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睡眠与记忆巩固 被引量：1
1
作者 胡波 谭萱 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第4期290-297,共8页
记忆是指大脑将从机体内、外部获取的信息保存一段时间的生理过程。在大脑中,散在分布于不同脑区的神经元集群将经历过的场景或事件信息进行编码并形成记忆,从而能提取出来以指导个体在未来类似场景或事件中的行为。除非被巩固,新形成... 记忆是指大脑将从机体内、外部获取的信息保存一段时间的生理过程。在大脑中,散在分布于不同脑区的神经元集群将经历过的场景或事件信息进行编码并形成记忆,从而能提取出来以指导个体在未来类似场景或事件中的行为。除非被巩固,新形成的记忆往往快速消退。睡眠是一种具有多种生理功能的大脑状态,包括非快速眼动(non-rapid eye movement sleep,NREM)睡眠和快速眼动(rapid eye movement,REM)睡眠两个时相。记忆形成的涉及编码、巩固和提取3个过程。睡眠总时间减少或者睡眠片段化会导致多种类型记忆巩固的受损,表明促进记忆巩固是睡眠的重要生理功能之一。本文总结了NREM睡眠和REM睡眠参与记忆巩固的实验证据,并探讨了睡眠可能通过记忆重激活和突触修饰等机制促进记忆巩固。未来的研究方向可能包括进一步探索睡眠如何协调突触“降尺度”和“升尺度”、REM睡眠如何与NREM睡眠协作互补、神经胶质细胞在睡眠促进记忆巩固中的作用,以及控制NREM和REM睡眠的脑区是否以及如何直接参与记忆巩固的调控。 展开更多
关键词 睡眠 记忆巩固 重激活 突触可塑性
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嗅觉黏膜间充质干细胞通过上调GPX4抑制铁死亡减轻脑缺血再灌注损伤 被引量：2
2
作者 庄俊鸿 杨国帅 +3 位作者 彭俊 陈梓桂 汤宏 夏鹰 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第13期1420-1428,共9页
目的探究嗅觉黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells,OM-MSCs)通过谷胱甘肽氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)改善氧糖剥夺/复氧(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)诱导的神经元细胞铁死亡... 目的探究嗅觉黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells,OM-MSCs)通过谷胱甘肽氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)改善氧糖剥夺/复氧(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)诱导的神经元细胞铁死亡。方法收集鼻息肉患者的中鼻道正常嗅觉黏膜组织,并提取OM-MSCs,采用流式细胞仪检测人嗅觉黏膜分离培养的原代细胞表面标志物CD34、CD45、CD73、CD90、CD105、CD146,显微镜下观察细胞形态学。将小鼠海马神经元细胞HT22细胞按随机数字表法分为:对照组、OGD/R组、OGD/R+OM-MSCs组、OGD/R+sh-NC组、OGD/R+sh-GPX4组、OGD/R+sh-GPX4+OM-MSCs组。对HT22细胞进行OGD/R处理,并给予OM-MSCs共培养和/或GPX4敲低处理。采用流式细胞仪检测HT22细胞凋亡,CCK-8法检测HT22细胞活力,试剂盒检测HT22细胞中铁死亡相关指标MDA、ROS、GSH、Fe^(2+),qPCR及Western blot检测GPX4表达。结果人嗅觉黏膜分离培养的原代细胞表面CD34及CD45呈阴性,CD73、CD90、CD105、CD146呈阳性,细胞贴壁生长并呈梭状,细胞表面标志物及形态学符合OM-MSCs特征。在HT22细胞方面,对照组、OGD/R组、OGD/R+OM-MSCs组在细胞活力、MDA、ROS、GSH、Fe^(2+)、GPX4方面具有统计学差异(P<0.05);OGD/R组与对照组相比,细胞活力和GSH降低(P<0.05),MDA、ROS、Fe^(2+)升高(P<0.05),GPX4下调(P<0.05);OGD/R+OM-MSCs组与OGD/R组相比(P<0.05),细胞活力和GSH升高(P<0.05),MDA、ROS、Fe^(2+)降低(P<0.05),GPX4上调。OGD/R+sh-GPX4组与OGD/R-sh-NC组相比,细胞活力和GSH降低(P<0.05),MDA、ROS、Fe^(2+)升高(P<0.05),并伴随有GPX4下调(P<0.05),OM-MSCs可逆转以上变化。结论OM-MSCs通过上调GPX4在HT22细胞中的表达抑制OGD/R诱导的HT22细胞铁死亡。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 铁死亡 谷胱甘肽氧化酶4 嗅觉黏膜间充质干细胞 神经元
