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CHK2调节PARP1对血管性痴呆大鼠神经功能影响
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作者 姚婷 邓谦 +3 位作者 周颖 石红梅 蒋军林 吴玉华 《青岛大学学报(医学版)》 2025年第5期659-664,共6页
目的探讨周期检查点激酶2(CHK2)调节聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)对血管性痴呆(VD)大鼠神经功能的影响及相关机制。方法将46只成年雄性SD大鼠分为4组:阴性对照组(13只)、模型组(13只)、CHK2 shRNA组(10只)以及PARP1 shRNA组(10只)。... 目的探讨周期检查点激酶2(CHK2)调节聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)对血管性痴呆(VD)大鼠神经功能的影响及相关机制。方法将46只成年雄性SD大鼠分为4组:阴性对照组(13只)、模型组(13只)、CHK2 shRNA组(10只)以及PARP1 shRNA组(10只)。采用苏木精-伊红染色观察大鼠海马组织和神经元的病理变化,TUNEL实验检测大鼠海马组织神经细胞的凋亡,水迷宫实验评估大鼠穿越平台次数和逃避潜伏期时间的变化,酶联免疫吸附试验检测大鼠海马组织的白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α表达,比色法检测海马组织超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)表达,蛋白免疫印迹实验检测大鼠海马组织CHK2与PARP1的表达。结果各检测指标均数多组间比较,差异均有显著性(F=46.850~607.692,P<0.001)。与模型组大鼠比较,CHK2 shRNA组和PARP1 shRNA组损伤的海马组织结构得到改善、海马神经元凋亡数量减少(P<0.05),大鼠穿越平台次数增多、逃避潜伏期时间缩短(P<0.05),海马组织炎症因子及MDA表达降低,而SOD及GSH表达增加(P<0.05)。CHK2 shRNA组大鼠海马组织PARP1的表达降低(P<0.05)。结论抑制VD大鼠体内CHK2表达可改善其认知功能,其机制可能与干扰CHK2后导致PARP1表达降低相关。 展开更多
关键词 痴呆 血管性 周期检测点激酶2 多(ADP核糖)聚合酶1 炎症介导素类 氧化性应激 记忆与学习测试 大鼠 Sprague-Dawley
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温肾健脾方通过p70S6K信号通路调控自噬减轻糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的机制
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作者 史波 李如瑶 +2 位作者 金汀龙 王金 曹晓丹 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期567-573,共7页
目的探究基于70 ku核糖体S6激酶(phosphoprotein 70 S6 kinase,p70S6K)信号通路的温肾健脾方调控自噬减轻糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞损伤的作用机制。方法将链脲佐菌素诱导的DN模型大鼠分为5组,每组6只,即DN对照组... 目的探究基于70 ku核糖体S6激酶(phosphoprotein 70 S6 kinase,p70S6K)信号通路的温肾健脾方调控自噬减轻糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞损伤的作用机制。方法将链脲佐菌素诱导的DN模型大鼠分为5组,每组6只,即DN对照组、温肾健脾方低剂量组(7.5 g·kg^(-1)·d^(-1))、温肾健脾方中剂量组(15 g·kg^(-1)·d^(-1))、温肾健脾方高剂量组(30 g·kg^(-1)·d^(-1))、缬沙坦阳性对照组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),另以6只正常大鼠作为阴性对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg^(-1)·d^(-1)),各组大鼠连续灌胃8周。测定各组大鼠空腹血糖、尿液白蛋白/肌酐比值(urine albumin/creatinine ratio,UACR)和血液黏滞性,透射电镜观察各组大鼠足细胞结构和自噬小体变化,Western blot检测各组大鼠肾脏组织信号通路因子p70S6K和自噬因子p62的表达水平,免疫组化检测各组大鼠肾脏组织p62的表达水平。结果温肾健脾方可降低DN大鼠空腹血糖和UACR比值,改善血液黏滞性。透射电镜提示,温肾健脾方能够明显改善DN模型大鼠足细胞结构,提高足细胞自噬水平。Western blot结果提示,DN模型大鼠肾脏细胞信号通路因子p70S6K和自噬因子p62表达水平比空白对照组大鼠明显升高,差异有统计学意义( P <0.01)。与模型对照组相比,不同浓度温肾健脾方干预后p70S6K和p62表达水平均有所下降( P <0.05),其中温肾健脾方中剂量组变化最为显著。免疫组化结果显示,与对照组大鼠相比,DN大鼠肾脏组织自噬因子p62水平升高,温肾健脾方对DN大鼠p62的表达有一定的抑制作用。 结论 温肾健脾方可能通过抑制DN大鼠肾脏组织p70S6K水平,降低自噬因子p62表达,诱导肾脏细胞自噬增强进而恢复细胞稳态。 展开更多
关键词 温肾健脾方 糖尿病肾病 自噬 足细胞 P70S6K P62
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基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制 被引量:2
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作者 章帅 刘靓靓 +2 位作者 赵轶峰 盛茹 李曙光 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期508-514,共7页
