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27个省市聋校学生基于SLC26A4基因IVS7-2 A>G突变的全序列分析 被引量:35
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作者 袁永一 黄莎莎 +4 位作者 王国建 康东洋 韩东一 黄德亮 戴朴 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第1期17-23,共7页
目的在全国27个省市聋校学生2352例中进行基于SLC26A4基因热点突变IVS7-2A>G的该基因的全序列筛查,分析和探讨中国人SLC26A4基因相关大前庭水管综合征的分子流行病学状况。方法调查对象来自全国27个省市自治区的聋哑学校学生2352例,... 目的在全国27个省市聋校学生2352例中进行基于SLC26A4基因热点突变IVS7-2A>G的该基因的全序列筛查,分析和探讨中国人SLC26A4基因相关大前庭水管综合征的分子流行病学状况。方法调查对象来自全国27个省市自治区的聋哑学校学生2352例,共涉及21个民族。听力正常的对照人群150例。所有受检者均采集外周血并提取DNA,其中1552例以序列分析方法检测SLC26A4基因外显子7+8以筛查热点突变IVS7-2A>G,800例以试剂盒的方法检测IVS7-2A>G突变。对携带IVS7-2A>G纯合突变的个体结束筛查,对携带IVS7-2A>G单杂合突变的个体进行SLC26A4基因其他外显子测序,寻找可能存在的另外一个突变位点。结果 2352例来自全国多个地区的耳聋患者中271例携带SLC26A4基因IVS7-2A>G突变,其中106例携带IVS7-2A>G纯合突变,165例携带IVS7-2A>G单杂合突变,IVS7-2A>G突变总检出率达到11.52%(271/2352),汉族患者中IVS7-2A>G突变检出率达到13.35%(254/1903);对165例携带IVS7-2A>G单杂合突变的患者进行SLC26A4基因其他外显子序列分析显示其中105例找到另外一个突变位点,其余60例未找到另外的突变。2352例耳聋患者中基于IVS7-2A>G突变的SLC26A4基因纯合及复合杂合突变携带者共211例,占总人数的8.97%(211/2352)。其中1903例汉族耳聋患者中基于IVS7-2A>G突变的SLC26A4基因纯合及复合杂合突变携带者共199例,占汉族人数的10.46%(199/1903)。105例携带SLC26A4基因复合杂合突变的患者中,除IVS7-2A>G突变外的另一突变位点主要存在于外显子19、10、17、11+12、3和15上。正常对照人群IVS7-2A>G突变检出率为2%,均为单杂合突变,且均未找到另一个突变。结论 2352例聋哑学生通过基于SLC26A4基因热点突变IVS7-2A>G的该基因的全序列筛查,将211例耳聋患者明确为SLC26A4基因突变致聋;发现在中国由SLC26A4基因热点突变引起的大前庭水管相关遗传性耳聋的比例较高,接近9%,汉族耳聋人群中该比例超过10%;揭示SLC26A4基因筛查和诊断在耳聋的病因学诊断中起重要作用,在大规模耳聋患者的病因学筛查方面具有优势。此研究同时为明确SLC26A4基因热点突变区域提供了依据。 展开更多
关键词 大前庭水管综合征 SLC26A4基因 序列分析 热点突变
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NF-κB分子生物学特性及其在牙周炎等炎症性疾病中的作用 被引量:9
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作者 陈铁楼 苏丹 +1 位作者 许兵 刘国勤 《口腔医学》 CAS 2010年第4期242-245,共4页
核转录因子-kappaB(NF-κB)是细胞中重要的调节因子,静息状态下与一组抑制蛋白ΙκB家族成员结合形成复合体,以无活性状态存在于细胞质中。当细胞受到外界刺激时,IκB磷酸化,使NF-κB暴露出核定位信号,进入细胞核结合DNA,调节基因的表... 核转录因子-kappaB(NF-κB)是细胞中重要的调节因子,静息状态下与一组抑制蛋白ΙκB家族成员结合形成复合体,以无活性状态存在于细胞质中。当细胞受到外界刺激时,IκB磷酸化,使NF-κB暴露出核定位信号,进入细胞核结合DNA,调节基因的表达。本文对NF-κB家族、分子生物学特性及在炎症性疾病和牙周炎发生和治疗中分子机制进行探讨,为用NF-κB抑制剂治疗开辟新途径。 展开更多
关键词 NF-κB家族 分子生物学 炎症性疾病 IκB家族 分子机制 牙周炎
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miR-449b和miR-34c对卵巢癌细胞SKOV3-ipl周期相关蛋白的下调及细胞周期阻滞作用 被引量:7