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胶质细胞对神经突触功能影响的研究进展
3
作者 于长江 刘千朔 +2 位作者 李硕 吴晓旭 徐斌 《解剖科学进展》 2025年第3期430-433,共4页
胶质细胞分布于整个中枢神经系统,由星形胶质细胞、少突胶质细胞系细胞和小胶质细胞组成,占哺乳动物大脑细胞总数的50%以上。神经突触的功能对于维持准确的神经网络活动和正常的脑功能至关重要,而突触功能的维持受到多种因素的调节,不... 胶质细胞分布于整个中枢神经系统,由星形胶质细胞、少突胶质细胞系细胞和小胶质细胞组成,占哺乳动物大脑细胞总数的50%以上。神经突触的功能对于维持准确的神经网络活动和正常的脑功能至关重要,而突触功能的维持受到多种因素的调节,不同的突触损伤导致不同神经系统疾病的发生。因此,了解影响神经突触功能的胶质细胞相关机制十分重要,可以为许多神经退行性疾病的治疗干预提供分子靶点。本文主要对神经突触的功能及胶质细胞对神经突触功能的影响做一综述。 展开更多
关键词 神经突触 功能影响 星形胶质细胞 小胶质细胞
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6-OHDA诱导帕金森病模型小鼠的疼痛及抑郁样行为
4
作者 史雅颖 张静 +1 位作者 谢俊霞 石丽敏 《青岛大学学报(医学版)》 2025年第3期368-370,共3页
目的探讨6-羟基多巴胺(6-OHDA)单侧损毁纹状体诱导的帕金森病(PD)模型小鼠是否出现痛敏反应及抑郁样行为。方法选用7周龄C57BL/6小鼠17只,随机分为对照组(注射生理盐水)和模型组(注射6-OHDA)。通过立体定位的方式向小鼠左侧纹状体注射2... 目的探讨6-羟基多巴胺(6-OHDA)单侧损毁纹状体诱导的帕金森病(PD)模型小鼠是否出现痛敏反应及抑郁样行为。方法选用7周龄C57BL/6小鼠17只,随机分为对照组(注射生理盐水)和模型组(注射6-OHDA)。通过立体定位的方式向小鼠左侧纹状体注射2μL生理盐水或2.5 g/L 6-OHDA。2周后进行机械痛、悬尾和强迫游泳实验,检测小鼠50%后爪回撤阈值和不动时间百分比。结果机械痛实验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠50%后爪回撤阈值降低,出现痛敏反应(t=6.854,P<0.001)。悬尾实验和强迫游泳实验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠不动时间百分比增加,差异具有统计学意义(t=3.828、2.958,P<0.05)。结论6-OHDA损毁单侧纹状体诱导的PD模型小鼠出现痛敏反应和抑郁样行为。 展开更多
关键词 帕金森病 羟基多巴胺类 纹状体 疼痛 抑郁 小鼠
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反复轻度脑损伤致认知障碍小鼠神经元中CaMKⅡ信号通路及不同BDNF亚型的表达变化
5
作者 刘殿卿 黎芸 +1 位作者 张捷焘 刘夕霞 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第12期1291-1300,共10页
目的探索钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)信号通路及不同脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)亚型的表达在反复轻度创伤性脑损伤(repetitive mild traumatic ... 目的探索钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)信号通路及不同脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)亚型的表达在反复轻度创伤性脑损伤(repetitive mild traumatic brain injury,rmTBI)致认知功能障碍中的变化。方法使用随机数字表法将63只雄性C57BL/6J小鼠(5周龄,体质量16~17 g)分为模型组(n=50)和对照组(n=13),模型组通过自由落体撞击法建立rmTBI模型,对照组仅接受麻醉处理。造模结束后的第30天起通过Morris水迷宫实验评估小鼠空间学习能力和记忆能力,对相关指标进行相关性分析,通过聚类分析将模型组按照认知水平分为高表现组、中表现组和低表现组,将中表现组剔除,对高表现组、低表现组以及对照组的水迷宫指标进行组间对比。行为学实验结束后进行取材,Western blot检测高表现组、低表现组和对照组小鼠前额叶皮质以及海马组织中CaMKⅡ、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionicacid receptor,AMPAR)亚基(GluR1、p-GluR1、GluR2)、不同亚型的BDNF蛋白(mBDNF、proBDNF)的表达,并进行组间对比分析。结果(1)水迷宫相关统计指标之间均存在显著相关(P<0.05),通过分层聚类将模型组小鼠分为高表现组(n=31)、中表现组(n=11)、低表现组(n=8),高表现组、低表现组以及对照组3组组间各项认知指标均存在差异。