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枫杨总黄酮调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及凋亡的作用及机制 被引量：1
1
作者 包卓玛 侯孜明 +4 位作者 江露 李玮怡 张宗星 刘道忠 袁林 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第4期816-823,共8页
背景:研究证实枫杨总黄酮能够改善胶原诱导的大鼠关节炎水平,但它对成纤维样滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及对相关细胞功能的影响尚缺少研究。目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探究枫杨总黄酮对脂多糖诱导的成纤维样滑膜... 背景:研究证实枫杨总黄酮能够改善胶原诱导的大鼠关节炎水平,但它对成纤维样滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及对相关细胞功能的影响尚缺少研究。目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探究枫杨总黄酮对脂多糖诱导的成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及凋亡的作用及机制。方法:成纤维样滑膜细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+枫杨总黄酮低、中、高剂量组(10,20,40μg/mL)、脂多糖+Wnt通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组、脂多糖+DKK1+枫杨总黄酮高剂量组(40μg/mL)。采用CCK-8法检测枫杨总黄酮对成纤维样滑膜细胞活力的影响并筛选最终用药浓度和时间;流式细胞术检测成纤维样滑膜细胞的凋亡情况;细胞划痕实验、EDU染色和细胞克隆实验检测成纤维样滑膜细胞的迁移和增殖能力;蛋白质免疫印迹检测成纤维样滑膜细胞Wnt3a、β-catenin、细胞致瘤基因、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果与结论:(1)与对照组相比,当枫杨总黄酮质量浓度>40μg/mL时细胞活力明显下降(P<0.01),故选择药物剂量≤40μg/mL进行后续实验;(2)与脂多糖组相比,枫杨总黄酮低、中、高剂量组细胞划痕愈合率、细胞克隆形成率、EDU阳性细胞数均显著降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05-0.01);(3)蛋白质免疫印迹结果显示,与脂多糖组相比,枫杨总黄酮低、中、高剂量组显著抑制细胞Wnt3a、β-catenin、细胞致瘤基因、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、Bcl-2蛋白表达,并促进Bax蛋白表达(P<0.01);(4)与单用Wnt通路抑制剂DKK1组相比,DKK1+枫杨总黄酮高剂量联合干预后,能够明显增强DKK1对细胞Wnt3a、β-catenin、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、Bcl-2蛋白表达的抑制作用和对Bax蛋白表达的促进作用(P<0.01);(5)结果表明,枫杨总黄酮可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路下调脂多糖诱导的成纤维样滑膜细胞增殖、迁移能力,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 枫杨总黄酮 成纤维样滑膜细胞 类风湿关节炎 Wnt/β-catenin 凋亡 增殖
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骨髓间充质干细胞通过抑制NLRP3/GSDMD介导的细胞焦亡减轻重症急性胰腺炎炎症与组织损伤
2
作者 李亚希 金晶 +2 位作者 张雅婧 孟唤男 赵航 《陆军军医大学学报》 北大核心 2026年第3期261-271,共11页
目的探索骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在抑制焦亡通路治疗重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型的作用机制。方法冲洗骨髓腔法分离提取4周龄SPF级雄性SD大鼠[体质量(100±20)g]骨髓MSCs,并进... 目的探索骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在抑制焦亡通路治疗重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型的作用机制。方法冲洗骨髓腔法分离提取4周龄SPF级雄性SD大鼠[体质量(100±20)g]骨髓MSCs,并进行培养鉴定。将24只6~8周龄SPF级雄性大鼠[体质量(200±20)g]采用随机数字表法随机分为4组(n=6):假手术组、SAP模型组、乌司他丁组、MSCs治疗组。SAP模型组、乌司他丁组、MSCs治疗组采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠制备大鼠SAP模型,SAP模型组于造模后12 h注射100μL PBS;乌司他丁组于模型制备完成后立即腹腔注射乌司他丁溶液(5×10^(4) U/kg);MSCs治疗组于造模后12 h注射MSCs细胞悬液(5×10~6个/kg);假手术组切开腹腔并数次翻动胰腺后,关闭腹腔。