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作者 马丽萍 李娜 +1 位作者 何湘君 张旗 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期129-133,共5页
目的:基于miR-449和miR-34在p53突变的卵巢癌细胞系SKOV3和SKOV3-ipl的表达差异,研究探讨这些miRNA对肿瘤细胞生长、细胞周期的影响及靶基因的表达变化。方法:通过反转录实时定量PCR方法测定miR-449a/b和miR-34b,c在SKOV3和SKOV3-ipl... 目的:基于miR-449和miR-34在p53突变的卵巢癌细胞系SKOV3和SKOV3-ipl的表达差异,研究探讨这些miRNA对肿瘤细胞生长、细胞周期的影响及靶基因的表达变化。方法:通过反转录实时定量PCR方法测定miR-449a/b和miR-34b,c在SKOV3和SKOV3-ipl的表达,通过转染使它们在极低表达的SKOV3-ipl中获得表达。用MTS方法测定细胞生长率变化、流式细胞术检测细胞周期改变、Western blot检测细胞周期相关蛋白表达。结果:miR-449b和miR-34c使SKOV3-ipl黏附性下降28%~34%,细胞周期阻滞:G1期细胞数量分别增加15.62%和15.71%;S期细胞数量分别减少15.96%和16.56%。细胞周期相关蛋白CDK6和CDC25A均表达下调,miR-449b使CDK6减少39%、CDC25A减少22%;miR-34c使CDK6减少49%、CDC25A减少32%;而miR-449b与miR-34c共同作用后,下调作用更明显,CDK6减少69%,CDC25A减少86%,CyclinA减少59%。结论:miR-449b和miR-34c使高恶性卵巢癌细胞系SKOV3-ipl发生细胞周期阻滞,CDK6、CDC25A和CyclinA表达均下调。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 细胞周期蛋白类 微RNAS
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中国北方汉族人载脂蛋白E基因多态性与血脂代谢的关系 被引量:3
4
作者 容春莉 彭应心 +2 位作者 刘美霞 王秀萍 宋津晓 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期586-588,591,共4页
目的从基因水平探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与中国北方汉族人血脂的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术测定150例心血管病患者(病例组)和130例正常对照者(对照组)的ApoE基因多态性,并测定血脂代谢的指标... 目的从基因水平探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与中国北方汉族人血脂的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术测定150例心血管病患者(病例组)和130例正常对照者(对照组)的ApoE基因多态性,并测定血脂代谢的指标,研究ApoE基因多态性与血脂水平的关系。结果在3种等位基因间,总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及载脂蛋白B(ApoB)水平均按ε4基因携带者>ε3基因携带者>ε2基因携带者的顺序递减,差异有显著性(对照组均P<0.05,病例组均P<0.01),而三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白AI(ApoAI)水平差异无显著性(均P>0.05)。结论ApoE基因多态性影响中国北方汉族人的血脂代谢,ε4等位基因对TC、LDL-C及ApoB有升高作用。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 基因多态性 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术 血脂
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细胞因子与牙槽骨重建关系的研究进展 被引量:5
5
作者 郭冲冲 杜启翠 +2 位作者 孟春秀 高传飞 张惠民 《口腔医学》 CAS 2015年第8期697-701,共5页
牙槽骨是牙周组织的重要组成部分之一,在口腔生理功能中发挥重要作用。牙槽骨具有高度可塑性,可随着牙齿的生长、脱落及咀嚼压力的变化而变化。目前,大量国内外研究证明,许多细胞因子也对牙槽骨的重建有重要影响,在骨吸收和骨再生方面... 牙槽骨是牙周组织的重要组成部分之一,在口腔生理功能中发挥重要作用。牙槽骨具有高度可塑性,可随着牙齿的生长、脱落及咀嚼压力的变化而变化。目前,大量国内外研究证明,许多细胞因子也对牙槽骨的重建有重要影响,在骨吸收和骨再生方面有不同的刺激作用。BMP-2、PTH等可以促进间充质干细胞分化为成骨细胞,进而促进新骨形成。而IL-1、TGF-β等又可以促进单核细胞分化,破骨细胞增多,从而引起骨质吸收。该文即针对不同细胞因子对牙槽骨的作用作一综述,通过对这些细胞因子的研究进一步了解、完善骨重建过程。 展开更多