(2)相较于对照组和低表现组,高表现组小鼠的海马组织中GluR1的磷酸化程度降低(P<0.05);相较于对照组,低表现组的前额叶皮质中GluR1、GluR2的表达均升高(P<0.05),高表现组的前额叶皮质中GluR2及CaMKⅡ的表达均升高(P<0.05);相较于高表现组,低表现组小鼠前额叶皮质中的GluR2/GluR1比值更低(P<0.05)。(3)相较于对照组,低表现组小鼠前额叶皮质和海马组织中的proBDNF以及mBDNF的表达均升高(P<0.05),且mBDNF/proBDNF也更高(P<0.05);高表现组在前额叶皮质中存在mBDNF的表达升高(P<0.05)。结论rmTBI慢性期,良好的认知功能预后伴随着CaMKⅡ信号通路的表达上调,且认知功能差异伴随着突触后膜上不同AMPAR亚基的占比变化,认知障碍组存在着两种BDNF亚型的过表达以及mBDNF转化率的升高。 展开更多
关键词 轻度脑损伤 认知障碍 CaMKⅡ AMPAR 脑源性神经营养因子
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小鼠胚胎脊髓神经干细胞提取与传代培养:3种常用消化酶优劣的比较与分析
6
作者 罗丹 葛志林 +5 位作者 侯永辉 王万舜 詹吉恒 侯宇 林定坤 陈树东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第31期6609-6615,共7页
背景:在神经干细胞的研究及应用过程中,细胞的培养与传代是关键环节,直接影响到细胞的质量和实验结果。寻找一种最适宜的消化酶类,对维持胚胎小鼠脊髓神经干细胞的生物学特性并增强其传代效率,具有重要意义。目的:探讨胚胎小鼠脊髓神经... 背景:在神经干细胞的研究及应用过程中,细胞的培养与传代是关键环节,直接影响到细胞的质量和实验结果。寻找一种最适宜的消化酶类,对维持胚胎小鼠脊髓神经干细胞的生物学特性并增强其传代效率,具有重要意义。目的:探讨胚胎小鼠脊髓神经干细胞传代最适合的消化酶。方法:显微解剖分离提取孕14 d C57BL/6胎鼠脊髓组织,用含有表皮生长因子、碱性成纤维生长因子及B27的DMEM/F12无血清培养基培养,待成球后进行Nestin与Sox2免疫荧光鉴定。神经干细胞传代培养过程中分别采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及TrypLE^(TM)Express酶消化结合吹打法制成单细胞悬液,观察细胞分散效果及成球情况,取第3代细胞进行碘化丙啶染色观察细胞死亡情况,通过计数细胞总数观察细胞增殖情况,通过免疫荧光染色、Western blot和RT-PCR检测Olig2、Tuj1、GFAP、NeuN蛋白和mRNA表达鉴定细胞分化情况。结果与结论:脊髓组织细胞培养72 h后可形成悬浮生长的神经球,5-7 d后即可传代。与胰蛋白酶、木瓜蛋白酶相比,TrypLE^(TM)Express酶结合吹打法进行传代的细胞分散率高,活性较好,分化为NeuN与Tuj1的阳性神经元细胞较多。此研究优化了神经干细胞的培养和传代过程,为进一步开展脊髓疾病的干细胞移植治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 神经干细胞 C57BL/6小鼠 胚胎 脊髓 胰蛋白酶 木瓜蛋白酶 TrypLE^(TM)Express酶 工程化干细胞
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载脂蛋白E基因多态性影响星形胶质细胞损伤后早期NF-κB表达的实验研究 被引量：16
7
作者 吴海涛 江涌 +3 位作者 张晓冬 何朝晖 夏海坚 孙晓川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期103-106,共4页
目的探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性与星形胶质细胞损伤后NF-κB表达的相关性。方法通过RT-PCR及定点突变技术扩增人源性APOEε2、ε3、ε4 3种等位基因的CDS区,并构建pEGFP-N1-APOE重组质粒;APOE基因敲除鼠星形胶质... 目的探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性与星形胶质细胞损伤后NF-κB表达的相关性。方法通过RT-PCR及定点突变技术扩增人源性APOEε2、ε3、ε4 3种等位基因的CDS区,并构建pEGFP-N1-APOE重组质粒;APOE基因敲除鼠星形胶质细胞的原代培养、鉴定,脂质体法将重组质粒转染入星形胶质细胞,并筛选稳定表达APOE信息的细胞株;利用划痕致伤构建细胞损伤模型,于伤后12、24、48 h,通过RT-PCR测定NF-κB mRNA的转录,通过West-ern blot测定其蛋白的表达。结果伤后12 h,APOEε2、ε3、ε4 3组细胞可检测到NF-κB的表达,但各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);伤后24 h,3组细胞NF-κB的表达较伤前增高,且APOEε4组的表达明显高于APOEε2和APOEε3组(P<0.05);伤后48 h,表达进一步增强,APOEε4组的表达依然明显高于APOEε2和APOEε3组(P<0.05)。结论损伤后早期,携带APOEε4等位基因的星形胶质细胞NF-κB的表达水平高于APOEε2和APOEε3型,提示APOEε4携带体可能通过早期创伤性炎症反应导致急性期伤情加重及不良预后。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 基因多态性 星形胶质细胞 核因子KAPPA B