HE染色比较各组间胰腺组织形态,并进行病理学评分;试剂盒检测血清淀粉酶、脂肪酶水平;ELISA法检测血清炎症因子IL-10、IL-1β、TNF-α水平;透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察胰腺腺泡细胞超微形态相关变化;免疫荧光观察胰腺组织NLRP3、GSDMD、caspase-1蛋白表达情况;qRT-PCR法检测胰腺组织NLRP3、GSDMD、caspase-1的mRNA含量;Western blot法检测胰腺组织NLRP3、GSDMD、GSDMD-N、caspase-1、cleaved caspase-1、IL-1β的蛋白相对表达量。结果骨髓MSCs具有成纤维细胞样纺锤体形状,并贴附在培养板的壁上;CD29(99.22%)呈高表达,CD45(0.42%)呈低表达;具有成脂、成骨分化能力,细胞状态良好。与假手术组相比,SAP模型组在胰腺组织病理学评分、血清淀粉酶、脂肪酶、炎症因子等方面均有显著差异(P<0.0001)。与SAP模型组相比,乌司他丁组、MSCs治疗组胰腺组织病理学评分、血清淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、TNF-α水平均降低(P<0.001),IL-10水平升高(P<0.05);且MSCs治疗组上述指标较乌司他丁组明显好转(P<0.05)。TEM显示MSCs治疗组腺泡细胞线粒体嵴恢复,线粒体形态改变,内质网肿胀减少;且与乌司他丁组相比,MSCs治疗组线粒体与内质网损伤程度减轻。免疫荧光结果显示,与SAP模型组相比,MSCs治疗组和乌司他丁组的胰腺组织NLRP3、GSDMD、caspase-1表达量下降(P<0.0001)。Western blot结果示,与SAP模型组相比,MSCs治疗组和乌司他丁组胰腺组织NLRP3、GSDMD、GSDMD-N、caspase-1、cleaved caspase-1、IL-1β蛋白相对表达量均有不同程度下降(P<0.0001)。qPR-PCR结果示,与SAP模型组相比,MSCs治疗组和乌司他丁组胰腺组织NLRP3、GSDMD、caspase-1 mRNA表达水平明显下降(P<0.01);且与乌司他丁组相比,MSCs治疗组上述指标均下降更为显著(P<0.001)。结论MSCs减轻炎症反应,减少胰腺组织损伤,可通过抑制NLRP3/GSDMD/IL-1β通路改善腺泡细胞焦亡并缓解SAP。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 间充质干细胞 焦亡 腺泡细胞
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人羊膜间充质干细胞通过TGF-β1/Smad通路抑制EMT与纤维化修复子宫内膜损伤 被引量：1
3
作者 谢婷 黄燕明 +5 位作者 牛嘉颖 刘荣霞 梁思雨 张瑶 陈璐 盛瑸樾 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第21期2688-2697,共10页
目的探究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)对子宫内膜损伤的修复作用及机制。方法两酶消化法分离hAMSCs,取P3代细胞通过流式细胞术检测表面分子并鉴定其三系分化能力。将18只8~9周龄体质量250~280 g... 目的探究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)对子宫内膜损伤的修复作用及机制。方法两酶消化法分离hAMSCs,取P3代细胞通过流式细胞术检测表面分子并鉴定其三系分化能力。将18只8~9周龄体质量250~280 g的未生育雌性SD大鼠通过随机数字表法分为3组(n=6):正常组(control组)、模型组(IUA组)、hAMSCs组。采用机械及脂多糖感染法建立SD大鼠宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUA)模型。造模2周后hAMSCs组双侧宫角移植0.2 mL hAMSCs(1.0×10^(6)/μL),IUA组双侧宫角注射等量PBS。移植2周后处死大鼠,采用HE染色观察子宫内膜厚度和腺体数量;Masson染色观察子宫内膜纤维化面积;RT-qPCR方法检测子宫内膜组织中TGF-β1、Smad3、Smad7以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)标志性因子E-cadherin、Vimentin、纤维化因子α-SMA、子宫内膜雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)等的mRNA表达水平;Western blot方法检测子宫内膜组织中上述因子的蛋白表达水平。结果所获细胞经细胞表面分子及分化能力的鉴定符合hAMSCs特征。与control组相比,IUA组子宫内膜厚度降低,腺体数量减少,纤维化面积增加;与IUA组相比,hAMSCs组子宫内膜厚度及腺体数量增加,纤维化面积减少。IUA组子宫内膜中纤维化相关因子TGF-β1、Smad3、Vimentin、α-SMA的mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01);纤维化抑制分子Smad7、EMT标志物E-cadherin以及子宫内膜ER、PR的mRNA及蛋白表达水平明显下调(P<0.01)。与IUA组相比,hAMSCs组上述纤维化相关因子的mRNA表达明显下调(P<0.01),Smad7、E-cadherin、ER及PR的mRNA表达水平则显著上调(P<0.01);hAMSCs组TGF-β1、Smad3、α-SMA的蛋白表达水平明显下降(P<0.05),Smad7、PR的蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。结论hAMSCs宫腔内移植可促进子宫内膜损伤修复,并可能通过TGF-β1/Smad7信号通路抑制子宫内膜EMT和纤维化。 展开更多
关键词 宫腔粘连 人羊膜间充质干细胞 TGF-Β1/SMAD 子宫内膜纤维化
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红花来源纳米囊泡通过调控SIPA1L2泛素化促进内皮细胞自噬 被引量：1
4
