miRNAs在人骨髓间充质干细胞中的表达 被引量：6

1

作者 高杰 杨彤涛 +3 位作者 裘秀春 韩建伟 范清宇 马保安 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期65-68,共4页

目的观察miRNAs在人骨髓间充质干细胞(MSC)中的表达情况。方法以从骨髓中分离培养的人骨髓MSC为实验对象,分离提取细胞内小片段RNA(≤200nt),经多聚腺苷酸化和5'连接子连接后进行反转录,扩增克隆到得到大约109bp的DNA片段,测序后经... 目的观察miRNAs在人骨髓间充质干细胞(MSC)中的表达情况。方法以从骨髓中分离培养的人骨髓MSC为实验对象,分离提取细胞内小片段RNA(≤200nt),经多聚腺苷酸化和5'连接子连接后进行反转录,扩增克隆到得到大约109bp的DNA片段,测序后经生物信息学分析确定miRNAs的表达情况。选取部分miRNAs和新发现miRNAs,合成相应探针,与从人骨髓MSC、人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607和大鼠成骨肉瘤细胞系UMR-106中分离出的小片段RNA进行杂交验证(Northernblot)。结果成功从骨髓中分离培养出骨髓MSC,流式细胞仪检测93%以上的MSC表达CD44,但不表达CD34、CD45。从MSC中克隆测序得到194个克隆体,经生物信息学分析发现52个miRNAs(27种),其中包括26种已知的miRNAs和1种Nature杂志预测的miRNAs(PRE-DICTED-miR-202)。选取4条miRNAs(miR-495、miR-34a、miR-17-5p和PREDICTED-miR-202)进行Northernblot验证,发现它们均在MSC中表达。其中miR-34a和PREDICTED-miR-202只表达于MSC,miR-495在MSC和SOSP-9607中表达,miR-17-5p在3种细胞中均有表达。结论筛选出了在人骨髓MSC中表达的miRNAs,为miRNAs参与调控MSC的自我更新提供了依据,同时为miRNAs在干细胞中的潜在应用奠定了基础。 展开更多

关键词 骨髓 间质干细胞 细胞 培养的 微RNAS

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以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对人白血病K562细胞的抑制作用 被引量：11

2

作者 郭敏 李育敏 +1 位作者 费嘉 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1127-1131,共5页

目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲... 目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,台盼蓝拒染法检测其对细胞生长抑制的作用,姬姆萨染色观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化。利用荧光定量PCR技术检测反义寡核苷酸作用后细胞内microRNA-21表达水平的改变。结果:MTT结果显示反义寡核苷酸有效抑制细胞生长,分别与随机组、空白对照组进行比较有显著差异(P<0.05),反义寡核苷酸作用的最佳浓度是0.6μmol/L。台盼蓝拒染法结果显示从转染K562细胞24 h开始,反义寡核苷酸组细胞生长明显受到抑制,抑制效应持续到72 h。姬姆萨染色显示反义寡核苷酸作用K562细胞24 h后,可在细胞中见凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示反义寡核苷酸组出现明显的亚二倍体峰,细胞周期无发生明显变化。荧光定量PCR结果显示,反义寡核苷酸可有效抑制细胞内microRNA-21的表达水平。结论:以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸可有效抑制人白血病K562细胞的生长,并显著促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 microRNA 寡核苷酸类 反义 K562细胞 细胞凋亡

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鸡贫血病毒VP3基因核酸疫苗治疗荷SHG-44人脑胶质瘤大鼠的实验研究 被引量：2

3

作者 郭云宝 李蕴博 +2 位作者 杜丹华 赵刚 郭宇 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1244-1247,共4页

目的探索鸡贫血病毒VP3基因核酸疫苗(pVVP3)对SHG-44人脑胶质瘤生长的抑制作用。方法构建荷SHG-44人脑胶质瘤W istar大鼠的肿瘤模型,随机分组给予不同的处理给药,观察治疗期间及治疗后的肿瘤生长情况,通过病理组织学、超微结构分析,检测... 目的探索鸡贫血病毒VP3基因核酸疫苗(pVVP3)对SHG-44人脑胶质瘤生长的抑制作用。方法构建荷SHG-44人脑胶质瘤W istar大鼠的肿瘤模型,随机分组给予不同的处理给药,观察治疗期间及治疗后的肿瘤生长情况,通过病理组织学、超微结构分析,检测pVVP3在W istar大鼠体内的抗肿瘤作用。结果pVVP3治疗组肿瘤生长速度明显受到抑制,其抑瘤率达90.58%。病理组织学及超微结构观察在pVVP3治疗组可见典型的凋亡特征。说明pVVP3对SHG-44人脑胶质瘤生长有抑制作用,可诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 鸡贫血病毒 凋亡素基因 胶质瘤 凋亡

