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Wnt/β-catenin信号途径促进肌源性干细胞向神经细胞分化
被引量：
15
1
作者
张德龙
王伟
+3 位作者
张力
李广
于光明
金秋
《解放军医学院学报》
CAS
2014年第4期383-387,共5页
目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在肌源性干细胞(muscle derived stem cells,MDSCs)分化过程中的调控作用。方法对照组单纯体外培养MDSCs;实验组采用丙戊酸(valproic acid,VA)诱导培养MDSCs分化为类神经细胞;抑制剂组在实验组的基础上采...
目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在肌源性干细胞(muscle derived stem cells,MDSCs)分化过程中的调控作用。方法对照组单纯体外培养MDSCs;实验组采用丙戊酸(valproic acid,VA)诱导培养MDSCs分化为类神经细胞;抑制剂组在实验组的基础上采用Dickkopf-1(DKK-1)和sFRP抑制Wnt/β-catenin信号途径。免疫细胞化学检测各组MDSCs的分化情况。RT-PCR检测MDSCs中Wnt3a mRNA表达的变化,Western blot检测MDSCs中GSK-3β、β-catenin蛋白含量的变化。结果实验组和抑制剂组MDSCs经VA诱导后出现神经细胞分化现象,抑制剂组分化水平明显低于实验组,对照组未见分化。与对照组相比,实验组和抑制剂组Wnt3a mRNA和β-catenin表达水平增加,实验组明显高于抑制剂组。实验组和抑制剂组GSK-3β表达水平低于对照组。结论 MDSCs向类神经细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号通路被激活,Wnt/β-catenin信号通路阻断能够部分抑制MDSCs向类神经细胞分化。
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关键词
WNT
β—catenin信号途径
肌源性干细胞
神经分化
暂未订购
饰胶蛋白聚糖核心片段Leu155-Val260 cDNA克隆与表达
被引量：
1
2
作者
刘赴平
刘景春
莫晓燕
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第B04期56-58,共3页
[目的]通过克隆并表达饰胶蛋白核心片断Leu155-Val260 cDNA,为进一步研究其是否具有饰胶蛋白聚糖全部或部分生物学活性功能莫定基础。[方法]根据GeneBank中报道的饰胶蛋白聚糖基因序列设计扩增Leu155-Val260 cDNA片段结构区引物,将克隆...
[目的]通过克隆并表达饰胶蛋白核心片断Leu155-Val260 cDNA,为进一步研究其是否具有饰胶蛋白聚糖全部或部分生物学活性功能莫定基础。[方法]根据GeneBank中报道的饰胶蛋白聚糖基因序列设计扩增Leu155-Val260 cDNA片段结构区引物,将克隆正确的P155-260肽cDNA采用原核表达载体pBV220进行表达.表达产物进行SDS—PAGE电泳分析。[结果]通过测序证实所克隆的目的片段是饰胶蛋白核心片段Leu155-Val260 cDNA,表达产物经过SDS—PAGE电泳分析,得到大小与预期大小(12kd)一致的目的蛋白,可溶性达到95%以上。[结论]本研究成功地克隆并表达了饰胶蛋白聚糖核心片段Leu155-Val260 cDNA。
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关键词
饰胶蛋白聚糖
克隆
表达
测序分析
暂未订购
多用途基因捕获C3H/10T1/2细胞阳性克隆库的构建及鉴定
被引量：
4
3
作者
王明科
邹仲敏
+1 位作者
罗成基
粟永萍
《第四军医大学学报》
北大核心
2008年第6期508-512,共5页
目的：以10T1／2细胞为间充质干细胞模型，构建用于间充质干细胞分化及恶性转化分子机制等研究的基因捕获阳性克隆库．方法：Dra I线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY后，与pIRES2-EGFP用脂质体共转染phoenix细胞，LacZ染色证明转染...
