血浆置换联合早期连续性肾替代治疗在多发伤高肌红蛋白血症患者的临床应用

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作者 任洪冰 张元松 +3 位作者 朱浩然 邓文君 李朝军 刘涵 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第12期1276-1283,共8页

目的探讨血浆置换(plasmae exchange,PE)联合连续性肾替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)在多发伤高肌红蛋白血症患者的临床应用安全性及其对凝血、免疫功能的影响。方法收集2021年1月至2024年12月在陆军军医大学第... 目的探讨血浆置换(plasmae exchange,PE)联合连续性肾替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)在多发伤高肌红蛋白血症患者的临床应用安全性及其对凝血、免疫功能的影响。方法收集2021年1月至2024年12月在陆军军医大学第一附属医院急诊医学科创伤中心住院的60例严重多发伤高肌红蛋白血症患者的病例资料,采用非随机对照研究设计,根据患者治疗时血液净化方式的不同,将其中采用CRRT^(+)常规基础治疗的30例患者设为对照组,采用血浆置换^(+)CRRT^(+)常规基础治疗的30例患者设为观察组。比较2组患者治疗前后不同时间点血清肌红蛋白(myoglobin,Mb)等生化指标、炎症指标、外周血淋巴细胞亚群数量、凝血指标、临床指标及评分。结果2组患者治疗后1、2、3 d的Mb、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase-MB isoenzyme,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、钾离子(potassium Ion,K^(+))、白细胞计数(white blood cell count,WBC)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、D-二聚体(D-dimer,D-Di)均较治疗前降低(P<0.05);其中,观察组患者治疗后1、2、3 d的Mb、CK、CK-MB、LDH、SCr、BUN、K^(+)、WBC、CRP、PCT、IL-6、D-Di均明显低于对照组(P<0.05);另外,观察组患者平均总住院时间、平均入住创伤重症监护病房(trauma intensive care unit,TICU)住院时间和急性生理与慢性健康评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)明显低于对照组(P<0.05),而2组患者在凝血功能、淋巴细胞亚群指标无差异,无并发症出现。结论血浆置换联合CRRT在多发伤高肌红蛋白血症患者中早期应用可有效清除机体内Mb数量,改善血清生化指标、肾功能和炎症状态,维持内环境稳定,且不影响患者的免疫、凝血功能,有较高的临床应用和推广价值。 展开更多

关键词 血浆置换 多发伤 肌红蛋白 连续性肾脏替代疗法

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阳离子脂质体转染Hela细胞的实验 被引量：14

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作者 段艳 王冰 +5 位作者 崔韶辉 赵不凋 姜云霞 杨颖 姜慧明 张树彪 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2119-2122,共4页

背景:基因载体是基因治疗中重要的影响因素,阳离子脂质体细胞毒性低,转染效率高,是一种很有前景的基因转染载体。目的:评价两种阳离子脂质体介导基因转染宫颈癌细胞的转染效果,优化它们对宫颈癌细胞的转染条件。设计、时间及地点:以Hel... 背景:基因载体是基因治疗中重要的影响因素,阳离子脂质体细胞毒性低,转染效率高,是一种很有前景的基因转染载体。目的:评价两种阳离子脂质体介导基因转染宫颈癌细胞的转染效果,优化它们对宫颈癌细胞的转染条件。设计、时间及地点:以Hela细胞为观察对象,分组设计。实验于2008-03/06在大连民族学院生命科学学院国家民委-教育部重点实验室完成。材料:质粒pGFP-N2购自Clontech公司,Hela细胞由大连民族学院的实验室保存。方法:首先采用DNA延滞实验考察阳离子脂质体与DNA的结合能力,然后用进行细胞转染实验研究脂质体的转染效率,最后通过四甲基偶氮唑盐法考察脂质体对细胞的毒性。主要观察指标:采用DNA延滞实验观察阳离子脂质体Lipofectamine2000和DOTAP与DNA的结合能力,以报告基因(绿色荧光蛋白基因pGFP-N2),分析阳离子脂质体Lipofectamine2000和DOTAP转染Hela细胞转染效率和细胞毒性。结果:Lipofectamine2000和DOTAP与DNA均有很强的结合力;以绿色荧光蛋白基因为报告基因,Lipofectamine2000转染率较高;当Lipofectamine2000与DNA质量比为3∶1时,转染效率最高,约72%,是DOTAP转染细胞最高活性的2.5倍;在最佳转染剂量时,2种试剂的细胞存活率均在75%以上,Lipofectamine2000的毒性相对较小。结论:对Hela细胞而言,Lipofectamine2000较DOTAP具有更高的转染效率和较低的细胞毒性。 展开更多