目的探讨基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制。方法30只大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,MAGE-3沉默(SM)组,每组10只,对MO组、SM组采用MNNG灌胃法建模,建模成功后,... 目的探讨基于MAPK/ERK信号通路探讨siRNA介导MAGE-3沉默对胃癌大鼠肠道菌群、胃黏膜PTEN表达及肝转移的作用机制。方法30只大鼠,随机分为正常(CO)组,模型(MO)组,MAGE-3沉默(SM)组,每组10只,对MO组、SM组采用MNNG灌胃法建模,建模成功后,对SM组腹腔注射20μg·kg^(-1) shRNA MAGE-3慢病毒载体,肠道菌群选择性培养基检测大鼠肠道菌群数量,免疫组化法检测胃黏膜PTEN表达,HE染色检测肝转移情况,免疫印迹法检测MAPK/ERK信号通路蛋白表达,体外实验验证siRNA介导MAGE-3沉默对MAPK/ERK信号通路的调节作用。结果与CO组相比,MO组肠球菌、大肠埃希菌含量、p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达升高(P<0.05),乳酸杆菌、双岐杆菌含量、PTEN表达降低(P<0.05),与MO组比较,SM组肠球菌、大肠埃希菌含量、p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达降低(P<0.05),乳酸杆菌、双岐杆菌含量、PTEN表达升高(P<0.05);与CO组相比,MO组细胞p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达无明显差异(P>0.05),与MO组比较,SM组细胞p-MEK1、p-ERK1、p-Elk1蛋白表达降低(P<0.05)。结论siRNA介导MAGE-3沉默可明显改善胃癌大鼠肠道菌群,促进胃黏膜PTEN表达,并抑制肝转移,其作用机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 MAPK/ERK信号通路 MAGE-3 胃癌 肠道菌群 PTEN 肝转移
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枸杞糖肽激活CAMKK2/AMPK/MCU信号通路改善大鼠卵巢颗粒细胞衰老 被引量:1
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作者 刘晓丹 凌晨 +5 位作者 刘璐 蒲静 马海滨 马会明 张文萍 陈冬梅 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1116-1125,共10页
目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光... 目的探讨枸杞糖肽(Lycium barbarum glycopeptide,LbGP)改善大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老的作用机制。方法大鼠原代卵巢颗粒细胞分为正常组,DOX组及DOX加入4种不同浓度的LbGP治疗组干预后,通过CCK-8、EDU和Ki67检测细胞增殖情况、免疫荧光法、蛋白免疫印迹法检测衰老标志和线粒体功能相关因子。结果CCK-8、EDU、Ki67与DOX组相比,经LbGP治疗可明显提高细胞活力(P<0.05),促进增殖(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后细胞中β-半乳糖苷酶阳性面明显减少(P<0.05);免疫荧光结果显示:与DOX组相比,LbGP治疗后p21、γH2A.X下降(P<0.05)、pRB升高(P<0.05);Western blot结果显示,与DOX组相比,LbGP治疗组衰老表型蛋白p21、p53明显减少(P<0.05),pRB升高(P<0.05);线粒体释放到胞质中的cyt C和活化的caspase-9明显减少(P<0.05);CAMKK2、pAMPK和线粒体钙稳态调节蛋白MCU水平升高(P<0.05);细胞核中能量代谢相关蛋白SIRT1、PGC1α/β和ATP5A1明显升高(P<0.05);与DOX组相比,LbGP治疗后ROS水平明显下降(P<0.05)。结论LbGP可改善DOX诱导的大鼠原代卵巢颗粒细胞衰老,其机制可能是通过上调CAMKK2/AMPK信号通路,进而改善线粒体钙稳态,提高细胞能量代谢相关调节蛋白的表达水平实现的。为LbGP能够辅助改善卵巢功能提供了实验基础。 展开更多
关键词 枸杞糖肽 衰老 CAMKK2/AMPK信号通路 线粒体钙稳态 能量代谢 大鼠原代卵巢颗粒细胞
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香草醛对LPS诱导的BV2细胞TREM2/PI3K表达的影响 被引量:1
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作者 苏琳琳 梁冰 +1 位作者 袁庆 胡利民 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1199-1200,共2页
川芎为伞形科植物川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)的干燥根茎,具有活血行气,祛风止痛的功效[1]。香草醛(vanillin)作为川芎的主要活性成分,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌等特性[2]。骨髓细胞表达的触发受体2(triggering receptor exp... 川芎为伞形科植物川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)的干燥根茎,具有活血行气,祛风止痛的功效[1]。香草醛(vanillin)作为川芎的主要活性成分,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌等特性[2]。骨髓细胞表达的触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cells-2,TREM2)作为小胶质细胞上特异性蛋白,参与小胶质细胞增殖、存活、迁移和吞噬作用,调控小胶质细胞从M1型向M2型转变,从而减少炎症反应[3]。TREM2可以通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)信号通路影响小胶质细胞的吞噬和炎症反应[4]。本实验通过LPS诱导的BV2细胞炎症模型,观察香草醛对BV2细胞释放的一氧化氮(nitric oxide,NO)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平以及TREM2/PI3K的表达的影响,探讨香草醛是否通过调控TREM2/PI3K信号通路发挥抗炎作用,为香草醛的研究和川芎的临床应用提供依据。 展开更多
