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不同病情肺炎支原体肺炎病儿血清tGSH和GPx表达及其与预后关系
1
作者 贺改涛 张毓娴 +2 位作者 田莉 孙亚男 高娜 《青岛大学学报(医学版)》 2025年第4期548-552,共5页
目的探讨不同病情肺炎支原体肺炎(MPP)病儿血清总谷胱甘肽(tGSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)表达及其与预后的关系。方法2022年9月-2024年3月,选取陕西省人民医院收治的122例MPP病儿为研究对象,对其临床资料进行回顾性分析。根据病情将... 目的探讨不同病情肺炎支原体肺炎(MPP)病儿血清总谷胱甘肽(tGSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)表达及其与预后的关系。方法2022年9月-2024年3月,选取陕西省人民医院收治的122例MPP病儿为研究对象,对其临床资料进行回顾性分析。根据病情将病儿分为轻度组(33例)、中度组(43例)与重度组(46例),按照治疗结果将病儿分为预后不良组(32例)与预后良好组(90例)。比较各组病儿tGSH和GPx表达。采用多因素Logistic回归分析预后的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估血清tGSH和GPx表达对预后的预测价值。结果随着MPP病情加重tGSH表达逐渐增高(重度组>中度组>轻度组),而GPx表达则逐渐降低(轻度组>中度组>重度组),差异均有显著性(F=24.156、65.148,P<0.05)。MPP病儿血清tGSH表达与病情程度呈正相关,而GPx表达则与病情程度呈负相关(r=0.543、-0.463,P<0.05)。预后良好组血清tGSH表达高于预后不良组,而GPx表达则低于预后不良组(t=25.800、43.929,P<0.05)。预后良好组病儿C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、D-二聚体(D-D)、入院急性生理与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分、红细胞沉降率(ESR)和白细胞介素-18(IL-18)等指标与预后不良组比较,差异均有统计学意义(t=4.873~56.833,P<0.05)。多因素分析显示,APACHEⅡ≥5分、tGSH≥284.2μmol/L和GPx≤186.2μmol/L等变量均是影响MPP病儿预后的危险因素(OR=2.375~3.056,95%CI=(1.483~1.819)~(3.100~6.298),P均<0.05)。血清tGSH和GPx单独及二者联合(串联)预测MPP病儿预后的AUC分别为0.768、0.874和0.921(95%CI=(0.711~0.885)~(0.812~0.957),P<0.05),其中以二者联合的预测价值最高。结论MPP病儿血清tGHS和GPx表达与其病情和预后均密切相关,二者联合检测对MPP病儿预后有较高的预测价值。 展开更多
关键词 肺炎 支原体 谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化酶 病人病情 预后 预测 儿童
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重组人神经肽Y融合蛋白的表达、纯化及生物信息学分析研究 被引量：9
2
作者 丁克祥 董萍 +6 位作者 郑永晨 杨永鹏 朱晓亮 韩晋云 单志新 丁宇 丁振华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期2198-2202,共5页
目的在大肠杆菌中表达人神经肽Y,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-NPY转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-... 目的在大肠杆菌中表达人神经肽Y,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-NPY转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析NPY蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-NPY重组质粒的DE3菌,表达出重组人NPY融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了NPY的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-NPY在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对NPY蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 人神经肽Y 融合蛋白 包涵体 纯化 生物信息学
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饲喂乳源免疫调节肽对大鼠生长和免疫的影响 被引量：12
3
作者 李素萍 秦宜德 +3 位作者 董琼珠 方敏 张伟 刘慧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第6期499-501,共3页