关键词 LIPOFECTAMINE 2000 转染 细胞毒性 HELA 阳离子脂质体

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重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体的构建与鉴定 被引量：3

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作者 彭亮权 王大平 +7 位作者 周可 黄俊锋 任凯 徐小平 陆伟 熊建义 欧阳侃 朱伟民 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期3942-3946,共5页

背景:目前报道的重组腺病毒构建方法较复杂,构建周期长,导致重组腺病毒构建的成功率较低。GatewayTM技术是基于λ噬菌体的位点特异性高效重组系统,其构建重组病毒载体具有快捷高效的特点。目的:构建含人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病... 背景:目前报道的重组腺病毒构建方法较复杂,构建周期长,导致重组腺病毒构建的成功率较低。GatewayTM技术是基于λ噬菌体的位点特异性高效重组系统,其构建重组病毒载体具有快捷高效的特点。目的:构建含人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体,为应用骨形态发生蛋白2基因治疗的研究奠定基础。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2008-02/06在深圳市第二人民医院中心实验室完成。材料:pOTB7-BMP-2质粒、HEK293为ATTC产品;BLOCK-iTTM Adenovirus Expression System为Invitrogen产品;大肠杆菌DH5α为Biontex产品。方法:用聚合酶链反应方法扩增骨形态发生蛋白2目的基因,并插入载体pMD19-T Simple Vector中进行测序分析。将骨形态发生蛋白2基因亚克隆到穿梭载体pEC3.1(+)中,构建pEC3.1-BMP-2穿梭质粒,再将其中的表达盒通过重组克隆到pAd/BLOCK-iT?-DEST腺病毒载体中,线性化后转293细胞进行包装获得重组腺病毒rAd-BMP2。主要观察指标:①目的基因骨形态发生蛋白2的聚合酶链反应扩增。②重组质粒TS-BMP2的构建。③重组pEC3.1-BMP2的构建。④重组pAd-BMP2的构建。⑤重组腺病毒的制备与鉴定。结果:正确扩增长约1.2kb的骨形态发生蛋白2cDNA,并成功地构建其腺病毒载体,经线性化的pAd-BMP2DNA转染HEK293细胞,包装、扩增后得到人骨形态发生蛋白2重组腺病毒(rAd-BMP2),其滴度约为1×1010PFU/mL,该滴度可满足进一步的骨形态发生蛋白2成骨作用的研究。结论:成功地构建重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白 表达载体 腺病毒 转染

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RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响 被引量：2

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作者 李文林 石小玉 +3 位作者 刘弘晟 周莹 熊丽霞 赵林 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期4700-4703,共4页

背景:Delta-like4(DLL4)是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成。目的:研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响。设计、时间及地点:随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大... 背景:Delta-like4(DLL4)是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成。目的:研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响。设计、时间及地点:随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人微血管内皮细胞由上海细胞生物和生物化学研究所提供。方法:设计和化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lepofectamineTM2000介导DLL4siRNA转染人微血管内皮细胞。提取细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应扩增,琼脂糖电泳检测DLL4mRNA。提取细胞总蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。采用四甲基偶氮唑盐法检测DLL4siRNA对人微血管内皮细胞增殖的影响,实验分4组:①85nmol/LDLL4siRNA-duplex组。②85nmol/LDLL4siRNA-scrambled阴性对照组。③lepofectamine组。④未经处理组。主要观察指标:RNA干扰后,人微血管内皮细胞DLL4的转录和蛋白表达及人微血管内皮细胞的增殖。结果:反转录-聚合酶链反应和Westernblot实验结果显示,人微血管内皮细胞转录DLL4和表达DLL4蛋白;85nmol/LDLL4siRNA完全抑制人微血管内皮细胞DLL4转录和DLL4蛋白的表达。DLL4siRNA抑制人微血管内皮细胞DLL4表达的有效浓度为85nmol/L。四甲基偶氮唑盐实验结果显示,85nmol/L DLL4 siRNA-duplex组的细胞增殖率为190.00%,未经处理组的细胞增殖率为110.00%。结论:人微血管内皮细胞表达DLL4,DLL4siRNA抑制人微血管内皮细胞表达DLL4并促进人微血管内皮细胞增殖,DLL4对人微血管内皮细胞增殖具有抑制作用。 展开更多

