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雄黄激活JNK/p38 MAPK通路对食管癌细胞凋亡的影响
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作者 张娜 杨如意 +3 位作者 方铠 段少阳 赵文玲 王宏斌 《中国医药导报》 2025年第16期7-12,共6页
目的探究雄黄通过激活JNK/p38 MAPK通路诱导活性氧(ROS)介导食管癌细胞凋亡的分子机制。方法使用不同浓度的雄黄(10、20、40、60、80、100μmol/L)处理食管癌细胞Eca109,并设立空白组、雄黄低剂量组(56.2μmol/L)、雄黄中剂量组(112.4μ... 目的探究雄黄通过激活JNK/p38 MAPK通路诱导活性氧(ROS)介导食管癌细胞凋亡的分子机制。方法使用不同浓度的雄黄(10、20、40、60、80、100μmol/L)处理食管癌细胞Eca109,并设立空白组、雄黄低剂量组(56.2μmol/L)、雄黄中剂量组(112.4μmol/L)、雄黄高剂量组(224.8μmol/L)。为进一步验证JNK/p38 MAPK通路的作用,另设雄黄高剂量+抑制剂组(224.8μmol/L雄黄+10μmol/L SB203580 JNK/p38 MAPK通路抑制剂)。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡率,活性氧检测试剂盒测定ROS水平,并通过Western blot法分析JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白的表达。结果与空白组比较,雄黄各浓度抑制细胞增殖,增加细胞凋亡率,上调Bax、cleaved-Caspase3及p-JNK/p-p38MAPK信号因子的表达,下调Bcl-2,升高ROS水平(P<0.01)。与雄黄高剂量组比较,雄黄高剂量+抑制剂组下调p-JNK和p-p38MAPK蛋白的表达水平(P<0.01),并降低细胞凋亡率(P<0.01)。结论雄黄通过激活JNK/p38 MAPK信号通路,增加ROS水平,进而诱导食管癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 雄黄 食管癌细胞 JNK/p38 MAPK信号通路 细胞凋亡
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过表达PP2Cm减轻阿托伐他汀诱导的胰岛素抵抗
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作者 赵诗晗 唐才林 +3 位作者 陈宇 黄伟康 罗凤蓉 白雪 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第7期1273-1282,共10页
目的探讨蛋白磷酸酶2Cm(protein phosphatase 2Cm,PP2Cm)特异性过表达对阿托伐他汀(atorvastatin)诱导胰岛素抵抗的潜在作用及相关机制。方法饲养♂C57BL/6J小鼠、成纤维细胞生长因子21敲除小鼠(FGF21-KO)和野生型(WT)小鼠12周后建模。... 目的探讨蛋白磷酸酶2Cm(protein phosphatase 2Cm,PP2Cm)特异性过表达对阿托伐他汀(atorvastatin)诱导胰岛素抵抗的潜在作用及相关机制。方法饲养♂C57BL/6J小鼠、成纤维细胞生长因子21敲除小鼠(FGF21-KO)和野生型(WT)小鼠12周后建模。分为Atorvastatin组、Control组、Atorvastatin+PP2Cm OE组、FGF21-KO+vehicle组、FGF21-KO+PP2Cm OE组、WT+vehicle组、WT+PP2Cm OE组。在第4、8、12周监测小鼠体质量、空腹血糖、空腹胰岛素,进行腹腔葡萄糖耐量实验;运用qRT-PCR、Western blot、ELISA法,测定阿托伐他汀治疗后小鼠细胞、组织和血清中支链氨基酸(branched-chain amino acid,BCAA)浓度,BCAA分解代谢酶mRNA及蛋白表达水平;探究过表达PP2Cm对上述指标的影响,并对变化最明显的FGF21进行体内外实验验证。