目的探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对大鼠生长和免疫的影响。方法取42只40日龄的SD大鼠(♀♂各半)随机分为两个实验组和一个对照组(每组14只且♀♂相等,分开饲养)。预饲1周后,实验组Ⅰ和Ⅱ分别被灌喂2.5×10-3g/L和2.5×10-2g/L... 目的探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对大鼠生长和免疫的影响。方法取42只40日龄的SD大鼠(♀♂各半)随机分为两个实验组和一个对照组(每组14只且♀♂相等,分开饲养)。预饲1周后,实验组Ⅰ和Ⅱ分别被灌喂2.5×10-3g/L和2.5×10-2g/L免疫调节肽,对照组灌喂生理盐水,记录大鼠日采食量和体重。饲养1个月后检测对照组和实验组大鼠淋巴细胞转化、红细胞免疫、巨噬细胞吞噬、日采食量和体重等差别。结果乳源免疫调节肽对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬和红细胞免疫有显著促进功能(P<0.05);而对淋巴细胞转化作用有增长的趋势,但未达到显著水平(P>0.05)。与对照组相比,实验组Ⅱ的大鼠日采食量显著地增加(P<0.05),♀♂大鼠分别提高了10.95%和8.03%;增重率有提高的趋势,♀♂大鼠增重率分别提高了5.13%和7.10%,但均未达显著水平(P>0.05)。实验组Ⅰ的大鼠,其日采食量和增重与对照组相比均变化不大。结论乳源免疫调节肽能促进机体的免疫功能,提高其免疫力;增加日采食量。 展开更多
关键词 大鼠 生长 免疫
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促肾上腺皮质激素释放激素受体在应激反应中的作用研究 被引量：9
4
作者 曾纯 严灿 +1 位作者 徐志伟 吴丽丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期517-520,共4页
促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生... 促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生一系列生理、病理效应。近年来通过对转基因动物、选择性CRH受体拮抗剂和特异性CRH受体激动剂等的应用,对CRH受体在应激中作用有了更深的了解,也进一步揭示了应激机制。 展开更多
关键词 促肾上腺皮质激素释放激素 受体 应激
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胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的相关性研究 被引量：5
5
作者 郑晓雅 任伟 +1 位作者 张素华 阳萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期169-172,共4页
目的分析糖代谢异常个体血清胰岛素原(proinsulin,PI)、胰岛素(insulin,INS)和胰淀素原(proamylin,PA)、胰淀素(amylin,AMY)的变化,探讨胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的关系。方法研究对象分为正常组、糖调节异常... 目的分析糖代谢异常个体血清胰岛素原(proinsulin,PI)、胰岛素(insulin,INS)和胰淀素原(proamylin,PA)、胰淀素(amylin,AMY)的变化,探讨胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的关系。方法研究对象分为正常组、糖调节异常组(IGR组)、2型糖尿病(T2DM)1组(FBG<10 mmol/L)和T2DM2组(FBG>15 mmol/L)。分别测定人体测量学指标、血生化指标,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(HOMA-B)。结果不同血糖水平的个体PI和AMY差异无统计学意义(P>0.05),但4组间PA、PI/INS和PA/AMY有显著性差异(P<0.05);PI和PI/INS对HOMA-IR有显著性影响(P<0.01),PA和PA/AMY对HOMA-B有显著性影响(P<0.01)。结论胰岛素原在胰岛素抵抗产生中可能起着重要的作用,而胰淀素原在胰岛β细胞功能障碍中可能起着重要的作用。 展开更多
关键词 2型糖尿病 胰岛素原 胰淀素原 胰淀素 胰岛素抵抗
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酪丝亮肽荧光标记物的合成及其在肿瘤治疗靶点研究中的应用 被引量：4
6
作者 简序 傅正 +9 位作者 张燕玲 韩丽霞 朱志峰 徐琼 王莉 周春雷 石琳熙 刘俊燕 陆融 姚智 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1161-1167,共7页
酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确.为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质(5(6)-羧基... 酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确.为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质(5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯,5(6)-TAMRASE)对酪丝亮肽进行了标记,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳和荧光分光光度法对标记酪丝亮肽进行纯化和鉴定.并在激光扫描共聚焦显微镜下观察了荧光标记酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞中的分布.结果显示,合成的酪丝亮肽荧光标记物性质稳定,标记的酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞的胞浆中呈聚集分布. 展开更多
