目的探究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(C1q/tumor necrosis factor related protein 6,CTRP6)在槲皮素(quercetin,Que)抑制急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后大鼠心肌细胞焦亡中的作用及机制。方法采用冠状动脉左前降支结...目的探究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(C1q/tumor necrosis factor related protein 6,CTRP6)在槲皮素(quercetin,Que)抑制急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后大鼠心肌细胞焦亡中的作用及机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型。首先,将实验分为假手术组(Sham)、AMI组、槲皮素低剂量组(Que-L,25 mg·kg^(-1))、槲皮素高剂量组(Que-H,100 mg·kg^(-1))、福辛普利钠片组(fosinopril,4 mg·kg^(-1)),每组各10只。各组大鼠按照对应的药物剂量或是生理盐水灌胃,1次/d,连续14 d。多普勒超声检测心功能变化,观察大鼠心肌组织病理学变化,Western blot检测焦亡相关蛋白和CTRP6表达。通过以上实验指标检测筛选得出Que最佳给药剂量。随后,将实验分为Sham、AMI、Que(100 mg·kg^(-1))、Que+si-NC组、Que+si-CTRP6,每组各10只。干预14 d后,检测心肌梗死、心肌损伤指标、细胞焦亡、CTRP6及PI3K/Akt通路蛋白表达。结果与Sham组相比,AMI组大鼠LVEDV、LVESV明显增加,EF、FS明显降低(P<0.05),心肌组织出现明显病理损伤,纤维化程度增加,心肌梗死面积增加,LDH、CK-MB、cTnI水平,TUNEL阳性细胞比率升高,NLRP3、cleaved caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达增加,CTRP6表达,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值降低(均P<0.05)。与AMI组相比,Que-L和Que-H大鼠心功能指标以及心肌组织病理损伤程度减轻,心肌梗死面积降低,LDH、CK-MB、cTnI水平,TUNEL阳性率降低( P <0.05),细胞焦亡相关蛋白表达降低,CTRP6及PI3K/Akt通路蛋白表达增加( P <0.05),且呈剂量相关性。与Que组相比,Que+si-CTRP6组大鼠上述指标变化均得到明显逆转。 结论 Que能够抑制心肌细胞焦亡,改善AMI大鼠心肌梗死,其机制与上调CTRP6表达,促进PI3K/Akt信号通路活化相关。展开更多
目的探究皮层肌动蛋白结合蛋白(Cortactin)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的病理性心肌肥大的调控作用及其机制。方法采用ISO刺激新生大鼠心肌细胞(neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs)24 h,在细胞水平建立心肌肥大模型;C57BL/6...目的探究皮层肌动蛋白结合蛋白(Cortactin)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的病理性心肌肥大的调控作用及其机制。方法采用ISO刺激新生大鼠心肌细胞(neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs)24 h,在细胞水平建立心肌肥大模型;C57BL/6小鼠皮下注射ISO 1周,在动物水平建立心肌肥大模型。采用RT-qPCR检测mRNA的变化;免疫印迹法检测相应蛋白含量的变化;免疫荧光法检测Cortactin的亚细胞定位及表达量的变化;采用腺病毒感染的方法过表达Cortactin,通过转染小干扰RNA敲低Cortactin。结果在细胞和动物水平上,成功建立ISO诱导的心肌肥大模型,均观察到ISO引起Cortactin和N型钙黏连蛋白(N-cadherin)水平降低;过表达Cortactin可逆转ISO导致的N-cadherin蛋白水平的降低及心肌细胞肥大反应;敲低Cortactin则显示相反的效应。结论Cortactin可能联合N-cadherin通过增强心肌细胞之间的连接,发挥抗心肌肥大的作用。展开更多
文摘目的探究皮层肌动蛋白结合蛋白(Cortactin)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的病理性心肌肥大的调控作用及其机制。方法采用ISO刺激新生大鼠心肌细胞(neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs)24 h,在细胞水平建立心肌肥大模型;C57BL/6小鼠皮下注射ISO 1周,在动物水平建立心肌肥大模型。采用RT-qPCR检测mRNA的变化;免疫印迹法检测相应蛋白含量的变化;免疫荧光法检测Cortactin的亚细胞定位及表达量的变化;采用腺病毒感染的方法过表达Cortactin,通过转染小干扰RNA敲低Cortactin。结果在细胞和动物水平上,成功建立ISO诱导的心肌肥大模型,均观察到ISO引起Cortactin和N型钙黏连蛋白(N-cadherin)水平降低;过表达Cortactin可逆转ISO导致的N-cadherin蛋白水平的降低及心肌细胞肥大反应;敲低Cortactin则显示相反的效应。结论Cortactin可能联合N-cadherin通过增强心肌细胞之间的连接,发挥抗心肌肥大的作用。
