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题名SD大鼠胰岛的分离纯化及培养
被引量：6
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作者
侯续伟
尹波
任甫
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机构
辽宁医学院解剖学教研室
辽宁医学院附属第一医院肝胆外科
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出处
《解剖科学进展》
CAS
2011年第2期168-170,共3页
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基金
辽宁省科技厅科技攻关基金(No.2006225001-14)
辽宁省教育厅基金(No.20060519)
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文摘
目的探讨分离纯化大鼠胰岛素分泌细胞的方法,并评价细胞的生物学特性。方法选用3～4周龄健康成年SD大鼠,常规外科手术显露SD大鼠胰腺和胆总管,在胆总管内插入4.5～5号头皮针后固定,逆行注入预冷的0.5mg/ml的胶原酶V溶液8～10ml,使胰腺膨胀后迅速取出胰腺放入6mlHanks液中38℃消化10min,用含10%胎牛血清的Hanks液终止消化,60目筛网过滤后用Ficoll400非连续梯度离心纯化胰岛。纯化后的细胞用DTZ染色和胰岛素释放试验来分析胰岛素的分泌情况。结果 DTZ染色后β细胞胞浆着色,为均一的猩红色。胰岛细胞分布于Ficoll400浓度为23%～20%和20%～11%的界面之间,纯度高达90%,并且细胞的胰岛素分泌情况良好。结论胶原酶V消化,Ficoll400纯化是一种简单高效的胰岛素分泌细胞分离纯化的方法,可以获取数量多,活性和纯度好的胰岛素分泌细胞。
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关键词
Β细胞
胰岛细胞培养
胰岛素
SD大鼠
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Keywords
β-cell
islet cell culture
insulin
SD rats
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分类号
R353.6
[医药卫生—基础医学]
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