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红景天苷对脑出血后自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62的作用研究 被引量：16
1
作者 石宗华 王新军 +1 位作者 张兰玉 孙哲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第12期61-64,I0036,共5页
目的观察红景天苷对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后自噬相关蛋白的作用,并探讨红景天苷缓解脑出血后脑损伤的可能机制。方法将实验大鼠随机分为假手术组、模型组、脑心通组和红景天苷组,除假手术组外,其他各组制定脑出血模型... 目的观察红景天苷对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后自噬相关蛋白的作用,并探讨红景天苷缓解脑出血后脑损伤的可能机制。方法将实验大鼠随机分为假手术组、模型组、脑心通组和红景天苷组,除假手术组外,其他各组制定脑出血模型。分别于6、12、24、72 h记录各组大鼠的脑组织含水量和运动功能;采用免疫组化、Real time-PCR和Western Bolt检测脑组织中Beclin-1、p62、LC3-Ⅱ的表达水平。结果与假手术组比较,模型组在ICH后大鼠脑组织含水量逐渐增加,脑水肿逐渐严重(P<0.01),脑心通组和红景天苷组则能明显减少了大鼠脑组织含水量并减轻了脑水肿(P<0.01)。ICH后72 h内大鼠运动功能显著减退,6 h时各组大鼠评分差异无统计学意义(P>0.05),从伤后12~72 h各组大鼠运动功能均逐渐恢复,而脑心通组和红景天苷组则能明显加快大鼠运动功能的恢复,取得更好的恢复效果(P<0.01)。假手术组大鼠脑组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62阳性细胞数表达水平较低,造模后,模型组大鼠脑组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62阳性细胞数表达水平升高(P<0.01),给药后,脑心通组和红景天苷组中大鼠脑组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62阳性细胞数表达水平降低(P<0.01)。假手术组大鼠脑组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62的基因和蛋白表达水平较低,造模后,模型组大鼠脑组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62的基因和蛋白表达水平升高(P<0.01),给药后,脑心通组和红景天苷组大鼠脑组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62的基因和蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。结论红景天苷能改善脑出血后脑损伤,其机制可能与其抑制大鼠脑组织内自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62的表达有关。 展开更多
关键词 红景天苷 脑出血 脑水肿 自噬 机制
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STAT6 ASODN对哮喘小鼠脾淋巴细胞影响的实验研究 被引量：3
2
作者 赵鹰 弓清梅 +3 位作者 田新瑞 任文霞 李建强 刘卓拉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期195-200,共6页
目的研究STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞的影响作用。方法实验细胞分组:正常鼠空白组(A组)、正常鼠OVA组(B组)、哮喘空白组(C组)、哮喘OVA组(D组)、哮喘治疗组(E组)。正常设计并人工合成一段互补于小鼠STAT6 mRNA翻译起始区271-... 目的研究STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞的影响作用。方法实验细胞分组:正常鼠空白组(A组)、正常鼠OVA组(B组)、哮喘空白组(C组)、哮喘OVA组(D组)、哮喘治疗组(E组)。正常设计并人工合成一段互补于小鼠STAT6 mRNA翻译起始区271-290的反义寡核苷酸片段,全链硫代修饰。用卵白蛋白和氢氧化铝复制哮喘模型,用淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,进行体外培养并导入由阳离子脂质体转染剂Geneshuttle携带的反义寡核苷酸,观察反义寡核苷酸的转染对脾淋巴细胞STAT6蛋白表达水平及细胞培养上清中IL-4分泌水平的影响。免疫细胞化学观察脾淋巴细胞中STAT6蛋白的表达水平,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定脾细胞培养上清液中IL-4的浓度。结果D组细胞STAT6蛋白表达明显高于其余各组,均具有显著性差异(P均<0.01),STAT6 ASODN转染后,E组细胞该蛋白的表达量明显下降(P<0.01);D组脾淋巴细胞培养上清中IL-4分泌水平明显高于其余各组,均具有显著性差异(P均<0.01);STAT6 ASODN转染后,E组培养上清中IL-4分泌水平显著低于D组(P<0.01)。结论STAT6 ASODN可特异性抑制哮喘鼠脾淋巴细胞中STAT6蛋白的表达,并可特异性抑制脾淋巴细胞中IL-4的分泌,为反义基因技术治疗哮喘提供了依据。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 支气管哮喘 白介素-4 信号转导和转录激活因子6
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血管内皮生长因子与地塞米松对早产鼠肺泡表面活性物质结合蛋白B表达的影响
3
作者 李涛 肖玉 +2 位作者 谢集建 王作军 潘同国 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期588-591,F0002,共5页