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匹罗卡品致大鼠癫痫持续状态后海马神经元凋亡的动态观察 被引量：12
8
作者 张映琦 廖维宏 +4 位作者 迟路湘 陈康宁 史树贵 范文辉 陈贞芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期71-73,共3页
目的探讨癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马细胞凋亡的发生及其与caspase-3表达的关系。方法采用匹罗卡品诱发大鼠SE模型,用TUNEL染色和免疫组化技术检测海马神经元凋亡和caspase-3表达的动态变化。结果正常对照组大鼠海马未见... 目的探讨癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马细胞凋亡的发生及其与caspase-3表达的关系。方法采用匹罗卡品诱发大鼠SE模型,用TUNEL染色和免疫组化技术检测海马神经元凋亡和caspase-3表达的动态变化。结果正常对照组大鼠海马未见TUNEL阳性细胞;SE后6 h,开始出现少量TUNEL阳性细胞;SE后72 h,达到高峰;SE后7 d,TUNEL阳性细胞开始减少。正常对照组大鼠海马可见少量caspase-3阳性表达;SE后6 h,大鼠海马caspase-3阳性表达增多,主要集中于CA1和CA3区;SE后48 h,caspase-3表达达到高峰;SE后72 h^7 d,caspase-3阳性染色细胞数开始减少;但仍显著多于对照组,差异有极显著意义(P<0.01)。结果显示caspase-3表达分布与TUNEL染色基本一致,caspase-3表达高峰早于TUNEL所示凋亡细胞出现的高峰。结论神经元凋亡参与了SE后海马神经元迟发性死亡过程并与caspase-3的激活有密切的关系。 展开更多
关键词 癫痫持续状态 海马 CASPASE-3 匹罗卡品 凋亡
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全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征 被引量：9
9
作者 陈力学 姜利人 +2 位作者 刘宝松 陈恒胜 康格非 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期531-534,共4页
目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征，为神经元损伤的早期干预和继发性脑损害的防治提供实验依据。方法 建立大鼠全脑缺血模型，采用TTC染色、原位细胞凋亡检测（原位末端标记法，TUNEL）及AO／EB荧光比色法观察... 目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征，为神经元损伤的早期干预和继发性脑损害的防治提供实验依据。方法 建立大鼠全脑缺血模型，采用TTC染色、原位细胞凋亡检测（原位末端标记法，TUNEL）及AO／EB荧光比色法观察脑缺血再灌后海马、皮层凋亡发生的数量和分布，用荧光指示剂Fura-2 AM标记，检测脑海马细胞内游离钙的浓度。结果 TUNEL显示再灌注3h海马部位即出现散在凋亡细胞，并向皮层区域扩展，24—48h达高峰；坏死细胞迟于凋亡出现，弥散分布于凋亡细胞周围，再灌注48h后坏死细胞增多，72h最多。AO／EB法显示海马、额叶和顶叶凋亡细胞总数分布在再灌注后24h和72h达高峰，并显著高于对照组（P〈0．05）。TTC染色证实全脑缺血再灌注后不出现梗死灶，而是在海马及大脑皮层有弥散性坏死。胞内[Ca^2＋];各时间点与对照相比匀显著升高（P〈0．01）。结论 全脑缺血再灌后受累神经元经历了由凋亡到死亡的过程，对缺血敏感的海马神经元首先受损，并向顶叶和额叶皮层扩展，细胞质内[Ca^2＋]i增加是主要原因。利用凋亡时间窗进行早期干预可能有益于保护和挽救凋亡前期神经元，减小继发性损害的严重程度。 展开更多
关键词 脑缺血 细胞凋亡 AO/EB TUNEL TTC 神经元 海马
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免疫磁珠法分选胚胎大鼠脑神经干细胞的初步研究 被引量：12
10
作者 高国一 卢亦成 +3 位作者 江基尧 李莉 张玲珍 朱诚 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1092-1094,共3页