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吉西他滨对人肺癌A549细胞株CN-Ⅱ，APE／Ref-1mRNA和蛋白表达的影响 被引量：2

4

作者 宋东 周曙光 +3 位作者 刘玥 李晓栋 王姗姗 唐小龙 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期246-249,共4页

【目的】研究人肺癌A549细胞株在吉西他滨化疗时CN-Ⅱ,APE/Ref-1基因表达的变化,并探讨其在肺癌化疗耐药中所起的作用。【方法】不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人肺癌A549细胞株24h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定... 【目的】研究人肺癌A549细胞株在吉西他滨化疗时CN-Ⅱ,APE/Ref-1基因表达的变化,并探讨其在肺癌化疗耐药中所起的作用。【方法】不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人肺癌A549细胞株24h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定用药后CN-Ⅱ和APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达情况。【结果】吉西他滨作用人肺癌A549细胞株24h后,CN-Ⅱ和APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达水平均明显上升,并与吉西他滨的浓度呈正相关(CN-ⅡRT-PCR:r=0.687,P=0.009;Western blot:r=0.594,P=0.021;APE/Ref-1RT-PCR:r=0.669,P=0.010;Western blot:r=0.562,P=0.029)。【结论】CN-Ⅱ和APE/Ref-1在肺癌化疗时表达明显增强,可能与化疗耐药性的产生有关,并提示针对CN-Ⅱ和APE/Ref-1的靶向干预可能有助于提高肺癌的化疗敏感性。 展开更多

关键词 吉西他滨 CN-Ⅱ APE/REF-1 肺癌 化疗耐药性

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siRNA沉默RALA基因影响人白血病K562细胞增殖和凋亡 被引量：1

5

作者 李育敏 朱雪姣 +1 位作者 谷景义 费嘉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期625-630,共6页

目的:研究小干扰RNA(siRNA)抑制v-ral猴白血病病毒癌基因同系物A(RALA)基因表达对人慢性粒细胞性白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用LipofectamineTM2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检... 目的:研究小干扰RNA(siRNA)抑制v-ral猴白血病病毒癌基因同系物A(RALA)基因表达对人慢性粒细胞性白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用LipofectamineTM2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测RALA siRNA对K562细胞增殖的影响;台盼蓝拒染法检测RALA siRNA对K562细胞存活率的影响;real-time PCR检测RALA mRNA表达水平;Western blotting检测RALA蛋白表达水平;annexin V/PI双染流式细胞仪检测RALA siRNA对K562细胞凋亡的影响;Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态学变化。结果:RALA siRNA可明显抑制K562细胞内RALA mRNA和蛋白的表达(P<0.05);与阴性对照组相比,转染RALA siRNA的K562细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);流式细胞术结果显示转染RALA siRNA的K562细胞凋亡较阴性对照组显著增加(P<0.05);Hoechst 33258染色见转染RALA siRNA的K562细胞出现典型的凋亡形态学变化。结论:癌基因RALA在白血病发生发展过程中发挥重要作用。siRNA下调RALAmRNA和蛋白的表达,可抑制人白血病K562细胞增殖,诱导细胞凋亡,提示RALA可能是白血病治疗的新靶点。 展开更多

关键词 v-ral猴白血病病毒癌基因同系物A 小干扰RNA 白血病 细胞增殖 细胞凋亡

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miR-125b在儿童AML中的表达及其反义寡核苷酸对白血病细胞的作用 被引量：5

6

作者 刘晓丹 徐令 +1 位作者 檀卫平 颜慕霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期738-741,共4页

目的:研究儿童急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓细胞中miR-125b的表达及miR-125b为靶标的反义寡核苷酸对人白血病细胞的作用。方法:采用基因芯片和实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测儿童AML治疗前后骨髓细胞中miR-125b的表达。采用电转法... 目的:研究儿童急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓细胞中miR-125b的表达及miR-125b为靶标的反义寡核苷酸对人白血病细胞的作用。方法:采用基因芯片和实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测儿童AML治疗前后骨髓细胞中miR-125b的表达。采用电转法将与miR-125b序列互补的反义寡核苷酸转染HL-60细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测转染后24 h、48 h、72 h、96 h细胞增殖情况。结果:芯片结果显示miR-125b在儿童AML中表达明显增高,约为正常的12倍,qRT-PCR结果进一步证实了miR-125b在儿童AML中异常高表达,同时还发现miR-125b在儿童AML部分缓解的患者骨髓细胞中表达下降,在完全缓解患者骨髓细胞中降至正常水平。CCK-8结果显示,针对miR-125b的反义寡核苷酸能有效抑制白血病细胞的增殖,与对照组相比有显著差异(P<0.01)。结论:miR-125b在儿童AML中可能起"癌基因"作用,以miR-125b为靶标的反义寡核苷酸可能为儿童AML治疗提供新的方法。 展开更多

