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别嘌呤醇恢复犬尿氨酸异常代谢改善小鼠溃疡性结肠炎的作用和机制
1
作者 陈悦兰 董伟波 +3 位作者 许和鹏 严尚学 魏伟 常艳 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第5期830-836,共7页
目的探讨别嘌呤醇(allopurinol,ALLO)恢复色氨酸-2,3-双加氧酶2(tryptophan 2,3-dioxygenas 2,TDO2)介导的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)异常代谢,进而改善小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用和部分机制,为ALLO治疗UC提供实验... 目的探讨别嘌呤醇(allopurinol,ALLO)恢复色氨酸-2,3-双加氧酶2(tryptophan 2,3-dioxygenas 2,TDO2)介导的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)异常代谢,进而改善小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用和部分机制,为ALLO治疗UC提供实验依据。方法构建葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的小鼠UC模型,随机分为对照组、模型组、ALLO低、中、高剂量组(10、20、40 mg·kg-1)以及阳性药物柳氮磺吡啶(salazosulfapyridine,SASP)(200 mg·kg-1)组,记录小鼠体质量、疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分变化;HE染色观察结肠组织病理损伤程度;Western blot检测结肠组织TDO2蛋白表达;流式细胞术检测脾脏及肠系膜淋巴结巨噬细胞比例变化;ELISA检测结肠组织匀浆上清中TNF-α、IL-1β、IL-6促炎细胞因子水平;高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测结肠组织匀浆上清中色氨酸(tryptophan,Trp)和Kyn含量。结果与模型组相比,ALLO给药后,明显改善UC小鼠结肠组织病理损伤,降低脾脏及肠系膜淋巴结巨噬细胞比例,下调结肠组织匀浆上清TNF-α、IL-1β、IL-6促炎因子水平,抑制结肠组织TDO2活性(Kyn/Trp比值)和表达。结论ALLO可改善小鼠UC疾病表现,可能与其恢复TDO2介导的Kyn异常代谢有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 别嘌呤醇 犬尿氨酸 色氨酸 色氨酸-2 3-双加氧酶2 自身免疫病
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TDO2介导肾小管上皮细胞凋亡在Cis-AKI中作用及机制
2
作者 林茜茜 宗雪梅 +5 位作者 陈悦兰 汪文莉 王越业 严尚学 魏伟 常艳 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期475-482,共8页
目的探讨色氨酸-2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TDO2)在顺铂诱导急性肾损伤(cisplatin-acute kidney injury,Cis-AKI)中的作用,并在肾小管上皮细胞(tubular epithelial cells,TECs)中探究TDO2与凋亡相关机制。方法采用腹腔... 目的探讨色氨酸-2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TDO2)在顺铂诱导急性肾损伤(cisplatin-acute kidney injury,Cis-AKI)中的作用,并在肾小管上皮细胞(tubular epithelial cells,TECs)中探究TDO2与凋亡相关机制。方法采用腹腔注射顺铂(cisplatin,Cis)建立AKI模型。比色法检测CRE、BUN水平,PAS染色观察小鼠肾脏损伤。免疫组化检测TDO2蛋白表达和分布及巨噬细胞(F4/80+)浸润;免疫荧光检测TDO2与肾小管标记物LTL共定位;TUNEL染色检测小鼠肾脏细胞凋亡;流式细胞术检测人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK2)过表达和给予TDO2抑制剂680C91后细胞凋亡情况;Western blot检测过表达和抑制TDO2后HK2细胞TDO2、NF-κB信号通路蛋白水平。结果在整体动物实验中,与对照组相比,Cis-AKI小鼠CRE、BUN水平均明显升高,肾小管损伤明显;同时,Cis-AKI小鼠肾脏组织F4/80表达增加且肾脏细胞凋亡比例增加。免疫组化和免疫荧光结果表明TDO2表达增加且主要定位在TECs中。在细胞实验中,HK2细胞过表达TDO2后凋亡比例增加,TDO2、p-IκBα、p-p65蛋白表达升高,p-IκBα/IκBα、p-p65/p65升高;此外,给予680C91后细胞凋亡比例减少,p-IκBα、p-p65蛋白表达降低,p-IκBα/IκBα、p-p65/p65降低。结论TECs中TDO2升高参与Cis-AKI病理机制,可能与其诱导TECs凋亡和激活NF-κB信号通路进而参与肾损伤有关。 展开更多