关键词 细胞因子 牙槽骨 再生 吸收
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4个非综合征耳聋家系中检出线粒体COI和COII基因的新变异 被引量:3
6
作者 刘奇才 陈静 +4 位作者 郜峰 杨滨 商红艳 陈添彬 欧启水 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第4期442-447,共6页
目的报道4个疑有母系遗传特征的中国非综合征耳聋家系的线粒体分子遗传学特征。方法应用限制性内切酶酶切和直接测序技术对先证者的线粒体基因序列进行分析,同时收集患者的相关临床资料。结果在2个非综合征耳聋家系的先证者中发现线粒... 目的报道4个疑有母系遗传特征的中国非综合征耳聋家系的线粒体分子遗传学特征。方法应用限制性内切酶酶切和直接测序技术对先证者的线粒体基因序列进行分析,同时收集患者的相关临床资料。结果在2个非综合征耳聋家系的先证者中发现线粒体COⅠ和COⅡ基因上两个新变异形式(7250A>G和7774G>A)均为沉默突变(Thr→Thr和Thr→Thr),而位于COⅠ基因上的7196C>A(Leu→Leu)、7319T>C(Ile→Ile)和COⅡ基因上的7660A>G(Asp→Asp)为国外及汉族群体中已报道的3个多态性位点,其中COⅠ基因两个多态性位点为首次在畲族耳聋遗传家系中报道。这些突变或多态没有产生错义氨基酸,可能通过基因调控机制使tRNA代谢或线粒体功能产生缺陷,或者对氨基糖甙类药物易感而致聋。同时,在家系中未发现GJB2、MTO1基因及其他线粒体基因突变。结论 mtDNA7250A>G和7774G>A为汉族耳聋家系中新发现的线粒体基因突变形式,而mtDNA7196C>A和7319T>C是首次在畲族耳聋遗传家系中报道。 展开更多
关键词 遗传性非综合征耳聋 线粒体DNA COⅠ基因 COⅡ基因 突变 氨基糖甙类药物
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内皮素-3对A375人类恶性黑素瘤细胞株骨桥蛋白基因表达的影响 被引量:2
7
作者 田进 黄长征 +5 位作者 刘业强 李延 陶娟 李家文 涂亚庭 沈关心 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期720-723,741,共5页
目的研究内皮素-3(ET-3)对A375人类恶性黑素瘤细胞株骨桥蛋白(OPN)基因表达的影响。方法体外培养A375细胞株,分别设立对照组,ET-3不同浓度(1、10、100nmol/L)实验组和ET-3同一浓度(100nmol/L)不同时间(6、12、18、24、30、36h)实验组,采... 目的研究内皮素-3(ET-3)对A375人类恶性黑素瘤细胞株骨桥蛋白(OPN)基因表达的影响。方法体外培养A375细胞株,分别设立对照组,ET-3不同浓度(1、10、100nmol/L)实验组和ET-3同一浓度(100nmol/L)不同时间(6、12、18、24、30、36h)实验组,采用RT-PCR和Western blot结合吸光度分析技术检测骨桥蛋白基因表达情况。结果不同浓度的ET-3能显著上调A375细胞株骨桥蛋白基因表达,与对照组比较差异有统计学意义,并且这种上调效应呈剂量依赖性,不同浓度干预组组间比较差异有统计学意义。在100nmol/LET-3浓度条件下,随着培养时间的延长,OPN的表达逐渐增加,24h达到高峰,随后缓慢下降,RT-PCR结果吸光度分析显示各时间段实验组与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),6、12、18、24h实验组组间比较除6h和12h组间差异无统计学意义外,其余各组组间差异均有统计学意义,24、30、36h实验组组间比较差异有统计学意义。Western blot吸光度分析显示各时间段实验组与对照组比较差异有统计学意义,6、12、18、24h实验组组间以及24、30、36h实验组组间比较差异有统计学意义。结论ET-3能时间和剂量依赖性地上调A375细胞株骨桥蛋白基因的表达。 展开更多
关键词 黑色素瘤 内皮素3 内皮素受体B 骨桥蛋白
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豚鼠外周血单个核细胞与耳蜗组织中糖皮质激素体含量的相关性分析 被引量:2
8
作者 陆玲 张秀玲 +3 位作者 杨秭莹 吴骎 戴艳红 佘万东 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第1期60-64,共5页