作者 罗烨 杨灵 +2 位作者 陈俊羽 翁建新 柯晓 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期303-310,共8页
目的:探讨红花来源纳米囊泡(Carthamus tinctorius L.-derived nanovesicles,CDNVs)在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)介导的内皮细胞损伤中的保护作用及其调节机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC... 目的:探讨红花来源纳米囊泡(Carthamus tinctorius L.-derived nanovesicles,CDNVs)在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)介导的内皮细胞损伤中的保护作用及其调节机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用ox-LDL诱导内皮细胞损伤模型;分为正常对照(normal control,NC)组、oxLDL组(HUVECs加入100 mg/L ox-LDL处理24 h构建内皮细胞损伤模型或内皮细胞炎症模型)和CDNVs+ox-LDL组(先加入40 mg/L CDNVs处理1 h后再加入100 mg/L ox-LDL共培养24 h。采用EdU增殖染色实验观察HUVECs增殖情况;采用细胞凋亡实验检测HUVECs的凋亡水平;RT-qPCR检测信号诱导增殖相关蛋白1样蛋白2(signal-induced proliferation-associated 1-like protein 2,SIPA1L2)mRNA的表达变化;Western blot实验检测自噬蛋白及SIPA1L2蛋白表达水平的变化;免疫共沉淀检测SIPA1L2的泛素化程度。结果:(1)成功分离提纯CDNVs,其鉴定为类圆形、具有双层膜结构的纳米级别囊泡;(2)CDNVs可促进ox-LDL干预下HUVECs的增殖水平(P<0.05),并抑制凋亡(P<0.05);(3)CDNVs可抑制ox-LDL干预下HUVECs的SIPA1L2蛋白表达水平(P<0.05),并促进其自噬(P<0.05);(4)CDNVs促进SIPA1L2蛋白泛素化,并通过泛素-蛋白酶体途径降低SIPA1L2的蛋白水平(P<0.05)。结论:CDNVs通过介导SIPA1L2泛素化促进内皮细胞自噬而发挥保护作用。 展开更多
关键词 红花 纳米囊泡 自噬 SIPA1L2蛋白 泛素化
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基于CRISPR-Cas9敲除系统的胚胎干细胞基态多能性退出调控基因的筛选与鉴定
5
作者 杨艺 阮艳 +3 位作者 张俊磊 田衍平 余梦 李红丽 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第18期2223-2236,共14页
目的系统性鉴定调控胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)基态多能性退出的关键基因,为深入解析多能性状态转换及早期细胞命运决定机制提供新靶点和理论依据。方法利用全基因组Brie敲除文库感染Nanog-绿色荧光蛋白(Nanog-green fluores... 目的系统性鉴定调控胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)基态多能性退出的关键基因,为深入解析多能性状态转换及早期细胞命运决定机制提供新靶点和理论依据。方法利用全基因组Brie敲除文库感染Nanog-绿色荧光蛋白(Nanog-green fluorescent protein,Nanog-GFP)报告基因标记的ESC,在白血病抑制因子/血清(leukemia inhibitory factor/serum,LIF/S)条件下持续培养14 d;通过流式细胞术分选Nanog-GFP^(+)(基态)与Nanog-GFP^(-)(始发态)细胞群,提取基因组DNA进行高通量测序;采用MAGeCK软件分析GFP^(-)/Input、GFP^(+)/Input与GFP^(+)/GFP^(-)组的差异基因,利用Metascape和基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)进行功能富集分析;基于筛选结果构建候选基因敲除模型,通过细胞形态观察、Nanog阳性率检测、克隆形成实验及分子标志物检测评估候选基因功能。结果在GFP^(+)/Input筛选中,鉴定出2921个负向变化基因(主要富集于RNA代谢、细胞周期等基础生命过程)和1393个正向变化基因(主要富集于神经系统发育、糖代谢和脉管系统发育等过程)。在GFP^(-)/Input筛选中,鉴定到2765个负向变化基因(主要富集于RNA代谢、细胞周期等基础生命过程)和1303个正向变化基因(主要富集于神经发育、细胞存活、内皮迁移等过程)。在GFP^(+)/GFP^(-)筛选中,鉴定出1001个负向变化基因[主要参与细胞应激响应和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路抑制]和983个正向变化基因[主要参与成纤维细胞生长因子/细胞外信号调节激酶(fibroblast growth factor/extracellular signal-regulated kinase,FGF/ERK)信号通路和糖代谢过程],其中不仅包括已知的多能性维持因子(如Nanog、Nr5a2、Klf2、Klf4)及多能性退出相关基因(如Gata6、Grb2、Zeb1、Fgfr1),还包括一些在基态多能性退出过程中功能尚未明确的基因(如Dmrt1、Rxra、Zbtb14和Tmem41b)。候选基因功能验证显示,瞬时敲除Dmrt1、Tmem41b和Hic2的ESC中Nanog+细胞比例显著升高(P<0.01),表明这些基因可能抑制基态多能性退出。Dmrt1稳定敲除使ESC呈现更基态的表型,表现为克隆形态变紧密、呈穹隆状,未分化克隆比例增加(P<0.01),基态多能性标志基因(如Nanog、Nr5a2、Dppa3)表达上调(P<0.01),而始发态标志基因(如Fgf5、Lefty1、Dnmt3b)表达下调(P<0.01)。回复表达Dmrt1可逆转上述表型。结论本研究通过全基因组CRISPR-Cas9筛选鉴定出调控ESC基态多能性退出的候选基因集,明确Dmrt1在促进ESC基态多能性退出过程中的关键作用。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9 胚胎干细胞 基态 始发态 多能性退出
