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PTPMeg2的PTP结构域对磷酸化STAT3入核的抑制作用 被引量：1
1
作者 苏富琴 王玉春 +2 位作者 齐占朋 孙超 李淑艳 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2355-2358,共4页
目的探讨PTPMeg2结构域对磷酸化STAT3核转位的影响。方法采用免疫共沉淀技术研究PTPMeg2与STAT3不同结构域的相互作用,采用GST pull down实验研究STAT3与PTPMeg2不同结构域的相互作用,用激光共聚焦显微镜直接观察PTPMeg2对磷酸化STAT3... 目的探讨PTPMeg2结构域对磷酸化STAT3核转位的影响。方法采用免疫共沉淀技术研究PTPMeg2与STAT3不同结构域的相互作用,采用GST pull down实验研究STAT3与PTPMeg2不同结构域的相互作用,用激光共聚焦显微镜直接观察PTPMeg2对磷酸化STAT3细胞定位的影响。结果 STAT3与PTPMeg2的所有结构域均有相互作用,PTPMeg2的PTP结构域和△SEC结构域(PTP结构域+LK结构域)可以抑制磷酸化STAT3入核。结论 PTPMeg2的PTP结构域对磷酸化STAT3的入核具有抑制作用。 展开更多
关键词 PTPMeg2 磷酸化STAT3 核转位
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DNA修复酶基因多态性与1,3-丁二烯作业工人DNA损伤遗传易感性的关系 被引量：1
2
作者 刘楠 李斌 +5 位作者 程娟 李云 郑国颖 关维俊 崔涛 孟会林 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期17-20,共4页
目的研究DNA修复酶基因XRCC1、XRCC2、XRCC4、RAD52单核酸多态性在1,3-丁二烯(BD)致外周血淋巴细胞DNA损伤遗传易感性中的作用。方法选取171名BD作业工人和55名行政人员作为研究对象,采用碱性彗星试验评价个体外周血淋巴细胞DNA损伤,聚... 目的研究DNA修复酶基因XRCC1、XRCC2、XRCC4、RAD52单核酸多态性在1,3-丁二烯(BD)致外周血淋巴细胞DNA损伤遗传易感性中的作用。方法选取171名BD作业工人和55名行政人员作为研究对象,采用碱性彗星试验评价个体外周血淋巴细胞DNA损伤,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析XRCC1、XRCC2、XRCC4、RAD52基因多态性。结果 BD暴露组和对照组彗星尾距分别为4.53(3.49~5.87)和2.38(0.82~3.98),差异具有统计学意义(P<0.01)。暴露组中具有XRCC1基因G28152A位点GG基因型个体的彗星尾距显著低于AA基因型个体[4.52(3.43~5.64),5.18(4.23~6.18),P<0.05];XRCC4A245G位点AG和GG基因型个体的彗星尾距显著高于AA基因型个体[(5.05(3.79~6.05),5.37(4.29~6.36),4.23(3.35~5.41),P<0.01]。结论 XRCC1 G28152A和XRCC4 A245G位点的多态性可能与BD诱导的DNA损伤有关。 展开更多
关键词 1 3-丁二烯(BD) 彗星试验 DNA损伤修复基因 基因多态性
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前蛋白转化酶枯草溶菌素9基因与脂质代谢 被引量：2
3
作者 吴柳松 钱民章 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期4401-4404,共4页