目的通过分析豚鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)与耳蜗组织中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白含量变化,探讨PBMC与耳蜗组织中GR含量的相关性。方法将32只健康白色豚鼠随机分为地塞... 目的通过分析豚鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)与耳蜗组织中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白含量变化,探讨PBMC与耳蜗组织中GR含量的相关性。方法将32只健康白色豚鼠随机分为地塞米松组和对照组,地塞米松组予地塞米松(5mg/ml,10mg/kg/day)腹腔连续注射7天,对照组予等体积的生理盐水腹腔连续注射7天。给药结束后次日取豚鼠PBMC及双侧耳蜗组织,通过实时荧光定量PCR检测豚鼠PBMC和左耳耳蜗组织中GR mRNA表达水平,通过Western blot结果半定量分析豚鼠PBMC和右侧耳蜗组织中GR蛋白的含量,并运用统计学软件SPSS16.0进一步分析豚鼠PBMC与耳蜗组织中GR mRNA及GR蛋白表达量的相关性及短期全身使用地塞米松对其表达量的影响。结果 GR mRNA与GR蛋白在豚鼠PBMC与耳蜗组织中均有表达,地塞米松组PBMC及耳蜗组织中GR mRNA与GR蛋白含量较对照组有明显提高,统计学相关性分析结果提示地塞米松组及对照组的PBMC与耳蜗组织的GR mRNA、GR蛋白表达量存在正相关,结果有统计学意义。结论豚鼠短期全身使用地塞米松可以使PBMC与耳蜗组织中的GR mRNA、GR蛋白含量均同步上调,豚鼠PBMC与耳蜗组织中GR mRNA、GR蛋白的含量变化具有正相关性。PBMC中GR含量可间接反映耳蜗组织的GR表达水平。 展开更多
关键词 受体 糖皮质激素 外周血单个核细胞 耳蜗 豚鼠
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青年聋人对耳聋基因检测的态度 被引量:3
9
作者 韩冰 戴朴 +5 位作者 李琦 王国建 袁永一 翟所强 黄德亮 韩东一 《中华耳科学杂志》 CSCD 2007年第4期384-387,共4页
目的通过了解青年聋人对耳聋基因检测的态度,使遗传咨询工作者更全面的考虑到聋人的思想观念,提高遗传咨询工作的质量。方法来自昆明华夏中专和贵阳盲聋哑学校的124名青年聋生参加了此研究。在知情同意的基础上,每人独立完成一份包含6... 目的通过了解青年聋人对耳聋基因检测的态度,使遗传咨询工作者更全面的考虑到聋人的思想观念,提高遗传咨询工作的质量。方法来自昆明华夏中专和贵阳盲聋哑学校的124名青年聋生参加了此研究。在知情同意的基础上,每人独立完成一份包含6个问题的调查表。结果124名青年聋生中,57%(71/124)的聋生对自己目前的状态不满意,希望得到改善;60%(75/124)的聋生希望未来的配偶为听力正常者;85%(105/124)的聋生希望生育听力正常的后代;84%(104/124)的聋生对耳聋基因检测感兴趣,89%(110/124)的聋生愿意接受耳聋基因检测。结论绝大部分聋人对耳聋基因检测持积极态度。聋人对耳聋基因检测的态度对遗传咨询工作有重要的指导意义。 展开更多
关键词 耳聋 基因检测 态度
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谷胱甘肽S-转移酶GSTT1、GSTM1基因多态性与老年性耳聋遗传易感性的关联性分析 被引量:2
10
作者 朱玉华 戴朴 +1 位作者 袁慧军 翟所强 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第1期12-16,共5页
目的探讨谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)GSTT1和GSTM1基因多态性是否与老年性耳聋遗传易感性相关。方法在解放军总医院耳鼻咽喉科研究所聋病分子诊断中心样本库中选取本研究的研究对象,提取基因组DNA;利用多重PCR(Pol... 目的探讨谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)GSTT1和GSTM1基因多态性是否与老年性耳聋遗传易感性相关。方法在解放军总医院耳鼻咽喉科研究所聋病分子诊断中心样本库中选取本研究的研究对象,提取基因组DNA;利用多重PCR(Polymerase chain reaction,PCR)的方法同时扩增所有研究对象GSTT/GSTM基因编码区并进行GSTM1和GSTT1基因多态性的分型;通过病例-对照关联性分析方法进行统计学分析,明确GSTT1和GSTM1的多态性和老年性耳聋遗传易感性是否相关。结果本研究共选取了224名研究对象,包括110例老年性耳聋病例(平均阈值PTA=51±11dB)及114例相同年龄构成的对照组(PTA=18±4dB);所有研究对象的年龄均在60至80岁之间,病例组(男77人,女33人)的平均年龄为72.93±5.080岁,对照组(男76人,女38人)的平均年龄73.10±5.787岁。通过GSTM1和GSTT1基因多态性分型及统计学分析结果显示:GSTM1、GSTT1基因型阳性率及GSTT1+/GSTM1+、GSTT1+/GSTM1-、GSTT1-/GSTT1+和GSTT1-/GSTM1-不同基因多态性频率在病例-对照组间差异均无显著的统计学意义(P>0.05)。结论中国人群中GSTT1和GSTM1基因的多态性与老年性耳聋之间并不存在较强的关联性。 展开更多
