能量平衡失调被认为是一个影响人类疾病的重要驱动因素,单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)作为一种重要的能量传感器,在维持能量稳态中的核心作用使其成为预防和治疗疾病的一个关键靶点。铁死亡作为一种新...能量平衡失调被认为是一个影响人类疾病的重要驱动因素,单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)作为一种重要的能量传感器,在维持能量稳态中的核心作用使其成为预防和治疗疾病的一个关键靶点。铁死亡作为一种新型细胞死亡方式,与多种疾病的病理生理过程有关,而AMPK相关信号通路又是调控铁死亡的重要途径,明确AMPK具体通过何种通路诱导或抑制铁死亡,将为未来疾病治疗提供新思路,为新药研究提供新靶点。该文通过整理国内外相关文献,挖掘了AMPK调控铁死亡的相关信号通路,并对AMPK调控铁死亡相关信号通路在疾病中的应用进行了综述,旨在为后期研究提供参考。展开更多
目的构建含T7RNA聚合酶(T7RNA Polymerase,T7RNP)的真核表达载体,同时构建含T7启动子、增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)和T7RNP转录终止信号的载体,并通过观察EGFP的表达推测T7RNP表达和T7表达系统介导基...目的构建含T7RNA聚合酶(T7RNA Polymerase,T7RNP)的真核表达载体,同时构建含T7启动子、增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)和T7RNP转录终止信号的载体,并通过观察EGFP的表达推测T7RNP表达和T7表达系统介导基因转录的功能。方法根据编码T7RNP的基因序列,应用PCR技术从含有T7RNP基因的E.coli BL21(DE3)基因组中扩增编码T7RNP的基因片段,克隆至载体pcDNA3·1(+)。同时从px8δt载体和pGEM-Teasy/EGFP上切下T7RNP识别的终止信号(terminator,TER)和编码EGFP的基因,克隆至载体pcD-NAII。将获得的两个重组质粒共转染BHK细胞。48h后,通过观察EGFP基因在真核细胞内的表达情况,推测T7RNP基因的表达及表达后识别T7启动子介导基因转录功能。结果成功构建了含T7RNP编码基因的真核表达载体pcDNA3·1(+)/T7RNP和原核表达载体pcDNAII/EG-FP/TER,共转染BHK细胞后,可观察到EGFP表达的绿色荧光。结论T7RNP能顺利在真核细胞内表达,并通过与T7启动子和TER的相互作用,成功实现了EGFP基因的转录和表达。展开更多
文摘能量平衡失调被认为是一个影响人类疾病的重要驱动因素,单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)作为一种重要的能量传感器,在维持能量稳态中的核心作用使其成为预防和治疗疾病的一个关键靶点。铁死亡作为一种新型细胞死亡方式,与多种疾病的病理生理过程有关,而AMPK相关信号通路又是调控铁死亡的重要途径,明确AMPK具体通过何种通路诱导或抑制铁死亡,将为未来疾病治疗提供新思路,为新药研究提供新靶点。该文通过整理国内外相关文献,挖掘了AMPK调控铁死亡的相关信号通路,并对AMPK调控铁死亡相关信号通路在疾病中的应用进行了综述,旨在为后期研究提供参考。