关键词 酪丝亮肽 肝癌 荧光标记 激光扫描共聚焦显微镜
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β-CM-7对MCF-7、SKOV_3和SK-N-SH肿瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5
7
作者 周艳 秦宜德 +1 位作者 董华胜 顾芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期5-9,共5页
目的探讨β-酪啡肽-7（β-CM-7）在体外对人乳腺癌细胞（MCF-7）、人卵巢癌细胞（SKOV3）和人神经母细胞瘤细胞（SK—N—SH）增殖和凋亡的影响。方法用MTT测定法观察β-CM-7在体外对MCF-7、SKOV3、SK—N—SH细胞增殖的影响。用流式细胞... 目的探讨β-酪啡肽-7（β-CM-7）在体外对人乳腺癌细胞（MCF-7）、人卵巢癌细胞（SKOV3）和人神经母细胞瘤细胞（SK—N—SH）增殖和凋亡的影响。方法用MTT测定法观察β-CM-7在体外对MCF-7、SKOV3、SK—N—SH细胞增殖的影响。用流式细胞仪测定β-CM-7在体外对MCF-7和SKOV3细胞凋亡的影响。结果β-CM-7作用于MCF-7细胞24和48h，对其增殖影响不明显（P〉0．05）。2．5×10^-6 -2．5×10^-2g／L的β-CM-7作用72h，能抑制MCF-7细胞增殖（P〈0．05或P〈0．01），抑制率为17．50％～32．08％。β-CM-7作用MCF-7细胞72h，在2．5×10^-7～2．5×10^-2g／L剂量下，诱导肿瘤细胞的凋亡（P〈0．05或P〈0．01），凋亡率为9．23％～29．41％，而在作用48h后，仅在2．5×10^-3g／L的高浓度下具有诱导肿瘤细胞的凋亡作用，凋亡率为10．12％。β-CM-7作用于SKOV3细胞24～72h，只有在高剂量（2．5×10^-2g／L和／或2．5×10^-3g／L）时，抑制肿瘤细胞增殖（P〈0．05），抑制率为10．50％～19．44％。β-CM-7作用SKOV、细胞48h和72h，在2．5×10^-3～2．5×10^-2g／L高剂量下能诱导肿瘤细胞的凋亡（P〈0．05或P〈0．01），凋亡率为8．72％～17．83％。β-CM-7对SK—N—SH肿瘤细胞增殖影响无显著性（P〉0．05）。结论β-CM-7能够抑制MCF-7和SKOV3细胞增殖，诱导细胞凋亡，作用结果与其剂量和作用时间有关。β-CM-7对SK—N—SH细胞的增殖无明显影响。 展开更多
关键词 内啡肽类 乳腺肿瘤/病理学 神经母细胞瘤/病理学 细胞凋亡 细胞分裂
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谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子表达的影响 被引量：3
8
作者 彭曦 陈蓉春 +2 位作者 王裴 尤忠义 汪仕良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期205-207,共3页
目的　探讨谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子 (intestinaltrefoilfactor,ITF)表达的影响及其可能的机制。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分正常对照 (C)组 ,烧伤后普通肠道营养 (EN)组及烧伤后添加谷氨酰胺的肠道营养 (G... 目的　探讨谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子 (intestinaltrefoilfactor,ITF)表达的影响及其可能的机制。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分正常对照 (C)组 ,烧伤后普通肠道营养 (EN)组及烧伤后添加谷氨酰胺的肠道营养 (GLN)组。EN组用等量甘氨酸补足氮量 ,使两组烧伤大鼠保持等氮、等热卡 ,动态观察伤后两组大鼠ITF及ITFmRNA的变化。结果　正常大鼠小肠中ITF及ITFmRNA均有一定表达 ,烧伤后其表达一过性增加 ,随后明显降低。两组比较 ,GLN组大鼠肠组织中ITF及ITFmRNA水平明显高于EN组 ,同时GLN组肠粘膜受损程度也明显低于EN组。结论　严重烧伤后肠粘膜结构受损是ITF合成下降的主要原因 ,谷氨酰胺能保护肠粘膜 ,维护杯状细胞的正常结构和功能 。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 肠三叶因子 肠道营养 大鼠 烧伤
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EMAP-Ⅱ对紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1相互作用的调节和机制 被引量：3
9
作者 王佐周 刘丽波 +1 位作者 薛一雪 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期481-484,493,共5页