关键词 老年性聋 GSTT1/GSTMA基因 突变 易感性
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Cx26、Cx30与非综合征耳聋的研究现状及基因治疗的展望 被引量:5
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作者 曲雁 王娜 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第1期106-112,共7页
遗传性耳聋可分为综合征性耳聋(syndromic hearing loss,SHL)和非综合征性耳聋(nonsyndromic hearing loss,NSHL)。目前与遗传性耳聋关系最密切的两种连接蛋白是Cx26和Cx30,二者在耳蜗的生理功能上起着举足轻重的作用。随着人们对生活... 遗传性耳聋可分为综合征性耳聋(syndromic hearing loss,SHL)和非综合征性耳聋(nonsyndromic hearing loss,NSHL)。目前与遗传性耳聋关系最密切的两种连接蛋白是Cx26和Cx30,二者在耳蜗的生理功能上起着举足轻重的作用。随着人们对生活质量要求的提高,众多耳聋患者的听力亟待解决,目前基因治疗被认为是耳聋治疗最有希望的方法之一。本文就连接蛋白26、30与非综合征性耳聋的研究现状及耳聋基因治疗常用载体、常用治疗基因及内耳基因转导途径等方面的最新研究进展进行综述。 展开更多
关键词 连接蛋白 非综合征性耳聋 基因治疗
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TGF-β1真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达 被引量:1
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作者 于宏 周静 +4 位作者 孙伟 周洲 吴莹 姜政 王丕龙 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第24期2984-2988,共5页
目的:构建人转化生长因子-β1(TGF-β1)的真核表达载体,并检测其融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达,为阐明TGF-β1在肝纤维化发生、发展中的作用以及建立相应的基因沉寂治疗途径奠定基础.方法:从人的肝脏组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法... 目的:构建人转化生长因子-β1(TGF-β1)的真核表达载体,并检测其融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达,为阐明TGF-β1在肝纤维化发生、发展中的作用以及建立相应的基因沉寂治疗途径奠定基础.方法:从人的肝脏组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法获得人TGF-β1基因,将其克隆到真核荧光表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-TGF-β1,转染真核表达细胞COS-7中,通过荧光显微镜检测其表达,RT-PCR和Western Blot检测TGF-β1基因在真核细胞中的表达.结果:通过RT-PCR方法克隆人TGF-β1基因为1173bp,与目的基因片段大小相一致;测序结果显示,于531位有1个碱基突变:T→C,为无义突变.通过RT-PCR和Western Blot检测到TGF-β1基因的表达,其融合蛋白分子质量约为52ku(绿色荧光蛋白分子质量约为27ku),说明重组质粒在COS-7细胞内正常表达.结论:成功的构建了真核表达质粒pEGFP-N1-TGF-β1,并在真核细胞COS-7中表达,为进一步研究其在肝纤维化的基因治疗中奠定了基础. 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星形细胞 转化生长因子 基因治疗 转染
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阻断HepG2细胞中ERK信号转导途径对IFN诱导抗病毒蛋白的影响 被引量:1
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作者 吴园园 管世鹤 +1 位作者 杨凯 潘颖 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第11期1287-1290,共4页