1前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)简介Seidah等〔1〕在研究神经元发育分化时发现一个新基因,称为PCSK9,该基因编码是一种前蛋白转化酶,名为神经细胞凋亡调节转化酶1(NARC)-1,该酶参与肝细胞发育再生和神经细胞分化〔1〕。后续研究发现,P... 1前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)简介Seidah等〔1〕在研究神经元发育分化时发现一个新基因,称为PCSK9,该基因编码是一种前蛋白转化酶,名为神经细胞凋亡调节转化酶1(NARC)-1,该酶参与肝细胞发育再生和神经细胞分化〔1〕。后续研究发现,PCSK9蛋白能靶向降解低密度脂蛋白(LDL)受体(LDLR),与脂质代谢、异常胆固醇血症及动脉粥样硬化等有密切关系。 展开更多
关键词 PCSK9 低密度脂蛋白受体 脂质代谢
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Cidec研究进展 被引量：2
4
作者 郭冬妹 江渝 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期101-104,共4页
诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C(Cidec)又名脂肪特异性蛋白27(FSP27),最先在小鼠脂肪细胞中分离得到,随后在人肝细胞、脂肪细胞等细胞中相继发现,属于Cide家族。研究发现,Cidec蛋白可定位于脂肪细胞的脂滴表面,促进脂肪的储存和脂滴体... 诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C(Cidec)又名脂肪特异性蛋白27(FSP27),最先在小鼠脂肪细胞中分离得到,随后在人肝细胞、脂肪细胞等细胞中相继发现,属于Cide家族。研究发现,Cidec蛋白可定位于脂肪细胞的脂滴表面,促进脂肪的储存和脂滴体积的增大,进而调节脂肪代谢和机体能量平衡。Cidec在细胞凋亡方面也发挥着重要作用。 展开更多
关键词 Cidec(FSP27) 脂代谢 脂滴 细胞凋亡
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白细胞介素18基因工程表达方法 被引量：1
5
作者 乔友军 汪欣 +2 位作者 高杰 王宝 贾春祎 《中国老年学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第6期1646-1648,共3页
目的探讨人白细胞介素(IL)-18基因工程表达方法。方法复苏含有p GEX-IL-18重组体质粒的E.coli JM109,并进行增菌培养;利用质粒提取试剂盒提取p GEX-IL-18重组体质粒,通过琼脂糖凝胶电泳、基因片段测序、基因库比对等技术鉴定IL-18基因序... 目的探讨人白细胞介素(IL)-18基因工程表达方法。方法复苏含有p GEX-IL-18重组体质粒的E.coli JM109,并进行增菌培养;利用质粒提取试剂盒提取p GEX-IL-18重组体质粒,通过琼脂糖凝胶电泳、基因片段测序、基因库比对等技术鉴定IL-18基因序列;将提取得到的p GEX-IL-18重组体质粒转化到DH5α,制成高效表达的IL-18原核表达系统。结果含有p GEX-IL-18重组体质粒的E.coli JM109增菌培养后提取质粒,酶切电泳与Marker比对,证实质粒大小2.7 kb;经测序并利用基因库比对证实,所制备的DNA片段符合IL-18基因序列。将p GEX-IL-18转染DH5α细菌内,并经过蓝白筛选系统进行筛选,证实转染成功。结论经过系统的实验研究,成功建立了IL-18的基因工程表达系统。IL-18具有重要的生物学功能,在后续的科研工作中将对IL-18的应用价值进行系统研究。 展开更多
关键词 白细胞介素-18 基因重组质粒
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人重组5-脂氧合酶基因真核表达载体的构建和鉴定 被引量：2
6
作者 白春英 史铁伟 +1 位作者 瑞云 李天柱 《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》 2016年第4期321-325,369,共6页
基因表达载体的构建是进一步研究相应基因功能的基础.该文详细地介绍了人5-脂氧合酶基因真核细胞表达载体的设计理念和构建方法,并通过转染、western blotting等方法鉴定了该载体在HEK293T细胞中的表达.