关键词 急性肾损伤 顺铂 HK2 TDO2 凋亡 NF-ΚB
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眼镜蛇毒细胞毒素-1的分离纯化及其对HSC-LX2细胞PI3K/AKT 信号通路的影响 被引量：1
3
作者 孔露平 王秀男 +4 位作者 廖明 张学荣 周怡 张昊 罗小玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期599-600,共2页
肝纤维化是多种刺激诱导的肝脏反复损伤的一种病理再生反应[1],其主要表征是肝脏中沉积着过量的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)。ECM产生主要原因之一是由于肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)被大量激活分化,磷脂酰肌醇-3-... 肝纤维化是多种刺激诱导的肝脏反复损伤的一种病理再生反应[1],其主要表征是肝脏中沉积着过量的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)。ECM产生主要原因之一是由于肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)被大量激活分化,磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路是一条重要的细胞内信号通路,能通过影响HSC的增殖和凋亡来调节肝纤维化[2-4]。 展开更多
关键词 细胞毒素-1 分离纯化 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路 HSC-LX2细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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前列腺素E_2调控MN9D细胞孤儿核受体Nurr1表达的研究 被引量：1
4
作者 赵咏梅 张海燕 +1 位作者 许秋岩 吕风月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期26-29,共4页
目的观察前列腺素E2（prostaglandinE2，PGE2）对多巴胺（dopamine，DA）合成细胞系MN9D细胞内源性孤儿核受体Nurrl表达的作用，并研究Nurrl表达增高对酪氨酸羟化酶（tyrosinehydroxylase，TH）表达的影响，探讨Nurrl调控DA能神经元发... 目的观察前列腺素E2（prostaglandinE2，PGE2）对多巴胺（dopamine，DA）合成细胞系MN9D细胞内源性孤儿核受体Nurrl表达的作用，并研究Nurrl表达增高对酪氨酸羟化酶（tyrosinehydroxylase，TH）表达的影响，探讨Nurrl调控DA能神经元发育的机制。方法用100μg·L-1的PGE2作用于MN9D细胞2h至6h，观察细胞形态变化，并用免疫细胞化学染色及Westernblot方法检测PGE2作用前后MN9D细胞内源性Nurrl及TH表达的变化。结果①100μg·L-1的PGE2作用2、4及6h，MN9D细胞形态没有明显变化。②加入PGE：2、4及6h，MN9D细胞Nurrl抗体免疫荧光染色强度比未加PGE2作用的正常对照组细胞明显增强。MN9D细胞自身表达TH呈不均一性，PGE：作用2～6h，MN9D细胞中TH阳性染色细胞百分比与正常对照组细胞接近。③Westernblot结果显示，PGE：作用6h，MN9D细胞Nurrl蛋白表达比未加PGE，的正常对照组细胞明显增加（P〈0．05），而此时TH蛋白表达与正常对照组细胞接近。结论PGE，可在短时间内迅速明显激活MN9D细胞内源性Nurrl表达，但对TH表达没有影响。TH表达的激活或许还需要除Nurrl以外其它环境或因子的共同参与。 展开更多
关键词 前列腺素E2 NURR1 多巴胺能神经元 酪氨酸羟化酶
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内蒙古经典型苯丙酮尿症PAH基因外显子11突变的检测 被引量：3
5
作者 孟峻 张军力 《内蒙古医学院学报》 2006年第3期178-180,共3页