关键词 DLL4 人微血管内皮细胞 RNA干扰 细胞增殖

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重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP的构建与鉴定 被引量：3

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作者 王长昇 林建华 吴朝阳 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期3947-3951,共5页

背景:基因治疗是目前脊髓损伤治疗的方向,目的基因和载体是基因治疗的关键。目的:构建携带增强型绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescence protein,EGFP)标志人脑源性神经营养因子(humanbrain-derived neurotrophic factor,hBDNF... 背景:基因治疗是目前脊髓损伤治疗的方向,目的基因和载体是基因治疗的关键。目的:构建携带增强型绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescence protein,EGFP)标志人脑源性神经营养因子(humanbrain-derived neurotrophic factor,hBDNF)基因重组腺病毒载体。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2007-09/2008-06在福建医科大学附属第一医院完成。材料:感受态大肠杆菌DH-5α购自美国Stratagene公司;pDC316-hBDNF、载体质粒pDC316-mCMV-EGFP、腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre、腺病毒包装系统AdMax和包装细胞株293购自加拿大Mixcrobix-Biosystems公司。方法:以pDC316-hBDNF为模板,聚合酶链反应扩增酶切获得hBDNF基因片段,连接到带有EGFP标记基因的载体质粒pDC316-mCMV-EGFP上,构建穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP。利用AdMax包装系统,穿梭质粒与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293包装细胞,同源重组产生复制缺陷型重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP,反复感染293细胞扩增病毒后,离子交换法纯化病毒,并测定病毒颗粒数及滴度。主要观察指标:①hBDNF基因原始质粒聚合酶链反应鉴定。②穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP的构建及鉴定。③重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP的包装、扩增及纯化。④毒种目的基因的聚合酶链反应鉴定。⑤纯化病毒的滴度测定结果。结果:经聚合酶链反应鉴定、限制性酶切分析及序列测定,证明已正确构建重组穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP和重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP;扩增纯化后,测得重组腺病毒颗粒数为2.4×1011VP/mL,A260/A280值约为2.0,滴度为0.8×1010CCID50/mL。结论:已成功构建重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP,为hBDNF基因功能及基因治疗的进一步研究奠定实验基础。 展开更多

关键词 脑源性神经营养因子 腺病毒载体 增强型绿色荧光蛋白 基因重组

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小鼠生精细胞发育特异基因spata3的表达分析和克隆纯化 被引量：2

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作者 李喜霞 张栋 +1 位作者 崔慧林 郭睿 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2024-2028,共5页