关键词 香草醛 BV2 LPS NO TNF-α IL-6 IL-1Β TREM2/PI3K
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龙马方活性成分配伍通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进软骨细胞增殖
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作者 裴梓含 曹寅生 +4 位作者 张琪瑶 蒋堃 周功瑾 董克芳 吴萍 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第9期1776-1782,共7页
目的基于Wnt/β-catenin信号通路,研究龙马方中活性成分马钱子碱(brucine,Bru)和蚓激酶(lumbrokinase,LK)配伍促进软骨细胞增殖的作用与机制。方法将原代软骨细胞分为Control、Bru、LK单用组及Bru+LK配伍组,采用CCK-8法筛选最佳配伍浓... 目的基于Wnt/β-catenin信号通路,研究龙马方中活性成分马钱子碱(brucine,Bru)和蚓激酶(lumbrokinase,LK)配伍促进软骨细胞增殖的作用与机制。方法将原代软骨细胞分为Control、Bru、LK单用组及Bru+LK配伍组,采用CCK-8法筛选最佳配伍浓度及干预时间;通过EdU和鬼笔环肽染色验证细胞增殖;蛋白免疫印迹法检测活性成分配伍干预软骨细胞后,Ⅱ型胶原(collagenⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、SRY相关高迁移率族盒基因9(SRY-related high-mobility group box gene 9,SOX9)的蛋白表达及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控。结果龙马方活性成分最佳配伍浓度(Bru 0.025 mg·L^(-1)+LK 5 mg·L^(-1))在48 h时,与Control组、Bru或LK单用组相比,可明显提高软骨细胞存活率,增加软骨细胞S期比率,促进肌动蛋白聚集,上调collagenⅡ、aggrecan的蛋白表达,并通过激活Wnt/β-catenin通路上调SOX9的表达。结论龙马方活性成分Bru与LK的最佳配伍(Bru 0.025 mg·L^(-1)+LK 5 mg·L^(-1))能够有效维持软骨细胞表型,并通过调控Wnt/β-catenin信号通路,进而激活下游关键转录因子SOX9的表达,最终促进软骨细胞增殖。 展开更多
关键词 龙马方 活性成分 马钱子碱 蚓激酶 软骨细胞增殖 WNT/Β-CATENIN信号通路
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Cx43及其蛋白修饰对神经炎症的调控效应:抑郁症发病机制的潜在研究靶点
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作者 曾璇 严子涵 +7 位作者 田志锋 王宏彬 艾启迪 林美妤 刘渲 陈乃宏 阳松威 杨岩涛 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第11期2027-2031,共5页
大量研究表明,抑郁症主要与星形胶质细胞(astrocytes,Astro)中连接蛋白43 (connexin 43,Cx43)的异常表达及其介导的缝隙连接(gap junction,GJ)功能障碍密切相关。然而,靶向Cx43翻译后修饰调控神经炎症相关的抑郁症分子生物学机制仍不明... 大量研究表明,抑郁症主要与星形胶质细胞(astrocytes,Astro)中连接蛋白43 (connexin 43,Cx43)的异常表达及其介导的缝隙连接(gap junction,GJ)功能障碍密切相关。然而,靶向Cx43翻译后修饰调控神经炎症相关的抑郁症分子生物学机制仍不明确。Cx43的翻译后修饰主要包括:Cx43通过蛋白激酶C (protein kinase,PKC)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、蛋白激酶G(protein kinaseG,PKG)、有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)等蛋白调控途径对特定氨基酸位点进行磷酸化修饰以及Cx43通过赖氨酸48 (lysine48,K48)/赖氨酸-63 (lysine-63,K63)多聚泛素化及去泛素途径调控蛋白降解,这些修饰过程最终通过关联GJ功能来参与神经炎症反应的调控。该文系统综述了Cx43翻译后修饰在神经炎症中的调控作用,以期进一步深入探讨靶向这些修饰过程对炎症反应机制的调控在改善抑郁症状的潜在应用价值。 展开更多
关键词 抑郁症 缝隙连接 连接蛋白43 磷酸化 泛素化 神经炎症
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PU.1抑制剂对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用
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作者 徐诺 郭婷婷 +3 位作者 李颖 王康 魏伟 严尚学 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第8期1478-1484,共7页
目的探讨PU.1抑制剂DB2313对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)的改善作用及机制。方法将30只雌性MRL/lpr小鼠随机分配至3组:模型组、DB2313组、泰他西普(TACI-Ig)组,每组10只。选取另外10只雌性BALB/c小鼠作为对照组。DB2313... 目的探讨PU.1抑制剂DB2313对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)的改善作用及机制。方法将30只雌性MRL/lpr小鼠随机分配至3组:模型组、DB2313组、泰他西普(TACI-Ig)组,每组10只。选取另外10只雌性BALB/c小鼠作为对照组。DB2313组小鼠隔日腹腔DB2313注射,TACI-Ig组隔日皮下注射TACI-Ig。每日腹腔注射给予对照组与模型组等量0.9%NaCl注射液。在药物干预前及干预后的1~5周内,定期收集小鼠尿液,测定尿蛋白含量,评估肾脏损伤指数。HE、Masson及PAS染色观察肾组织病理学变化;免疫组化方法检测肾组织内免疫复合物C3含量;试剂盒检测血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、IL-6及TNF-α的水平;免疫荧光技术测定肾组织中PU.1与FLT3的表达水平;Western blot技术检测肾组织PU.1、FLT3、PI3K、AKT及p-AKT的蛋白表达。结果DB2313治疗能明显减轻MRL/lpr小鼠肾脏病理损伤,降低C3沉积、肾脏损伤指数及24 h尿蛋白量;ELISA结果表明,DB2313给药可明显降低MRL/lpr小鼠血清BUN、Scr、IL-6及TNF-α的水平;免疫荧光与Western blot结果进一步表明,DB2313治疗可明显下调PU.1、PI3K及p-AKT的蛋白表达,上调FLT3的蛋白表达。结论DB2313对MRL/lpr小鼠LN具有改善作用,其潜在机制可能涉及抑制转录因子PU.1介导的信号通路。 展开更多
