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枸杞糖肽激活CAMKK2/AMPK/MCU信号通路改善大鼠卵巢颗粒细胞衰老
1
作者 刘晓丹 凌晨 +5 位作者 刘璐 蒲静 马海滨 马会明 张文萍 陈冬梅 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1116-1125,共10页
目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光... 目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光法、蛋白免疫印迹法检测衰老标志和线粒体功能相关因子。结果CCK-8、EDU、Ki67与DOX组相比,经LbGP治疗可明显提高细胞活力(P<0.05),促进增殖(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后细胞中β-半乳糖苷酶阳性面明显减少(P<0.05);免疫荧光结果显示:与DOX组相比,LbGP治疗后p21、γH2A.X下降(P<0.05)、pRB升高(P<0.05);Western blot结果显示,与DOX组相比,LbGP治疗组衰老表型蛋白p21、p53明显减少(P<0.05),pRB升高(P<0.05);线粒体释放到胞质中的cyt C和活化的caspase-9明显减少(P<0.05);CAMKK2、pAMPK和线粒体钙稳态调节蛋白MCU水平升高(P<0.05);细胞核中能量代谢相关蛋白SIRT1、PGC1α/β和ATP5A1明显升高(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后ROS水平明显下降(P<0.05)。结论LbGP可改善DOX诱导的大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老,其机制可能是通过上调CAMKK2/AMPK信号通路,进而改善线粒体钙稳态,提高细胞能量代谢相关调节蛋白的表达水平实现的。为LbGP能够辅助改善卵巢功能提供了实验基础。 展开更多
关键词 枸杞糖肽 衰老 CAMKK2/AMPK信号通路 线粒体钙稳态 能量代谢 大鼠原代卵巢颗粒细胞
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TdR诱导肝癌细胞株HepG2细胞周期同步化的效果 被引量：2
2
作者 白瑞霞 王文礼 李丽梅 《科学技术与工程》 2008年第1期164-165,169,共3页
取对数生长期的HepG2细胞,加入含TdR的培养基28h后,收集细胞,用PBS洗2次,加完全培养基,分别于12h和24h收集各组细胞。用流式细胞术分析细胞周期各时相细胞百分数。探讨TdR(胸腺嘧啶核苷)诱导人肝癌细胞株HepG2同步化后的细胞周期时相的... 取对数生长期的HepG2细胞,加入含TdR的培养基28h后,收集细胞,用PBS洗2次,加完全培养基,分别于12h和24h收集各组细胞。用流式细胞术分析细胞周期各时相细胞百分数。探讨TdR(胸腺嘧啶核苷)诱导人肝癌细胞株HepG2同步化后的细胞周期时相的变化。结果是TdR能较好地使肝癌细胞株HepG2同步化于G1期和G2期。TdR诱导细胞后,分别于12中h获得(63.62±2.82)%的G2/M期同步化细胞,24h后获得(75.24±0.17)%的G1期同步化细胞。 展开更多
关键词 肝癌 细胞周期同步化 流式细胞术
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二苯乙烯苷对脑缺血啮齿动物脑NMDA受体及细胞内钙离子的影响 被引量：52
3
作者 刘治军 李林 +1 位作者 叶翠飞 艾厚喜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1112-1115,共4页
目的　研究二苯乙烯苷对脑缺血再灌注啮齿动物脑组织N 甲基 D 天 (门 )冬氨酸 (NMDA)受体结合力的影响 ,同时观察二苯乙烯苷对神经细胞内钙离子浓度的影响 ,初步探讨二苯乙烯苷对缺血再灌注动物的脑保护作用的机制。方法　麻醉后夹闭沙... 目的　研究二苯乙烯苷对脑缺血再灌注啮齿动物脑组织N 甲基 D 天 (门 )冬氨酸 (NMDA)受体结合力的影响 ,同时观察二苯乙烯苷对神经细胞内钙离子浓度的影响 ,初步探讨二苯乙烯苷对缺血再灌注动物的脑保护作用的机制。方法　麻醉后夹闭沙土鼠和小鼠双侧颈总动脉 10min后 ,小心撤去动脉夹制作缺血再灌注动物模型 :(1)沙土鼠再灌注 7d后处死 ,取前脑进行NMDA受体结合力实验 ;(2 )小鼠再灌注 15min后迅速断头取脑 ,切成脑片 ,加入Fluo 3/AM负载后 ,在激光扫描共聚焦显微镜上进行光切 ,观察不同层面皮层和海马区细胞内游离钙的荧光强度。结果　模型组的NMDA受体结合力比假手术组明显升高 ,而二苯乙烯苷治疗组可以降低模型动物的NMDA受体结合力 ;脑片的光切结果显示 ,脑缺血再灌注模型组神经细胞内游离钙离子浓度比假手术组明显升高 ;与模型组相比 ,二苯乙烯苷治疗组的细胞内游离钙离子浓度降低。结论　二苯乙烯苷能够抑制啮齿动物脑缺血再灌注所导致的脑组织NMDA受体结合力及神经细胞内钙离子浓度的升高 ,减轻钙超载导致的脑组织损伤 。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 何首乌 啮齿动物 脑缺血 兴奋性氨基酸受体 钙离子 激光共聚焦显微镜
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MCHR2在CHO细胞中的稳定表达及其信号通路分析 被引量：3