目的研究内皮—单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对血肿瘤屏障(BTB)紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1分布和相互作用的影响,以及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,探讨PKC在EMAP-Ⅱ开放紧密连接中的作用。方法提取和培养大鼠脑微血管内皮细胞,建立体... 目的研究内皮—单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对血肿瘤屏障(BTB)紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1分布和相互作用的影响,以及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,探讨PKC在EMAP-Ⅱ开放紧密连接中的作用。方法提取和培养大鼠脑微血管内皮细胞,建立体外BTB模型;实验分为7组,即模型组、EMAP-Ⅱ0.5 h组、EMAP-Ⅱ1 h组、EMAP-Ⅱ2 h组、EMAP-Ⅱ3h组、EMAP-Ⅱ6 h组和EMAP-Ⅱ12 h组。应用Milicell-ERS系统检测体外BTB模型跨内皮细胞阻抗值的变化;双重免疫荧光检测内皮细胞中紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的分布和定位;免疫共沉淀检测内皮细胞中occludin和ZO-1的结合水平;PKC活性检测试剂盒检测体外BTB模型内皮细胞中总PKC的活性。结果与模型组相比,EMAP-Ⅱ显著降低了体外BTB模型的跨内皮细胞阻抗值,增加了BTB通透性;在模型组,紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1在内皮细胞边缘呈连续分布,并且二者存在共定位,EMAP-Ⅱ能够使occludin和ZO-1在内皮细胞边缘的分布减少,二者的共定位减弱;免疫共沉淀结果也显示EMAP-Ⅱ能够减弱occludin和ZO-1的结合;上述作用在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果最显著(P<0.01);同时发现EMAP-Ⅱ作用后,BTB模型内皮细胞中PKC的活性显著升高,在EMAP-Ⅱ作用1 h时达峰值(P<0.01)。结论 EMAP-Ⅱ能够调节紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1在内皮细胞的相互作用,开放紧密连接;PKC可能是EMAP-Ⅱ影响occludin和ZO-1相互作用、调节紧密连接的机制之一。 展开更多
关键词 内皮—单核细胞激活多肽Ⅱ OCCLUDIN ZO-1 蛋白激酶C 血肿瘤屏障
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肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定 被引量：2
10
作者 潘雪刁 何冰 +3 位作者 王桂香 刘金泳 曹成明 臧林泉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期342-346,共5页
目的应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽。方法以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆... 目的应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽。方法以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆进行DNA测序并翻译为氨基酸序列;化学合成异硫氰酸荧光素标记的多肽(FITC-ZS-5),采用细胞和组织免疫荧光法鉴定FITC-ZS-5与肺癌细胞的亲和力及特异性。结果通过3轮减性筛选后,与NCI-H1299细胞结合的噬菌体克隆得到有效的富集;ELISA结果显示5号克隆对NCI-H1299细胞亲和力最高,将其命名为Phage ZS-5;测序结果显示Phage ZS-5所表达的多肽序列在国内外均未见报道,细胞及组织免疫荧光实验结果显示FITC-ZS-5对肺癌细胞及组织具有较高的亲和力和特异性。结论应用噬菌体随机肽库技术筛选到肺癌靶向性多肽ZS-5,为肺癌的靶向治疗和诊断奠定基础。 展开更多
关键词 肺癌 噬菌体展示技术 多肽 减性筛选 NCI-H1299细胞 肽库
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LncRNA SNHG14靶向miR-30a-5p对高糖诱导的足细胞损伤的影响
11
作者 孔翠文 路延双 +1 位作者 孙丽萍 于芬芬 《天津医药》 2025年第9期903-909,共7页
