大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达 被引量：6

1

作者 吴长毅 庞庆丰 +3 位作者 曾因明 王俊科 杨光 高新跃 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期101-104,共4页

目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转... 目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Westernblot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性。结果:表达产物相对分子量约为32kU,表达量约为7.0mg/L,HO-1活性为2.386U/(mg·h)。结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠HO-1。 展开更多

关键词 血红素加氧酶-1 基因克隆表达 乳酸乳球菌

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CYP19基因表达与芳香化酶活性调控因子的研究进展 被引量：12

2

作者 王慧 李霞 张育辉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期304-308,共5页

芳香化酶是雌激素合成中的关键酶,催化睾酮和雄烯二酮转化为雌激素。本文在对芳香化酶的蛋白结构、基因特征和分布进行阐述的基础上,重点对编码该蛋白的CYP19基因的调控因子以及芳香化酶活性的调节进行探讨。CYP19基因的调控因子包括cAM... 芳香化酶是雌激素合成中的关键酶,催化睾酮和雄烯二酮转化为雌激素。本文在对芳香化酶的蛋白结构、基因特征和分布进行阐述的基础上,重点对编码该蛋白的CYP19基因的调控因子以及芳香化酶活性的调节进行探讨。CYP19基因的调控因子包括cAMP反应元件(CRE)、类固醇生成因子1/肾上腺4结合蛋白(SF-1/Ad4BP)、雌激素受体(ER)等顺式作用因子和TATA结合蛋白(TBP)、生长因子等反式作用因子。主要通过cAMP依赖性蛋白激酶信号通路在转录水平对其进行调节。而芳香化酶表达及其酶活性的调控因子主要集中于性类固醇激素和促性腺激素,此外还受到温度等外部因子等因素的调节。芳香化酶的调节对维持雌雄激素间作用的平衡、保证机体的正常生理功能具有重要意义。 展开更多

关键词 芳香化酶 CYP19基因 调控因子 机制

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人类Gfi1基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：3

3

作者 黄敏 欧东梅 +2 位作者 徐金环 张晓梅 张义成 《实验与检验医学》 CAS 2011年第2期102-104,124,共4页

目的建立测定人类Gfi1mRNA表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为进一步研究新基因的功能奠定基础。方法以Gfi1基因为靶基因设计引物。构建携带Gfi1cDNA的质粒plox-Gfi1,经过纯化,质粒浓度测定,拷贝数的计算及10倍的梯度稀释制备... 目的建立测定人类Gfi1mRNA表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为进一步研究新基因的功能奠定基础。方法以Gfi1基因为靶基因设计引物。构建携带Gfi1cDNA的质粒plox-Gfi1,经过纯化,质粒浓度测定,拷贝数的计算及10倍的梯度稀释制备标准品。应用ABI stepone PCR仪对Gfi1mRNA进行实时荧光定量PCR检测,建立标准曲线和熔解曲线。结果建立了Gfi1mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,本法线性范围为6.36×102～6.36×108copies/μl,线性相关系数γ2为0.996,熔解曲线为单峰,Tm值为(89.98±0.22)℃,标准品的循环阈值批内变异系数和批间变异系数分别为1.35%～3.61%和1.49%～3.42%。结论本研究建立的Gfi1mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法速度快,灵敏度高,特异性强,重复性及稳定性好,可用于Gfi1基因的定量检测。 展开更多

关键词 Gfi1 SYBR GreenI 实时荧光定量PCR

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含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品的制备及应用 被引量：2

4

作者 江梅 简正伟 +3 位作者 罗清 徐芬 万腊根 张长林 《实验与检验医学》 CAS 2011年第5期482-485,共4页

目的建立一个含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品,用于PML/RARαL型)的定量检测。方法从NB4细胞中提取总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板,设计PML/RARα(L型)与ABL基因特异性引物进行PCR,PCR产物经琼脂糖电泳、胶回收、PCMV4载体克隆... 目的建立一个含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品,用于PML/RARαL型)的定量检测。方法从NB4细胞中提取总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板,设计PML/RARα(L型)与ABL基因特异性引物进行PCR,PCR产物经琼脂糖电泳、胶回收、PCMV4载体克隆后转化DH5α工程菌,提取质粒进行酶切、测序鉴定,提取质粒用于制作荧光定量PCR标准曲线,同时对质粒的稳定性能进行评价。结果结果NB4细胞提取的总RNA完整性良好,构建的质粒经酶切鉴定后与目的条带一致,测序结果与目的片段几乎完全一致,且质粒的原始浓度为9×1012copies/ml,倍比稀释至9×104copies/ml,均能得到良好的标准曲线(R2≈1),且质粒的稳定性好,提示含PML/RARa(L型)与ABL双基因荧光定量PCR质粒标准品构建成功。结论本研究建立了制备含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品方法,并成功制备出稳定的含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品。 展开更多

