ω-3多不饱和脂肪酸对大脑突触结构和传递功能影响的研究进展 被引量：5

1

作者 刘志国 张宏宇 +2 位作者 王华林 王丽梅 刘烈炬 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期703-710,共8页

ω-3多不饱和脂肪酸（omega-3polyunsaturated fatty acid,ω-3PUFA）是脑组织中含量丰富的脂肪酸,对大脑具有保护作用。

关键词 Ω-3多不饱和脂肪酸 大脑功能 突触传递 神经细胞 受体

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护理干预对正常分娩产妇产程进展的影响 被引量：13

2

作者 高雅娜 高伟 窦红哲 《河北医药》 CAS 2012年第12期1892-1893,共2页

正常分娩是指胎儿经阴道自然娩出。产力、产道、胎儿及心理状态是影响产程进展的四个因素，任何一个因素发生异常都会引起分娩过程受阻，造成难产。在社会范围内，分娩虽然是一个自然的生理过程，孕妇因对产程过程的无知及对分娩痛的恐... 正常分娩是指胎儿经阴道自然娩出。产力、产道、胎儿及心理状态是影响产程进展的四个因素，任何一个因素发生异常都会引起分娩过程受阻，造成难产。在社会范围内，分娩虽然是一个自然的生理过程，孕妇因对产程过程的无知及对分娩痛的恐惧恐惧，临产时易产生焦虑或抑郁等情绪，可导致体内内分泌改变，如去甲肾上腺素减少，导致子宫收缩乏力，产程延长，产后出血或手术助产几率增加。 展开更多

关键词 护理干预 正常分娩 产程进展

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后腹腔镜切除术治疗老年巨大血管平滑肌脂肪瘤对免疫功能及神经内分泌功能的影响 被引量：1

3

作者 杨瑜 陈明 +4 位作者 朱伟东 柳靖 陈恕求 张晓文 许斌 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1411-1413,共3页

目的探讨后腹腔镜切除术治疗老年巨大血管平滑肌脂肪瘤(AML)对患者免疫功能及神经内分泌功能的影响。方法选择2012年2月至2015年6月收治的老年巨大AML患者62例,按照入院顺序编号随机分为观察组与对照组各31例,其中对照组采用开放性肾切... 目的探讨后腹腔镜切除术治疗老年巨大血管平滑肌脂肪瘤(AML)对患者免疫功能及神经内分泌功能的影响。方法选择2012年2月至2015年6月收治的老年巨大AML患者62例,按照入院顺序编号随机分为观察组与对照组各31例,其中对照组采用开放性肾切除术治疗,观察组采用后腹腔镜肾切除术治疗,比较两组患者术中出血量、手术时间、术后住院时间,术前、术后免疫功能指标:CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+,神经内分泌功能指标:β-内啡肽、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇。结果 1观察组术中出血量及住院时间均明显少于对照组(P<0.05);2观察组术后第1、4天CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于对照组,CD8+水平术后第1、4天低于对照组(P<0.05);3观察组术后第1、4天β-内啡肽、ACTH及皮质醇激素水平明显低于对照组(P<0.05)。结论后腹腔镜切除术治疗老年巨大微创优势明显,对免疫功能及神经内分泌功能影响较小。 展开更多

关键词 巨大血管平滑肌脂肪瘤 肾脏 后腹腔镜切除术 免疫功能 神经内分泌功能

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tTG小干扰RNA对人晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质沉积的抑制作用 被引量：1

4

作者 邢星 胡义珍 +1 位作者 李世洋 马红利 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第1期11-14,19,共5页