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黄芩素对Naive CD4^(+)T细胞向Th1和Treg细胞分化的影响 被引量：1
6
作者 佟慧敏 王爽 李玲 《精准医学杂志》 2025年第1期8-12,18,共6页
目的探讨黄芩素对Naive CD4^(+)T细胞向Th1和Treg细胞分化的影响。方法从6~8周龄的BALB/c雄性小鼠脾脏中分选出Naive CD4^(+)T细胞,并将其分为A~F组。A组细胞接种在包被有抗小鼠CD3抗体的孔板中,在含抗小鼠CD28抗体的培养基中培养72 h;... 目的探讨黄芩素对Naive CD4^(+)T细胞向Th1和Treg细胞分化的影响。方法从6~8周龄的BALB/c雄性小鼠脾脏中分选出Naive CD4^(+)T细胞,并将其分为A~F组。A组细胞接种在包被有抗小鼠CD3抗体的孔板中,在含抗小鼠CD28抗体的培养基中培养72 h;B组细胞在A组基础上再加入白细胞介素-2(IL-2)、IL-12和抗小鼠IL-4抗体;C组细胞在B组的基础上再加入黄芩素。D组细胞的培养体系与A组相同;E组细胞在D组的基础上再加入IL-2和转化生长因子-β(TGF-β);F组细胞在E组的基础上再加入黄芩素。通过流式细胞术检测A~C组中Th1细胞的比例和D~F组中Treg细胞的比例;通过RT-qPCR检测A~C组细胞中T盒子转录因子(T-bet)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的相对表达水平和D~F组中叉头框蛋白P3(Foxp3)和IL-10的相对表达水平;通过免疫荧光染色检测A~C组中Th1细胞阳性率和D~F组中Treg细胞阳性率。结果流式细胞术检测结果显示,C组Th1细胞比例显著低于B组(F=46.91,q=7.95,P<0.05),F组Treg细胞比例显著高于E组(F=145.20,q=8.64,P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,C组细胞中T-bet、IFN-γ、TNF-α的相对表达水平显著低于B组(F=15.77~862.50,q=7.05~26.34,P<0.05),F组细胞中Foxp3和IL-10的相对表达水平显著高于E组(F=38.25、49.24,q=4.65、7.64,P<0.05)。免疫荧光结果显示,C组Th1细胞阳性率显著低于B组(F=11.64,q=4.50,P<0.05),F组Treg细胞阳性率显著高于E组(F=20.31,q=4.64,P<0.05)。结论黄芩素对Naive CD4^(+)T细胞向Th1细胞分化具有抑制作用,对Naive CD4^(+)T细胞向Treg细胞分化具有促进作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 TH1细胞 T淋巴细胞 调节性 细胞分化 体外研究
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瘤内和瘤周影像组学模型评估宫颈鳞癌分化程度的价值
7
作者 李传贵 苏亚英 +2 位作者 左惠玲 周义 李娇娇 《放射学实践》 北大核心 2025年第6期749-756,共8页
目的:探讨瘤内和瘤周影像组学特征评估宫颈鳞癌分化程度的价值。方法:回顾性分析132例宫颈鳞癌患者的临床及影像资料,基于动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)提取影像组学特征,使用相关性分析和最小绝对收缩与选择算子(LASSO)算法进行降... 目的:探讨瘤内和瘤周影像组学特征评估宫颈鳞癌分化程度的价值。方法:回顾性分析132例宫颈鳞癌患者的临床及影像资料,基于动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)提取影像组学特征,使用相关性分析和最小绝对收缩与选择算子(LASSO)算法进行降维筛选,计算影像组学评分(Radscore)并建立logistic模型。对临床参数进行单因素和多因素logistic回归并建立临床模型,然后联合Radscore构建联合模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线、400次5折交叉验证评价模型的区分度和稳定性,以校准曲线、决策曲线分析(DCA)评估模型的校准度和临床适用性。计算综合判别改善指数(IDI)定量评估模型之间预测效能的改善情况。结果:ROC曲线显示瘤内模型、瘤周模型、瘤内-瘤周模型、临床模型和联合模型预测鳞癌分化程度的AUC分别为0.858、0.845、0.872、0.759和0.901,交叉验证表明模型均具有较高的稳定性和一致性。校准曲线显示模型均具有良好的校准度,DCA显示各个模型均具有一定临床应用价值,联合模型的临床净获益最大。IDI结果表明相比于瘤内模型,瘤内-瘤周模型的预测效能无明显提升,而较瘤周模型提升了10.1%。结论:结合肿瘤和瘤周影像组学特征可以更全面地表征肿瘤的生物学特性,对辅助临床医师制定个性化诊疗方案具有重要意义。 展开更多
关键词 影像组学 宫颈癌 细胞分化 机器学习 肿瘤微环境
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NLRC3在血管内皮细胞中的功能初探及在冠心病中的诊断价值 被引量：3
8
作者 古晓东 翁锐强 +2 位作者 赵俊丽 李霞 刘苏东 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第4期661-668,共8页