关键词 内参基因 PML/RARα(L型) 实时定量PCR 质粒

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钙磷脂结合蛋白Ⅱ在人肝细胞癌中的表达 被引量：1

5

作者 朱晓静 张建平 +6 位作者 刘悦芳 徐凛峰 张慧林 李玉华 陈汐敏 冯振卿 管晓虹 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期663-666,731,F0006,共6页

目的:应用抑制差减杂交技术(supressionsubtractivehybridization,SSH)结合cDNA芯片筛选人肝细胞癌中差异表达基因。进一步探讨所筛选出的钙磷脂结合蛋白(annexinⅡ)在肝细胞中的表达及作用。方法:以肝癌组织和非肿瘤肝组织进行SSH,构... 目的:应用抑制差减杂交技术(supressionsubtractivehybridization,SSH)结合cDNA芯片筛选人肝细胞癌中差异表达基因。进一步探讨所筛选出的钙磷脂结合蛋白(annexinⅡ)在肝细胞中的表达及作用。方法:以肝癌组织和非肿瘤肝组织进行SSH,构建正、反向差减杂交文库,差减片断的PCR产物制备cDNA芯片,筛选出肝癌组织中差异表达基因。进一步应用荧光实时定量技术验证芯片结果,免疫组化方法分析annexinⅡ在肝细胞癌和正常肝组织中的表达。结果:成功构建了肝细胞癌差减杂交文库。芯片结果显示annexinⅡ在肝细胞癌中高表达并经荧光实时定量技术证实。免疫组化结果表明annexinⅡ在肝细胞癌和癌旁肝硬化组织中高表达,在正常肝组织中不表达(P<0.05)。在低分化肝细胞癌中annexinⅡ的表达有增高趋势。结论:SSH方法构建的肝细胞癌差减杂交文库富含肝细胞癌差异表达基因。肝细胞癌中高表达基因annexinII可能与肝细胞的恶性转化,肝癌细胞的转移和侵袭能力有关。 展开更多

关键词 肝细胞癌 抑制差减杂交技术 CDNA芯片 钙磷脂结合蛋白 免疫组化

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体外培养神经干细胞NGF、BDNF和NT-3及其受体trkA、trkB和trkC的表达 被引量：2

6

作者 李玉 王波 +2 位作者 林娜 王廷华 习杨彦彬 《昆明医学院学报》 2011年第2期3-6,共4页

目的检测体外培养神经干细胞(NSC)神经生长因子(NGF),脑源性深营养因子(BDNF),神经营养因子3(NT-3)及其受体trkA、trkB、trkC的表达.方法胎鼠海马神经干细胞培养并鉴定后,提取其总RNA,RT-PCR技术检测NGF、BDNF、NT-3及其受体trkA、trkB... 目的检测体外培养神经干细胞(NSC)神经生长因子(NGF),脑源性深营养因子(BDNF),神经营养因子3(NT-3)及其受体trkA、trkB、trkC的表达.方法胎鼠海马神经干细胞培养并鉴定后,提取其总RNA,RT-PCR技术检测NGF、BDNF、NT-3及其受体trkA、trkB、trkC的表达情况.免疫组化染色观察三种生长因子在NSC的分布和亚细胞定位.结果 RT-PCR显示NSC表达三种生长因子及其受体mRNA.免疫组化染色显示NSC表达三种生长因子蛋白,免疫阳性产物主要分布于细胞质.结论体外培养NSC表达NGF,BDNF,NT-3及其受体,提示三种因子对NSC发育和发挥生物学功能可能有重要作用. 展开更多

关键词 小鼠 神经干细胞 神经营养因子 基因表达

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食管癌组织中Survivin基因的表达及其与Bcl-2,P53的相关性 被引量：1