关键词 miR-125b 寡核苷酸类 反义 HL-60细胞

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TRAIL诱导黑色素瘤细胞中miRNA-221的表达 被引量：2

7

作者 侯丽丽 程冰 +2 位作者 张旭东 王丽 张林杰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第2期120-124,共5页

目的研究TRAIL诱导的黑色素瘤细胞中miRNA-221的表达及其在细胞凋亡抵抗中的意义。方法 TRAIL(100μg/L)分别处理黑色素瘤细胞系sk-Mel-28、IgR3、Mel-RM、MM200、Me4405,6 h后收集细胞,实时荧光定量PCR检测各细胞系中miRNA-221的mRNA水... 目的研究TRAIL诱导的黑色素瘤细胞中miRNA-221的表达及其在细胞凋亡抵抗中的意义。方法 TRAIL(100μg/L)分别处理黑色素瘤细胞系sk-Mel-28、IgR3、Mel-RM、MM200、Me4405,6 h后收集细胞,实时荧光定量PCR检测各细胞系中miRNA-221的mRNA水平,同时检测TRAIL(100μg/L)诱导Mel-RM细胞不同时间点miRNA-221的mRNA水平变化;脂质体转染反义miRNA-221下调TRAIL诱导的Mel-RM细胞中miRNA-221的表达,同时设对照组和转染无意序列组;流式细胞术PI单染法检测细胞凋亡率;Western blot检测p-ERK及p27蛋白表达。结果 TRAIL(100μg/L)诱导Mel-RM细胞中miRNA-221的mRNA水平明显高于其他细胞系(2-ΔΔCt值为18.553 4±1.514 6)。随TRAIL诱导时间的延长,Mel-RM细胞中miRNA-221的表达上调。TRAIL(100μg/L)诱导的Mel-RM细胞中,反义miR-NA-22l转染组凋亡率高于对照组和转染无意序列组。miR-NA-221靶基因p27在U0126(MEK1/2抑制剂)和TRAIL共处理的Mel-RM细胞中的表达较TRAIL单独处理组上调。结论抑制miRNA-221的表达可能具有提高TRAIL诱导的黑色素瘤细胞凋亡敏感性的作用,抑制ERK的激活可能下调miRNA-221的表达,从而上调miRNA-221的靶基因p27蛋白的表达。 展开更多

关键词 黑色素瘤 细胞凋亡 转染 微RNAS

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光照应激对SD大鼠睾丸中Annexin 5表达的影响 被引量：1

8

作者 时姗姗 王大勇 +7 位作者 柳海燕 陶晓倩 韩雪峰 卢坤刚 张艳梅 戈一峰 崔英霞 姚兵 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期189-191,共3页

目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和West... 目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和Western blotting技术分析annexin5免疫定位和蛋白相对表达。结果Western blotting结果显示:短期光照应激组(2、3、4、7d)的实验组大鼠睾丸annexin5表达与对照组相比无明显变化;在持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量与对照组相比分别从3.09提高到4.16,从4.20提高到5.28(P<0.01,P<0.05);而持续光照28d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量(4.87)与对照组(4.13)比较无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,annexin5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但光照应激长期实验组(14、21、28d)annexin5免疫组化显色较深,说明annexin5表达升高,这与Westernblotting的结果基本一致。结论长期光照应激使大鼠睾丸annexin5的表达量明显增加。annexin5参与了应激过程,并可能参与了睾丸中某些重要生理功能的调节。 展开更多

关键词 光 应激 ANNEXIN 5 基因

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人类微小RNA-208a的靶基因预测及生物学过程和信号通路的生物信息学分析 被引量：2