目的:研究内蒙古地区经典型苯丙酮尿症(PKU)苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变的特点和频率,以提高该地区PKU的基因诊断率。方法:应用PCR-SSCP-银染法和DNA直接测序的方法,对22例内蒙古地区PKU病人PAH基因外显子11进行了检测。结果:检出一种... 目的:研究内蒙古地区经典型苯丙酮尿症(PKU)苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变的特点和频率,以提高该地区PKU的基因诊断率。方法:应用PCR-SSCP-银染法和DNA直接测序的方法,对22例内蒙古地区PKU病人PAH基因外显子11进行了检测。结果:检出一种已知突变Y356X(TAC→TAA),突变频率为13.6%。结论:内蒙古地区PKU病人PAH基因外显子11的突变频率均高于我国的其它北方人群,也高于云南PKU病人的突变频率,这为内蒙古地区PKU病人PAH基因分析和产前诊断提供了科学依据。 展开更多
关键词 苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶 聚合酶链反应-单链构象多态性 基因突变
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上海学龄儿童细胞色素P450 3A酶活性分布
6
作者 张顺国 张健 唐跃年 《药学服务与研究》 CAS CSCD 2006年第3期176-178,共3页
目的：调查上海地区1169名6～15岁学龄儿童细胞色素P450 3A酶活性（cytochrome P450 3A activity，CA）的分布情况及正常值范围。方法：采用HPLC梯度洗脱法测定尿液中氢化可的松和6p羟基氢化可的松的浓度，以地塞米松为内标，采用HP Hyp... 目的：调查上海地区1169名6～15岁学龄儿童细胞色素P450 3A酶活性（cytochrome P450 3A activity，CA）的分布情况及正常值范围。方法：采用HPLC梯度洗脱法测定尿液中氢化可的松和6p羟基氢化可的松的浓度，以地塞米松为内标，采用HP Hypersil ODS柱（250mm×4mm，5μm），流动相A相为CH3CN，B相为7．56mmol／L（NH4）2SO4溶液，梯度设置；0～6．5min，A：10％，B：90％；6．5～15min，A：35％，B：65％，线性变化；15～24min，A：35％，B：65％；24～28min，A：10％，B：90％，线性变化；28～42min，A：10％，B：90％。柱温30℃；流速1．0ml／min,检测波长240nm。数据分布形态检测采用Kolmogorov-Smirnov检验，男、女儿童酶活性之间的比较采用两个独立样本的t检验。结果：1169名学龄儿童CA分布为左偏态分布，偏度系数为2．66，IgCA呈正态分布，偏度系数为0．027。CA正常值范围为1．00～25．47，男女性之间CA无显著性差异（P=0．919）。将未发育期、发育启动期和发育中期分别设为X=1、2、3，与CA平均值（Y）进行线性回归，得到回归方程为Y=0．685X＋3．513（r=0．9999）。结论：确定学龄儿童CA分布情况及其正常值范围，可为制定儿童个体化给药方案和给药剂量提供依据。 展开更多
关键词 细胞色素P 450酶系统 儿童 统计学分布 氢化可的松 尿
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内蒙古经典型苯丙酮尿症PAH基因外显子7突变的检测及一种新突变的鉴定
7
作者 孟峻 张军力 +5 位作者 翟晓萍 周银锁 方根 史珉 高建钢 王光 《内蒙古医学院学报》 2003年第3期148-151,共4页
目的 :探讨内蒙古地区经典型苯丙酮尿症 (PKU)基因突变特征 ,为基因诊断提供依据。方法 :应用PCR-单链构象多态性分析技术和 DNA直接测序的方法 ,对 2 2例内蒙古地区 PKU病人苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子 7内突变进行了检测。结果 :... 目的 :探讨内蒙古地区经典型苯丙酮尿症 (PKU)基因突变特征 ,为基因诊断提供依据。方法 :应用PCR-单链构象多态性分析技术和 DNA直接测序的方法 ,对 2 2例内蒙古地区 PKU病人苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子 7内突变进行了检测。结果 :共检出 4种错义突变 :R2 43 Q、R2 5 2 Q、R2 61 Q及 G2 3 9D,1种剪接部位突变 IVS7nt(2 ) ,突变频率分别为 :8/4 4、1 /4 4、1 /4 4、1 /4 4、1 /4 4。经与国际 PAH基因突变数据库比较 ,确认 G2 3 9D(G→ A)为国际上首次发现的新突变。结论 :内蒙古地区 PKU病人 PAH基因外显子 7的突变位点、突变频率和中国东北人群相类似 ,但与中国南方人群 PAH基因突变特点不同 。 展开更多
关键词 苯丙酮尿症 苯丙氨酸羟化酶 聚合酶链反应—单链构象多态性 基因突变
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