目的:探讨NLR家族含CARD域蛋白3(NLR family CARD domain containing 3,NLRC3)在血管内皮细胞中的功能及在冠心病中的诊断价值。方法:取20只8周龄雄性ApoE^(-/-)C57BL/6小鼠,分为实验组及对照组(各10只),实验组采用高脂饮食喂养8周诱导... 目的:探讨NLR家族含CARD域蛋白3(NLR family CARD domain containing 3,NLRC3)在血管内皮细胞中的功能及在冠心病中的诊断价值。方法:取20只8周龄雄性ApoE^(-/-)C57BL/6小鼠,分为实验组及对照组(各10只),实验组采用高脂饮食喂养8周诱导动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS),对照组采用普通饮食喂养;采用RT-qPCR及免疫荧光检测主动脉NLRC3的表达;采用白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β;10μg/L)刺激人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),检测NLRC3的表达变化;采用慢病毒载体或质粒载体在内皮细胞中过表达或敲减NLRC3的表达并用IL-1β诱导炎症,采用RT-qPCR和ELISA检测NLRC3对内皮细胞炎症的影响,采用Western blot和免疫荧光检测NLRC3对内皮细胞NF-κB信号通路的调控;采用ELISA检测冠心病患者及对照患者血浆NLRC3的表达水平,通过受试者工作特征曲线评估检测NLRC3在冠心病诊断中的价值。结果:AS小鼠主动脉中可观察到明显的粥样斑块病变;NLRC3在AS小鼠主动脉弓的表达较对照组小鼠下调;NLRC3在IL-1β刺激的HUVECs中显著下调,并呈现时间依赖性(P<0.01)和剂量依赖性(P<0.01);过表达NLRC3显著抑制IL-1β刺激的内皮细胞IL-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoatbactant protein-1,MCP-1)、p-p65及p-IκBα的表达(P<0.01),而敲减NLRC3则增加内皮细胞IL-6、IL-8、MCP-1、p-p65及p-IκBα的表达(P<0.01);NLRC3在冠心病患者血浆中的表达水平显著低于对照组,其诊断冠心病的曲线下面积为0.851,95%CI为0.785~0.918(P<0.01),当临界值为1.605μg/L时,诊断灵敏度为93.8%,特异度为71.3%。结论:NLRC3可能通过抑制NF-κB通路调节内皮炎症影响AS的发展,并可作为冠心病诊断的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 NLR家族含CARD域蛋白3 内皮细胞 炎症 冠心病 NF-ΚB信号通路
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辣椒来源外泌体样纳米囊泡通过调控Epac1/Rap1a通路抑制成纤维细胞活化
9
作者 杨灵 罗烨 +3 位作者 吕峰 陈俊羽 阮焕均 柯晓 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第12期2330-2338,共9页
目的:探讨辣椒来源外泌体样纳米囊泡(capsicum-derived exosome-like nanovesicles,CDELNs)在血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)介导的成纤维细胞活化中的作用及其机制。方法:从SD乳大鼠心脏组织中分离原代心脏成纤维细胞,分为对照(c... 目的:探讨辣椒来源外泌体样纳米囊泡(capsicum-derived exosome-like nanovesicles,CDELNs)在血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)介导的成纤维细胞活化中的作用及其机制。方法:从SD乳大鼠心脏组织中分离原代心脏成纤维细胞,分为对照(control,CN)组、Ang II组(加入5μmol/L Ang II处理24 h构建成纤维细胞活化模型)、CDELNs组(1×10^(11)particles/L CDELNs与5μmol/L Ang II共培养24 h)和8CPT组(在CDELNs组基础上加入10μmol/L Epac1激动剂8-CPT-2Me-cAMP共培养24 h)。采用共聚焦显微镜检测成纤维细胞对CDELNs的摄取;采用细胞免疫荧光检测细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α⁃smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达;RT-qPCR和Western blot检测纤维化蛋白标志物[I型胶原(collagen type I,Col I)和α-SMA]及cAMP效应分子(Epac1和Rap1a)的mRNA和蛋白表达水平。结果:(1)CDELNs呈典型杯状囊泡结构,平均粒径为(144.4±62.3)nm,平均电位为(−7.10±0.54)mV,符合外泌体形态学特征。(2)CDELNs可被心脏成纤维细胞摄取,12 h摄取率可达(90.96±0.23)%。(3)CDELNs可抑制Ang II干预下原代心脏成纤维细胞活力(P<0.01),并抑制细胞迁移(P<0.01)。(3)CDELNs可抑制Ang II干预下α-SMA、Col I、Epac1和Rap1蛋白表达水平(P<0.01)。(4)加入Epac1激动剂逆转CDELNs对成纤维细胞活化的抑制作用(P<0.05)。结论:CDELNs通过调控Epac1/Rap1a通路抑制心脏成纤维细胞活化。 展开更多
关键词 辣椒来源外泌体样纳米囊泡 心脏成纤维细胞 Epac1/Rap1a信号通路
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lncRNA与METTL3在肿瘤中相互调控的研究进展 被引量：2
10