目的探讨RNA干扰抑制组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)的表达对人转化生长因子β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)转分化和细胞外基质沉积的抑制作用。方... 目的探讨RNA干扰抑制组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)的表达对人转化生长因子β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)转分化和细胞外基质沉积的抑制作用。方法设计并合成针对tTG的3对小干扰RNA(siRNA):tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-3,用Real-time PCR和Western blot检测转染了siR-NA后HLE-B3细胞表达tTG mRNA和tTG蛋白的变化。然后将体外培养的HLE-B3细胞分为正常对照组、TGF-β2组和TGF-β2+siRNA组。48h后,用Western blot检测各组tTG、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronec-tin,FN)和Ⅳ型胶原(collagenⅣ,Col-Ⅳ)的表达。结果转染tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-348h后,tTG mRNA的表达分别下降为空白对照组的46.60%、12.84%、66.75%(均为P<0.05);tTG蛋白的表达量分别下降为空白对照组的60.49%、27.87%、55.91%(均为P<0.01)。Real-time PCR与Western blot检测结果一致显示了tTG-siRNA-2对tTG基因的抑制效果最佳。与正常对照组相比,TGF-β2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显增加(均为P<0.01);与TGF-β2组相比,TGF-β2+tTG-siRNA-2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显减少(均为P<0.01)。结论靶向tTG的siRNA可以显著降低tTG的表达水平,同时可以明显抑制TGF-β2诱导的HLE-B3细胞合成α-SMA、FN、Col-Ⅳ。提示tTG是介导TGF-β2诱导人LEC转分化和细胞外基质沉积的重要分子。 展开更多

关键词 RNA干扰 组织型转谷氨酰胺酶 细胞外基质 平滑肌肌动蛋白 晶状体上皮细胞 后囊膜混浊

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鄂南农村社区居民高血压患病状况及相关知识和行为的调查 被引量：3

5

作者 蒋汝刚 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2006年第5期824-825,共2页

目的:了解鄂南农村社区居民高血压患病状况及对高血压的认知和相关行为,为社区高血压的综合防治提供依据。方法:采用多阶段抽样法,抽取鄂南农村社区居民1641例进行调查。结果:高血压患病率为25.78%,其中男性为27.27%,女性24.14%,男、女... 目的:了解鄂南农村社区居民高血压患病状况及对高血压的认知和相关行为,为社区高血压的综合防治提供依据。方法:采用多阶段抽样法,抽取鄂南农村社区居民1641例进行调查。结果:高血压患病率为25.78%,其中男性为27.27%,女性24.14%,男、女差异无统计学意义(χ2=2.10,P>0.05)。不同年龄高血压患病率差异有统计学意义(χ2=90.63,P<0.01),患病率随年龄增长而增高。文化程度低者患病率高于文化程度高者(χ2=23.13,P<0.01)。居民高血压病相关知识知晓率偏低,有不良卫生行为者较多。结论:在农村社区居民中应尽快采取措施,积极开展社区高血压的综合防治工作。 展开更多

关键词 高血压 患病率 社区居民 认知 农村社区

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CDIO教学模式在急危重症护理学实验教学中的应用研究 被引量：4

6

作者 聂玉琴 窦丽 +1 位作者 杨秀红 许菊芳 《新疆医学》 2018年第6期684-686,共3页

急危重症护理学是护理专业的主干课程之一,是一门实践性较强的临床学科。传统急危重症护理学实验教学多采用＂理论讲解一示教一学生练习＂,内容相对单一,缺乏系统性和综合性。因此在有限的教学时间内整合相关课程,优化教学内容,创新临... 急危重症护理学是护理专业的主干课程之一,是一门实践性较强的临床学科。传统急危重症护理学实验教学多采用＂理论讲解一示教一学生练习＂,内容相对单一,缺乏系统性和综合性。因此在有限的教学时间内整合相关课程,优化教学内容,创新临床护理实验教学模式,培养更多高层次应用型. 展开更多

关键词 实验教学模式 重症护理学 应用 主干课程 护理专业 临床学科 教学时间 教学内容

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血管紧张素Ⅱ受体1在胚胎及生后小鼠肾的表达 被引量：1

7

作者 李晓明 于嵩 郭敏 《解剖科学进展》 CAS 2006年第4期317-319,I0002,共4页

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1(AngiotensinⅡreceptor type1,AT1R)在小鼠早期肾脏发育中的表达及其与肾脏发育的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫印迹法(W estern b lot)检测胚龄14、15、16、18d及生后日龄1、3d小鼠肾脏发育中AT1R... 目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1(AngiotensinⅡreceptor type1,AT1R)在小鼠早期肾脏发育中的表达及其与肾脏发育的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫印迹法(W estern b lot)检测胚龄14、15、16、18d及生后日龄1、3d小鼠肾脏发育中AT1R的表达。结果胚龄14 d,AT1R在输尿管芽中有少量表达,胚龄15 d时AT1R表达达到高峰,从胚龄16天开始AT1R在输尿管芽及其分支表达明显减弱,而较多出现在皮质肾小管,胚龄18 d时,只有微量表达。AT1R在小鼠后肾发生发育中的表达具有一定的时空顺序,最先出现在输尿管芽,然后是肾小管及肾小球。结论AT1R与输尿管芽分支不断延长以及肾小球和肾小管的增殖和分化密切相关。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ受体1 小鼠 肾脏发育