目的探究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因14(LncRNA SNHG14)靶向调控微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)对高糖诱导的足细胞损伤的影响。方法体外培养足细胞,并将其分为标准糖(NG)组、高糖(HG)组、si-NC+HG组、si-SNHG14+HG组、miR-NC+HG组、mi... 目的探究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因14(LncRNA SNHG14)靶向调控微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)对高糖诱导的足细胞损伤的影响。方法体外培养足细胞,并将其分为标准糖(NG)组、高糖(HG)组、si-NC+HG组、si-SNHG14+HG组、miR-NC+HG组、miR-30a-5p mimics+HG组、si-SNHG14+inhibitor NC+HG组、siSNHG14+miR-30a-5p inhibitor+HG组。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测LncRNA SNHG14、miR-30a-5p表达;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平;分别采用黄嘌呤氧化法、钼酸铵比色法、硫代巴比妥酸法检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;双萤光素酶报告基因检测LncRNA SNHG14与miR-30a-5p的靶向关系;Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果与NG组相比,HG组LncRNA SNHG14表达、细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平升高,miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平降低(P<0.05)。与HG组、si-NC+HG组相比,si-SNHG14+HG组LncRNA SNHG14表达、细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化型胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平降低,miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平、B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)表达水平升高(P<0.05);与HG组、miR-NC+HG组相比,miR-30a-5p mimics+HG组LncRNA SNHG14表达无变化(P>0.05),miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白表达升高,细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05);与si-SNHG14+HG组、si-SNHG14+inhibitor NC+HG组相比,si-SNHG14+miR-30a-5p inhibitor+HG组LncRNA SNHG14表达无变化(P>0.05),miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白表达水平降低,细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验证实LncRNA SNHG14靶向负调控miR-30a-5p。结论抑制LncRNA SNHG14可靶向miR-30a-5p减轻高糖诱导的足细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 细胞凋亡 炎症 LncRNA SNHG14 miR-30a-5p 高糖
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内毒素结合肽在烧伤合并内毒素血症大鼠模型中的作用 被引量：3
12
作者 麻莉 刘友生 +2 位作者 王晓东 章容 李永旺 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期373-377,共5页
目的　观察重组人内毒素结合肽蛋白在烧伤合并内毒素血症大鼠中的作用。方法　采用烧伤合并内毒素血症大鼠模型 ,分为模型组 (n =3 6)、治疗组 (n =3 6)及对照组 (n =6)。模型组在烧伤后立即腹腔内注射 1mg/kg内毒素(用 1ml生理盐水配制... 目的　观察重组人内毒素结合肽蛋白在烧伤合并内毒素血症大鼠中的作用。方法　采用烧伤合并内毒素血症大鼠模型 ,分为模型组 (n =3 6)、治疗组 (n =3 6)及对照组 (n =6)。模型组在烧伤后立即腹腔内注射 1mg/kg内毒素(用 1ml生理盐水配制 ) ;治疗组腹腔内注射 1mg/kg内毒素 (用 0 5ml生理盐水配制 )后 ,再注入 40 0 μg/kg制备好的内毒素结合肽 (用 0 5ml生理盐水配制 ) ;模型组和治疗组分别在处理后 1、3、6、12、2 4、48h取血和肝、肺组织 ,对照组仅在脱毛后腹腔内注入 1ml生理盐水 ,取血和肝、肺组织作总体对照。采用生化速率法、ELISA法及组织学切片染色和电镜制样等方法 ,测定血清中丙氨酸转氨酶 (ALT)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白介素 6(IL 6)的含量变化以及光、电镜观察肝、肺组织的病理学变化。结果　模型组于伤后 1h血清TNFα显著高于对照组 (P <0 0 1) ,6h达峰值 ;治疗组与模型组比较各时相点血清TNFα含量均显著降低 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。血清IL 6含量测定结果 ,模型组于伤后 1h血清IL 6显著高于对照组(P <0 0 1) ,12h达峰值。治疗组 3～ 48h各时相点血清IL 6含量均显著低于模型组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。大鼠血清中谷丙转氨酶的动态变化提示 。 展开更多