结果阿托伐他汀治疗诱导小鼠胰岛素抵抗,影响胰岛素、耐糖水平,使BCAA水平升高,而过表达PP2Cm可减轻以上变化。在Atorvastatin+PP2Cm OE组中,FGF21的mRNA、蛋白、浓度表达均上调。无论PP2Cm是否过表达,敲除FGF21均使BCAA、空腹胰岛素和血糖水平高于WT组。结论FGF21可能是PP2Cm参与调控阿托伐他汀诱导胰岛素抵抗的关键因子,过表达PP2Cm可通过调节FGF21减轻该抵抗。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 胰岛素抵抗 支链氨基酸 蛋白磷酸酶2Cm 成纤维细胞生长因子21 支链-酮酸脱氢酶
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蚕蚀性角膜溃疡MMPs/TIMPs表达的研究 被引量:3
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作者 赵长霖 谢汉平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第15期1595-1597,共3页
目的探讨进行性蚕蚀性角膜溃疡患者角膜中基质金属蛋白酶(MMPs)及其特异性组织抑制剂的表达及意义。方法应用间接免疫荧光技术检测进行性蚕蚀性角膜溃疡与正常角膜中MMP-1、2、3、9,TIMP-1、2的分布,阳性结果应用图像分析系统进行定量... 目的探讨进行性蚕蚀性角膜溃疡患者角膜中基质金属蛋白酶(MMPs)及其特异性组织抑制剂的表达及意义。方法应用间接免疫荧光技术检测进行性蚕蚀性角膜溃疡与正常角膜中MMP-1、2、3、9,TIMP-1、2的分布,阳性结果应用图像分析系统进行定量分析。结果正常角膜中,仅上皮层有TIMP-1、2的弱阳性表达。在蚕蚀性角膜溃疡,MMP-1、2、3、9,TIMP-1、2均有阳性表达,MMP-2、TIMP-2表达于上皮层,MMP-3表达于基质层,MMP-1、9,TIMP-1在上皮层和基质层均有表达。结论在蚕蚀性角膜溃疡进展期,角膜中溃疡病变与损伤修复反应共存,但是修复速度不及组织破坏速度;其原因可能与角膜中MMP-9过度表达及MMPs/TIMPs系统调节失衡有关。 展开更多
关键词 蚕蚀性角膜溃疡 角膜 基质 金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制剂
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二肽基肽酶4的多功能性及相关药物靶点作用机制的研究进展 被引量:1
4
作者 汪磊 杨智荟 +5 位作者 郑洋 张瑛 赵铁建 罗伟生 梁天坚 王佳慧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2212-2217,共6页
二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase 4,DPP4)是丝氨酸膜固定的外肽酶,在人体的多项生理或病理活动过程中发挥重要调控作用。DPP4不仅作为转录因子调控下游靶基因的转录和表达,还能作为不依赖于转录的调节因子,通过蛋白间的相互作用,发挥... 二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase 4,DPP4)是丝氨酸膜固定的外肽酶,在人体的多项生理或病理活动过程中发挥重要调控作用。DPP4不仅作为转录因子调控下游靶基因的转录和表达,还能作为不依赖于转录的调节因子,通过蛋白间的相互作用,发挥其调控作用。在目前研究中,DPP4与多种疾病密切相关,并且已发现多种具有潜在靶向DPP4的物质。该文主要综述了DPP4在调节机体能量代谢、炎症、组织修复和癌变等多个方面的多功能性。同时,以慢性肝病的病理发展过程为基础,还综述了DPP4体外抑制剂的筛选以及其在调控慢性肝病方面的研究进展。 展开更多
关键词 二肽基肽酶4 药物靶点 炎症反应 组织修复 能量代谢 慢性肝病
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PON_(3)的生物学功能及其癌症相关的研究进展
5
作者 刘海涛(综述) 张敏(综述) 范理宏(审校) 《河北医科大学学报》 2025年第8期890-894,共5页