目的探讨阻断细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导途径对α-干扰素(IFN-α)Janus激酶-信号转导和转录激活子(JAK-STAT)信号转导途径分子和抗病毒蛋白表达的影响。方法以人肝胚瘤细胞株HepG2细胞为研究对象,以单独IFN-α及IFN-α和ERK抑制剂... 目的探讨阻断细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导途径对α-干扰素(IFN-α)Janus激酶-信号转导和转录激活子(JAK-STAT)信号转导途径分子和抗病毒蛋白表达的影响。方法以人肝胚瘤细胞株HepG2细胞为研究对象,以单独IFN-α及IFN-α和ERK抑制剂PD98059联合处理细胞,分析阻断ERK途径对HepG2细胞IFN-α应答的变化。结果反转录PCR(RT-PCR)结果显示,HepG2细胞经处理后,细胞内抗病毒蛋白和JAK-STAT信号转导途径分子STATl、STAT2、IRF9 mRNA表达均增高,其中联合处理的表达升高更加明显。Western blot分析STAT1、STAT2结果与RT-PCR结果一致,另外,细胞经IFN处理后JAK-STAT信号转导途径抑制因子3(SOCS3)的表达升高,联合处理后,SOCS3表达减少。结论在体外细胞模型中,ERK信号转导途径可能通过调节SOCS3蛋白的表达而参与IFN-α抗病毒效应。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 Α干扰素 ERK抑制剂
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circ_0001955/miR-188-3p轴影响肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的分子机制研究 被引量:1
14
作者 王金娜 赵磊 +1 位作者 孙国钧 冯燕 《医学分子生物学杂志》 CAS 2021年第6期474-481,共8页
目的探讨circ_0001955对肺癌细胞恶性行为的影响及可能机制。方法RT-qPCR检测41例肺癌组织及癌旁组织中circ_0001955和miR-188-3p表达,分析肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p表达的相关性。体外培养肺癌细胞A549,双荧光素酶报告基因... 目的探讨circ_0001955对肺癌细胞恶性行为的影响及可能机制。方法RT-qPCR检测41例肺癌组织及癌旁组织中circ_0001955和miR-188-3p表达,分析肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p表达的相关性。体外培养肺癌细胞A549,双荧光素酶报告基因实验验证A549细胞中circ_0001955和miR-188-3p调控关系。构建干扰si-circ_0001955或过表达miR-188-3p的A549细胞,用CCK-8法和克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术及蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、迁移、凋亡及细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中circ_0001955表达升高(P<0.05),miR-188-3p表达降低(P<0.05)。肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p的表达呈负相关(r=-0.978,P<0.05)。circ_0001955可靶向结合miR-188-3p,且干扰circ_0001955促进A549细胞中miR-188-3p表达。干扰circ_0001955或过表达miR188-3p降低了A549细胞集落形成数、划痕愈合率及细胞中Bcl-2蛋白表达(P<0.05),提高了细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达(P<0.05)。干扰miR-188-3p逆转干扰circ_0001955对A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结论干扰circ_0001955可能通过上调miR-188-3p阻碍肺癌细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺癌 circ_0001955 miR-188-3p 细胞增殖 迁移 凋亡
原文传递
两种培养基对卵母细胞体外成熟效果比较 被引量:1
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作者 周桦 何峻 周从容 《贵阳医学院学报》 CAS 2013年第5期509-511,共3页