7

作者 王道梅 骆志国 熊奎 《郧阳医学院学报》 2005年第6期337-339,F0004,共4页

目的:探讨凋亡抑制基因Survivin在食管癌组织中的表达及其与Bc l-2和P53基因表达的相关性。方法:检测Survivin、Bc l-2、P53基因在10例癌旁组织及30例食管癌组织中表达。结果:60%食管癌组织表达Sur-vivin,而癌旁组织不表达。Survivin基... 目的:探讨凋亡抑制基因Survivin在食管癌组织中的表达及其与Bc l-2和P53基因表达的相关性。方法:检测Survivin、Bc l-2、P53基因在10例癌旁组织及30例食管癌组织中表达。结果:60%食管癌组织表达Sur-vivin,而癌旁组织不表达。Survivin基因表达与食管癌临床分期、年龄不相关,而与Bc l-2、P53基因显著相关,食管癌组织中P53蛋白表达阳性、阴性中,Survivin基因阳性率分别为73.68%,18.18%;两者有显著差异性(p<0.05);Bc l-2蛋白表达阳性、阴性中,Survivin基因阳性率分别为70.58%、7%,亦有显著差异(p<0.05)。结论:Survivin基因的异常表达而引起的细胞凋亡抑制,在食管癌的发生中起一定作用,Survivin基因的表达与食管癌组织中P53、Bc l-2蛋白的异常表达有一定相关性。 展开更多

关键词 SURVIVIN BCL-2 P53 食管肿瘤 免疫组织化学

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良性家族性婴儿惊厥家系候选基因的突变检测

8

作者 宋延民 龙莉莉 +5 位作者 杨国帅 李海燕 魏妮 刘佳 邓景贵 唐北沙 《中国热带医学》 CAS 2011年第5期545-547,共3页

目的检测良性家族性婴儿惊厥—家系的致病基因。方法通过生物信息学查询选择HCRTR1、STX12、HPCA为候选基因,应用Primer 3引物设计、PCR扩增、直接测序的方法进行候选基因的突变检测。序列分析采用DNAStar软件。结果未发现与疾病表型共... 目的检测良性家族性婴儿惊厥—家系的致病基因。方法通过生物信息学查询选择HCRTR1、STX12、HPCA为候选基因,应用Primer 3引物设计、PCR扩增、直接测序的方法进行候选基因的突变检测。序列分析采用DNAStar软件。结果未发现与疾病表型共分离的致病突变,但其中发现1个已知的多态。结论排除HCRTR1、STX12、HPCA为该BFIS家系致病基因的可能。 展开更多

关键词 良性家族性婴儿惊厥 候选基因 突变检测

原文传递

骨性关节炎软骨细胞中胰岛素样生长因子Ⅱ表达的研究 被引量：13

9

作者 赵玉岩 郭磊 +2 位作者 田蕾 高晓宇 刘魁 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期195-197,共3页

目的研究骨性关节炎(OA)软骨组织中细胞因子-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的基因表达的变化规律。方法选取OA患者(6例)和创伤性截肢的患者(5例)的膝关节软骨组织,HE染色光镜观察OA软骨组织病理学特征。采用原位杂交方法定位软骨组织中IGF... 目的研究骨性关节炎(OA)软骨组织中细胞因子-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的基因表达的变化规律。方法选取OA患者(6例)和创伤性截肢的患者(5例)的膝关节软骨组织,HE染色光镜观察OA软骨组织病理学特征。采用原位杂交方法定位软骨组织中IGF-ⅡmRNA的表达。提取关节软骨组织的总RNA和蛋白质,RT-PCR和Western印迹杂交方法测定软骨组织中IGF-ⅡmRNA和蛋白质的表达。结果OA软骨组织表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱,数目减少,有细胞成簇现象,可见软骨细胞变性、坏死,软骨厚度变薄,基质染色不均匀,有异染性。正常软骨细胞的细胞核与细胞浆中有IGF-ⅡmRNA的表达。与正常成人相比,OA患者软骨组织内IGF-Ⅱ在基因的转录与翻译水平明显降低了75%和63%(P<0.05)。结论细胞因子IGF-Ⅱ在OA软骨细胞中呈低表达状态。IGF-Ⅱ基因的差异表达可能是骨关节软骨退变的发生机制之一。 展开更多

关键词 骨性关节炎 软骨细胞 胰岛素样生长因子Ⅱ 基因表达

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二噁英对成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2基因表达的作用 被引量：1

10

作者 赵玉岩 郭磊 +2 位作者 田蕾 张世亮 刘魁 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期342-344,共3页