关键词 内毒素结合肽 脂多糖 内毒素血症
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大鼠坐骨神经结扎后降钙素基因相关肽的变化 被引量：2
13
作者 郑林丰 谢应桂 +4 位作者 许愿忠 张建伟 易西南 吴贤群 张灵芝 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期1791-1794,共4页
目的研究大鼠坐骨神经结扎模型的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的时空变化规律,为探讨其在神经再生中的机制与作用提供实验依据。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1d到2... 目的研究大鼠坐骨神经结扎模型的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的时空变化规律,为探讨其在神经再生中的机制与作用提供实验依据。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1d到28d,免疫组化结合图像分析技术观察CGRP在坐骨神经、背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)、脊髓分布和含量的变化。结果结扎后1d坐骨神经CGRP大量堆积,结扎近端多于远端,随后逐渐下降,近端至14d基本消失,远端至7d基本消失;结扎后7dDRGCGRP开始下降,21d达最低值,28d仍低于正常;结扎后14d脊髓后角CGRP下降,但后角免疫阳性面积未见明显变化;各时间点脊髓前角CGRP未见明显变化。结论神经结扎后CGRP表达变化呈现一定的时空模式,可能与靶源性神经营养因子的缺乏有密切关系。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 大鼠 坐骨神经 结扎
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巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄前后血管内膜的变化 被引量：3
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作者 赵胜 刘伏元 +2 位作者 崇爱国 孟培娜 严激 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期646-650,共5页
目的观察巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近远端血管内膜的变化情况。方法25只新西兰大白兔随机分为对照手术组(n=10)、高脂手术组(n=10)、高脂假手术组(n=5),饲养28周后,对照手术组和高脂手术组行腹主动脉缩窄... 目的观察巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近远端血管内膜的变化情况。方法25只新西兰大白兔随机分为对照手术组(n=10)、高脂手术组(n=10)、高脂假手术组(n=5),饲养28周后,对照手术组和高脂手术组行腹主动脉缩窄术,高脂假手术组行假手术。术后继续以原来的饲养方法饲养4周,在测量狭窄近远端压力后获取标本。采用HE染色和免疫组织化学分析检测血管内膜厚度、巨噬细胞数量、血管紧张素Ⅱ水平。结果平均内膜厚度(μm):高脂手术组狭窄近端(204.7±8.3)较高脂假手术组相同位置(175.8±4.3)增厚(P=0.001);而高脂手术组狭窄远端(140.1±1.3)较高脂假手术组相同位置(166.2±5.1)厚度降低(P=0.000)。巨噬细胞数量(/μm):高脂手术组狭窄近端(0.31±0.05)较狭窄远端(0.16±0.04)显著升高(P=0.000);高脂手术组狭窄近端(0.31±0.05)较高脂假手术组相同位置(0.20±0.02)显著升高(P=0.000)。组织血管紧张素Ⅱ水平(/μm):高脂手术组狭窄近端(0.26±0.01)较狭窄远端(0.12±0.01)显著升高(P=0.000),高脂手术组狭窄近端(0.26±0.01)较高脂假手术组狭窄远端(0.17±0.01)明显升高(P=0.000),高脂手术组狭窄近端(0.12±0.01)较高脂假手术组狭窄远端(0.15±0.02)明显降低(P=0.000)。结论在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近端,压力增高,血管组织内膜厚度和巨噬细胞数量增加,血管紧张素Ⅱ水平明显升高;在狭窄远端,血管组织内膜厚度变薄,巨噬细胞数量减少,血管紧张素Ⅱ水平降低。 展开更多
关键词 动脉硬化 巨噬细胞 血管紧张素Ⅱ 血管内膜/病理学
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反义B7-H1位置特异性腺病毒载体的构建与鉴定 被引量：2
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作者 吴淼 余佩武 +4 位作者 王自强 赵永亮 雷晓 曾冬竹 朱自满 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期387-390,共4页