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耳穴埋豆在防治肿瘤化疗所致恶心呕吐中的运用 被引量：14

8

作者 王林娥 杨玉英 《现代实用医学》 2014年第2期181-182,共2页

目的观察耳穴埋豆预防及治疗恶性肿瘤患者进行化疗时引起胃肠道毒副反应恶心、呕吐的疗效。方法采取自身对照的方法对患者进行疗效观察。63例患者首次化疗疗程采用静脉注射药物方法预防,第2次化疗疗程则采用耳穴埋豆加静脉注射药物,观... 目的观察耳穴埋豆预防及治疗恶性肿瘤患者进行化疗时引起胃肠道毒副反应恶心、呕吐的疗效。方法采取自身对照的方法对患者进行疗效观察。63例患者首次化疗疗程采用静脉注射药物方法预防,第2次化疗疗程则采用耳穴埋豆加静脉注射药物,观察患者在化疗期间恶心呕吐发生情况。结果耳穴埋豆法总有效率达87.3%,而静脉注射药物方法为60.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论耳穴埋豆防治肿瘤化疗导致恶心、呕吐的疗效显著,值得推广。 展开更多

关键词 肿瘤 化疗 恶心 呕吐 耳穴埋豆

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骨性关节炎软骨细胞中胰岛素样生长因子Ⅱ表达的研究 被引量：13

9

作者 赵玉岩 郭磊 +2 位作者 田蕾 高晓宇 刘魁 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期195-197,共3页

目的研究骨性关节炎(OA)软骨组织中细胞因子-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的基因表达的变化规律。方法选取OA患者(6例)和创伤性截肢的患者(5例)的膝关节软骨组织,HE染色光镜观察OA软骨组织病理学特征。采用原位杂交方法定位软骨组织中IGF... 目的研究骨性关节炎(OA)软骨组织中细胞因子-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的基因表达的变化规律。方法选取OA患者(6例)和创伤性截肢的患者(5例)的膝关节软骨组织,HE染色光镜观察OA软骨组织病理学特征。采用原位杂交方法定位软骨组织中IGF-ⅡmRNA的表达。提取关节软骨组织的总RNA和蛋白质,RT-PCR和Western印迹杂交方法测定软骨组织中IGF-ⅡmRNA和蛋白质的表达。结果OA软骨组织表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱,数目减少,有细胞成簇现象,可见软骨细胞变性、坏死,软骨厚度变薄,基质染色不均匀,有异染性。正常软骨细胞的细胞核与细胞浆中有IGF-ⅡmRNA的表达。与正常成人相比,OA患者软骨组织内IGF-Ⅱ在基因的转录与翻译水平明显降低了75%和63%(P<0.05)。结论细胞因子IGF-Ⅱ在OA软骨细胞中呈低表达状态。IGF-Ⅱ基因的差异表达可能是骨关节软骨退变的发生机制之一。 展开更多

关键词 骨性关节炎 软骨细胞 胰岛素样生长因子Ⅱ 基因表达

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shRNA表达载体pWH1的构建及用于HIF1基因的沉默 被引量：4

10

作者 吴元明 张晓楠 +2 位作者 韩者艺 李春英 陈南春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期115-118,共4页

目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpinRNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducibleFactor-1,HIF1)基因的沉默效果。方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆入酶切处理后的pEGFP-C1载体片段中,此载体命名为pWH1... 目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpinRNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducibleFactor-1,HIF1)基因的沉默效果。方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆入酶切处理后的pEGFP-C1载体片段中,此载体命名为pWH1。以人HIF1cDNA基因为靶标设计引物,退火后克隆入pWH1。新的载体转染SGC7901细胞,然后用RT-PCR和Western blot检测HIF1基因的表达改变。结果:构建的pWH1载体能很好地表达针对HIF1基因的shRNA,RT-PCR和Western blot的结果显示HIF1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。结论:成功构建了shRNA表达载体pWH1,这对于基因的功能研究具有重要的意义。 展开更多