对氧磷酶3(paraoxonase 3,PON_(3))是对氧磷酶家族中定位细胞内的酶类成员,能调节线粒体中超氧阴离子的产生,同时参与内质网应激诱导的细胞凋亡。PON_(3)在部分人类肿瘤细胞中的表达水平呈现显著升高特征,并通过抗氧化作用防止癌细胞死... 对氧磷酶3(paraoxonase 3,PON_(3))是对氧磷酶家族中定位细胞内的酶类成员,能调节线粒体中超氧阴离子的产生,同时参与内质网应激诱导的细胞凋亡。PON_(3)在部分人类肿瘤细胞中的表达水平呈现显著升高特征,并通过抗氧化作用防止癌细胞死亡,与癌症的发生发展有密切的联系。因此,PON_(3)可能成为治疗癌症的潜在靶点。本文通过综述近几年关于PON_(3)生物学功能及癌症相关的研究,以期为癌症诊断及其治疗和预后提供新的思路。 展开更多
关键词 肿瘤 诊断 治疗 生物学功能
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caspase-8依赖的细胞死亡方式与脑缺血/再灌注损伤
6
作者 车彦熹 罗秀菊 彭军 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第12期2240-2245,共6页
caspase-8是一种细胞中广泛分布的半胱天冬氨酸蛋白酶。作为一种分子“开关”,caspase-8参与调控了多种细胞死亡方式,包括细胞凋亡、坏死样凋亡和细胞焦亡等。脑缺血/再灌注时,caspase-8激活是诱导神经细胞死亡的关键因素之一。目前,既... caspase-8是一种细胞中广泛分布的半胱天冬氨酸蛋白酶。作为一种分子“开关”,caspase-8参与调控了多种细胞死亡方式,包括细胞凋亡、坏死样凋亡和细胞焦亡等。脑缺血/再灌注时,caspase-8激活是诱导神经细胞死亡的关键因素之一。目前,既有caspase-8的特异性抑制剂,如Z-IETD-FMK和Ac-IETD-CHO等,也有多种泛caspase抑制剂,如z-VAD、Q-VD-OPH和恩利卡生等。动物和细胞实验均证明这些抑制剂能减轻脑缺血/再灌注损伤,该作用涉及抑制caspase-8活性,减少神经细胞凋亡。临床上,某些治疗缺血性脑卒中的药物可降低血浆caspase-8活性,提示caspase-8可能成为缺血性脑卒中诊断和预后的生物标志物。围绕caspase-8寻找和开发具有临床价值的抑制剂,有望为缺血性脑卒中新药研发提供新思路。 展开更多
关键词 CASPASE-8 caspase-8抑制剂 细胞凋亡 坏死样凋亡 细胞焦亡 脑缺血/再灌注
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糖基化神经酰胺相关代谢酶与动脉粥样硬化
7
作者 谭欣 魏强 +1 位作者 廖园红 陆景坤 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1005-1010,共6页
动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢异常和炎症反应的动脉病变,是许多心脑血管疾病的始动因素。糖基化神经酰胺是指神经酰胺分子上附加了糖基化基团的衍生物,其不仅影响细胞膜的结构完整性,还调控细胞凋亡、炎症及脂质代谢,糖基化神经酰胺... 动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢异常和炎症反应的动脉病变,是许多心脑血管疾病的始动因素。糖基化神经酰胺是指神经酰胺分子上附加了糖基化基团的衍生物,其不仅影响细胞膜的结构完整性,还调控细胞凋亡、炎症及脂质代谢,糖基化神经酰胺代谢紊乱与动脉粥样硬化发生、发展密切相关。该文主要探讨了糖基化神经酰胺相关的代谢酶——葡萄糖神经酰胺合成酶、葡萄糖脑苷酶、乳糖神经酰胺合成酶、半乳糖苷酶等在动脉粥样硬化中的具体功能,以及其对动脉粥样硬化发展的影响。同时,该文综述了这些代谢酶的靶向治疗策略、相关药物开发及在动脉粥样硬化防治中的重大潜力。 展开更多
关键词 糖基化神经酰胺 动脉粥样硬化 葡萄糖神经酰胺合成酶 葡萄糖脑苷酶 乳糖神经酰胺合成酶 半乳糖苷酶
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抑癌基因PTEN与肿瘤血管生成研究进展 被引量:21
8