目的：以10T1／2细胞为间充质干细胞模型，构建用于间充质干细胞分化及恶性转化分子机制等研究的基因捕获阳性克隆库．方法：Dra I线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY后，与pIRES2-EGFP用脂质体共转染phoenix细胞，LacZ染色证明转染成功后收集病毒上清感染10T1／2细胞．经潮霉素筛选获得阳性克隆，为排除假阳性克隆用LacZ部分片段PCR进行鉴定．结果：ROSAFARY脂质体转染phoenix细胞后48h，GFP指示的转染效率约为20％～30％，LacZ染色有大约10％的阳性率．150mg／L潮霉素筛选病毒感染的10T1／2细胞，挑取药物抗性克隆，PCR鉴定后获得43个阳性克隆，LacZ染色5个为捕获基因高表达细胞克隆．结论：基因捕获技术建立非胚胎干细胞的克隆是可行的，成功建立的基因捕获阳性克隆库为应用基因捕获技术揭示成体干细胞分化及恶性转化分子机制奠定了基础．
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关键词
基因捕获
C3H/10T1/2细胞
聚合酶链反应R
β-半乳糖苷酶类
暂未订购
题名
Wnt/β-catenin信号途径促进肌源性干细胞向神经细胞分化
被引量：
15
1
作者
张德龙
王伟
张力
李广
于光明
金秋
机构
辽宁医学院研究生院
锦州市中心医院
辽宁医学院锦州临床学院骨科
出处
《解放军医学院学报》
CAS
2014年第4期383-387,共5页
文摘
目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在肌源性干细胞(muscle derived stem cells,MDSCs)分化过程中的调控作用。方法对照组单纯体外培养MDSCs;实验组采用丙戊酸(valproic acid,VA)诱导培养MDSCs分化为类神经细胞;抑制剂组在实验组的基础上采用Dickkopf-1(DKK-1)和sFRP抑制Wnt/β-catenin信号途径。免疫细胞化学检测各组MDSCs的分化情况。RT-PCR检测MDSCs中Wnt3a mRNA表达的变化,Western blot检测MDSCs中GSK-3β、β-catenin蛋白含量的变化。结果实验组和抑制剂组MDSCs经VA诱导后出现神经细胞分化现象,抑制剂组分化水平明显低于实验组,对照组未见分化。与对照组相比,实验组和抑制剂组Wnt3a mRNA和β-catenin表达水平增加,实验组明显高于抑制剂组。实验组和抑制剂组GSK-3β表达水平低于对照组。结论 MDSCs向类神经细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号通路被激活,Wnt/β-catenin信号通路阻断能够部分抑制MDSCs向类神经细胞分化。
关键词
WNT
β—catenin信号途径
肌源性干细胞
神经分化
Keywords
Wnt/β -catenin signaling pathway
muscle-derived stem cells
neural differentiation
分类号
R33-34 [医药卫生—人体生理学]
暂未订购
题名
饰胶蛋白聚糖核心片段Leu155-Val260 cDNA克隆与表达
被引量：
1
2
作者
刘赴平
刘景春
莫晓燕
机构
东莞市中心血站
西安交通大学环境与化学工程学院
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第B04期56-58,共3页
文摘
[目的]通过克隆并表达饰胶蛋白核心片断Leu155-Val260 cDNA,为进一步研究其是否具有饰胶蛋白聚糖全部或部分生物学活性功能莫定基础。[方法]根据GeneBank中报道的饰胶蛋白聚糖基因序列设计扩增Leu155-Val260 cDNA片段结构区引物,将克隆正确的P155-260肽cDNA采用原核表达载体pBV220进行表达.表达产物进行SDS—PAGE电泳分析。[结果]通过测序证实所克隆的目的片段是饰胶蛋白核心片段Leu155-Val260 cDNA,表达产物经过SDS—PAGE电泳分析,得到大小与预期大小(12kd)一致的目的蛋白,可溶性达到95%以上。[结论]本研究成功地克隆并表达了饰胶蛋白聚糖核心片段Leu155-Val260 cDNA。
关键词
饰胶蛋白聚糖
克隆
表达
测序分析
分类号
R33-34 [医药卫生—人体生理学]
暂未订购
题名
多用途基因捕获C3H/10T1/2细胞阳性克隆库的构建及鉴定
被引量：
4
3
作者
王明科
邹仲敏
罗成基
粟永萍
机构
第三军医大学军事预防医学院放射医学教研室
出处
《第四军医大学学报》
北大核心
2008年第6期508-512,共5页
基金
国家重点基础研究发展规划资助项目(973项目)(2005CB522605)
军队"十一五"归国人员基金(06H029)
文摘
目的：以10T1／2细胞为间充质干细胞模型，构建用于间充质干细胞分化及恶性转化分子机制等研究的基因捕获阳性克隆库．方法：Dra I线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY后，与pIRES2-EGFP用脂质体共转染phoenix细胞，LacZ染色证明转染成功后收集病毒上清感染10T1／2细胞．经潮霉素筛选获得阳性克隆，为排除假阳性克隆用LacZ部分片段PCR进行鉴定．结果：ROSAFARY脂质体转染phoenix细胞后48h，GFP指示的转染效率约为20％～30％，LacZ染色有大约10％的阳性率．150mg／L潮霉素筛选病毒感染的10T1／2细胞，挑取药物抗性克隆，PCR鉴定后获得43个阳性克隆，LacZ染色5个为捕获基因高表达细胞克隆．结论：基因捕获技术建立非胚胎干细胞的克隆是可行的，成功建立的基因捕获阳性克隆库为应用基因捕获技术揭示成体干细胞分化及恶性转化分子机制奠定了基础．
关键词
基因捕获
C3H/10T1/2细胞
聚合酶链反应R
β-半乳糖苷酶类
Keywords
gene trap
C3H/10T1/2 cells
polymerase chainreaction
beta-galactosidase
分类号
R33-34 [医药卫生—人体生理学]
暂未订购
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Wnt/β-catenin信号途径促进肌源性干细胞向神经细胞分化
张德龙
王伟
张力
李广
于光明
金秋
《解放军医学院学报》
CAS
2014
15
暂未订购
2
饰胶蛋白聚糖核心片段Leu155-Val260 cDNA克隆与表达
刘赴平
刘景春
莫晓燕
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
暂未订购
3
多用途基因捕获C3H/10T1/2细胞阳性克隆库的构建及鉴定
王明科
邹仲敏
罗成基
粟永萍
《第四军医大学学报》
北大核心
2008
4
暂未订购
已选择
0
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