关键词 5-脂氧合酶基因 PCDNA3.1(+) 载体 RT-PCR WESTERN BLOTTING 蛋白表达
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原位杂交检测microRNA-150在增生性瘢痕中的表达
7
作者 王玥莹 宋溦 +3 位作者 李海珠 梅敏 陈珊 黄东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1606-1611,共6页
瘢痕是人体在创伤修复过程中的必然产物,而增生性瘢痕是皮肤在创伤修复过程中成纤维细胞过度增生的表现。本研究的目的是探讨micro RNA-150在皮肤增生性瘢痕组织结构中的表达情况。本研究通过HE染色显示正常皮肤组织和增生性瘢痕的结构... 瘢痕是人体在创伤修复过程中的必然产物,而增生性瘢痕是皮肤在创伤修复过程中成纤维细胞过度增生的表现。本研究的目的是探讨micro RNA-150在皮肤增生性瘢痕组织结构中的表达情况。本研究通过HE染色显示正常皮肤组织和增生性瘢痕的结构差异与病变的形态结构特点;利用Masson染色鉴别增生性瘢痕中胶原纤维和肌纤维的组织形态;进一步原位杂交检测皮肤增生性瘢痕micro RNA-150的表达。原位杂交分析显示,按着色细胞染色强度分为:高表达记为(+),未表达和低表达记为(-)。micro RNA-150的表达在增生性瘢痕和正常皮肤组织中的表达有统计学意义。原位杂交分析结果提示,micro RNA-150可能参与了增生性瘢痕的发生、发展,并随着增生性瘢痕的演进呈下降趋势。 展开更多
关键词 原位杂交 MICRO RNA-150 增生性瘢痕
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人IFN-γ基因启动子的克隆鉴定及功能分析
8
作者 汤必奎 程禹 +3 位作者 翟素莲 刘小粉 胡明洁 吴守伟 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期4901-4903,共3页
目的克隆鉴定人IFN-γ基因启动子序列,并进行功能分析。方法通过生物信息学方法预测启动子区域,PCR克隆至pGL3报告载体,双荧光素酶法检测启动子活性。结果克隆得到人IFN-γ基因翻译起始点上游700 bp启动子区域,经检测具有活性,可启动报... 目的克隆鉴定人IFN-γ基因启动子序列,并进行功能分析。方法通过生物信息学方法预测启动子区域,PCR克隆至pGL3报告载体,双荧光素酶法检测启动子活性。结果克隆得到人IFN-γ基因翻译起始点上游700 bp启动子区域,经检测具有活性,可启动报告基因表达;同时,该区域DNA被甲基化修饰后启动活性下降达4倍。结论克隆构建人IFN-γ基因启动子成功。 展开更多
关键词 IFN-γ启动子 克隆 甲基化
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CARP-1(Cell Division Cycle and Apoptosis Regulator Protein 1)的生物功能和表达模式探究 被引量：3
9
作者 贾宝林 《生物化工》 2016年第2期39-40,共2页
本文对CARP-1生物功能和表达模式进行了研究,结果表明,作为一个关键的细胞内复合物,传感激活细胞的增殖或凋亡信号通路,在经典Wnt通路中,CARP-1与β-catenin功能共激活,协助β-catenin在Wnt目标基因作用中的转录激活,涉及到一些蛋白信... 本文对CARP-1生物功能和表达模式进行了研究,结果表明,作为一个关键的细胞内复合物,传感激活细胞的增殖或凋亡信号通路,在经典Wnt通路中,CARP-1与β-catenin功能共激活,协助β-catenin在Wnt目标基因作用中的转录激活,涉及到一些蛋白信号的扩散和转移;参与caspase泛素化蛋白酶途径,与APC/C复合,在CFM-4的阻碍作用下,阻滞G2/M细胞周期;与P53、P160复合,刺激靶细胞激素代谢,调控细胞周期,通过增强CDK1和P21的水平来调节细胞凋亡。 展开更多
关键词 CARP-1 细胞周期 表达模式
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LV3-KiSS1-miRNA的构建及其在体内外沉默效应观察
10
作者 董红 李嫔 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第24期28-30,112,共4页