作者 沈存思 范方田 +3 位作者 陶丽 陈文显 王爱云 陆茵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期597-600,共4页
PTEN是具有磷酸脂酶活性的抑癌基因,是双特异蛋白磷酸酶家族(DSPs)的成员,同时具有脂质磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶活性。而在肿瘤增殖,侵袭,迁移的过程中,肿瘤血管生成作为肿瘤发生发展中一个关键因素已越来越受到人们的关注。抑癌基因P... PTEN是具有磷酸脂酶活性的抑癌基因,是双特异蛋白磷酸酶家族(DSPs)的成员,同时具有脂质磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶活性。而在肿瘤增殖,侵袭,迁移的过程中,肿瘤血管生成作为肿瘤发生发展中一个关键因素已越来越受到人们的关注。抑癌基因PTEN可以参与PI3K/Akt信号通路,调控缺氧诱导因子1,基质金属蛋白酶,血管内皮生长因子,钠氢交换调控因子1等血管生成相关信号以及一些机体氧化产物来影响肿瘤血管生成。根据近年来PTEN基因与肿瘤血管生成关系最新研究信息,该文综述了其目前的研究现状。 展开更多
关键词 抑癌基因 PTEN 肿瘤 血管生成 PI3K AKT
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PLCE1调控p53诱导食管癌细胞凋亡的实验研究 被引量:17
9
作者 李昀 张军航 +2 位作者 安军 何锦园 黄邵洪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期82-86,共5页
目的探讨磷脂酶Cε1(PLCE1)基因抑制食管癌细胞凋亡的作用机制。方法选用人食管癌细胞株OE33和CPC作为研究对象。采用qRT-PCR、Western blot法分别检测转染PLCE1 siRNA前、后食管癌细胞OE33和CP-C中PLCE1、p53 mRNA和蛋白水平的表达;甲... 目的探讨磷脂酶Cε1(PLCE1)基因抑制食管癌细胞凋亡的作用机制。方法选用人食管癌细胞株OE33和CPC作为研究对象。采用qRT-PCR、Western blot法分别检测转染PLCE1 siRNA前、后食管癌细胞OE33和CP-C中PLCE1、p53 mRNA和蛋白水平的表达;甲基化特异性PCR重亚硫酸盐法检测p53启动子区甲基化状态;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果食管癌细胞株OE33和CP-C均高表达PLCE1,抑制PLCE1表达后食管癌细胞CP-C中p53表达上调并促进p53去甲基化,细胞凋亡明显增加。结论 PLCE1通过促进p53启动子区甲基化抑制p53的表达,从而抑制食管癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管癌 磷脂酶Cε1 P53 细胞凋亡 小干扰RNA 表观遗传学
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荔枝核黄酮类化合物对SARS-CoV 3CL蛋白酶抑制作用的研究 被引量:18
10
作者 龚受基 苏小建 +4 位作者 虞海平 李佳 覃永俊 徐庆 罗伟生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期699-700,共2页
关键词 荔枝核黄酮类化合物 SARS-COV 3CL蛋白酶 抑制 作用
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酸刺激前后唾液淀粉酶活性、流率和pH值的性别差异 被引量:5
11
作者 杨泽民 林静 +3 位作者 陈龙辉 张敏 陈蔚文 杨小蓉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期883-887,共5页