目的探讨环境类致癌因子对调控成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2)基因表达的作用机制。方法应用环境类致癌因子二噁英(TCDD)作用于人成骨肉瘤细胞(SaOS-2)细胞株;采用流式细胞仪检测TCDD对SaOS-2细... 目的探讨环境类致癌因子对调控成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2)基因表达的作用机制。方法应用环境类致癌因子二噁英(TCDD)作用于人成骨肉瘤细胞(SaOS-2)细胞株;采用流式细胞仪检测TCDD对SaOS-2细胞凋亡的影响规律;采用实时定量PCR定量分析SaOS-2细胞中IGF-2 mRNA的表达;采用Western印迹杂交鉴定SAOS-2细胞中IGF-2和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的p38 MAPK蛋白质的表达及磷酸化水平的变化。结果1×10-9mol/L、1×10-8mol/L、1×10-7mol/L剂量的TCDD对SaOS-2细胞具有抗凋亡作用,在基因转录和翻译水平上增强SaOS-2细胞中IGF-2的表达;TCDD明显地降低了SaOS-2细胞内p38 MAPK磷酸化水平。结论低生理浓度的TCDD可促进靶基因IGF-2的表达,并通过p38 MAPK信号转导通路,发挥拮抗成骨细胞凋亡的毒性作用。 展开更多

关键词 二噁英 肿瘤细胞 胰岛素样生长因子2 信号通路

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晶状体上皮细胞培养及Ⅳ型胶原表达 被引量：1

11

作者 刘卫华 张勇 《眼科新进展》 CAS 2007年第9期675-677,共3页

目的体外培养小牛晶状体上皮细胞，免疫组织化学SABC法检测1V型胶原表达。方法小牛晶状体前囊组织块培养，晶状体上皮细胞原代和传代培养。传代2次后免疫组织化学法检测细胞内1V型胶原表达。结果原代培养2-3周后细胞成单层后传代培养，... 目的体外培养小牛晶状体上皮细胞，免疫组织化学SABC法检测1V型胶原表达。方法小牛晶状体前囊组织块培养，晶状体上皮细胞原代和传代培养。传代2次后免疫组织化学法检测细胞内1V型胶原表达。结果原代培养2-3周后细胞成单层后传代培养，传代细胞易贴壁，9～10d后可再传代，免疫组织化学检测发现细胞质内有大量Ⅳ型胶原表达，形成细胞的骨架成分。结论晶状体上皮细胞在增生时有大量Ⅳ型胶原表达，其与晶状体后囊混浊有关。 展开更多

关键词 晶状体上皮细胞 细胞培养 1V型胶原

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地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞TGF-β受体表达的影响 被引量：1

12

作者 陈华新 张端莲 《华南国防医学杂志》 CAS 2008年第1期9-13,共5页

目的探讨地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞TGF-β受体表达的影响及意义。方法取1月鼠龄SD大鼠,予地塞米松眼膏涂双眼结膜囊,分别于用药1月、3月及6月摘取晶状体作为实验材料,采用晶状体前囊膜铺片方式,应用荧光免疫组化技术进行TGF-βR1和T... 目的探讨地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞TGF-β受体表达的影响及意义。方法取1月鼠龄SD大鼠,予地塞米松眼膏涂双眼结膜囊,分别于用药1月、3月及6月摘取晶状体作为实验材料,采用晶状体前囊膜铺片方式,应用荧光免疫组化技术进行TGF-βR1和TGF-βR2荧光免疫组化染色,检测其蛋白水平表达的变化;采用剥取晶状体囊膜组织方法,应用RT-PCR技术检测TGF-βR1和TGF-βR2在转录水平表达的变化。取相同数量的正常同龄大鼠作为对照组。结果在蛋白及转录水平,TGF-βR1和TGF-βR2的表达于用药后1、3、6月均较同龄对照组减弱(P<0.05);对照组中,TGF-βR1和TGF-βR2的表达随着年龄的增加也逐渐减弱(P<0.05);实验组中,随着用药时间的增加,TGF-βR1和TGF-βR2的表达进一步减弱(P<0.05)。结论地塞米松可以降低大鼠晶状体上皮细胞中TGF-βR1和TGF-βR2的表达,并随着用药时间的延长,其表达进一步降低,对白内障的形成有一定的影响。 展开更多

关键词 转化生长因子 转化生长因子受体 晶状体上皮细胞 地塞米松

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生肌调节因子和连接蛋白43基因诱导大鼠成纤维细胞分化为肌细胞实验研究

13

作者 张旭敏 李淑梅 +3 位作者 范慧敏 刘中民 张文杰 汪进益 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期417-420,共4页