9

作者 黎珊珊 钟国强 +1 位作者 蒋智渊 温丽娜 《广西医学》 CAS 2016年第12期1634-1637,共4页

目的采用生物信息学技术预测人类微小RNA-208a(hsa-miRNA-208a)靶基因及分析其可能参与的生物学过程及信号通路。方法应用miRbase数据库和UCSC Genome Browser分析工具获取hsa-miRNA-208a的染色体定位、碱基序列和物种保守性等基本信息... 目的采用生物信息学技术预测人类微小RNA-208a(hsa-miRNA-208a)靶基因及分析其可能参与的生物学过程及信号通路。方法应用miRbase数据库和UCSC Genome Browser分析工具获取hsa-miRNA-208a的染色体定位、碱基序列和物种保守性等基本信息,利用miRanda、miRDB、Target Scan和miRwalk进行靶基因预测,采用miRwalk网站对靶基因取交集,合并有文献支持和经实验证实的靶基因作为基因集,对基因集进行功能富集分析(GO分析)和信号通路分析。结果hsa-miRNA-208a序列在各物种间高度保守。对Target Scan、miRDB、miRanda和miRwalk预测的靶基因进行交集后共得到16个靶基因(CPEB2、CSNK2A2、DLD、MTF2、FBXO28、LEP、SMAD4、NLK、GPR88、VPS13D、ZNF215、CHD9、SLC7A5、C19orf44、SLC45A3、MAP4K4),miRwalk、DIANA Lab Tar Base检索到已验证的靶基因分别为12个(CASP3、MRGPRX3、FPRL1、MED13、IL10、GATA4、HSH2D、MYH6、MYH7、TNNI3、CDKN1A、PAK3)和3个(SOX6、MTM1、TAB3)。GO分析结果显示靶基因富集于心室肌组织发育、心室形态发育、心腔发育、心肌发育、心脏发育以及细胞发育等生物学过程(P<0.05);信号通路分析结果显示靶基因富集于黏附连接、紧密连接、心肌收缩、Wnt信号通路以及病毒性心肌炎、肥厚型心肌病和扩张型心肌病的相关信号通路中(P<0.05)。结论 hsa-miRNA-208a参与心脏生长发育的生物学过程,与心肌疾病的发生密切相关。 展开更多

关键词 微小RNA-208a 人类 生物信息学 靶基因 心脏生长发育 心肌疾病

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呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒的方法学探讨 被引量：1

10

作者 闵凡贵 赵维波 +5 位作者 张钰 刘香梅 王静 刘忠华 谭文雅 黄韧 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第3期171-173,I0002,共4页

目的探讨呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒方法的可行性。方法利用1株鹅源性H5N1流感病毒经环甲膜穿刺接种恒河猴,通过观察恒河猴在接种后短期内各项指标的变化来评价呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒的可行性。结果恒河... 目的探讨呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒方法的可行性。方法利用1株鹅源性H5N1流感病毒经环甲膜穿刺接种恒河猴,通过观察恒河猴在接种后短期内各项指标的变化来评价呼吸道吸入法接种恒河猴感染H5N1流感病毒的可行性。结果恒河猴接种H5N1流感病毒后出现了典型的临床症状和病理学变化,与人和动物感染后的主要症状相似,是很好的模型动物。结论环甲膜穿刺接种恒河猴感染H5N1流感病毒具有很高的可行性,是恒河猴感染H5N1流感病毒和造模的良好途径,并为其它通过呼吸道感染的病原的造模和研究工作提供参考。 展开更多

关键词 H5N1流感病毒 环甲膜穿刺 恒河猴

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以miRNA为基础的RNA干扰线粒体相关基因TFAM和POLG的研究 被引量：1

11

作者 刘凤斌 李建福 +1 位作者 陈晓芳 汤苏阳 《军医进修学院学报》 CAS 2011年第9期952-955,共4页

目的通过慢病毒介导的RNA干扰技术干扰线粒体相关基因TFAM和POLG,为研究线粒体和干细胞提供资料。方法选取线粒体相关因子TFAM和POLG,分别设计三条干扰序列,构建以miRNA为基础的RNA干扰病毒载体。在293FT细胞中包装病毒液,并转染原代成... 目的通过慢病毒介导的RNA干扰技术干扰线粒体相关基因TFAM和POLG,为研究线粒体和干细胞提供资料。方法选取线粒体相关因子TFAM和POLG,分别设计三条干扰序列,构建以miRNA为基础的RNA干扰病毒载体。在293FT细胞中包装病毒液,并转染原代成纤维细胞,通过定量PCR和western blot检测干扰效率。结果两个基因的1号序列都能有效干扰相应基因表达,POLG下调了75%,而TFAM下调了85%。结论慢病毒介导的miRNA为基础的干扰病毒载体成功干扰了TFAM和POLG基因的表达。 展开更多

关键词 RNA干扰 慢病毒 线粒体转录因子A 线粒体DNA特异性聚合酶G

原文传递

基于CRISPR/dCas9-SAM系统筛选胃癌细胞增殖相关基因 被引量：1

12

作者 彭玉 巩琦凡 +5 位作者 台福敏 王田田 葛常辉 郑晓飞 秦宜德 付汉江 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1693-1698,共6页