目的探讨唾液淀粉酶(sAA)活性、流率和pH值以及sAA活性与流率相关性的性别差异。方法采集105名健康志愿者酸刺激前后的唾液标本,测定其sAA活性、流率和pH值,分析sAA活性和流率的相关性,比较唾液测定指标之间的性别差异。结果柠檬酸刺激... 目的探讨唾液淀粉酶(sAA)活性、流率和pH值以及sAA活性与流率相关性的性别差异。方法采集105名健康志愿者酸刺激前后的唾液标本,测定其sAA活性、流率和pH值,分析sAA活性和流率的相关性,比较唾液测定指标之间的性别差异。结果柠檬酸刺激能增加sAA活性、流率和pH值,其中以流率增加最大(P<0.01);sAA活性、流率和pH值在酸刺激前后以及对刺激的反应(前后的差值)都不存在性别差异;女性在酸刺激前后sAA活性和流率之间以及sAA活性差值和流率差值之间都存在正相关(P<0.05),并且相关系数相对稳定;男性只在酸刺激后的sAA活性和流率之间表现正相关(P<0.01)。结论 sAA活性、流率和pH值在基础和应激状态下都没有性别差异,但是sAA活性和流率之间的相关性存在一定的性别差异。 展开更多
关键词 唾液 Α淀粉酶 流率 PH值 柠檬酸 性别
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N-V蛋白酶体内外纤维蛋白溶解活性的实验研究 被引量:10
12
作者 李奇 迟秀梅 +2 位作者 石立红 王艳萍 洪敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期976-979,共4页
目的研究NV蛋白酶对纤溶系统的影响。方法采用纤维蛋白平板法,观察NV蛋白酶体外溶解纤维蛋白的活性。通过一次静脉给药后不同时间测定家兔纤维蛋白原(Fg)、D二聚体(DDimer)的含量及血浆优球蛋白溶解时间(ELT),观察NV蛋白酶对正常家兔纤... 目的研究NV蛋白酶对纤溶系统的影响。方法采用纤维蛋白平板法,观察NV蛋白酶体外溶解纤维蛋白的活性。通过一次静脉给药后不同时间测定家兔纤维蛋白原(Fg)、D二聚体(DDimer)的含量及血浆优球蛋白溶解时间(ELT),观察NV蛋白酶对正常家兔纤维蛋白溶解活性的影响。通过测定家兔凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT),观察NV蛋白酶对凝血功能的作用。结果NV蛋白酶具有体外溶解纤维蛋白的活性,测定效价为30000kU·g-1。NV蛋白酶(6000U·kg-1体重,15000U·kg-1体重)可明显减少DDimer、Fg含量,缩短ELT,对PT、APTT无明显影响。结论NV蛋白酶具有纤维蛋白溶解活性,对凝血功能未见有影响。 展开更多
关键词 N—V蛋白酶 纤溶活性 凝血功能
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磷酯酶C对人血小板细胞质游离钙离子浓度的影响 被引量:7
13
作者 杨芳 王常高 +3 位作者 干信 陈明锴 王近芬 陈涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期37-40,共4页
目的 测定磷酯酶C(phospholipaseC ,简称PLC ,下同 )对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法 将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura 2 /AM进行负载 ,分别用生理... 目的 测定磷酯酶C(phospholipaseC ,简称PLC ,下同 )对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法 将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura 2 /AM进行负载 ,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理荧光负载后的血小板 ,采用双波长荧光分光光度法分别测定经过不同处理后的血小板在静息状态和以ADP为诱导剂时的激活状态下的胞质游离钙离子浓度 [Ca2 + ]i。结果 以健康成人血为样品时 ,经生理盐水、ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1处理后的血小板 ,在静息状态下测得的胞质游离 [Ca2 + ]i 浓度 (nmol·L-1)分别为15 2 5 5± 15 0 7,131 6 3± 15 5 8,14 0 2 7± 12 0 3,139 4 8± 1 73,12 1 11± 9 5 8,116 6 2± 15 96和 10 7 2 0± 17 0 7,而以ADP为诱导剂激活血小板后测得的胞质游离 [Ca2 + ]i(nmol·L-1)分别为 90 2 6 2± 94 74 ,6 87 99± 6 2 86 ,810 99± 72 37,70 1 73± 2 1 37,4 2 9 6 7± 71 5 9,342 82± 4 4 86和 2 6 3 2 7± 2 5 4 6。