目的构建人反义B7-H1位置特异性腺病毒载体。方法将B7H1cDNA反向连接到穿梭质粒pDC315上以构建重组反义B7-H1穿梭质粒pDC315.ASB7-H1,用脂质体将pDC315.ASB7-H1和腺病毒质粒pBHGloxΔE1,3Cre转染293细胞,通过位置特异性重组产生反义B7-H... 目的构建人反义B7-H1位置特异性腺病毒载体。方法将B7H1cDNA反向连接到穿梭质粒pDC315上以构建重组反义B7-H1穿梭质粒pDC315.ASB7-H1,用脂质体将pDC315.ASB7-H1和腺病毒质粒pBHGloxΔE1,3Cre转染293细胞,通过位置特异性重组产生反义B7-H1腺病毒载体Ad.ASB7-H1。结果穿梭质粒经酶切、凝胶电泳和测序鉴定与预期结果一致,重组腺病毒载体经PCR扩增后得到564bp和872bp特征性片段;其病毒滴度达:5×1010pfu/ml。结论利用位置特性重组技术,成功的构建了人反义B7-H1的腺病毒载体,为后续对B7-H1的相关研究创造了条件。 展开更多
关键词 B7-H1 重组腺病毒载体 反义技术
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人ⅡA型磷脂酶A_2衍生肽P26抗菌作用与结构修饰的研究 被引量：4
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作者 何睿林 梁宁生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1300-1304,共5页
目的比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺... 目的比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的两种多肽分别与6种细菌在37℃孵育2 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果两种多肽对革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和炭疽杆菌有较强的杀菌活性,环肽P26的作用比直链肽P26强4倍左右;对革兰阴性菌大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,而环肽P26的作用更弱。结论衍生自人ⅡA型PLA2 C末端26个氨基酸残基的肽P26和修饰得到的环肽P26对G+菌有较强的杀菌活性,经修饰成环肽后作用更强,可能与环肽分子带的正电荷更集中有关。 展开更多
关键词 人ⅡA型磷脂酶A2 C末端 抗菌肽 直链肽 环肽 抗菌活性 结构修饰
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乳源抗菌-免疫调节融合蛋白原核表达和纯化 被引量：2
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作者 江良梁 秦宜德 +2 位作者 周艳 王超 刘滋康 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第3期260-263,共4页
目的构建乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化。方法采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌B... 目的构建乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化。方法采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌BL21,然后用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白。用Glutathione Sepharose4B亲和层析方法纯化融合蛋白。结果成功构建原核表达质粒pGEX-KG-FP,并在大肠杆菌BL21中诱导其高表达。SDS-PAGE及Western-blot分析显示,特异性的抗GST单克隆抗体所识别的融合蛋白分子量与理论值相近。经Glutathione Sepharose4B纯化后,得到较纯的GST-FP融合蛋白。结论构建了原核表达的融合蛋白质粒,并高效表达和纯化了该融合蛋白。 展开更多
关键词 大肠杆菌 肽类/遗传学 基因表达 重组融合蛋白 质类
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合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌活性评价 被引量：2
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作者 赵铁华 程玉洁 李哲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1292-1294,共3页
目的对合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌作用进行分析,探讨合成产物与天然产物的一致性以及临床应用价值。方法体外抗菌试验测定合成抗菌肽及与庆大霉素、青霉素和链霉素联合应用对金色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小杀菌浓度(MBC)。结果合成抗菌... 目的对合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌作用进行分析,探讨合成产物与天然产物的一致性以及临床应用价值。方法体外抗菌试验测定合成抗菌肽及与庆大霉素、青霉素和链霉素联合应用对金色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小杀菌浓度(MBC)。结果合成抗菌肽对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均有一定的杀菌作用,MBC值分别为200 mg.L-1和100 mg.L-1,但活性低于生物化学方法提取的天然产物。合成抗菌肽与青霉素、链霉素联合使用后抗菌作用有增强趋势,其中与青霉素联合使用的效果较明显,MBC值达到青霉素/合成肽为0.625 mg.L-1/25 mg.L-1。结论抗菌肽的联合应用可能有助于改善病原性细菌对传统抗生素的耐药性。 展开更多