目的构建靶向Ki SS1基因的miRNA慢病毒质粒(LV3-Ki SS1-miRNA),并观察其在人胚肾293T细胞及SD大鼠体内的沉默效应。方法利用四质粒系统合成LV3-Ki SS1-miRNA,分别用LV3-Ki SS1-miRNA(观察组)、LV3-N-miRNA(对照病毒组)、细胞培养液(空... 目的构建靶向Ki SS1基因的miRNA慢病毒质粒(LV3-Ki SS1-miRNA),并观察其在人胚肾293T细胞及SD大鼠体内的沉默效应。方法利用四质粒系统合成LV3-Ki SS1-miRNA,分别用LV3-Ki SS1-miRNA(观察组)、LV3-N-miRNA(对照病毒组)、细胞培养液(空白对照组)与Ki SS1的真核表达载体pc DNA3.1(+)-Ki SS1共转染293T细胞,72 h后采用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)阳性表达率,RT-PCR法检测细胞中的Ki SS1 mRNA。将90只21日龄SD大鼠随机分为3组各30只,分别侧脑室注射LV3-Ki SS1-miRNA(干扰病毒组)、LV3-N-miRNA(对照病毒组)和生理盐水(生理盐水组)40μL,采用RT-PCT法检测30、35、45日龄时大鼠下丘脑组织中的Ki SS1mRNA。结果空白对照组中无GFP表达,而观察组与对照病毒组的GFP表达率分别为89.4%、94.2%。观察组与对照病毒组、空白对照组比较Ki SS1 mRNA表达量减少(P均<0.01),沉默效率达到86%;对照病毒组与空白对照组比较,P>0.05。干扰病毒组大鼠各日龄时下丘脑组织中Ki SS1 mRNA表达水平明显低于生理盐水组和对照病毒组(P均<0.05)。结论成功构建LV3-Ki SS1-miRNA,并能高效、稳定地抑制293T细胞及SD大鼠下丘脑组织中Ki SS1 miRNA的表达。 展开更多
关键词 性发育 KI SS1基因 基因干扰技术 微小核糖核酸 慢病毒载体 大鼠
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葡萄糖转运蛋白的转运机制研究 被引量：13
11
作者 江诚 谢俊 陈海峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1372-1377,共6页
葡萄糖是真核生物体内的重要能源物质。葡萄糖转运蛋白(GLUT1)是细胞获取葡萄糖的最基本需求。GLUT1功能的缺失会造成严重的疾病,尤其是可能造成永久的脑部损伤,包括早发型惊厥,智力缺陷等。此外,肿瘤细胞对于葡萄糖的大量需求也使得GL... 葡萄糖是真核生物体内的重要能源物质。葡萄糖转运蛋白(GLUT1)是细胞获取葡萄糖的最基本需求。GLUT1功能的缺失会造成严重的疾病,尤其是可能造成永久的脑部损伤,包括早发型惊厥,智力缺陷等。此外,肿瘤细胞对于葡萄糖的大量需求也使得GLUT1可以作为肿瘤诊断的分子标记。因此,研究葡萄糖转运蛋白对于研发糖代谢障碍药物以及诊断肿瘤均有重要意义。本实验运用分子动力学模拟的方法,在NAnoscale Molecular Dynamics(NAMD)中使用Chemistry at HARvard Macromolecular Mechanics(CHARMM)力场,构建了GLUT1结合葡萄糖和未结合葡萄糖的膜系统,并分别进行了20 ns时长的分子动力学模拟。运用Visual Merchandising(VMD)和自写脚本对这一轨迹进行分析,探究葡萄糖转运蛋白转运葡萄糖的分子机理。结果表明,20 nano-seconds(ns)的模拟时长能够使这样两个体系构象达到稳定,并且从平均结构和通道直径来看,去除葡萄糖能够使得GLUT1的结构发生翻转,由向胞内释放葡萄糖变为从胞外摄取葡萄糖的构象。同时结合模式的分析表明葡萄糖主要依靠与Gln283和Gln282形成的3个较强的氢键。最后我们通过氢键跟踪分析,发现Asn288和Thr295在这种面向胞外的口袋张开过程中发挥了重要作用。这一结论对研发针对关键氨基酸的葡萄糖代谢药物有指导作用,并且可以为癌症诊断提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 葡萄糖转运蛋白(GLUT1) 分子动力学模拟 糖代谢障碍 肿瘤诊断