以生理盐水作为对照 ,ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1剂量组对激活状态下血小板胞质 [Ca2 + ]i 的抑制率I(% )分别为 2 5 展开更多
关键词 磷酯酶C 人血小板 胞质游离钙 荧光测定
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ADAM8在恶性肿瘤转移中的作用研究进展 被引量:5
14
作者 贾琦 刘兆国 +5 位作者 余苏云 陈力川 祝娉婷 陈文星 王爱云 陆茵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1037-1040,共4页
转移是恶性肿瘤的重要生物学特征之一,与肿瘤患者的预后紧密相关。近年来研究表明,去整合素-金属蛋白酶8(a disintegrin and metalloprotease 8,ADAM8)在多种恶性肿瘤中呈现高表达状态,且在恶性肿瘤的转移中发挥着重要的作用。研究显示,... 转移是恶性肿瘤的重要生物学特征之一,与肿瘤患者的预后紧密相关。近年来研究表明,去整合素-金属蛋白酶8(a disintegrin and metalloprotease 8,ADAM8)在多种恶性肿瘤中呈现高表达状态,且在恶性肿瘤的转移中发挥着重要的作用。研究显示,ADAM8过表达可减弱肿瘤细胞间的黏附作用,并促进细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解和细胞膜上细胞因子释放,同时有助于肿瘤部位新生血管生成,从而促进了肿瘤细胞转移。因此,抑制ADAM8有可能对肿瘤转移产生抑制作用,这使得ADAM8成为恶性肿瘤的预后指标和潜在治疗靶点,备受关注。该文对ADAM8与肿瘤转移的研究进展进行综述,探讨ADAM8介导的肿瘤转移的机制和靶向ADAM8进行肿瘤转移治疗的策略,为后续研究和临床治疗提供重要的参考。 展开更多
关键词 肿瘤 肿瘤转移 去整合素-金属蛋白酶8 ECM 作用机制 治疗策略
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眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A_2的研究进展 被引量:8
15
作者 杨亚萍 梁中琴 +1 位作者 顾振纶 秦正红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1045-1048,共4页
眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A2(sPLA2)作为眼镜蛇毒中的一个重要成分,有着广泛的生物学活性,近年来的研究热点正日益从眼镜蛇粗毒转向毒素中的某个单体,如sPLA2的研究。该文简要综述了眼镜蛇毒sPLA2的结构特征、分离纯化以及分子生物学特性,... 眼镜蛇毒分泌型磷脂酶A2(sPLA2)作为眼镜蛇毒中的一个重要成分,有着广泛的生物学活性,近年来的研究热点正日益从眼镜蛇粗毒转向毒素中的某个单体,如sPLA2的研究。该文简要综述了眼镜蛇毒sPLA2的结构特征、分离纯化以及分子生物学特性,着重论述了sPLA2多样的药理毒理作用,并对其作用机制和发展前景进行了探讨。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒 分泌型磷脂酶A2 约理作用 肿瘤
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原矛头蝮蛇毒中一个新颖双链纤溶酶的分离纯化与性质研究 被引量:8
16
作者 季仁升 孙黔云 乙引 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期818-823,共6页