关键词 SHRNA 表达载体 RNA干涉 HIF1基因

原文传递

大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达 被引量：6

11

作者 吴长毅 庞庆丰 +3 位作者 曾因明 王俊科 杨光 高新跃 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期101-104,共4页

目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转... 目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Westernblot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性。结果:表达产物相对分子量约为32kU,表达量约为7.0mg/L,HO-1活性为2.386U/(mg·h)。结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠HO-1。 展开更多

关键词 血红素加氧酶-1 基因克隆表达 乳酸乳球菌

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CYP19基因表达与芳香化酶活性调控因子的研究进展 被引量：12

12

作者 王慧 李霞 张育辉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期304-308,共5页

芳香化酶是雌激素合成中的关键酶,催化睾酮和雄烯二酮转化为雌激素。本文在对芳香化酶的蛋白结构、基因特征和分布进行阐述的基础上,重点对编码该蛋白的CYP19基因的调控因子以及芳香化酶活性的调节进行探讨。CYP19基因的调控因子包括cAM... 芳香化酶是雌激素合成中的关键酶,催化睾酮和雄烯二酮转化为雌激素。本文在对芳香化酶的蛋白结构、基因特征和分布进行阐述的基础上,重点对编码该蛋白的CYP19基因的调控因子以及芳香化酶活性的调节进行探讨。CYP19基因的调控因子包括cAMP反应元件(CRE)、类固醇生成因子1/肾上腺4结合蛋白(SF-1/Ad4BP)、雌激素受体(ER)等顺式作用因子和TATA结合蛋白(TBP)、生长因子等反式作用因子。主要通过cAMP依赖性蛋白激酶信号通路在转录水平对其进行调节。而芳香化酶表达及其酶活性的调控因子主要集中于性类固醇激素和促性腺激素,此外还受到温度等外部因子等因素的调节。芳香化酶的调节对维持雌雄激素间作用的平衡、保证机体的正常生理功能具有重要意义。 展开更多

关键词 芳香化酶 CYP19基因 调控因子 机制

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科罗索酸药理作用研究进展 被引量：8

13

作者 张建秀 柳慧哲 +1 位作者 朴光春 元海丹 《国际药学研究杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期22-26,共5页

科罗索酸是一种五环三萜类天然化合物,主要来源于枇杷叶、大叶紫薇、对萼猕猴桃、沙棘叶等。研究发现,科罗索酸具有降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗菌等多种药理活性,具有良好的开发潜力和广阔的应用前景,在医药、日化、食品等领域有... 科罗索酸是一种五环三萜类天然化合物,主要来源于枇杷叶、大叶紫薇、对萼猕猴桃、沙棘叶等。研究发现,科罗索酸具有降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗菌等多种药理活性,具有良好的开发潜力和广阔的应用前景,在医药、日化、食品等领域有广泛应用。本文主要对科罗索酸的降血糖、抗肿瘤、抗炎和心血管保护等多种药理作用进行综述,为科罗索酸的进一步研究和开发应用提供理论依据和借鉴。 展开更多

关键词 科罗索酸 降血糖 抗肿瘤 药理作用

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人类Gfi1基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：3

14

作者 黄敏 欧东梅 +2 位作者 徐金环 张晓梅 张义成 《实验与检验医学》 CAS 2011年第2期102-104,124,共4页

目的建立测定人类Gfi1mRNA表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为进一步研究新基因的功能奠定基础。方法以Gfi1基因为靶基因设计引物。构建携带Gfi1cDNA的质粒plox-Gfi1,经过纯化,质粒浓度测定,拷贝数的计算及10倍的梯度稀释制备... 目的建立测定人类Gfi1mRNA表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为进一步研究新基因的功能奠定基础。方法以Gfi1基因为靶基因设计引物。构建携带Gfi1cDNA的质粒plox-Gfi1,经过纯化,质粒浓度测定,拷贝数的计算及10倍的梯度稀释制备标准品。应用ABI stepone PCR仪对Gfi1mRNA进行实时荧光定量PCR检测,建立标准曲线和熔解曲线。结果建立了Gfi1mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,本法线性范围为6.36×102～6.36×108copies/μl,线性相关系数γ2为0.996,熔解曲线为单峰,Tm值为(89.98±0.22)℃,标准品的循环阈值批内变异系数和批间变异系数分别为1.35%～3.61%和1.49%～3.42%。结论本研究建立的Gfi1mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法速度快,灵敏度高,特异性强,重复性及稳定性好,可用于Gfi1基因的定量检测。 展开更多