目的探讨转染生肌调节因子(myoblast determination,MyoD)基因和连接蛋白43(Connexin,Cx43)基因的大鼠真皮成纤维细胞(der-mal fibroblast,DFs)生物学功能的变化及MyoD和Cx43基因转染DFs细胞治疗心力衰竭的可行性。方法采用Gateway技术... 目的探讨转染生肌调节因子(myoblast determination,MyoD)基因和连接蛋白43(Connexin,Cx43)基因的大鼠真皮成纤维细胞(der-mal fibroblast,DFs)生物学功能的变化及MyoD和Cx43基因转染DFs细胞治疗心力衰竭的可行性。方法采用Gateway技术,构建真核质粒表达载体,利用慢病毒(LV)表达系统,将大鼠MyoD cDNA和Cx43cDNA转入大鼠成纤维细胞中,经Blasticidin筛选培养,通过RT-PCR,Western印迹法等方法检测MyoD及Cx43蛋白及mRNA表达情况,并且通过显微镜观察转染后生长情况,膜片钳技术检测离子电流变化。结果RT-PCR,Western印迹法检测出MyoD及Cx43蛋白及相应mRNA表达,膜片钳检测到转染后钙离子电流,显微镜观察到基因转染筛选后培养1w细胞的融合现象,并有多核肌管形成。结论MyoD和Cx43基因转染使DFs分化为成肌细胞,为进一步研究基因治疗心力衰竭奠定基础。 展开更多

关键词 生肌调节因子 连接蛋白43 基因转染 成纤维细胞 心力衰竭

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通阳散结方对球囊损伤大鼠血管内膜转化生长因子-β1的影响

14

作者 郑琼莉 祝炜 +3 位作者 毛莉娜 喻荣辉 阮博 汪笋 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 2008年第2期111-113,共3页

目的探讨通阳散结法及其组方射心通胶囊对血管球囊损伤实验大鼠术后血管内膜增生的干预作用。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、球囊损伤模型组和中药复方干预组,每组10只。连续给药并饲养8周,各组于6周末行颈动脉内膜剥脱术,分离出... 目的探讨通阳散结法及其组方射心通胶囊对血管球囊损伤实验大鼠术后血管内膜增生的干预作用。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组、球囊损伤模型组和中药复方干预组,每组10只。连续给药并饲养8周,各组于6周末行颈动脉内膜剥脱术,分离出颈外动脉,结扎其远端,在近端作一切口,逆行插入球囊导管,造成颈动脉内膜损伤;假手术组只分离出颈外动脉,结扎其远端,未行球囊损伤。术后继续喂养2周后处死各组实验大鼠,取颈动脉损伤血管段,标本经相应处理后观察其形态学变化及转化生长因子-β1(TGFβ-1)免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结果。结果①模型组动脉内膜增生较假手术组明显,而中药复方干预后内膜增生面积明显减少,差异均有统计学意义(P均<0.01);②模型组TGF-β1的蛋白及mRNA表达较假手术组明显增加,而中药复方干预组能明显减少模型动物TGF-1β的蛋白及mRNA表达,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论通阳散结法及其组方可通过抑制TGF-β1的表达,阻止新生内膜的形成,从而干预球囊损伤术后的血管重构。 展开更多

关键词 通阳散结方 转化生长因子-Β1 血管重构

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慢性粒细胞白血病PKR基因的表达及临床意义

15

作者 李静 王小中 +1 位作者 黄淑英 李华 《实验与检验医学》 CAS 2010年第3期224-226,共3页

目的检测双链RNA依赖性蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)基因在慢性粒细胞白血病(CML)病人及CML细胞株K562细胞中的表达情况。方法分离CML患者慢性期(CP)15例,加速期(AP)11例,急变期(BC)9例及11例正常供者... 目的检测双链RNA依赖性蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)基因在慢性粒细胞白血病(CML)病人及CML细胞株K562细胞中的表达情况。方法分离CML患者慢性期(CP)15例,加速期(AP)11例,急变期(BC)9例及11例正常供者骨髓或外周血单个核细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测其PKR基因表达情况,并同时检测PKR基因在K562细胞中的表达。结果正常对照组PKR表达阳性率为90.9%,高于加速期的81.8%(P<0.05)及急变期的77.8%(P<0.05);正常对照组PKR/GAPDH比值为(0.92±0.40)%,高于慢性期的(0.85±0.32)%(P<0.05)及加速期的(0.72±0.54)%(P<0.05),明显高于急变期的(0.46±0.31)%(P>0.01)。K562细胞PKR/GAPDH比值为(0.55±0.13)%。结论 CML细胞及K562细胞株都有一定丰度的蛋白激酶PKR基因表达,为通过激活PKR而靶向诱导CML细胞凋亡奠定理论基础。 展开更多