目的:观察两种培养基在未成熟卵母细胞体外培养时,对卵子成熟及授精后胚胎发育的影响。方法:144枚未成熟卵母细胞随机分为两组行体外成熟培养,组1为囊胚培养基,共培养80枚卵子;组2为人输卵管液培养基,共培养64枚卵子培养,两种培养基除... 目的:观察两种培养基在未成熟卵母细胞体外培养时,对卵子成熟及授精后胚胎发育的影响。方法:144枚未成熟卵母细胞随机分为两组行体外成熟培养,组1为囊胚培养基,共培养80枚卵子;组2为人输卵管液培养基,共培养64枚卵子培养,两种培养基除基础液不同,其余组分及含量均相同,比较两组卵子的体外成熟、受精及胚胎发育情况。结果:组1卵子成熟率(86.25%)明显高于组2(60.94%),差异有统计学意义(P<0.05);两组卵子的受精率、卵裂率及优胚率无明显差异(P>0.05),但组1有优于组2的趋势。结论:两种培养基均可将未成熟卵母细胞培养成熟,但囊胚培养基更优于人输卵管液培养基,且方便配制,更适用于临床。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外研究 培养基 胚胎 成熟率 受精率 卵裂率 优胚率
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分子诊断技术在传染病病原体检测中的应用 被引量:9
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作者 王升启 《传染病信息》 2014年第5期266-269,共4页
传染病病原体的准确检测是传染病有效防控的前提,也是合理用药的基础。然而,传统的病原体分离、培养等诊断方法不能完全满足临床治疗和疾病控制的需要。新发展的传染病分子诊断技术可有效弥补传统方法的不足。本文就新一代测序、核酸扩... 传染病病原体的准确检测是传染病有效防控的前提,也是合理用药的基础。然而,传统的病原体分离、培养等诊断方法不能完全满足临床治疗和疾病控制的需要。新发展的传染病分子诊断技术可有效弥补传统方法的不足。本文就新一代测序、核酸扩增、生物芯片和生物传感等传染病分子诊断新技术及其应用研究进展进行综述。 展开更多
关键词 分子诊断技术 基因扩增 高通量核苷酸测序 微点阵分析 生物传感技术 传染病
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人参皂甙Rg3对胰岛素样生长因子-Ⅰ基因敲除鼠乳腺癌组织血管生成相关基因的影响
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作者 任玉萍 叶子荣 +3 位作者 唐泓波 张军 高峰 吴毅平 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期724-727,共4页
目的探讨低血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平与正常水平的小鼠乳腺癌模型中,应用人参皂甙(GS)Rg3后IGF家族及血管生长因子相关基因的变化。方法7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导肝脏特异性IGF-Ⅰ基因敲除(LID)鼠及对照鼠建立原发性乳腺癌... 目的探讨低血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平与正常水平的小鼠乳腺癌模型中,应用人参皂甙(GS)Rg3后IGF家族及血管生长因子相关基因的变化。方法7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导肝脏特异性IGF-Ⅰ基因敲除(LID)鼠及对照鼠建立原发性乳腺癌模型,应用GSRg3进行干预治疗,利用基因芯片技术检测小鼠乳腺肿瘤及正常组织中相关基因的差异表达。结果①LID鼠组小鼠的肿瘤发生时间、生长速度及大小均低于对照组;②IGF家族及血管生长相关基因的变化:LID鼠组肿瘤组织中IGF-Ⅰ、IGFBP-4、IGFBP-7、FGF-1、FIGF、Ang-1、HGF、TGF-β1基因较对照组上调,IGF-Ⅱ、IGF-ⅡR、IGFBP-2、IGFBP-3、IGFBP-5、FLT-1、Ang-2、FGFR-2、PDGFa、PDGFb、THBS-1、Col18a1基因较对照组下调;应用GSRg3组IGF-ⅠR、IGF-ⅡR、IGFBP-2、IGFBP-3、IGFBP-5、VEGFa、Ang-2、EGF、EGFR、PDGFa、FG-FR-2、THBS-1、Col18a1基因较对照组上调,而IGF-Ⅰ、IGFBP-4、IGFBP-7、TEK、TGF-β1基因较对照组下调。结论IGF-Ⅰ促进小鼠乳腺癌的发生发展,且与血管生长密切相关。GSRg3可能通过IGF-Ⅰ及其结合蛋白、TEK、TGF-β1、THBS-1及Col18a1发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅰ 人参皂甙RG3 基因芯片 肿瘤