关键词 狼疮性肾炎 MRL/LPR小鼠 DB2313 PU.1 FLT3 PI3K
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基于线粒体自噬探讨加味少腹逐瘀汤治疗子宫内膜异位症纤维化的作用机制
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作者 黄灿灿 万文文 +7 位作者 吉秀家 岳斌 张育贵 张小花 梁莉 陈国廉 武权生 毛海燕 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1177-1185,共9页
目的探讨加味少腹逐瘀汤通过调控线粒体自噬发挥拮抗子宫内膜异位症纤维化的机制。方法构建动物模型后以一般状况、器官含水率、热成像评价证候;以异位灶重量和粘连程度评价疗效;HE染色、透射电镜、Masson和天狼星红染色比较病理变化;... 目的探讨加味少腹逐瘀汤通过调控线粒体自噬发挥拮抗子宫内膜异位症纤维化的机制。方法构建动物模型后以一般状况、器官含水率、热成像评价证候;以异位灶重量和粘连程度评价疗效;HE染色、透射电镜、Masson和天狼星红染色比较病理变化;免疫组化检测PINK1、Parkin的表达;qPCR和Western blot测定mRNA和蛋白表达,ELISA检测血清ROS水平。结果模型小鼠自主活动减弱,脏器含水率增加,热成像见四肢和下腹部温度降低;HE染色可见异位上皮及腺体增生明显,透射电镜可见线粒体、内质网结构损伤,正常自噬结构消失;Masson和天狼星红染色显示胶原沉积加重;免疫组化显示异位灶PINK1、Parkin表达降低;qPCR和Western blot显示模型小鼠异位灶PINK1、Parkin、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达降低,p62 mRNA及蛋白表达增加,血清ROS升高。加味少腹逐瘀汤干预后模型小鼠证候表现改善;异位灶炎症浸润缓解,线粒体和内质网形态恢复,出现正常自噬结构;胶原沉积及纤维化程度减轻;PINK1、Parkin、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达增加;p62 mRNA及蛋白表达降低,ROS水平降低。结论加味少腹逐瘀汤可以改善寒湿瘀结证子宫内膜异位症小鼠异位病灶纤维化,可能与调控线粒体自噬有关。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 寒湿瘀结证 纤维化 加味少腹逐瘀汤 PINK1/Parkin信号通路 线粒体自噬
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基于网络药理学、分子对接及实验验证探讨胖大海抗PM2.5诱导急性肺损伤的作用机制
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作者 张凡 杜一凡 +7 位作者 邓肖舒 张祖烽 韩先磊 田薇 李秀梅 陈勉 刘飞 王楠 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第12期2362-2369,共8页
目的探究胖大海(Sterculiae Lychnophorae Semen,SLS)抗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用及其机制。方法通过网络药理学方法获得SLS的主要活性成分及其防治ALI的核心靶点和作用通路。随后运用分子对接和细胞实验进行验证。结果... 目的探究胖大海(Sterculiae Lychnophorae Semen,SLS)抗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用及其机制。方法通过网络药理学方法获得SLS的主要活性成分及其防治ALI的核心靶点和作用通路。随后运用分子对接和细胞实验进行验证。结果共获得HSP90AA1、CASP3、TNF、MAPK8、MAPK14等19个核心靶点。其机制可能涉及癌症、PI3K/Akt和MAPK等信号通路。分子对接证实了SLS的关键靶点与相关活性成分形成了较好的结合活性。细胞实验结果表明SLS能够对经PM2.5染毒的BEAS-2B细胞起到保护作用,且能够抑制其NO、IL-1β和TNF-α水平,降低p-p38 MAPK以及p-JNK蛋白表达。结论该文成功预测了SLS防治ALI的有效成分、作用靶点和信号通路,体外实验表明,SLS可能通过抑制p38 MAPK、JNK信号通路的过度激活保护BEAS-2B细胞免于PM2.5刺激诱导的炎症和凋亡。 展开更多
关键词 急性肺损伤 胖大海 PM2.5 网络药理学 分子对接 MAPK
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MST1敲除减弱丹酚酸B抑制pERK抗肾纤维化作用
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作者 李玉轩 王莹莹 +2 位作者 陶慧敏 江洁美 杨雁 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第11期2046-2052,共7页