目的 :探索应用免疫磁珠间接阳性法分选神经上皮干细胞蛋白 (nestin)阳性的神经干细胞群的实验条件 ,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。 方法 :制取胎鼠大脑组织细胞悬液 ,免疫磁珠法分选胎鼠脑神经干... 目的 :探索应用免疫磁珠间接阳性法分选神经上皮干细胞蛋白 (nestin)阳性的神经干细胞群的实验条件 ,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。 方法 :制取胎鼠大脑组织细胞悬液 ,免疫磁珠法分选胎鼠脑神经干细胞 ,以流式细胞术检测阳性细胞纯度 ,以锥虫蓝染色法检测细胞活性。 结果 :该法分选的 nestin阳性细胞纯度为93.0 %～ 99.7% ,其中活性细胞为 92 %～ 97%。结论 :免疫磁珠法分离胎鼠脑神经干细胞群落简便、有效 ,可以为神经干细胞细胞培养和移植提供细胞来源 ,也为研究高纯度神经干细胞的特性提供了实验基础。 展开更多
关键词 神经干细胞 神经巢蛋白 免疫磁珠法
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BDNF、NGF对体外培养的胚胆碱能神经元生长发育的影响 被引量：10
11
作者 金国华 徐慧君 +2 位作者 武义鸣 田美玲 钟世镇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期230-234,共5页
本文用AChE组化方法，研究了BDNF、NGF对培养的胚鼠基底前脑胆碱能神经元的作用及BDNF和NGF的协同作用。结果表明BDNF和NGF都具有增加AChE阳性神经元数量的作用，二者的不同在于BDNF作用出现的时间较早、强度较小；而NGF作用出现的时间... 本文用AChE组化方法，研究了BDNF、NGF对培养的胚鼠基底前脑胆碱能神经元的作用及BDNF和NGF的协同作用。结果表明BDNF和NGF都具有增加AChE阳性神经元数量的作用，二者的不同在于BDNF作用出现的时间较早、强度较小；而NGF作用出现的时间较迟但强度较大。并发现BDNF对体外培养的胚胆碱能神经元胞体早期的生长发育作用比较明显，而NGF的作用则不甚显著。BDNF对胚胆碱能神经元发出突起和突起的延伸作用较NGF强。BDNF和NGF的联合作用较单独使用BDNF或NGF为好。本文的结果提示在体外培养中两种营养因子联合应用较只用一种因子有益。 展开更多
关键词 胆碱能神经元 生长 神经营养因子 神经生长因子
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甲钴胺对SD大鼠坐骨神经损害后背根神经元的保护作用 被引量：8
12
作者 章莉萍 苏建华 +2 位作者 陈玉芳 唐金荣 肖杭 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第8期613-615,I0001,共4页
目的:观察甲钴胺对坐骨神经损害后背根神经元病理形态改变的影响。方法:将30只SD大鼠分为正常对照组、模型组和甲钴胺组,每组各10只。以大鼠坐骨神经建立周围神经损害动物模型,以背根神经节病理切片(光镜、电镜)中的神经元变化情况为观... 目的:观察甲钴胺对坐骨神经损害后背根神经元病理形态改变的影响。方法:将30只SD大鼠分为正常对照组、模型组和甲钴胺组,每组各10只。以大鼠坐骨神经建立周围神经损害动物模型,以背根神经节病理切片(光镜、电镜)中的神经元变化情况为观察指标,考察甲钴胺对坐骨神经损害后神经元的影响。结果:4周后模型组神经元坏死率为(60.28±3.56)%,而甲钴胺组为(11.66±1.52)%,甲钴胺组明显低于模型组(P<0.01)。模型组4周时可见胞质、胞核大量空泡变性,内质网水肿明显,染色质聚集成块,分布不均,而甲钴胺组电镜观察胞膜、核膜比较完整,细胞器分布均匀,内质网无明显肿胀,总体观与正常对照组相似。结论:甲钴胺对坐骨神经损害后神经元有确切的保护作用。 展开更多
关键词 神经元 坐骨神经 神经节 脊 大鼠 SPRAGUE-DAWLEY
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胞内cAMP浓度的增加可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞 被引量：8
13
作者 项鹏 夏文杰 +4 位作者 张丽蓉 陈振光 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1324-1327,I001,共5页
目的 :探讨胞内cAMP浓度的增加与骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的关系。方法 :采用Ficoll-Paque液 (1 0 77g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,采用含腺苷酸环化酶激动剂Forskolin及磷脂酶抑制剂 3-异丁基 - 1 -甲基黄嘌呤 (IBMX... 目的 :探讨胞内cAMP浓度的增加与骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的关系。方法 :采用Ficoll-Paque液 (1 0 77g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,采用含腺苷酸环化酶激动剂Forskolin及磷脂酶抑制剂 3-异丁基 - 1 -甲基黄嘌呤 (IBMX)的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得 5× 1 0 5,1 0代可获得 2× 1 0 1 0 个细胞。加入Forskolin、IBMX以及两者联用诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ,呈典型神经元样形态 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF -M表达阳性 ,GFAP阴性。结论 展开更多