目的利用CRISPR/dCas9-SAM系统探究影响胃癌细胞AGS增殖相关基因,分析其在胃癌发生发展中的作用。方法针对胃癌与正常胃组织差异表达的基因设计sgRNA,构建包装后获得慢病毒文库。以该文库感染AGS细胞后不同时间点作为筛选压力,收取第0、... 目的利用CRISPR/dCas9-SAM系统探究影响胃癌细胞AGS增殖相关基因,分析其在胃癌发生发展中的作用。方法针对胃癌与正常胃组织差异表达的基因设计sgRNA,构建包装后获得慢病毒文库。以该文库感染AGS细胞后不同时间点作为筛选压力,收取第0、7、14天3个时间点的AGS细胞。高通量测序分析感染后不同时间点AGS细胞中sgRNA富集情况,获得与AGS细胞增殖相关差异基因。结果生物信息学显示与0 d组相比,7 d组、14 d组分别获得阴性筛选差异基因42、45个,阳性筛选差异基因59、40个。其中7 d组和14 d组中阴性筛选和阳性筛选共有的基因各11个。结论筛选获得11个抑制AGS细胞增殖的基因,其中5个为蛋白编码基因,6个为长链非编码RNA(lncRNA)基因;筛选获得11个促进AGS细胞增殖的候选基因,其中3个为蛋白编码基因,8个为lncRNA基因。为进一步功能验证、全面解析胃癌发生发展过程奠定基础。 展开更多

关键词 CRISPR/dCas9-SAM系统 细胞增殖 胃癌 长链非编码RNA

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hsa—miR-218下调Survivin表达影响鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡 被引量：2

13

作者 农朝赞 黄之虎 +3 位作者 韦士喻 郭灵霄 李育敏 杨林杰 《医学分子生物学杂志》 CAS 2014年第1期32-36,共5页

目的研究hsa-miR-218对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡的影响，探讨其作用机制。方法构建hsa-miR-218的真核表达载体（pmiR-218），利用LipofectamineTM2000将PmiR-218转染CNE-2Z细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测PmiR-218对CNE-2Z细胞... 目的研究hsa-miR-218对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡的影响，探讨其作用机制。方法构建hsa-miR-218的真核表达载体（pmiR-218），利用LipofectamineTM2000将PmiR-218转染CNE-2Z细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测PmiR-218对CNE-2Z细胞增殖的影响；AnnexinV／PI双染流式细胞仪检测，miR-218对CNE-2Z细胞凋亡的影响；Western印迹检测细胞内Survivin蛋白表达水平。结果成功构建hsa-miR-218的真核表达载体，miR-218。与随机对照组相比，转染PmiR-218的CNE-2Z细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05），细胞早期凋亡显著增加（P〈0．05）。与随机对照组相比，PmiR-218抑制细胞内Survivin蛋白的表达。结论，miR-218可抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用机制与下调Survivin基因表达有关，提示hsa-miR-218在鼻咽癌的发生发展中扮演着肿瘤抑制基因的作用，可能是鼻咽癌治疗的新靶点。 展开更多

关键词 hsa-miR-218 SURVIVIN 鼻咽癌 CNE-2Z细胞 增殖 凋亡

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下调RALA表达抑制人白血病K562细胞迁移和侵袭

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作者 李育敏 朱雪姣 +1 位作者 谷景义 费嘉 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期479-483,共5页

目的 研究小干扰RNA（siRNA）抑制v-ral 白血病致病因子RALA基因表达对人白血病K562细胞迁移和侵袭的影响.方法 利用LipofectamineTM 2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,Real-time PCR检测细胞内RALA mRNA的表达水平;We... 目的 研究小干扰RNA（siRNA）抑制v-ral 白血病致病因子RALA基因表达对人白血病K562细胞迁移和侵袭的影响.方法 利用LipofectamineTM 2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,Real-time PCR检测细胞内RALA mRNA的表达水平;Western印迹检测细胞内RALA蛋白的表达水平;Boyden趋化小室实验检测细胞体外迁移和侵袭能力.结果与随机对照组相比,转染48 h后,RALA siRNA显著下调K562细胞内RALA mRNA和蛋白的表达（P＜0.05）.与随机对照组相比,转染RALA siRNA的K562细胞迁移和侵袭能力显著降低（P＜0.05）.结论 癌基因RALA在人白血病K562细胞迁移和侵袭过程中发挥重要作用,通过siRNA下调RALA的表达可抑制K562细胞迁移和侵袭能力. 展开更多

关键词 v-ral白血病致病因子 小干扰RNA K562细胞

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