目的 探讨MST1敲除减弱丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)抑制pERK抗肾纤维化作用。方法 体外实验用XMU-XP-1(10μmol·L^(-1))抑制剂刺激人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2);体内实验用DEN/CCl_(4)/C_(2)H_(5)OH(DCC)诱导野生型(WT)... 目的 探讨MST1敲除减弱丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)抑制pERK抗肾纤维化作用。方法 体外实验用XMU-XP-1(10μmol·L^(-1))抑制剂刺激人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2);体内实验用DEN/CCl_(4)/C_(2)H_(5)OH(DCC)诱导野生型(WT)和MST1全身性基因敲除小鼠(MST1^(-/-))肾纤维化模型,用Sal B (15 mg·kg^(-1)·d^(-1),ig)干预。HE和Masson染色观察肾组织病理情况;Western blot检测α-SMA和pERK蛋白表达;免疫荧光法检测pERK蛋白表达。结果体外结果表明,Sal B可以抑制pERK蛋白表达。体内结果表明,Sal B可以改善DCC诱导的肾组织病理损伤,抑制α-SMA、pERK蛋白表达;MST1^(-/-)加重病理损伤,明显上调α-SMA、pERK蛋白的表达。结论 Sal B通过抑制ERK蛋白的磷酸化,降低XMU-MP-1对HK-2细胞的刺激作用;Sal B通过抑制α-SMA蛋白、ERK蛋白的磷酸化从而发挥抗肾纤维化的作用;并且MST1^(-/-),加重肾组织病理损伤,明显上调α-SMA、pERK蛋白的表达,进而减弱Sal B的抗肾纤维化作用。 展开更多
关键词 丹酚酸B HK-2 肾纤维化 MST1 基因敲除 MAPK/ERK
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吴茱萸次碱抑制p38 MAPK信号通路改善脓毒症小鼠肺部炎症的作用
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作者 张馨月 郝鹏雁 +3 位作者 付悦 周超 郭佳 黄晓佳 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第9期1720-1727,共8页
目的探讨吴茱萸次碱(rutaecarpine,RUT)对脓毒症模型小鼠的保护作用及机制。方法通过腹腔注射5 mg·kg^(-1)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建脓毒症小鼠模型,将小鼠分为5组,即对照组、LPS模型组、低、中、高剂量(5、10、20 mg... 目的探讨吴茱萸次碱(rutaecarpine,RUT)对脓毒症模型小鼠的保护作用及机制。方法通过腹腔注射5 mg·kg^(-1)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建脓毒症小鼠模型,将小鼠分为5组,即对照组、LPS模型组、低、中、高剂量(5、10、20 mg·kg^(-1))RUT组,阳性对照药物地塞米松(2 mg·kg^(-1))组,每组10只,于LPS注射前30 min给予RUT腹腔注射。HE染色观察肺组织形态;检测肺组织中髓过氧化物酶活性评估中性粒细胞肺组织浸润;称质量法检测肺组织湿重/干重比、伊文思蓝染色法评估肺血管屏障通透性;检测动物存活率评估整体保护作用;采用ELISA法和实时荧光定量PCR法检测肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18含量和mRNA表达;蛋白免疫印迹法检测p38 MAPK、NF-κB、caspase-1、NLRP3、IL-18蛋白表达水平。结果与地塞米松作用类似,RUT(10~20 mg·kg^(-1))可剂量依赖性地抑制LPS诱导的肺组织炎症细胞浸润,降低促炎症因子产生、血管渗出和湿/干重比。RUT组小鼠存活率明显提高,且肺组织中p38 MAPK、NF-κB蛋白磷酸化水平明显降低,Caspase-1、NLRP3蛋白表达明显减少,IL-18基因和蛋白表达水平明显降低。结论RUT可抑制脓毒症模型小鼠肺组织炎症,减轻肺水肿,具有肺损伤保护作用,其机制可能与其抑制肺组织炎症细胞p38-MAPK信号通路和炎症小体生成有关。 展开更多
关键词 吴茱萸次碱 脓毒症 肺损伤 肺部炎症 p38 MAPK信号 炎症小体
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滑膜细胞条件性敲除Grk2基因小鼠的构建和鉴定
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作者 左书俊 王伟康 +4 位作者 谷金涛 郭富媛 郭昊周 韩陈陈 魏伟 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1194-1199,共6页
目的构建滑膜细胞条件性敲除G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因小鼠并分析基因型,为研究GRK2在滑膜细胞中的功能提供动物模型。方法将Grk2^(flox/+)小鼠交配得到Grk2^(flox/flox)小鼠,Grk2^(flox/flox)... 目的构建滑膜细胞条件性敲除G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因小鼠并分析基因型,为研究GRK2在滑膜细胞中的功能提供动物模型。方法将Grk2^(flox/+)小鼠交配得到Grk2^(flox/flox)小鼠,Grk2^(flox/flox)和Col1a1-iCre^(+)小鼠交配,获得Grk2^(flox/+)Col1a1-iCre^(+)与Grk2^(flox/flox)小鼠交配,得到Grk2^(flox/flox) Col1a1-iCre^(+)为目的小鼠。提取DNA,PCR扩增,鉴定基因型;Western blot验证滑膜、肝脏和肾脏组织GRK2敲除效果;HE染色检测滑膜细胞条件性敲除Grk2对踝关节滑膜、肝脏和肾脏组织的影响;多重免疫荧光检测滑膜细胞GRK2表达。结果基因鉴定结果表明,Grk2^(flox/flox) Col1a1-iCre^(+)小鼠Flox和Col1a1-iCre基因型均符合要求;Western blot结果表明,Grk2^(flox/flox) Col1a1-iCre^(+)小鼠滑膜组织GRK2表达降低,肝脏和肾脏组织GRK2表达无明显变化;HE染色结果显示,Grk2^(flox/flox) Col1a1-iCre^(+)小鼠踝关节滑膜、肝脏和肾脏组织病理无明显改变;多重免疫荧光结果表明,Grk2^(flox/flox) Col1a1-iCre^(+)小鼠滑膜细胞GRK2表达降低。结论成功构建和鉴定滑膜细胞条件性敲除Grk2基因小鼠,为进一步研究GRK2在滑膜细胞相关疾病中的作用提供动物模型。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体激酶2 滑膜组织 滑膜细胞 Cre-loxP系统 CRISPR/Cas9 条件性敲除小鼠
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JNK信号通路在骨肉瘤中的研究进展