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分子病理学技术在非小细胞肺癌诊疗中的应用 被引量:1
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作者 冉雯雯 邢晓明 《精准医学杂志》 2020年第3期278-282,共5页
肺癌是全球发病率及致死率最高的肿瘤,非小细胞肺癌(NSCLC)是其最常见的类型。分子病理学是病理学和多个学科相结合形成的一门新的分支学科,从核酸和蛋白质等生物大分子水平研究疾病发生发展的机制,为疾病诊疗提供依据。分子病理学技术... 肺癌是全球发病率及致死率最高的肿瘤,非小细胞肺癌(NSCLC)是其最常见的类型。分子病理学是病理学和多个学科相结合形成的一门新的分支学科,从核酸和蛋白质等生物大分子水平研究疾病发生发展的机制,为疾病诊疗提供依据。分子病理学技术主要包括免疫组织化学(IHC)技术、原位杂交(ISH)技术、聚合酶链反应(PCR)相关技术及生物芯片技术等。本文将对分子病理学各项技术的发展、原理及在NSCLC诊疗中的应用进行综述。 展开更多
关键词 非小细胞肺 病理学 分子 免疫组织化学 原位杂交 聚合酶链反应 芯片分析技术 诊断 治疗学 综述
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特大常染色体显性遗传聋家系听力学特征及候选致病基因突变筛查
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作者 陈睿春 刘丞 +4 位作者 魏钦俊 鲁雅洁 卢新红 曹新 邢光前 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第4期417-422,共6页
目的探讨一中国常染色体显性遗传聋大家系的听力学特征,进行已知致聋基因已知突变位点的筛查。方法经知情同意,对家系成员进行全身检查及听力学检测,获得血样标本;整理分析家系资料并绘制系谱图;用基因组DNA抽提试剂盒提取外周血DNA。对... 目的探讨一中国常染色体显性遗传聋大家系的听力学特征,进行已知致聋基因已知突变位点的筛查。方法经知情同意,对家系成员进行全身检查及听力学检测,获得血样标本;整理分析家系资料并绘制系谱图;用基因组DNA抽提试剂盒提取外周血DNA。对2例家系患者DNA进行GJB2和GJB3基因全部编码区突变检测,对其余23个已知常染色体显性遗传性耳聋(DFNA)基因的74个已知突变位点所涉及的50个外显子进行PCR扩增和直接测序分析。结果该家系共7代199人,现存4代176人,耳聋患者54人。系谱分析显示,耳聋表型代代相传,男女患病人数分别为24和30,符合常染色体显性遗传特征。听力学表现为:迟发性、进行性、双侧对称性、感音神经性听力损失,首先是高频区受损,并快速向中、低频扩展。GJB2、GJB3基因全部编码区及其余23个DFNA基因已知突变位点的序列分析均无阳性发现。结论该家系是一个非综合征型常染色体显性遗传聋大家系,耳聋表型为迟发性、进行性、双耳对称性感音神经性听力损失;初步分子遗传学分析提示可能由新基因或已知基因的新突变致病。 展开更多
关键词 常染色体显性遗传 耳聋 家系 基因突变
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小肠黏膜下层对牙髓细胞粘附、增殖和再矿化影响的研究
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作者 曹春花 邹德荣 《口腔医学》 CAS 2013年第6期376-379,共4页
目的探讨小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)作为盖髓材料的可行性。方法分别以SIS、聚乳酸(polylactic acid,PLA)医用膜为细胞支架与人牙髓细胞复合培养,测定2组细胞粘附率、细胞增殖指数,并通过比较2组细胞的碱性磷酸酶活... 目的探讨小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)作为盖髓材料的可行性。方法分别以SIS、聚乳酸(polylactic acid,PLA)医用膜为细胞支架与人牙髓细胞复合培养,测定2组细胞粘附率、细胞增殖指数,并通过比较2组细胞的碱性磷酸酶活性水平和钙结节形成的大小,研究各组牙髓细胞的矿化能力。结果复合培养24 h时SIS组的细胞粘附率为64.36%,高于PLA组(P<0.05),且复合培养3、5、7 d时SIS组的细胞增殖指数分别为23.0、18.9、17.9,均高于PLA组(P<0.05)。SIS组细胞的碱性磷酸酶活性水平在7、14、21 d均高于PLA组(P<0.05),并且28 d时SIS组形成钙结节,PLA组未形成明显的钙结节。结论 SIS有良好的生物相容性,在体外能促进牙髓细胞增殖、矿化,有望成为一种新型的盖髓材料。 展开更多
关键词 小肠黏膜下层 牙髓细胞 盖髓材料 活髓保存
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