作者 许晗 张毅 +3 位作者 王鑫 魏子辰 赵明超 庞磊 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第8期1639-1645,共7页
RNA的表观遗传修饰在肿瘤的发生和发展中扮演着关键角色。其中,由甲基转移酶3(METTL3)催化的N6-甲基腺苷(m6 A)修饰,是最为常见的RNA修饰之一,对调控RNA的转录、稳定性和翻译至关重要。同时,长链非编码RNA(lncRNA)作为一类重要的调控分... RNA的表观遗传修饰在肿瘤的发生和发展中扮演着关键角色。其中,由甲基转移酶3(METTL3)催化的N6-甲基腺苷(m6 A)修饰,是最为常见的RNA修饰之一,对调控RNA的转录、稳定性和翻译至关重要。同时,长链非编码RNA(lncRNA)作为一类重要的调控分子,也在肿瘤的发生和发展中发挥着关键作用。然而,lncRNA与METTL3之间的相互作用及其在肿瘤中的功能机制尚未被充分理解。因此,本文旨在对lncRNA与METTL3在肿瘤中的相互调控关系进行综述,以期为深入理解肿瘤发生机制提供新的思路和理论基础。 展开更多
关键词 RNA修饰 N6-甲基腺苷 METTL3 长链非编码RNA 肿瘤
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大黄多糖治疗三硝基苯磺酸诱导的溃疡性结肠炎的机制研究 被引量：1
11
作者 王玉波 郭晨辰 +1 位作者 李高娜 杨丽莹 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期640-643,649,共5页
目的:探讨大黄多糖(RTP)在改善肠道菌群治疗溃疡性结肠炎(UC)中的作用。方法:构建UC大鼠模型,分为正常对照组、模型组和RTP治疗组。采用HE染色观察大鼠结肠黏膜层、黏膜下层和肌层的完整性;ELISA检测血清中IL-8、TNF-α、IL-6及IL-1β... 目的:探讨大黄多糖(RTP)在改善肠道菌群治疗溃疡性结肠炎(UC)中的作用。方法:构建UC大鼠模型,分为正常对照组、模型组和RTP治疗组。采用HE染色观察大鼠结肠黏膜层、黏膜下层和肌层的完整性;ELISA检测血清中IL-8、TNF-α、IL-6及IL-1β的浓度;16S rRNA测序分析大鼠肠道菌群组成及差异。结果:UC大鼠出现便溏、便血、肛门污秽、畏寒、精神萎靡等症状,RTP治疗能够明显改善该症状,并降低DAI评分(P<0.05);HE染色发现UC大鼠结肠结构明显坏死,炎症细胞黏膜下浸润,RTP治疗可明显促进黏膜上皮的修复和再生;RTP可显著抑制UC大鼠炎症反应,下调炎症因子的表达(P<0.05)。UC大鼠肠道菌群组成和丰度较正常对照组差异较大,葡萄球菌明显增加,而柯林斯菌、Allobaculum、衣原体和霍尔德罗氏菌明显减少;RTP治疗可改善肠道菌群,降低葡萄球菌的丰度,增加柯林斯菌、Allobaculum、衣原体和霍尔德罗氏菌的丰度。结论:RTP可能通过抑制炎症和改善肠道菌群治疗大鼠UC。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 肠道微生物 大黄多糖 16S测序
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大鼠主动脉血管内皮细胞组织块天花板培养法提取及鉴定
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作者 张帆 李柏霖 +2 位作者 池茗 刘海琴 唐元瑜 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2025年第1期61-65,85,共6页
目的运用组织块天花板培养法体外分离大鼠主动脉血管内皮细胞(aortic vascular endothelial cells,AECs),为进一步开展高血压动脉粥样硬化、肺动脉高压等血管性疾病研究提供重要的工具细胞。方法取60 g SD大鼠1只,无菌分离出胸、腹主动... 目的运用组织块天花板培养法体外分离大鼠主动脉血管内皮细胞(aortic vascular endothelial cells,AECs),为进一步开展高血压动脉粥样硬化、肺动脉高压等血管性疾病研究提供重要的工具细胞。方法取60 g SD大鼠1只,无菌分离出胸、腹主动脉,剔除血管外筋膜、脂肪组织后,将内膜外翻,予0.1%Ⅱ型胶原酶预消化15 min后,将其剪碎成米粒状大小,采用“组织块天花板法”进行原代培养。通过细胞形态学观察、免疫细胞化学染色法检测第Ⅷ因子相关抗原及血管形成实验鉴定所培养的目的细胞。结果培养2 d后,少量短梭形细胞从血管组织块边缘爬出;4 d后“岛屿状”的细胞集落形成;6~8 d后集落融合成片,呈典型的单层、“鹅卵石样”、镶嵌式排列;第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色显示胞质淡染成棕红色,阳性细胞率达99%以上;血管形成实验为阳性。结论“组织块天花板培养法”能够简单、高效地提取原代大鼠AECs。 展开更多
关键词 大鼠 主动脉血管内皮细胞 组织块天花板培养法 第Ⅷ因子相关抗原 血管形成实验
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海洛因成瘾诱导肌萎缩的风险归因机制
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作者 邓云锋 吴先双 +1 位作者 杨旭东 杨威 《中国药物依赖性杂志》 2025年第3期179-184,190,共7页
骨骼肌作为人体最大的氨基酸储存库,其质量维持对于人类正常代谢和健康状态至关重要。海洛因是经典的阿片类毒品,越来越多的证据显示,大量摄入海洛因会诱导人体骨骼肌发生质量丢失与功能衰退,但其机制尚不明确。本文基于骨骼萎缩的蛋白... 骨骼肌作为人体最大的氨基酸储存库,其质量维持对于人类正常代谢和健康状态至关重要。海洛因是经典的阿片类毒品,越来越多的证据显示,大量摄入海洛因会诱导人体骨骼肌发生质量丢失与功能衰退,但其机制尚不明确。本文基于骨骼萎缩的蛋白稳态调控信号通路,首次探讨海洛因摄入在其中发挥的功能角色及作用机制,以期为维持海洛因滥用人群的骨骼肌健康状态及开发靶向骨骼肌的特异性脱瘾疗法提供理论依据和研究思路。 展开更多