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作者 秦庆庆 王一坤 +1 位作者 阳庆林 王勇平 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1001-1005,共5页
骨肉瘤(osteosarcoma,OS)是最常见的原发性骨恶性肿瘤,具有很高的局部浸润和转移倾向。c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族中极为重要的一员,而且JNK信... 骨肉瘤(osteosarcoma,OS)是最常见的原发性骨恶性肿瘤,具有很高的局部浸润和转移倾向。c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族中极为重要的一员,而且JNK信号通路已被证明参与调控了OS的发生发展。该文就JNK信号通路调控OS的增殖、迁移、侵袭、血管生成、自噬、凋亡和焦亡等生物学行为,以及氧化应激和非编码RNA通过JNK信号通路对OS调控的研究进展进行综述,进一步探究JNK信号通路的内在调控机制,为寻找OS的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 JNK 骨肉瘤 信号通路 MIRNA lncRNA 机制
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蛋白激酶D抑制剂CRT0066101通过抑制PI3K/AKT信号通路促进肝癌细胞凋亡和自噬抑制肿瘤
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作者 邓浩华 唐宝元 +1 位作者 谢蓓 李林静 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第12期2297-2305,共9页
目的探究蛋白激酶D(protein kinase D,PKD)特异性抑制剂CRT0066101对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的抑制作用及其分子机制,为肝细胞癌的靶向治疗提供新的理论依据和治疗策略。方法采用不同浓度CRT0066101处理肝癌细胞系,通过... 目的探究蛋白激酶D(protein kinase D,PKD)特异性抑制剂CRT0066101对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的抑制作用及其分子机制,为肝细胞癌的靶向治疗提供新的理论依据和治疗策略。方法采用不同浓度CRT0066101处理肝癌细胞系,通过CCK-8法、克隆形成实验和EdU染色法检测药物对肝癌细胞增殖的抑制作用;运用划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验评估药物对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blot分析CRT0066101对PKD及其下游PI3K/AKT信号通路关键蛋白磷酸化水平的影响;通过Western blot、流式细胞术及mRFP-GFP-LC3双荧光报告系统检测药物对肝癌细胞凋亡和自噬的调控作用。结果CRT0066101能显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blot结果显示,CRT0066101可剂量依赖性抑制PKD家族蛋白的磷酸化水平,并下调PI3K/AKT信号通路的活化。同时,CRT0066101处理可上调促凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并显著增加自噬标志蛋白Beclin-1和LC3B-Ⅱ的表达水平,提示该药物能同时诱导肝癌细胞凋亡和自噬。结论CRT0066101通过特异性抑制PKD活性,阻断PI3K/AKT信号通路,进而抑制肝癌细胞增殖和转移,并诱导细胞凋亡和自噬,是一种具有潜在临床应用价值的肝癌靶向治疗小分子抑制剂。 展开更多
关键词 肝癌 CRT0066101 自噬 凋亡 抑制剂 蛋白激酶D
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Asperisochroman B对氧糖剥夺/复氧诱导神经元损伤的影响
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作者 洪小婷 李雪珍 +2 位作者 黄寒 邹小雪 张玉琴 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第7期1311-1317,共7页
目的基于PI3K-AKT-Foxo1通路探讨异色满类化合物Asperisochroman B(AB)对神经元氧糖剥夺/复氧损伤(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)的保护作用及机制。方法培养原代神经元,构建OGD/R模型;将原代神经元分为空白对照组、... 目的基于PI3K-AKT-Foxo1通路探讨异色满类化合物Asperisochroman B(AB)对神经元氧糖剥夺/复氧损伤(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)的保护作用及机制。方法培养原代神经元,构建OGD/R模型;将原代神经元分为空白对照组、OGD/R组及AB低、中、高浓度(3、10、30μmol·L^(-1))组,采用CCK-8法、乳酸脱氢酶(LDH)释放法、Hoechst 33342染色法测定AB对原代神经元的影响,Western blot检测PI3K、AKT、Foxo1相关蛋白表达水平。采用PI3K抑制剂(LY294002)干预后再造模及AB高浓度(30μmol·L^(-1))干预,Western blot检测PI3K/Foxo1通路相关蛋白表达。结果与OGD/R组相比,AB能够明显提高原代神经元细胞存活率,减少LDH释放量,Hoechst 33342及免疫荧光染色法检测结果表明,AB减少OGD/R损伤后的细胞凋亡;Western blot结果可知,与OGD/R组相比,经AB干预后,神经元Bcl-2、NeuN蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.01),同时上调p-AKT、PI3K蛋白表达水平,促进Foxo1磷酸化,下调Foxo1的表达;与AB高剂量组相比,LY294002能够抑制上述指标变化,逆转AB对OGD/R损伤原代神经元的保护作用。结论AB可减轻氧糖剥夺/复氧诱导神经元损伤,其作用机制可能与PI3K-AKT-Foxo1信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 Asperisochroman B 缺血性脑卒中 PI3K-AKT-Foxo1通路 次级代谢产物 氧糖剥夺/复氧 神经元损伤