关键词 胞内cAMP浓度 骨髓间质干细胞 神经元样细胞 腺苷环-磷酸 福司柯林 诱导分化
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神经干细胞衰老与核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的关系 被引量：8
14
作者 吴奇 王顺和 +7 位作者 程霄 向玥 陈粼波 汪子玲 肖含先之 姜蓉 王璐 王亚平 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期815-820,共6页
目的建立D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠神经干细胞(NSCs)体外衰老模型,探讨NSCs衰老与细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系。方法取新生C57BL/6J小鼠全脑,分离、鉴定NSCs,培养至第3代,随机分为对照组和衰老组。... 目的建立D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠神经干细胞(NSCs)体外衰老模型,探讨NSCs衰老与细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系。方法取新生C57BL/6J小鼠全脑,分离、鉴定NSCs,培养至第3代,随机分为对照组和衰老组。对照组细胞在NSCs培养基中常规培养48 h,衰老组细胞在对照组基础上加入D-gal(终浓度为10 g/L)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测NSCs增殖活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老阳性神经球百分率;锥虫蓝染色检测细胞存活率;酶标比色法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;Western boltting检测NSCs中Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;Real-time PCR检测GCLC和GCLM基因表达水平。结果与对照组相比,衰老组NSCs增殖活力明显下降,锥虫蓝染色显示,NSCs存活率下降明显,SA-β-gal染色阳性神经球百分率显著上升,SOD活性与CAT活性均显著降低,MDA含量显著升高,NSCs中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2和HO-1表达水平显著下调,通路相关GCLC和GCLM基因表达下调。结论采用D-gal可以构建NSCs体外衰老模型,其氧化损伤机制可能与抑制Nrf2/ARE抗氧化信号通路有关。 展开更多
关键词 D-半乳糖 神经干细胞 衰老 细胞核相关因子2/抗氧化反应原件信号通路 实时定量聚合酶链反应 小鼠
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神经损伤与再生中神经元GAP-43mRNA表达的原位杂交研究 被引量：6
15
作者 刘光久 李振强 +2 位作者 殷玉芹 宋林 孙建森 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期659-661,共3页
目的　研究周围神经损伤过程中生长相关蛋白 (GAP 4 3)mRNA表达的变化规律。　方法　建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型 ,用原位杂交技术对大鼠的腰髓和背根神经节的GAP 4 3mRNA表达进行观察。　结果　大鼠坐骨神经损伤 2d后 ,腰髓腹角... 目的　研究周围神经损伤过程中生长相关蛋白 (GAP 4 3)mRNA表达的变化规律。　方法　建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型 ,用原位杂交技术对大鼠的腰髓和背根神经节的GAP 4 3mRNA表达进行观察。　结果　大鼠坐骨神经损伤 2d后 ,腰髓腹角运动神经元和背根节感觉神经元可检测到GAP 4 3mRNA杂交信号 ;术后 4、7和 14d明显增强 ;术后 30d减弱 ,6 0d已恢复正常。　结论　周围神经损伤诱导神经元胞体GAP 4 3mRNA表达显著增强 ,表明GAP 4 3在神经再生过程中起重要作用。 展开更多
关键词 神经损伤 MRNA 生长相关蛋白 原位杂交 大鼠 神经再生