目的从原矛头蝮蛇毒中寻找新型纤溶酶,对其理化性质与生物学活性进行研究,以了解其在蛇伤中的作用与毒性机制,并评估其潜在的应用价值。方法采用蛋白层析技术分离纯化获得目标蛋白,检测其分子量、等电点、肽指纹图谱、多种蛋白水解活性... 目的从原矛头蝮蛇毒中寻找新型纤溶酶,对其理化性质与生物学活性进行研究,以了解其在蛇伤中的作用与毒性机制,并评估其潜在的应用价值。方法采用蛋白层析技术分离纯化获得目标蛋白,检测其分子量、等电点、肽指纹图谱、多种蛋白水解活性、抗补体活性、出血活性、水肿活性及对流血时间的影响。结果通过阴离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析从原矛头蝮蛇毒中纯化出一个酸性纤溶酶PMSP-A,它是由两条等电点分别为5.7与6.1的非均等肽链共价结合而成。SDS-PAGE和凝胶过滤测定其分子量分别为26.1 ku与25.3 ku。肽指纹图谱分析表明PMSP-A与黄绿烙铁头蛇毒中的血液凝固结合因子有部分序列吻合。PMSP-A能够依次降解纤维蛋白原的Bβ、Aα链,该活性能被PMSF、1,10-phenanthroline抑制,EDTA、EGTA、SBTI不能抑制其活性。PMSP-A具有纤维蛋白、精氨酸酯水解活性,没有偶氮酪蛋白水解活性。它还具有抗补体活性。动物实验表明,PMSP-A明显延长小鼠尾静脉流血时间,能诱导小鼠足趾轻度水肿,无皮下出血活性。结论 PMSP-A是一个新颖的原矛头蝮蛇毒双链丝氨酸蛋白酶,具有多种影响机体的生物学活性。 展开更多
关键词 蛇毒丝氨酸蛋白酶 纤溶酶 抗凝活性 纤维蛋白(原)水解活性 抗补体活性 蛇伤 蛇毒 原矛头蝮蛇 烙铁头蛇
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一种磷脂酶A_2抑制剂体外筛选方法的建立 被引量:5
17
作者 刘彬 齐云 +2 位作者 王敏 蔡润兰 宋杨 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期890-892,共3页
目的建立磷脂酶A2(PLA2)抑制剂体外筛选的方法。方法以大豆磷脂酰胆碱为底物,通过分光光度法测定PLA2水解底物产生游离脂肪酸的量,间接反映待测物对PLA2活性的影响,并考查酶浓度、底物浓度及反应时间与游离脂肪酸生成量的线性关系。结... 目的建立磷脂酶A2(PLA2)抑制剂体外筛选的方法。方法以大豆磷脂酰胆碱为底物,通过分光光度法测定PLA2水解底物产生游离脂肪酸的量,间接反映待测物对PLA2活性的影响,并考查酶浓度、底物浓度及反应时间与游离脂肪酸生成量的线性关系。结果在一定范围内,酶浓度、底物浓度及反应时间与游离脂肪酸生成量呈良好的线性关系,氯丙嗪对PLA2的IC50为501μmol.L-1,甘草甜素对PLA2的IC50为461μmol.L-1。结论建立的磷脂酶A2抑制剂体外筛选方法,具有灵敏度高、快捷、准确、可操作性强的特点。 展开更多
关键词 磷脂酶A2 抑制剂 体外 分光光度法
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磷酸二酯酶及其抑制剂的研究进展 被引量:27
18
作者 陈昌亮 黄爽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期283-286,共4页
磷酸二酯酶(PDEs)是一类可水解细胞内第二信使环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)的酶类,可调节细胞内的多种信号传递和生理活动。PDEs由11种不同的家族组成,且各家族... 磷酸二酯酶(PDEs)是一类可水解细胞内第二信使环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)的酶类,可调节细胞内的多种信号传递和生理活动。PDEs由11种不同的家族组成,且各家族包含不同的亚型,各个亚型在细胞内分布、表达、调节方式以及对抑制剂的敏感性均不同,参与了炎症、哮喘、抑郁、勃起功能障碍等多种病理过程的发生发展,这些特点使得PDE作为新的药物靶点得到了越来越多的关注。该文将从PDE各家族生物学特点、生理病理学意义及其抑制剂的应用作一简单综述。 展开更多
关键词 磷酸二酯酶 磷酸二酯酶抑制剂 CAMP CGMP PDE4 PDE5