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灵孢多糖促进双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘小鼠髓鞘再生的机制
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作者 李彦青 李晓慧 +5 位作者 王青 宋丽娟 杨立志 王翰斌 肖保国 马存根 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第7期1265-1273,共9页
目的探究灵孢多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLPS)促进双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的慢性脱髓鞘小鼠髓鞘修复与再生的作用机制。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为4组:Normal+NS、Normal+GLPS、CPZ+NS和CPZ+GLPS。通过0... 目的探究灵孢多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLPS)促进双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的慢性脱髓鞘小鼠髓鞘修复与再生的作用机制。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为4组:Normal+NS、Normal+GLPS、CPZ+NS和CPZ+GLPS。通过0.2%CPZ建立慢性脱髓鞘模型,并采用旷场和高架十字迷宫实验观察小鼠的行为变化;免疫荧光染色Western blot检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达;ELISA法测定脑匀浆中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10的含量变化;免疫荧光染色观察离子化钙结合适配分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)和神经胶质抗原2(neural-glial antigen 2,NG2)的表达;RT-qPCR和Western blot分析MBP、iNOS、COX-2、JAK2、STAT3的mRNA及蛋白表达。结果CPZ+NS组小鼠体质量明显下降,认知行为异常,髓鞘再生受阻,促炎因子表达上升,抗炎因子水平下降,Iba1和NG2表达增加,JAK2/STAT3信号通路被激活。GLPS干预后,小鼠体质量回升,髓鞘再生现象出现,认知行为改善,炎症因子表达下降,抗炎因子增加,NG2表达进一步升高,抑制小胶质细胞增殖及JAK2/STAT3信号通路激活。结论GLPS能够改善慢性脱髓鞘小鼠的认知行为异常及炎性反应,抑制JAK2/STAT3信号通路,促进髓鞘的修复与再生。 展开更多
关键词 灵孢多糖 双环己酮草酰二腙 多发性硬化 髓鞘修复与再生 炎症 JAK2/STAT3信号通路
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淫羊藿-黄芪调控SCF/c-kit和PI3K/Akt信号通路防治少弱精症的作用机制
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作者 李彦荣 陈振东 +3 位作者 张秋菊 蒋宜伟 刘光炜 杨扶德 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第9期1693-1699,共7页
目的探讨淫羊藿-黄芪通过激活SCF/c-kit信号通路活化PI3K/Akt信号通路对少弱精症精子生成和活力的作用机制。方法SD雄性大鼠60只,随机分为实验组(中药高剂量组、中剂量组、低剂量组)、模型组、阳性对照组和空白对照组。实验组、阳性对... 目的探讨淫羊藿-黄芪通过激活SCF/c-kit信号通路活化PI3K/Akt信号通路对少弱精症精子生成和活力的作用机制。方法SD雄性大鼠60只,随机分为实验组(中药高剂量组、中剂量组、低剂量组)、模型组、阳性对照组和空白对照组。实验组、阳性对照组和模型组用环磷酰胺建立大鼠少弱精症模型。高、中、低剂量组大鼠分别按生药淫羊藿-黄芪提取物计算量800、400、200 mg·kg^(-1)灌胃,每日1次,给药35 d。阳性对照组予以左卡尼汀250 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,每日1次,给药35 d。ELISA检测血清T、E_(2)、FSH、LH,分别用Western blot法和IHC染色检测大鼠睾丸组织中SCF、c-kit、Bcl-2、Bax蛋白表达和PI3K、Akt蛋白表达,显微镜检测精子活性、睾丸组织结构和细胞形态特点。结果与模型组相比较,淫羊藿-黄芪可使大鼠模型精子密度、总活率和活力增加(P<0.05,P<0.01),精子凋亡率和LH、T、E_(2)水平降低(P<0.05,P<0.01),睾丸组织中Bax蛋白表达降低(P<0.01),Bcl-2、SCF、c-Kit、PI3K和Akt蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);生精细胞数量增多,生精小管形态改善明显,界膜增厚,管中有不同发育阶段的生精细胞及精子。结论淫羊藿-黄芪对少弱精症大鼠有明显的治疗作用,其机制可能是淫羊藿-黄芪通过激活SCF/c-kit信号通路活化PI3K/Akt信号通路促使精原细胞增殖、分化使精子发生、成熟且获能。 展开更多
关键词 淫羊藿-黄芪 少弱精症 SCF/c-kit信号通路 PI3K/AKT信号通路 生精细胞 睾丸 不育症
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二氢杨梅素通过激活AMPK/PPAR-α信号通路缓解AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚
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作者 张晓英 吴佳佳 +3 位作者 司祺 吴国秀 张亮 张致英 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第10期1914-1921,共8页
