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IQGAP1在氧糖剥夺/复氧诱导的小胶质细胞极化中的作用及其机制
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作者 朝博 任君浩 +2 位作者 郭若宇 苏优勒 马英 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第11期2011-2018,共8页
目的探讨含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)在氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的BV-2小胶质细胞极化中的作用及其机制。方法将IQGAP1过表达质粒(oe-IQGAP1)及其阴性对照质粒(Vector)转染至BV-2细胞中,再采用OGD/R法诱导BV-2细胞极化,并给予外源... 目的探讨含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)在氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的BV-2小胶质细胞极化中的作用及其机制。方法将IQGAP1过表达质粒(oe-IQGAP1)及其阴性对照质粒(Vector)转染至BV-2细胞中,再采用OGD/R法诱导BV-2细胞极化,并给予外源性干扰素-γ(IFN-γ)重组蛋白进行干预。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖率;试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中IQGAP1、IFN-γ及小胶质细胞极化标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、CD206、精氨酸酶1(Arg1)等mRNA表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中炎症因子IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-10水平;Western blot检测细胞中IQGAP1、IFN-γ蛋白表达水平。结果OGD/R处理后,BV-2细胞增殖率、上清液中IL-4、IL-10水平及CD206和Arg1 mRNA表达水平降低(均P<0.05),上清液中LDH、TNF-α、IL-1β水平及细胞中iNOS和CD86 mRNA表达水平升高(均P<0.05),同时,细胞中IQGAP1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。IQGAP1过表达处理后,OGD/R暴露下BV-2细胞上清液中IL-4、IL-10水平及细胞中CD206和Arg1 mRNA表达水平升高(均P<0.05),上清液中TNF-α、IL-1β水平和细胞中iNOS和CD86 mRNA表达水平降低(均P<0.05);同时,细胞中IFN-γ蛋白表达及分泌减少(均P<0.05),IFN-γmRNA表达水平无显著变化。然而,外源性IFN-γ重组蛋白联合干预明显逆转了IQGAP1过表达对OGD/R诱导的小胶质细胞M1型极化的抑制作用。结论IQGAP1过表达可通过减少IFN-γ分泌和表达抑制OGD/R条件下小胶质细胞的M1型极化。 展开更多
关键词 小胶质细胞 M1型极化 氧糖剥夺/复氧 含IQ基元GTP酶激活蛋白1 干扰素-Γ
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