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PTEN表达下调对神经元缺氧损伤的保护及其作用机制 被引量：8
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作者 陈力学 姜利人 +2 位作者 刘宝松 龙在云 康格非 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1942-1944,共3页
目的探讨PTEN对NR2B磷酸化的调节作用及其在阻断Ca2+内流和神经元保护中的作用。方法建立神经元缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,采用Fura 2-AM法测定胞内Ca2+浓度,用免疫沉淀法和W estern b ... 目的探讨PTEN对NR2B磷酸化的调节作用及其在阻断Ca2+内流和神经元保护中的作用。方法建立神经元缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,采用Fura 2-AM法测定胞内Ca2+浓度,用免疫沉淀法和W estern b lotting检测NR2B及磷酸化水平。结果OGD后NR2B酪氨酸磷酸化水平和胞内Ca2+浓度显著升高,shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中,并可显著下调其酪氨酸磷酸化水平(F=11.82,P<0.05),胞内Ca2+浓度也显著低于损伤组和PshGFP阴性对照组(F=62.85,P<0.05)。结论PTEN表达下调对缺氧诱导的NR2B酪氨酸磷酸化水平升高有拮抗作用,阻断Ca2+内流,从而达到神经元保护作用。 展开更多
关键词 PTEN NR2B shRNAs 酪氨酸磷酸化
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雌激素联合依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注的神经保护作用 被引量：13
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作者 薛新宏 赵小明 +4 位作者 彭延波 张江 陈瑞英 王艳 王大力 《河北医药》 CAS 2013年第3期325-327,共3页
目的通过观察雌激素和依达拉奉对大鼠脑局灶性缺血再灌注损伤后ICAM-1、TNF-α表达、SOD活力和MDA、NO含量的影响,探讨雌激素联合依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用及其可能机制。方法选择健康雄性SD大鼠200只,随机分为5组... 目的通过观察雌激素和依达拉奉对大鼠脑局灶性缺血再灌注损伤后ICAM-1、TNF-α表达、SOD活力和MDA、NO含量的影响,探讨雌激素联合依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用及其可能机制。方法选择健康雄性SD大鼠200只,随机分为5组,即假手术组(SO)、缺血再灌注组(I/R)、依达拉奉组(Ed)、雌激素组(Es)和雌激素联合依达拉奉组(C),每组40只。建立大鼠右侧大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化法测定大鼠大脑皮质ICAM-1、TNF-α表达情况,用生化法测定各组脑缺血再灌注后SOD活力、MDA、NO含量。结果在I/R组缺血侧大脑皮质各个时间点ICAM-1和TNF-α的表达明显高于SO组和Ed组、Es组、C组(P<0.01)。Ed组各个时间点ICAM-1和TNF-α的表达明显低于Es组和C组(P<0.05)。Ed组、Es组、C组及SO组脑组织SOD活力均高于I/R组(P<0.05),脑组织MDA及NO含量显著低于I/R组(P<0.05)。C组NO、MDA含量低于Es组、Ed组,C组SOD活力高于Es组(P<0.05)。结论雌激素和依达拉奉能通过抑制TNF-α的激活、减少ICAM-1的表达,从而减轻神经元的炎性反应,起到保护大脑的作用;雌激素和依达拉奉能增强SOD活力、减少MDA及NO含量,改善自由基代谢,有效减轻局灶性脑梗死引起的缺血性损伤。二者联合应用效果更好。 展开更多
关键词 雌激素 依达拉奉 脑缺血再灌注 细胞间黏附分子-1 肿瘤坏死因子-α 自由基
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Rap1a高表达对SNL大鼠神经病理性疼痛及星形胶质细胞自噬的影响 被引量：8
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作者 孙树凯 马磊 +1 位作者 张海红 贾栋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期2335-2339,共5页