背景:雄性哺乳动物生精细胞自发性或诱发性凋亡现象与细胞凋亡相关基因有着密切的联系。spata3是一个新发现的小鼠生精细胞凋亡相关基因。目的:探讨小鼠生精细胞发育特异基因spata3的表达特性,制备高纯度的可溶性GST-SPATA3融合蛋白。... 背景:雄性哺乳动物生精细胞自发性或诱发性凋亡现象与细胞凋亡相关基因有着密切的联系。spata3是一个新发现的小鼠生精细胞凋亡相关基因。目的:探讨小鼠生精细胞发育特异基因spata3的表达特性,制备高纯度的可溶性GST-SPATA3融合蛋白。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-10/2008-08在山西医科大学生物化学与分子生物学实验室和组织学与胚胎学实验室完成。材料:pMD19-T Simple克隆载体及大肠杆菌菌株E.coli DH5α(TaKaRa公司),表达载体pET-41a(+)plasmid DNA(Novagen公司),大肠杆菌菌株E.coli BL21(DE3)(Solarbio公司);1,2,3,5,8周龄雄性和8周龄雌性BALB/c小鼠。方法:麻醉后颈椎脱臼处死小鼠,取出各小鼠的睾丸组织和8周龄小鼠的大脑、心脏、肝脏、肺、肾脏、脾脏、卵巢、子宫,提取各组织总RNA。通过聚合酶链反应、定量聚合酶链反应和原位杂交研究spata3mRNA表达及定位;通过构建原核表达载体,诱导并纯化蛋白,制备抗体。主要观察指标:①反转录-聚合酶链反应分析spata3组织特异性表达。②荧光定量聚合酶链反应分析spata3的阶段特异性表达。③spata3mRNA细胞定位的杂交信号。④SPATA3重组蛋白在原核细胞的表达及其纯化。⑤重组蛋白的Western blot分析。结果:反转录-聚合酶链反应表明spata3具有显著的睾丸组织特异性表达特征;实时定量聚合酶链反应显示spata3在精子发生后期高表达,可能与精子细胞的变态成形过程密切相关;原位杂交证明spata3转录本主要定位在圆形和长形精子细胞内,进一步提示该基因参与了精子细胞发育后期的形态变化。DNA序列测定和SDS-PAGE分析证明spata3原核表达载体构建成功并可被高效诱导表达;Western blot印迹杂交显示纯化的SPATA3重组蛋白具有高度的特异性。结论:spata3是小鼠睾丸组织特异表达的精子发生相关基因,在圆形和长形精子细胞中处于高水平转录状态;实验获得的高纯度可溶性融合蛋白完全满足后期抗体制备的需要。 展开更多

关键词 spata3 生精细胞 实时荧光定量聚合酶链反应 克隆

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逆转录病毒介导的RNAi抑制小鼠生精细胞Zfy基因表达的研究 被引量：2

7

作者 马军德 贾斌 +4 位作者 马世俊 申红 张挺军 付维明 蔡国宝 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第2期176-181,共6页

为了构建逆转录病毒RNAi(RNA interference)载体靶向抑制小鼠生精细胞Zfy基因的表达,检测Zfy基因的沉默效果。将构建好的逆转录病毒RNAi载体转染经分离培养的小鼠生精细胞,筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养,应用qRT-PCR检测各试验组... 为了构建逆转录病毒RNAi(RNA interference)载体靶向抑制小鼠生精细胞Zfy基因的表达,检测Zfy基因的沉默效果。将构建好的逆转录病毒RNAi载体转染经分离培养的小鼠生精细胞,筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养,应用qRT-PCR检测各试验组细胞Zfy基因mRNA的表达情况。结果显示,转染逆转录病毒RNAi载体的生精细胞Zfy基因mRNA的表达水平显著降低,与阴性对照和空白对照相比差异极显著(P<0.01);阴性对照与空白对照之间差异不显著(P>0.05)。因此,逆转录病毒RNAi载体可以稳定、高效抑制Zfy基因的表达,为进一步探究Zfy基因在小鼠生精过程中的作用和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 RNAI Zfy基因 逆转录病毒载体 小鼠生精细胞

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成人水痘患者心肌肌钙蛋白Ⅰ水平监测及临床意义 被引量：1

8

作者 王晓云 周涛 +1 位作者 邓丹琪 杨红英 《检验医学与临床》 CAS 2010年第2期97-97,100,共2页

目的探讨心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)水平变化对评估成人水痘患者心肌损伤的临床意义。方法应用全自动微粒子化学发光免疫分析系统2(Beckman Coulter Access Ⅰ mmunoassay System2)对成人水痘患者和健康者血清cTnI水平进行测定。结果血清cTn... 目的探讨心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)水平变化对评估成人水痘患者心肌损伤的临床意义。方法应用全自动微粒子化学发光免疫分析系统2(Beckman Coulter Access Ⅰ mmunoassay System2)对成人水痘患者和健康者血清cTnI水平进行测定。结果血清cTnI均值成人水痘组为(0.029±0.021)ng/L,心电图异常组为(0.032±0.012)ng/L,正常组为(0.027±0.012)ng/L。3组两两间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论96例成人水痘患者未发现cTnI明显异常,成人水痘患者心肌损伤的发生率可能较低。 展开更多