关键词 抗菌肽 棕点湍蛙 合成 金黄色葡萄球菌 大肠埃希 菌 最小杀菌浓度
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大鼠shRNA-Slfn1重组腺病毒载体的构建与鉴定 被引量：5
19
作者 刘姿麟 林慕之 +1 位作者 况春燕 刘兴德 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第2期136-141,146,共7页
目的:构建大鼠睡眠因子1(Slfn1)基因的发夹状RNA质粒,并进行腺病毒载体包装。方法:根据Rat slfn1基因的转录本设计并合成3个干扰RNA靶点ShRNA-Slfn1(1)、ShRNA-Slfn1(2)及ShRNA-Slfn1(3),并将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶... 目的:构建大鼠睡眠因子1(Slfn1)基因的发夹状RNA质粒,并进行腺病毒载体包装。方法:根据Rat slfn1基因的转录本设计并合成3个干扰RNA靶点ShRNA-Slfn1(1)、ShRNA-Slfn1(2)及ShRNA-Slfn1(3),并将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体(p DKD-CMV-U6-shRNA)的U6启动子下游,替换掉原来的ccd B基因;利用Admax系统,将3种目的穿梭质粒分别与腺病毒骨架质粒共转染到HEK293细胞中重组获得病毒后进行小量扩增及病毒滴度测定;利用Slfn1过表达腺病毒质粒中目的基因携带Flag标签,通过Western Blot检测Slfn1过表达腺病毒质粒与靶点质粒共转染293T细胞中Flag表达,观察靶点质粒对Slfn1表达的影响。结果:经菌落PCR鉴定获得阳性克隆并测序验证正确,表明构建质粒成功;腺病毒包装ShRNA-Slfn1(1)、ShRNA-Slfn1(2)及ShRNA-Slfn1(3)的病毒滴度分别为1.0×1014ifu/L,2.5×1014ifu/L,6.3×1013ifu/L,Western Blot证实ShRNA-Slfn1(1)及ShRNA-Slfn1(3)能显著降低转染293T细胞中Flag的表达,确定shRNA-Slfn1(1)及shRNA-Slfn1(3)为目的质粒。结论:成功构建了大鼠shRNA-slfn1的重组腺病毒载体。 展开更多
关键词 睡眠因子1 RNA干扰 腺病毒载体 短发夹RNA 构建 大鼠
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重组人神经肽Y受体Y1融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究 被引量：1
20
作者 丁克祥 董萍 +6 位作者 郑永晨 杨永鹏 朱晓亮 韩晋云 单志新 丁宇 丁振华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期2331-2334,共4页
目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY1受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y1转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western Blot鉴定,表达产物包涵体经... 目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY1受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y1转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western Blot鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y1受体蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-Y1重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y1融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了Y1受体的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-Y1在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y1受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 人神经肽Y Y1受体 融合蛋白 包涵体 纯化 生物信息学
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