关键词 骨骼肌 海洛因 蛋白 萎缩 信号通路
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人间充质干细胞向内皮细胞定向诱导分化的研究进展
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作者 余洋洋 祖丽卡尔·萨迪克 +4 位作者 居尔艾提·克热木 徐天佑 张颖 布丽德尔西·革民江 谢敬辉 《黑龙江医学》 2025年第15期1903-1905,1909,共4页
在体外,间充质干细胞可被诱导分化为内皮细胞,有望在缺血性疾病的临床治疗、血管组织工程及再生医学等领域发挥作用。介绍近期国内外有关间充质干细胞的生物学特征、不同组织来源的间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的研究进展。
关键词 间充质干细胞 内皮分化 血管 内皮细胞
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大鼠骨髓基质细胞的生长特点和在诱骨条件下的成骨特性 被引量：18
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作者 韩君 陈锐 +3 位作者 陈槐卿 邓力 唐方 田卫 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期235-239,共5页
目的　研究大鼠骨髓基质细胞 (r MSCs)的生长特点和在诱导条件下的成骨特性。方法　使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓基质细胞进行培养 ,保留贴壁细胞传代 ,观察、测试在培养液中添加成骨诱导剂地塞米松 (Dex) 10 - 8mol/ L、β-甘油磷酸... 目的　研究大鼠骨髓基质细胞 (r MSCs)的生长特点和在诱导条件下的成骨特性。方法　使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓基质细胞进行培养 ,保留贴壁细胞传代 ,观察、测试在培养液中添加成骨诱导剂地塞米松 (Dex) 10 - 8mol/ L、β-甘油磷酸钠 (β- GP) 10 mm ol/ L,抗坏血酸 (AA) 5 0 μg/ ml条件下骨髓基质细胞的生长变化和成骨分化。结果　形态学观察表明 ,r MSCs贴壁细胞呈集落生长 ,有成纤维细胞样外观。利用 MTT法和流式细胞术 (FCM)测定增殖的结果表明 ,传代次数增加 ,r MSCs的增殖活性升高。成骨诱导剂促进骨髓基质细胞的增殖 ,而且对多次传代细胞促增殖作用明显。成骨诱导剂促进骨髓基质细胞成骨 ,在诱导 3周时即出现明显的钙化结节。组织化学染色结果显示 ,非诱导条件下 MSCs的碱性磷酸酶 (AL P)水平会随传代而升高。传 3代 r MSCs的 AL P的表达较弱 ,诱导一周后 AL P的表达明显升高 ,超过未加诱导剂的传一代大鼠成骨细胞 (OB)的 AL P表达。结论　本实验表明所培养的 r MSCs仍处于低分化水平 ,具有骨祖细胞的特性。 展开更多
关键词 大鼠 骨髓基质细胞 成骨诱导 细胞增殖 成骨分化 rMSCs
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壳聚糖抑制高糖诱导的脂质过氧化及血管内皮细胞与单核细胞黏附 被引量：12
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作者 王春明 董磊 +2 位作者 刁华佳 陈江宁 张峻峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1054-1058,共5页
目的研究壳聚糖(chitosan)对高糖诱导细胞产生脂质过氧化及血管内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用。方法建立人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)高糖培养模型,实验分空白对照组、高糖模型组、高糖+壳聚糖组,测定细胞产生羟自由基(OH.)及脂质... 目的研究壳聚糖(chitosan)对高糖诱导细胞产生脂质过氧化及血管内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用。方法建立人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)高糖培养模型,实验分空白对照组、高糖模型组、高糖+壳聚糖组,测定细胞产生羟自由基(OH.)及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)量;同时取单核巨噬细胞系Raw264.7,以荧光染料Rhodamin123孵育后加入以上各组,荧光摄像及比色检测单核细胞黏附数量;RT-PCR法检测血管细胞黏附分子(VCAM-1)mRNA变化。结果与空白对照组比较,高糖引起HUVEC产生OH.及MDA含量增加,黏附于HUVEC的Raw264.7数量以及VCAM-1表达升高;壳聚糖可呈浓度依赖性地抑制上述现象,但对细胞存活无明显影响。结论壳聚糖可能通过减轻自由基与脂质过氧化损伤,下调血管内皮细胞VCAM-1的表达,从而抑制高糖诱导的单核细胞与内皮细胞黏附。 展开更多
关键词 壳聚糖 自由基 脂质过氧化 内皮细胞 单核细胞 黏附 血管细胞黏附分子
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蛋白激酶与蛋白磷酸酶在细胞增殖分化中的机制研究 被引量：15
17
作者 刘善荣 刘厚奇 +3 位作者 戚中田 赵兰娟 王凤玫 冯根生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期550-552,共3页
细胞生长发育和癌变过程中有众多复杂的信号转导途径以及信号分子参与,其中最基本的生化反应过程是系列蛋白质(信号分子)的磷酸化.