目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)以及地塞米松单独或联合应用对早产大鼠肺泡表面活性物质结合蛋白B(SP-B)mRNA表达的影响,及与肺发育的关系,为临床防治早产儿呼吸窘迫综合征(NRDS)提供新途径。方法:孕15d清洁级Wistar大鼠12只,随机分为... 目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)以及地塞米松单独或联合应用对早产大鼠肺泡表面活性物质结合蛋白B(SP-B)mRNA表达的影响,及与肺发育的关系,为临床防治早产儿呼吸窘迫综合征(NRDS)提供新途径。方法:孕15d清洁级Wistar大鼠12只,随机分为4组,每组平均3只,试验分组:VEGF组、地塞米松组、VEGF加地塞米松组和对照组进行试验,应用RT-PCR检测早产鼠肺组织中SP-BmRNA的表达。结果:地塞米松组、VEGF加地塞米松组肺组织中SP-BmRNA表达与对照组比较,P<0.05,差异有显著性,VEGF加地塞米松组较地塞米松组SP-BmRNA表达进一步增加(P<0.05),而VEGF单独应用组与对照组比较,P>0.05,差异无显著性。结论:地塞米松能促进肺表面活性物质的合成和分泌,VEGF能协同地塞米松促进肺表面活性蛋白的分泌与合成。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 地塞米松 肺表面活性物质结合蛋白
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乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路减轻脓毒症性肺损伤 被引量：27
4
作者 张利鹏 赵焱 +2 位作者 刘国娟 杨大刚 周丽华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1311-1316,共6页
目的探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)对脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠的肺保护作用及可能机制。方法 56只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型(LPS 6、12、24 h)组、乌司他丁(UTI 6... 目的探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)对脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠的肺保护作用及可能机制。方法 56只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型(LPS 6、12、24 h)组、乌司他丁(UTI 6、12、24 h)组,每组8只。采用腹腔注射细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,10 mg·kg^(-1))的方法制备大鼠ARDS模型,乌司他丁组在左侧腹腔注射LPS后1 h后,在右侧腹腔注射乌司他丁20 000 U·kg^(-1),对照组、注射同等剂量的生理盐水,各组大鼠在不同时间点留取肺组织及血浆标本。计算肺组织湿/干质量(W/D)比值;光镜下观察肺组织病理改变;用ELISA法检测各组血浆中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素^(-1)8(interleukin^(-1)8,IL^(-1)8)、肺表面活性物质A((surfactant protein A,SPA)含量,检测各组肺匀浆中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide Dismutase,SOD)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;免疫组化法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)、细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-signal regulated protein kinase,ERK)蛋白表达情况;Western blot法检测肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)及磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达的变化。结果光镜下观察对照组肺组织结构完整,肺泡腔清晰;LPS组肺泡壁增厚,渗出明显,肺组织出现损伤性变化,以12h组变化最明显;UTI组各组病理改变较LPS组明显减轻。与对照组比较,LPS组W/D比值、血浆TNF-α、IL^(-1)8含量,肺匀浆MDA、NO含量均明显升高(P<0.05),而肺匀浆SOD含量明显降低;与LPS组比较,UTI各组肺组织W/D比值、血浆TNF-α、IL^(-1)8含量,肺匀浆MDA含量均明显降低,而肺匀浆SOD含量明显增高,差异有统计学意义;免疫组化结果显示:与对照组比较,LPS组p38MAPK、ERK蛋白在胞质和胞核表达均明显增加,而UTI组较LPS组表达均明显减少;Western blot检测结果显示:与对照组比较,LPS组肺组织p-p38MAPK/ERK蛋白表达均明显增高,而UTI干预组蛋白表达均明显受抑制。结论乌司他丁通过干预p38MAPK/ERK信号通路、抗氧化作用而减轻炎症反应,发挥对LPS致脓毒性大鼠ARDS的保护作用。 展开更多
关键词 乌司他丁 细菌脂多糖 急性呼吸窘迫综合征 P38丝裂原活化蛋白激酶 细胞外信号调节蛋白激酶 减轻
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微波固定对肺组织内磷脂超微结构保存的探讨
5
作者 肖辉 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 1993年第1期91-91,共1页
板层体主要由卵磷脂组成,这是肺泡Ⅱ型上皮细胞最重要的特征,也是在形态上研究呼吸窘迫综合症不可缺少的指标。然而,对于磷脂超微结构的保存,目前还是一个比较困难的问题。为此,我们在处理肺组织时,采用了微波快速固定技术,制样后在电... 板层体主要由卵磷脂组成,这是肺泡Ⅱ型上皮细胞最重要的特征,也是在形态上研究呼吸窘迫综合症不可缺少的指标。然而,对于磷脂超微结构的保存,目前还是一个比较困难的问题。为此,我们在处理肺组织时,采用了微波快速固定技术,制样后在电子显微镜下观察,结果十分令人满意,现将方法介绍如下:实验采用健康豚鼠,用20％乌拉坦(0.6ml/100g)腹腔注射麻醉,开胸取肺,按电镜制样要求切取肺组织,放入盛有微波固定液(1％锇酸2份、2.5％戊二醛1份)的小瓶中。并将小瓶置于盛水的平皿中。然后。 展开更多
关键词 肺 磷脂 超微结构 微波固定
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