关键词 双链RNA依赖性蛋白激酶 慢性粒细胞白血病 逆转录聚合酶链反应

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金雀异黄素对雌激素依赖靶基因转录的调节作用 被引量：5

16

作者 孙莹 孙肃 孙静 《中国医药导报》 CAS 2015年第4期12-14,共3页

目的观察金雀异黄素(genistein,GNT)对雌激素受体(estrogen receptor,ER)靶基因的转录调节作用。方法采用不同浓度的金雀异黄素(5、10、20 ng/m L)+雌二醇(10 ng/m L)或雌二醇单独处理乳腺癌细胞MCF7,36 h后收集细胞检测金雀异黄素对雌... 目的观察金雀异黄素(genistein,GNT)对雌激素受体(estrogen receptor,ER)靶基因的转录调节作用。方法采用不同浓度的金雀异黄素(5、10、20 ng/m L)+雌二醇(10 ng/m L)或雌二醇单独处理乳腺癌细胞MCF7,36 h后收集细胞检测金雀异黄素对雌激素反应元件(estrogen response element,ERE)报告基因的转录调控作用,通过定量PCR技术检测金雀异黄素对ER靶基因PDZK1和GREB1转录水平的影响。结果随着金雀异黄素浓度的增高,ER报告基因的转录水平逐渐下降,与之相一致,PDZK1和GREB1的转录水平也逐渐下降,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论金雀异黄素能够与雌二醇竞争结合细胞表面的ER,并拮抗ER调控的靶基因表达。 展开更多

关键词 金雀异黄素 雌二醇 雌激素受体 转录调控

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宏基因组学与人类健康关系研究进展 被引量：4

17

作者 朱真 朱嗣博 +1 位作者 张铁军 陈兴栋 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期122-124,共3页

近些年来,随着高通量测序技术发展,有关宏基因组学的研究开始逐步进入人们的视野,越来越多的人开始关注并研究宏基因组与人类健康的关系。在人类生活的环境中存在着许许多多生物群落;对他们进行宏基因组学研究,分析DNA序列,构建宏基因... 近些年来,随着高通量测序技术发展,有关宏基因组学的研究开始逐步进入人们的视野,越来越多的人开始关注并研究宏基因组与人类健康的关系。在人类生活的环境中存在着许许多多生物群落;对他们进行宏基因组学研究,分析DNA序列,构建宏基因组文库,进而了解人类周围环境中微生物组成以及彼此间的交互作用,探讨对人类健康的影响,对于促进健康、防止疾病有着重要意义。 展开更多

关键词 宏基因组学 人类健康 风险 研究进展

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用于人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选研究的转基因小鼠模型的建立

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作者 盛毅 纪亚忠 +3 位作者 赵亚南 张其 傅继梁 李建秀 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期77-80,共4页

分别将构建的人顶体蛋白酶原基因 (humanproacrosin ,hACR) 5’侧翼序列 ,第 1外显子和编码 β 半乳糖苷酶的基因 (lacZ)的融合基因 (载体 1 ) ,以及hACR基因 5’侧翼序列与报告基因lacZ的融合基因 (载体 2 ) ,通过显微注射受精卵法制... 分别将构建的人顶体蛋白酶原基因 (humanproacrosin ,hACR) 5’侧翼序列 ,第 1外显子和编码 β 半乳糖苷酶的基因 (lacZ)的融合基因 (载体 1 ) ,以及hACR基因 5’侧翼序列与报告基因lacZ的融合基因 (载体 2 ) ,通过显微注射受精卵法制备转基因小鼠 ,结果如下 :载体 1 :注射 89只卵 ,移植入 9只母鼠单侧输卵管中 ,3只怀孕 ,产仔9只 ,存活 7只 ,基因组Southern杂交检出整合有外源基因的阳性小鼠 1只 ,阳性率 1 4 .3% ;子 1代 1 5只 ,基因组Southern杂交 5只阳性。载体 2 :注射 2 35只卵 ,移植入 1 4只母鼠单侧输卵管中 ,4只怀孕 ,产仔 1 1只 ,存活 1 0只 ,基因组Southern杂交检出整合有外源基因的小鼠 1只 ,阳性率 1 0 .0 %。子 1代小鼠 1 0只 ,基因组Southern杂交 3只阳性。进一步将检测lacZ在转基因小鼠体内的表达。 展开更多

关键词 人顶体蛋白酶原基因 转基因小鼠 核酸杂交

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