关键词 蛋白激酶 蛋白磷酸酶 细胞增殖 细胞分化
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感觉神经肽SP对创面表皮干细胞迁移影响的实验研究 被引量：16
18
作者 黄晖 赖西南 +2 位作者 王正国 付小兵 王丽丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期884-886,共3页
目的　探讨感觉神经肽P物质 (SP)对创面表皮干细胞迁移的影响。方法　新生 3～ 4天Wistar大鼠 90只 ,随机分为正常组、SP组、辣椒素组 ,采用BrdU标记干细胞结合检测表皮干细胞特异性标记蛋白K19和β1整合素表达 ,观察皮肤全层缺损后 2 ... 目的　探讨感觉神经肽P物质 (SP)对创面表皮干细胞迁移的影响。方法　新生 3～ 4天Wistar大鼠 90只 ,随机分为正常组、SP组、辣椒素组 ,采用BrdU标记干细胞结合检测表皮干细胞特异性标记蛋白K19和β1整合素表达 ,观察皮肤全层缺损后 2 1天伤口局部应用SP对伤口表皮干细胞迁移及伤口愈合的影响 ,并与预先注射辣椒素毁损感觉神经元 (辣椒素组 )和单纯皮肤损伤 (正常组 )比较。结果　致伤后 18天SP组伤口闭合 ,较正常组提前 3天 ,而辣椒素组仅闭合创面面积的 2 5 5 4%。伤后SP组创缘及肉芽组织出现较多表皮干细胞 ;而抑制感觉神经肽SP的辣椒素组仅在创缘观察到少量表皮干细胞 ;正常组在肉芽组织中尚未发现表皮干细胞 ,在创缘的表皮干细胞数介于SP组和辣椒素组之间。结论　感觉神经肽SP能明显加快创面愈合速度 ,并具有诱导表皮干细胞向创缘和肉芽组织中迁移的作用。 展开更多
关键词 表皮干细胞 感觉神经肽 P物质 溴脱氧尿苷 伤口愈合 迁移
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骨髓基质细胞条件培养液对中脑神经干细胞分化的影响 被引量：14
19
作者 顾平 娄淑杰 +4 位作者 王铭维 王彦永 鲍璇 何成 路长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期295-297,共3页
目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。 方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组... 目的 :探讨骨髓基质细胞条件培养液诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元的机制。 方法 :采用骨髓基质细胞条件培养液培养中脑神经干细胞 7d ,通过免疫细胞化学染色方法鉴别和计数神经元的数量 ,并与自然分化组、骨髓基质细胞膜片段组、骨髓基质细胞固定组以及骨髓基质细胞共培养组相比较。 结果 :用成年大鼠骨髓基质细胞的条件培养液体外培养新生大鼠中脑神经干细胞 ,神经干细胞分化为神经元比例 [(40 .5± 14 .5 ) % ]明显高于自然分化组 [(16 .6± 10 .5 ) % ]、骨髓基质细胞膜片段组 [(2 0 .8± 12 .5 ) % ]以及骨髓基质细胞固定组 ,但与骨髓基质细胞共培养组 [(36 .1± 9.7) % ]相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。 结论 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 条件液 中脑神经干细胞 分化
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FGF10及其受体对胎儿皮肤附件形成的诱导作用 被引量：14
20
作者 姜笃银 付小兵 +2 位作者 孙同柱 陈伟 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期583-585,I002,共4页
探讨成纤维细胞生长因子 10 (FGF10 )及其受体 (Bek)在胎儿皮肤附件 (SA)形成中的表达特征及其生物学意义。采用病理学技术和免疫组化方法检测FGF10、Bek、细胞角蛋白 19(CK19)、Bcl 2和细胞增殖核抗原 (PCNA)在 13 0块分别来自 2 6例... 探讨成纤维细胞生长因子 10 (FGF10 )及其受体 (Bek)在胎儿皮肤附件 (SA)形成中的表达特征及其生物学意义。采用病理学技术和免疫组化方法检测FGF10、Bek、细胞角蛋白 19(CK19)、Bcl 2和细胞增殖核抗原 (PCNA)在 13 0块分别来自 2 6例不同胎龄 ( 8～3 1周)胎儿 5个不同部位 (头、下颌、耳垂、肩和胸骨柄)的皮肤组织中的表达水平。结果显示 ,除胎龄 (E) 8周胎儿缺乏FGF10和Bek蛋白表达外 ,所有蛋白在E11周以后的皮肤内都有阳性表达。在E11周 ,表皮下成团分布的间质细胞过表达FGF10、PCNA和Bcl 2 ,表皮细胞和周皮细胞则所有蛋白均呈强阳性表达 ;在E13周时表皮细胞局灶性增殖形成SA胚芽 ,并逐渐向真皮内生长、分化和迁移。提示间质细胞旁分泌的FGF10与上皮细胞膜Bek特异性结合 。 展开更多
关键词 受体 成纤维细胞生长因子 皮肤 胎儿
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