关键词 水痘 成年人 肌钙蛋白Ⅰ 心肌损伤

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构建pcDNA3.1/Hygro(+)-LeftyA真核表达载体及Lefty A的稳定表达细胞系 被引量：2

9

作者 李又空 张杰 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第37期7314-7317,共4页

背景:Lefty基因可能通过拮抗转化生长因子β1信号通路发挥抗肾纤维化作用。目的:为验证其抗纤维化作用,构建pcDNA3.1/Hygro(+)-LeftyA真核表达载体,并建立LeftyA稳定表达细胞系。设计、时间及地点:基因克隆构建,单一样本观察,于2008-04... 背景:Lefty基因可能通过拮抗转化生长因子β1信号通路发挥抗肾纤维化作用。目的:为验证其抗纤维化作用,构建pcDNA3.1/Hygro(+)-LeftyA真核表达载体,并建立LeftyA稳定表达细胞系。设计、时间及地点:基因克隆构建,单一样本观察,于2008-04/07在武汉大学人民医院中心实验室完成。材料:人肾小管上皮细胞株购于中国协和医科大学细胞库;真核表达载体pcDNA3.1/Hygro(+)由美国纽约州石溪大学SiamakTabibzadeh教授惠赠;LeftyA克隆载体pCMV-SPORT6购自武汉晶赛公司。方法:以pCMV-SPORT6为模板经PCR反应获得LeftyA编码区DNA,将其插入pcDNA3.1/Hygro(+)中构建LeftyA真核表达载体;通过LipofectamineTM2000将此重组质粒转染入人肾小管上皮细胞中,通过Hygromycin筛选挑取阳性表达克隆从而构建LeftyA稳定表达细胞系。主要观察指标:PCR扩增产物电泳鉴定结果。重组质粒的酶切鉴定结果。重组质粒基因测序结果。LeftyA稳定表达细胞系的筛选及其细胞内LeftyAmRNA表达。结果:pCMV-SPORT6经针对人LeftyA基因编码区序列的上下游引物PCR扩增后,10g/L琼脂糖凝胶电泳检测,在1.0kb条带处出现稍大于1.0kb的特异性扩增条带,与预期1.1kb目的片段大小相符。重组质粒分别被HindⅢ、BamHⅠ单酶切后所得片段大小一致,均为6.7kb,与重组质粒理论大小一致;经双酶切后得到大小分别为5.6kb和1.1kb的2条片段,与pcDNA3.1/Hygro(+)及LeftyA片段大小相符。将酶切鉴定阳性重组质粒测序,对测序结果进行生物信息学分析,发现与人LeftyA基因编码区序列完全一致。稳定转染LeftyA重组质粒的人肾小管上皮细胞高表达LeftyAmRNA。结论:pcDNA3.1/Hygro(+)-LeftyA真核表达载体构建成功,并建立了LeftyA稳定表达细胞系。 展开更多

关键词 LEFTY A 真核表达载体 稳定表达细胞系

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高效液相色谱法测定兔肌肉组织顺式阿曲库铵浓度 被引量：3

10

作者 孙文琴 莫利求 +3 位作者 秦莹 袁福利 伍伟军 刘明姬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期712-715,共4页

目的建立兔肌肉组织顺式阿曲库铵浓度的高效液相色谱紫外检测法。方法取单次静脉注射顺式阿曲库铵后兔膈肌和胫骨前肌,经匀浆、萃取后检测。色谱柱为Spher-sorb SCX(4.6 mm×150 mm,5μm,Phenomenex,USA),流动相为乙腈、硫酸钠和硫... 目的建立兔肌肉组织顺式阿曲库铵浓度的高效液相色谱紫外检测法。方法取单次静脉注射顺式阿曲库铵后兔膈肌和胫骨前肌,经匀浆、萃取后检测。色谱柱为Spher-sorb SCX(4.6 mm×150 mm,5μm,Phenomenex,USA),流动相为乙腈、硫酸钠和硫酸的混合液,梯度洗脱,流速:1 ml.min-1,柱温为室温;紫外检测波长为280 nm。结果顺式阿曲库铵线性范围0.1～2.0μg.g-1,最低检测限10 ng.g-1,不受肌肉组织内源性物质干扰,回收率大于90.0%,日内、日间变异率均小于5.0%,冻融稳定性良好。结论该方法特异性强,检测限低,灵敏度高,适于兔肌肉组织顺式阿曲库铵残留浓度检测。 展开更多