目的分析L5脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓组织中Rap1a的表达及其对神经病理性疼痛的影响,探讨其作用机制。方法采用L5脊神经结扎法制备SNL大鼠模型,分为假手术(n=6)、SNL模型组(n=30)、生理盐水组(n=6)、Cont-shR组(n=6)、Rap1a-shR组(n=6)... 目的分析L5脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓组织中Rap1a的表达及其对神经病理性疼痛的影响,探讨其作用机制。方法采用L5脊神经结扎法制备SNL大鼠模型,分为假手术(n=6)、SNL模型组(n=30)、生理盐水组(n=6)、Cont-shR组(n=6)、Rap1a-shR组(n=6)、雷帕霉素组(n=6),经由鞘内注射法处理后,采用Von-Frey纤维丝法检测大鼠机械痛阈值,采用RT-PCR和Western blot法检测大鼠脊髓组织和星形胶质细胞中Rap1a的表达、mTOR活性及自噬水平。结果 SNL大鼠脊髓组织中Rap1a的表达水平较生理盐水组显著上升,机械痛阈明显降低(P<0.05)。Rap1a shRNA腺病毒感染后,SNL大鼠机械痛阈明显升高(P<0.05),大鼠脊髓组织及分离培养的星形胶质细胞中细胞自噬标志分子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值升高,p62表达水平下降,细胞自噬水平增加,且mTOR活化水平降低(P<0.05)。细胞自噬诱导剂雷帕霉素作用后,星形胶质细胞及SNL大鼠脊髓组织细胞自噬水平均明显增加,SNL大鼠的机械痛阈显著升高(P<0.05)。结论神经损伤引起的Rap1a高表达对神经病理性疼痛的发展有促进作用,这一过程可能与Rap1a对mTOR信号通路及星形胶质细胞自噬水平的调节有关。 展开更多
关键词 Rap1a 神经病理性疼痛 星形胶质细胞自噬 MTOR SNL大鼠
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硫酸软骨素蛋白多糖抑制神经元轴突生长体外生物模型的建立 被引量：5
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作者 谭斐 吴晓黎 +3 位作者 景良 李桂晨 赵琛 郭阳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期4-7,11,共5页
目的利用硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)的生物特性建立抑制神经元生长和轴突再生的体外生物模型。方法将不同浓度CSPG与无生物毒性的德克萨斯红荧光染料混合,取5μl滴在培养板的中心部位,形成边界清楚的红色圆形斑点,称CSPG圆斑(CSPG SPOT)... 目的利用硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)的生物特性建立抑制神经元生长和轴突再生的体外生物模型。方法将不同浓度CSPG与无生物毒性的德克萨斯红荧光染料混合,取5μl滴在培养板的中心部位,形成边界清楚的红色圆形斑点,称CSPG圆斑(CSPG SPOT)。将神经母细胞瘤SY5Y细胞和小鼠小脑颗粒细胞(CGNs)铺在含有CSPG SPOT的培养板中,48h后观察细胞的生长情况。结果含有1μg/ml和3μg/ml CSPG的SPOT分别使CGNs和神经母细胞瘤SY5Y细胞停止生长、死亡,没有发现细胞的轴突延伸到SPOT上生长。高浓度的CSPG可渗透到SPOT周围区域,使CSPG SPOT周围区域的细胞生长和轴突再生受到抑制。结论该模型可以在体外模拟胶质细胞分泌的CSPG对神经细胞生长的抑制作用,对研究中枢神经系统损伤后神经元的生长和轴突的再生具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 硫酸软骨素蛋白多糖 细胞生长 轴突延伸 小脑颗粒细胞 神经母细胞瘤细胞
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大鼠脑发育过程中神经干细胞分布的免疫组织化学研究 被引量：11
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作者 肖新莉 刘勇 +1 位作者 徐曦 丁海燕 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期114-116,共3页
目的　观察神经干细胞在大鼠不同发育时期不同脑区的分布。方法　应用免疫组织化学ABC法 ,对不同发育时期大鼠脑的嗅球、室管膜、室管膜下区、顶叶皮质、纹状体、海马齿状回进行nestin免疫组织化学染色及光镜观察。结果　nestin从胚胎 1... 目的　观察神经干细胞在大鼠不同发育时期不同脑区的分布。方法　应用免疫组织化学ABC法 ,对不同发育时期大鼠脑的嗅球、室管膜、室管膜下区、顶叶皮质、纹状体、海马齿状回进行nestin免疫组织化学染色及光镜观察。结果　nestin从胚胎 1 8d至出生后 7d在脑内表达较强 ,阳性细胞在所观察的部位较多 ,出生后 1月nestin阳性细胞数急剧下降 ,成年鼠和老年鼠仅在嗅球、室管膜、部分室管膜下区及海马齿状回分布有nestin阳性细胞。结论　嗅球、室管膜、室管膜下区及海马齿状回终生具有神经干细胞存在 。 展开更多
关键词 发育过程 免疫组织化学 神经干细胞 神经巢蛋白 脑 大鼠
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