截肢患者肢体的血管、肌组织及... 目的:研究缺氧诱导因子1(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在动脉粥样硬化闭塞症(ASO)患者缺血下肢的表达及分布规律,为应用HIF-1α基因治疗缺血性疾病提供实验依据。方法:应用免疫组织化学SP法对15例ASO截肢患者肢体的血管、肌组织及3例正常人肌组织中的HIF-1α、VEGF蛋白进行检测;同时应用CD34标记血管,根据CD34阳性的血管内皮细胞数测定微血管密度(MVD)。结果:ASO患者缺血肢体主干血管及缺血肌组织内HIF-1α、VEGF表达灰度值较正常人均明显增加,MVD计数增加。增加最高的是胫后动脉(HIF-1α为932.5±545.2,VEGF为354.5±75.8,MVD为38.4±8.4),股浅动脉、胫前动脉、小腿缺血肌肌间动脉、小腿缺血肌以及足坏死肌中HIF-1α和VEGF表达量均明显低于胫后动脉;在缺血血管壁内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数均随着缺血程度的加重而增加;而在缺血肌组织内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数增加均与缺血程度无关联;HIF-1α、VEGF在缺血肌组织内的表达量均明显低于缺血大血管。结论:HIF-1α、VEGF在ASO患者缺血肢体主干血管和缺血肌组织中均有较高水平表达,但在缺血肌组织内的表达均明显低于缺血大血管。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子1 Α亚基 血管内皮生长因子A 缺血肢体 动脉粥样硬化闭塞症
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高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效的Meta分析 被引量：30
20
作者 张国荣 罗影 +1 位作者 于海燕 闵连秋 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1641-1645,共5页
目的探讨高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的疗效。方法检索PubMed和EMBase、中国知网、维普、万方中文数据库中2001年1月—2012年10月公开发表的采用高压氧治疗新生儿HIE的临床随机对照试验,按纳入标准对文献进行筛选后提取相关信... 目的探讨高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的疗效。方法检索PubMed和EMBase、中国知网、维普、万方中文数据库中2001年1月—2012年10月公开发表的采用高压氧治疗新生儿HIE的临床随机对照试验,按纳入标准对文献进行筛选后提取相关信息,采用Stata 11软件Meta分析流程,选择合适方法计算合并的RR值及95%可信区间(CI),并进行敏感性分析和发表偏倚的估计。结果本研究共纳入47篇文献,其中报道高压氧治疗HIE有效率的文献有38篇,病死率的文献有7篇,后遗症发生率的文献有12篇。合并结果显示,干预组较对照组的有效率高〔RR=0.29,95%CI(0.25,0.34),P<0.05〕,干预组病死率及后遗症发生率均低于对照组〔病死率:RR=0.23,95%CI(0.13,0.39),P<0.05;后遗症发生率:RR=0.30,95%CI(0.23,0.39),P<0.05〕。漏斗图示存在明显不对称性,Egger检验结果 (t=-3.95,P<0.05)显示存在发表偏倚。结论高压氧治疗HIE较常规治疗方法更为有效,并且能够有效降低HIE患儿的病死率和神经系统后遗症的发生危险。 展开更多
关键词 高压氧 缺氧缺血 脑 治疗结果 META分析
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