关键词 顺式阿曲库铵 高效液相色谱法 固相萃取 肌肉组织药物浓度 膈肌 胫骨前肌 残余肌松作用

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胱硫醚-γ-裂解酶在大鼠耳蜗的分布及其在噪声刺激后的表达变化

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作者 毛小波 乔莉 +3 位作者 邱建华 何亚 韩宇 米文娟 《中华耳科学杂志》 CSCD 2009年第1期55-59,共5页

目的探讨大鼠耳蜗胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的分布情况及在噪声刺激后的表达变化。方法通过免疫组织化学及免疫荧光染色技术,观察CSE在正常成年SD大鼠耳蜗内的分布及定位。32只SD大鼠被分成4组:正常对照组、1天组、... 目的探讨大鼠耳蜗胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的分布情况及在噪声刺激后的表达变化。方法通过免疫组织化学及免疫荧光染色技术,观察CSE在正常成年SD大鼠耳蜗内的分布及定位。32只SD大鼠被分成4组:正常对照组、1天组、1周组、3周组,后3组分别暴露于110dBSPL宽带白噪声中。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠接受强噪声刺激前后CSE在耳蜗内的表达变化。结果CSE主要表达在大鼠耳蜗的血管纹,螺旋突,以及耳蜗微小血管处;在耳蜗内外毛细胞、各类支持细胞、盖膜及蜗神经节处未见明显表达。随着噪声刺激时间的延长,CSE在mRNA水平的表达呈先增长后下降的趋势。结论CSE在耳蜗内的分布及其在噪声刺激后的表达变化,提示其在改善耳蜗血循环方面可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 胱硫醚-Γ-裂解酶 大鼠 耳蜗 噪声暴露

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Ac-SDKP调节Rac1信号抑制皮肤肌成纤维细胞的转化和迁移 被引量：1

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作者 王姗 张巧丹 +3 位作者 李世峰 徐洪 杨方 杨洁 《福建医科大学学报》 2019年第1期9-12,22,共5页

目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过阻断小G蛋白Ras相关的C3肉毒素底物(Rac1)信号,抑制转化生长因子β1(TGF-β1)介导的皮肤肌成纤维细胞转化的机制。方法原代培养大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、T... 目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过阻断小G蛋白Ras相关的C3肉毒素底物(Rac1)信号,抑制转化生长因子β1(TGF-β1)介导的皮肤肌成纤维细胞转化的机制。方法原代培养大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、TGF-β1诱导组及Ac-SDKP预处理组。划痕实验检测细胞迁移能力,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Rac1蛋白的表达,Western-blot法检测α-SMA、血清应答因子(SRF)、心肌蛋白相关转录因子(MRTF-A)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Rac1蛋白的表达。结果细胞划痕实验显示,TGF-β1诱导组与空白对照组比较,细胞迁移至中央划痕区的距离明显增大,Ac-SDKP预处理组与TGF-β1诱导组比较,细胞迁移至中央划痕区的距离减小。免疫细胞化学法检测结果显示,TGF-β1诱导组α-SMA和Rac1的阳性表达较空白对照组增强,而Ac-SDKP预处理组可明显抑制α-SMA和Rac1的阳性表达。TGF-β1诱导组的α-SMA,SRF,MRTF-A,ColⅠ及Rac1蛋白表达均较空白对照组明显上调,Ac-SDKP预处理组的蛋白表达较TGF-β1诱导组下降(P<0.05)。结论 Ac-SDKP能够阻断Rac1信号,抑制TGF-β1介导的皮肤成纤维细胞迁移能力的提高和肌成纤维细胞转化。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 成纤维细胞 细胞运动 蛋白质类

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