关键词 Gfi1 SYBR GreenI 实时荧光定量PCR

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金黄色葡萄球菌生物膜形成与ica操纵子关系探讨 被引量：4

15

作者 丁露 黄小林 +3 位作者 陈开森 廖晚珍 胡雪飞 胡妮娅 《实验与检验医学》 CAS 2011年第4期353-354,359,共3页

目的了解不同部位分离金黄色葡萄球菌在不同时间生物膜形成与ica操纵子关系。方法采用结晶紫法测定不同部位在不同时间形成生物膜的含量;采用PCR法测定菌株是否含有ica基因。结果生物膜形成能力强的菌株则ica基因大部分为阳性。结论含有... 目的了解不同部位分离金黄色葡萄球菌在不同时间生物膜形成与ica操纵子关系。方法采用结晶紫法测定不同部位在不同时间形成生物膜的含量;采用PCR法测定菌株是否含有ica基因。结果生物膜形成能力强的菌株则ica基因大部分为阳性。结论含有ica基因的金黄色葡萄球菌则生物膜形成的能力较强。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 生物膜 ICA操纵子

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Kidd血型系统Jk基因非编码区3个新突变位点的多态性 被引量：4

16

作者 章昊 安文静 +2 位作者 梁爽 苏宇清 洪文旭 《广东医学》 CAS 2019年第13期1895-1899,共5页

目的研究Kidd血型系统Jk基因非编码区3个新突变位点的多态性。方法选取深圳地区和惠州地区发现的7例Jk(a-b-)表型血液标本以及115例汉族健康无偿献血者血液标本,经尿素溶解试验及常规血型血清学方法鉴定Kidd表现型,并对于Jk基因启动子,... 目的研究Kidd血型系统Jk基因非编码区3个新突变位点的多态性。方法选取深圳地区和惠州地区发现的7例Jk(a-b-)表型血液标本以及115例汉族健康无偿献血者血液标本,经尿素溶解试验及常规血型血清学方法鉴定Kidd表现型,并对于Jk基因启动子,第1~11外显子及部分内含子片段进行直接测序比对分析。结果(1)检出两种Jk隐性基因,Exon 9 c.896G>A和IVS5-1g>a;同时发现3个新的突变位点Intron 2-51 c>t、Exon 3 42 c>a、Intron 3 72 c>t。(2)7例Jk(a-b-)中,5例携带IVS5-1 a/a,2例携带Exon 9 c.896 A/A隐性基因。并且7例标本均携带Intron 2-51 t/t和Exon 3 42 a/a纯合子等位基因,而对照组115例标本中只有29例携带。7例Jk(a-b-)样本均携带JkB基因。(3)7例Jk(a-b-)和对照组115例样本Jk基因均表现为Intron 3 72 t/t纯合子突变。结论IVS5-1 g>a和Exon 9 c.896G>A是中国人群中常见的Jk隐性基因。另外,Jk基因非编码区的2个新突变位点Intron 2-51 t/t、Exon 3 42 a/a基因型可能与Jk隐性基因相关。 展开更多

关键词 Jk(a-b-)血型 Jk基因 序列分析

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含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品的制备及应用 被引量：2

17

作者 江梅 简正伟 +3 位作者 罗清 徐芬 万腊根 张长林 《实验与检验医学》 CAS 2011年第5期482-485,共4页

目的建立一个含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品,用于PML/RARαL型)的定量检测。方法从NB4细胞中提取总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板,设计PML/RARα(L型)与ABL基因特异性引物进行PCR,PCR产物经琼脂糖电泳、胶回收、PCMV4载体克隆... 目的建立一个含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品,用于PML/RARαL型)的定量检测。方法从NB4细胞中提取总RNA并逆转录为cDNA,以此为模板,设计PML/RARα(L型)与ABL基因特异性引物进行PCR,PCR产物经琼脂糖电泳、胶回收、PCMV4载体克隆后转化DH5α工程菌,提取质粒进行酶切、测序鉴定,提取质粒用于制作荧光定量PCR标准曲线,同时对质粒的稳定性能进行评价。结果结果NB4细胞提取的总RNA完整性良好,构建的质粒经酶切鉴定后与目的条带一致,测序结果与目的片段几乎完全一致,且质粒的原始浓度为9×1012copies/ml,倍比稀释至9×104copies/ml,均能得到良好的标准曲线(R2≈1),且质粒的稳定性好,提示含PML/RARa(L型)与ABL双基因荧光定量PCR质粒标准品构建成功。结论本研究建立了制备含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品方法,并成功制备出稳定的含PML/RARα(L型)与ABL双基因质粒标准品。 展开更多