4
作者 杨俊霞 袁成福 +5 位作者 石华 魏丽丽 陈济 易发平 马永平 宋方洲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期294-299,共6页
目的构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3·1(+),经酶切和测序鉴定... 目的构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3·1(+),经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,经RT-PCR和Western blot鉴定后,通过测定细胞内cAMP、Ca2+浓度的改变分析MCHR2的信号转导通路。结果成功构建了pcDNA3·1-MCHR2真核表达载体并稳定转入CHO细胞,建立了稳定转染细胞系,成功地表达目的基因,MCH作用于MCHR2后不影响细胞内cAMP生成,可促使细胞内钙库释放Ca2+,进而使胞内Ca2+浓度出现明显而短暂的升高,提示MCHR2的信号转导通路主要是与Gq蛋白偶联。结论人MCHR2的稳定表达和信号转导通路分析为进一步体外研究MCHR2的功能提供了良好的实验基础。 展开更多
关键词 MCHR2 真核表达载体 稳定转染 基因表达 信号转导
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2019-2023年沈阳市蝇密度及其季节消长 被引量：2
5
作者 于冠华 吴旭 +1 位作者 周博 吴思璇 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2023年第6期510-513,共4页
目的了解沈阳市的蝇密度、种群构成及其季节消长变化的规律,为蝇类防治提供依据.方法采用笼诱法,于2019-2023年每年的5-10月在不同生境进行监测.结果2019-2023年沈阳市共布放蝇笼245个,捕蝇15739只,属5科9属12种,年平均密度为64.24只/笼... 目的了解沈阳市的蝇密度、种群构成及其季节消长变化的规律,为蝇类防治提供依据.方法采用笼诱法,于2019-2023年每年的5-10月在不同生境进行监测.结果2019-2023年沈阳市共布放蝇笼245个,捕蝇15739只,属5科9属12种,年平均密度为64.24只/笼,不同生境蝇密度依次为绿化带、居民区、农贸市场、餐饮外环境,不同年度、不同生境均以丝光绿蝇和厩腐蝇为优势种,分别占捕获总数的38.52%、23.66%.2019-2023年蝇类季节消长均呈单峰曲线,蝇密度在6-8月达到高峰后逐渐下降,10月蝇活动减弱.结论沈阳市蝇类主要集中在绿化带及居民区,6-8月为蝇类活动高峰,在蝇类防治过程中应结合季节消长规律,采取针对性措施,有效降低蝇密度. 展开更多
关键词 蝇密度 生境 季节消长
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Fura-2荧光测定胞质Ca^(2+)实验中注意Cd^(2+)的荧光干扰作用
6
作者 张政 蔡炳祥 +2 位作者 丘钦英 周家国 关永源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期763-764,共2页
目的探讨Cd2+在Fura-2荧光测定胞质Ca2+过程中对荧光的干扰作用。方法培养的PC12细胞,在无钙溶液中利用Fura-2荧光探针测定胞质内Ca2+浓度。结果在thapsigargin诱导Fura-2荧光比值(F340/F380)上升后,CdC l2可以导致F340/F380进一步升高... 目的探讨Cd2+在Fura-2荧光测定胞质Ca2+过程中对荧光的干扰作用。方法培养的PC12细胞,在无钙溶液中利用Fura-2荧光探针测定胞质内Ca2+浓度。结果在thapsigargin诱导Fura-2荧光比值(F340/F380)上升后,CdC l2可以导致F340/F380进一步升高。将细胞膜破坏,Fura-2从胞质内溢出,CdC l2依然可以导致荧光比值明显上升。在无PC12细胞,无Ca2+的溶液中,加入Fura-2/AM,100μmol.L-1CdC l2可以导致F340/F380明显升高。结论Cd2+对Fura-2及Fura-2/AM都存在荧光干扰现象,使荧光比值增加。 展开更多
关键词 CD^2+ FURA-2 荧光增敏 PC12
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磷掺杂碳量子点的分离及其光学性能研究
7
作者 雷云 黄丹丹 +1 位作者 林新华 刘爱林 《福建医科大学学报》 2019年第1期1-4,共4页
目的合成并分离磷掺杂碳量子点。方法以果糖和膦甲酸钠为前驱体水热法合成磷掺杂碳量子点,对洗脱条件进行优化,收集不同洗脱条件下得到的碳量子点样品,并进行紫外-可见光谱、荧光光谱和红外光谱表征以及量子产率的测定。结果随着碳量子... 目的合成并分离磷掺杂碳量子点。方法以果糖和膦甲酸钠为前驱体水热法合成磷掺杂碳量子点,对洗脱条件进行优化,收集不同洗脱条件下得到的碳量子点样品,并进行紫外-可见光谱、荧光光谱和红外光谱表征以及量子产率的测定。结果随着碳量子点极性的增大,碳量子点的发射波长逐渐红移,分离后的碳量子点与未分离的碳量子点混合液具有明显的光学性能差异。结论所合成的碳量子点产物可通过硅胶柱层析分离出具有不同极性及光学性能的碳量子点。 展开更多
关键词 碳量子点 光学 凝胶色谱法
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