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睫状神经营养因子基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞的构建 被引量：2
12
作者 武晶晶 华宁 +1 位作者 东莉洁 李筱荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期392-397,共6页
背景 间充质干细胞作为基因转移的载体,已在多种疾病的研究中发挥作用.该方法可能为外源性神经营养因子在中枢神经系统,包括在视网膜中的应用提供更有效的途径. 目的 构建慢病毒介导的过表达睫状神经营养因子（CNTF）的骨髓间充质于细胞... 背景 间充质干细胞作为基因转移的载体,已在多种疾病的研究中发挥作用.该方法可能为外源性神经营养因子在中枢神经系统,包括在视网膜中的应用提供更有效的途径. 目的 构建慢病毒介导的过表达睫状神经营养因子（CNTF）的骨髓间充质于细胞（BMSCs）,为眼科视网膜、视神经疾病的治疗提供新的方法.方法 对SD大鼠BMSCs进行培养和传代,第4代细胞用于实验.将全基因合成含信号肽的大鼠CNTF基因编码序列克隆至pHⅣ-dTomato慢病毒载体质粒,构建重组质粒CNTF-dTomato.CNTF-dTomato/pHⅣ-dTomato与慢病毒辅助质粒psPAX2及pMD2.G共转染293T细胞进行慢病毒包装,获得重组慢病毒CNTF-lenti及不含CNTF的control-lenti.以CNTF-lenti或control-lenti感染SD大鼠BMSCs,构建CNTF-BMSCs及空载-BMSCs细胞,根据红色荧光蛋白dTomato表达情况确定病毒感染效率;未感染lenti的BMSCs为空白-BMSCs.用ELISA法测定空白-BMSCs、空载-BMSCs及CNTF-BMSCs细胞培养液中CNTF的质量浓度.将CNTF-BMSCs向成骨和成脂2个方向诱导分化,并用茜素红S（ARS）染色和油红O染色对分化细胞进行鉴定.结果 CNTF-dTomato质粒转化大肠杆菌Stbl3感受态细胞后,菌落PCR产物大小约为1 033 bp,质粒测序结果显示,pHⅣ-dTomato质粒中插入部分的碱基序列与预期序列一致,显示CNTF-dTomato质粒构建成功.重组慢病毒对BMSCs的感染率达95％.ELISA检测结果显示,感染后2、3、4、7d,CNTF-BMSCs组细胞上清液中CNTF蛋白的质量浓度明显高于空白-BMSCs组及空载-BMSCs组,差异均有统计学意义（均P=0.000）;CNTF-BMSCs组感染后2、3、7d细胞上清液中CNTF质量浓度均明显高于感染后1d,差异均有统计学意义（P=0.013、0.004、0.042）.CNTF-BMSCs经成脂培养基诱导后分化的细胞油红0染色呈红色着染,经成骨培养基诱导后分化的细胞ARS染色可见橘红色钙结节. 结论 本研究成功构建CNTF-dTomato质粒,利用慢病毒载体可成功构建稳定过表达分泌型CNTF的大鼠BMSCs,CNTF-BMSCs具备向脂肪细胞和成骨细胞分化的潜能. 展开更多
关键词 睫状神经营养因子 慢病毒载体 骨髓间充质干细胞
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酸性成纤维细胞生长因子研究进展 被引量：2
13
作者 陈晓晶 冯治国 《生物产业技术》 2011年第6期72-77,共6页
酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factors,aFGF)是成纤维细胞生长因子家族(fibroblast growth factors,FGF)中的一员,是一种重要的生长因子,具有广泛的生物活性和临床应用价值。本文概述了aFGF的结构与功能关系和信号... 酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factors,aFGF)是成纤维细胞生长因子家族(fibroblast growth factors,FGF)中的一员,是一种重要的生长因子,具有广泛的生物活性和临床应用价值。本文概述了aFGF的结构与功能关系和信号传导通路,阐述了aFGF生理功能与生物学效应以及潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 酸性成纤维细胞因子 结构与功能 信号传导 生物学效应 临床应用
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