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AFU、AFP-L3、HCY联合检测对原发性肝癌早期诊断临床价值的研究 被引量:5
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作者 董怀平 王力 +2 位作者 赵歧刚 张延强 李庆敏 《国际检验医学杂志》 CAS 2007年第6期576-576,F0003,共2页
目的探讨3种血清肿瘤标志物α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、AFP异质体(AFP-L3)及同型半胱氨酸(HCY)联合检测原发性肝癌(PHC)的互补诊断价值及对肝癌早期诊断的意义。方法对该院2004年11月~2005年12月收治的84例PHC患者、健康对照组30... 目的探讨3种血清肿瘤标志物α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、AFP异质体(AFP-L3)及同型半胱氨酸(HCY)联合检测原发性肝癌(PHC)的互补诊断价值及对肝癌早期诊断的意义。方法对该院2004年11月~2005年12月收治的84例PHC患者、健康对照组30例、乙型肝炎对照组30例和冠心病组30例联合检测AFU、AFP-L3及HCY。采用速率法测定AFU水平,电泳亲和印迹法测定AFP-L3,采用IMx同型半胱氨酸专用试剂包测定HCY。结果PHC组与健康对照组血清AFU、AFP-L3及HCY水平相比差异有统计学意义(P〈O.01);3项标志物单项检测的敏感性分别为46.43%、88.10%、84.52%,3项指标联合检测PHC的检出率可达93.63%;PHC组与冠心病组HCY浓度差异有统计学意义(P%0.05)。结论联合检测AFU、AFP-L3及HCY 3项指标对HPC的早期诊断有一定的指导意义。 展开更多
关键词 肝肿瘤 甲胎蛋白类 Α-L-岩藻糖苷酶 半胱氨酸 早期诊断
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人PTP1B基因cDNA全长的克隆和原核系统表达 被引量:4
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作者 鲁云霞 李俊 +4 位作者 章秋 徐元宏 陈兵 张吕钊 孙玉诚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期91-95,共5页
目的构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因cD-NA全长的原核表达质粒(pET-28a(+)-hPTP1B)并在大肠杆菌中高效表达。方法取2型糖尿病人(BMI>28kg.m-2)的淋巴细胞提取总RNA,RT-PCR后的扩增产物回收构建克隆载体pMD-hPTP1B,测序后设计带... 目的构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因cD-NA全长的原核表达质粒(pET-28a(+)-hPTP1B)并在大肠杆菌中高效表达。方法取2型糖尿病人(BMI>28kg.m-2)的淋巴细胞提取总RNA,RT-PCR后的扩增产物回收构建克隆载体pMD-hPTP1B,测序后设计带酶切位点BamHⅠ和EcoRⅠ的引物,PCR后酶切连入pET-28a(+)中,转化DE3,IPTG诱导表达,SDS-PAGE后用Westernblot检测其特异表达,并进一步对rhPTP1B诱导表达时IPTG的浓度、时间和温度等条件进行了优化。结果测序证实所得的hPTP1BcDNA序列与其在GenBank中的序列一致,重组质粒pET-28a(+)-hPTP1B的双酶切结果与预期大小完全一致,IPTG诱导后高效表达的蛋白质是其不溶性的包涵体形式。IPTG诱导的最佳浓度是0.05mmol.L-1,时间为5h,温度为37℃。结论成功克隆了人PTP1B基因,构建了相应的原核表达载体并对原核体系诱导表达的条件进行了优化,使其能在DE3中高效表达,为筛选高特异的小分子抑制剂和制备相应的单克隆抗体打下坚实的基础。 展开更多
关键词 蛋白酪氨酸磷酸酶1B CDNA pET-28a(+) 高效表达 包涵体
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