目的探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚的作用及机制。方法将50只小鼠随机分为对照组,AngⅡ组,AngⅡ+卡托普利12.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)组,AngⅡ+DMY 100 mg·kg^(-1)·d^(-1)组,AngⅡ+DM... 目的探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚的作用及机制。方法将50只小鼠随机分为对照组,AngⅡ组,AngⅡ+卡托普利12.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)组,AngⅡ+DMY 100 mg·kg^(-1)·d^(-1)组,AngⅡ+DMY 200 mg·kg^(-1)·d^(-1)组,每组10只。对照组小鼠灌胃生理盐水、药物干预组灌胃DMY、阳性药物组灌胃卡托普利;除对照组外,其余各组小鼠皮下注射AngⅡ1.0 mg·kg^(-1)·d^(-1)。4周后计算心重/体质量比(heart weight/body weight,HW/BW)、左心室/体质量比(left ventricle weight/body weigh,LVW/BW),检测胎儿基因心房利钠肽(atrial natriuretic factor,ANF)、脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)、三磷酸腺苷合酶5β亚基(adenosine triphosphate 5β,ATP 5β)和解偶联蛋白(uncoupling protein2,UCP2)mRNA的表达,观察心脏组织形态学变化,测定血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)、乳酸(Lactic acid)含量,初步探究AMP活化蛋白激酶(AMP-activated proteinkinase,AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-acti-vated receptorα,PPAR-α)、T细胞核因子c4(T-cell nuclearfactor cytoplasmic 4,NFATc4)蛋白表达水平。利用AngⅡ诱导H9C2心肌细胞建立心肌肥大的细胞模型,并采用AMPK抑制剂(compound C)进行干预,检测胎儿基因(ANF、BNP、β-MHC)mRNA表达以及AMPK、PPAR-α的蛋白表达。结果DMY干预可明显降低小鼠HW/BW、LVW/BW,胎儿基因ANF、BNP、β-MHC、UCP2 mRNA表达降低,而ATP 5βmRNA升高,小鼠心肌细胞的肥大程度缓解,血清中CK-MB、LDH、FFA、Lactic acid含量下降,p-AMPK、AMPK、PPAR-α蛋白表达增加,而NFATc4蛋白表达下降。在AngⅡ诱导的心肌肥大细胞模型中,DMY预处理可使胎儿基因mRNA表达下降,而加入compound C抑制AMPK后,胎儿基因的表达出现回升,同时AMPK和PPAR-α的蛋白表达下降。结论DMY通过改善糖脂代谢紊乱,增加心肌细胞能量供应,改善AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚,其机制与激活AMPK/PPAR-α通路及抑制NFATc4的表达有关。 展开更多
关键词 二氢杨梅素 心肌肥厚 糖脂代谢 AMP活化蛋白激酶 过氧化物酶体增殖物激活受体Α T细胞核因子c4
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僵蚕不同极性萃取物体外抗胃癌前病变活性比较
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作者 常苗苗 周晓红 +1 位作者 厉博文 高维娟 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第12期2282-2290,共9页
目的比较僵蚕(bombyx batryticatus,BB)不同极性萃取物体外抗胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)的活性差异。方法BB经乙醇回流提取,不同极性有机溶剂萃取,得到石油醚(SYM)、乙酸乙酯(YSYZ)、正丁醇(ZDC)和水相(S... 目的比较僵蚕(bombyx batryticatus,BB)不同极性萃取物体外抗胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)的活性差异。方法BB经乙醇回流提取,不同极性有机溶剂萃取,得到石油醚(SYM)、乙酸乙酯(YSYZ)、正丁醇(ZDC)和水相(SX)4种萃取物。采用N-甲基-N′硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导GES-1细胞恶化构建PLGC细胞模型,CCK-8法筛选4种萃取物干预PLGC细胞的最佳浓度;平板克隆、划痕愈合和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭情况;Western blot实验检测各组细胞E-cadherin、Vimentin及PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白的表达水平;采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对4种萃取物中化学成分进行分析。结果与正常组相比,PLGC组细胞的增殖、迁移及侵袭能力均增强,E-cadherin蛋白表达水平下调,Vimentin、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平上调;与PLGC组相比,4种萃取物均能减弱PLGC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,下调Vimentin、p-PI3K、p-AKT及p-mTOR蛋白表达水平,SYM、YSYZ和ZDC萃取物干预后的PLGC细胞中E-cadherin蛋白表达水平均上调,SX组差异无统计学意义。此外,BB 4种不同极性萃取物中化学成分存在明显差异,差异化合物为Cysteine、Histidine等。结论BB的4种不同极性萃取物均可通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制EMT过程发挥体外抗PLGC作用。其中,正丁醇萃取物活性最强,其次为乙酸乙酯和石油醚萃取物,水相活性最弱,其活性差异可能与其中差异化合物Cysteine、Histidine等相关。 展开更多
关键词 僵蚕 胃癌前病变 不同极性萃取物 PI3K/AKT/MTOR EMT 体外活性
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