关键词 内参基因 PML/RARα(L型) 实时定量PCR 质粒

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钙磷脂结合蛋白Ⅱ在人肝细胞癌中的表达 被引量：1

18

作者 朱晓静 张建平 +6 位作者 刘悦芳 徐凛峰 张慧林 李玉华 陈汐敏 冯振卿 管晓虹 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期663-666,731,F0006,共6页

目的:应用抑制差减杂交技术(supressionsubtractivehybridization,SSH)结合cDNA芯片筛选人肝细胞癌中差异表达基因。进一步探讨所筛选出的钙磷脂结合蛋白(annexinⅡ)在肝细胞中的表达及作用。方法:以肝癌组织和非肿瘤肝组织进行SSH,构... 目的:应用抑制差减杂交技术(supressionsubtractivehybridization,SSH)结合cDNA芯片筛选人肝细胞癌中差异表达基因。进一步探讨所筛选出的钙磷脂结合蛋白(annexinⅡ)在肝细胞中的表达及作用。方法:以肝癌组织和非肿瘤肝组织进行SSH,构建正、反向差减杂交文库,差减片断的PCR产物制备cDNA芯片,筛选出肝癌组织中差异表达基因。进一步应用荧光实时定量技术验证芯片结果,免疫组化方法分析annexinⅡ在肝细胞癌和正常肝组织中的表达。结果:成功构建了肝细胞癌差减杂交文库。芯片结果显示annexinⅡ在肝细胞癌中高表达并经荧光实时定量技术证实。免疫组化结果表明annexinⅡ在肝细胞癌和癌旁肝硬化组织中高表达,在正常肝组织中不表达(P<0.05)。在低分化肝细胞癌中annexinⅡ的表达有增高趋势。结论:SSH方法构建的肝细胞癌差减杂交文库富含肝细胞癌差异表达基因。肝细胞癌中高表达基因annexinII可能与肝细胞的恶性转化,肝癌细胞的转移和侵袭能力有关。 展开更多

关键词 肝细胞癌 抑制差减杂交技术 CDNA芯片 钙磷脂结合蛋白 免疫组化

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二噁英对成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2基因表达的作用 被引量：1

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作者 赵玉岩 郭磊 +2 位作者 田蕾 张世亮 刘魁 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期342-344,共3页

目的探讨环境类致癌因子对调控成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2)基因表达的作用机制。方法应用环境类致癌因子二噁英(TCDD)作用于人成骨肉瘤细胞(SaOS-2)细胞株;采用流式细胞仪检测TCDD对SaOS-2细... 目的探讨环境类致癌因子对调控成骨肉瘤细胞中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2)基因表达的作用机制。方法应用环境类致癌因子二噁英(TCDD)作用于人成骨肉瘤细胞(SaOS-2)细胞株;采用流式细胞仪检测TCDD对SaOS-2细胞凋亡的影响规律;采用实时定量PCR定量分析SaOS-2细胞中IGF-2 mRNA的表达;采用Western印迹杂交鉴定SAOS-2细胞中IGF-2和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的p38 MAPK蛋白质的表达及磷酸化水平的变化。结果1×10-9mol/L、1×10-8mol/L、1×10-7mol/L剂量的TCDD对SaOS-2细胞具有抗凋亡作用,在基因转录和翻译水平上增强SaOS-2细胞中IGF-2的表达;TCDD明显地降低了SaOS-2细胞内p38 MAPK磷酸化水平。结论低生理浓度的TCDD可促进靶基因IGF-2的表达,并通过p38 MAPK信号转导通路,发挥拮抗成骨细胞凋亡的毒性作用。 展开更多

关键词 二噁英 肿瘤细胞 胰岛素样生长因子2 信号通路

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