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间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定技术及应用 被引量:2
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作者 刘宇 龚森怡 +4 位作者 杨丽华 李伟风 胡玉雯 闫钦彪 郭美锦 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第1期194-203,共10页
背景:间充质干细胞外泌体因低免疫原性和靶向递送效果在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用,已在疾病的治疗中临床应用。目的:综述间充质干细胞外泌体的分离纯化、鉴定方法及应用进展,促进间充质干细胞外泌体大规模制备技术的开发与... 背景:间充质干细胞外泌体因低免疫原性和靶向递送效果在细胞通讯和表观遗传调控中发挥重要作用,已在疾病的治疗中临床应用。目的:综述间充质干细胞外泌体的分离纯化、鉴定方法及应用进展,促进间充质干细胞外泌体大规模制备技术的开发与临床转化。方法:以“外泌体,间充质干细胞,分离纯化,表征,临床应用”为中文检索词,“exosome,extracellular vesicles,mesenchymal stem cells,isolation,characterization,application”为英文检索词,检索中国知网、PubMed和Web of Science数据库于2024年9月之前发表的文献,排除与主题相关性较差、年代久远及重复的文章,最后纳入109篇文献进行综述。结果与结论:①综述了近年来外泌体分离纯化方法,根据原理的不同比较了超速离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、聚合物沉淀法、免疫亲和法、微流控法及其他新方法的特点;②外泌体的鉴定方法可以分为物理与生化分析,从外泌体的形状大小及特征蛋白等方面进行表征;③间充质干细胞外泌体因具有免疫调节、跨越生物屏障等能力在医疗美容、损伤修复、癌症治疗等多个领域具有广泛应用;④外泌体由于自身结构复杂、缺少通用分离技术、稳定性较差等缺点而难以在短时间内实现临床转化。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 细胞外囊泡 分离纯化 制备工艺 特征鉴定 临床应用 疾病治疗 工程化外泌体
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大麻素受体Ⅰ对人根尖牙乳头干细胞神经向分化的影响
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作者 刘紫薇 尼加提·吐尔逊 +2 位作者 殷瑞 李淑慧 周晶 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第1期93-100,共8页
背景:研究证实大麻素受体Ⅰ能够促进神经干细胞和间充质干细胞的增殖及神经向分化,也可以调节人根尖牙乳头干细胞的增殖和矿化能力。然而,关于大麻素受体Ⅰ过表达对人根尖牙乳头干细胞神经分化的影响,目前国内外相关研究较少。目的:探... 背景:研究证实大麻素受体Ⅰ能够促进神经干细胞和间充质干细胞的增殖及神经向分化,也可以调节人根尖牙乳头干细胞的增殖和矿化能力。然而,关于大麻素受体Ⅰ过表达对人根尖牙乳头干细胞神经分化的影响,目前国内外相关研究较少。目的:探讨大麻素受体Ⅰ在体外环境下对人根尖牙乳头干细胞神经向分化能力的影响。方法:收集因正畸治疗需要拔除的根尖尚未完全发育成熟的健康第三磨牙,采用组织块法和酶消化法进行原代人根尖牙乳头干细胞的分离培养。通过慢病毒介导的转染技术,将大麻素受体Ⅰ基因引入人根尖牙乳头干细胞中,设置空白对照组、阴性对照组和过表达大麻素受体Ⅰ组,通过Western blot验证过表达大麻素受体Ⅰ慢病毒转染效果;设置对照组、阴性对照组、过表达大麻素受体Ⅰ组和过表达大麻素受体Ⅰ+AM251(大麻素受体Ⅰ拮抗剂)组,分别在成神经诱导第1,5,10天采用CCK-8法检测细胞增殖能力,成神经诱导第10天采用qRT-PCR检测TH、NeuroD-1、NCAM1基因表达水平以及免疫荧光检测Nestin、TUBB3蛋白表达。结果与结论:①与空白对照组和阴性对照组相比,过表达大麻素受体Ⅰ组大麻素受体Ⅰ蛋白表达量明显升高,差异有显著性意义(P<0.05);②与空白对照组和阴性对照组相比,成神经诱导第5,10天时,过表达大麻素受体Ⅰ组人根尖牙乳头干细胞的增殖能力最强(P<0.05);③与空白对照组和阴性对照组相比,过表达大麻素受体Ⅰ组人根尖牙乳头干细胞中NeuroD-1、NCAM1、TH mRNA表达量显著增加,Nestin和TUBB3荧光强度显著增强(P<0.05);④与过表达大麻素受体Ⅰ组相比,过表达大麻素受体Ⅰ+AM251组人根尖牙乳头干细胞增殖能力显著下降,NeuroD-1、NCAM1、TH mRNA表达量以及Nestin、TUBB3荧光强度显著降低(P<0.05)。结果表明:过表达大麻素受体Ⅰ能促进人根尖牙乳头干细胞的增殖及神经向分化。 展开更多
关键词 人根尖牙乳头干细胞 牙乳头 大麻素受体Ⅰ 神经分化 增殖 慢病毒 AM251 神经损伤
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Small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells enhance perineurial cell proliferation and migration via the TGF-β/SMAD/HAS2 pathway
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作者 Yiming Huo Bing Xiao +8 位作者 Haojie Yu Yang Xu Jiachen Zheng Chao Huang Ling Wang Haiyan Lin Jiajun Xu Pengfei Yang Fang Liu 《Neural Regeneration Research》 2026年第5期2060-2072,共13页
Peripheral nerve defect repair is a complex process that involves multiple cell types;perineurial cells play a pivotal role.Hair follicle neural crest stem cells promote perineurial cell proliferation and migration vi... Peripheral nerve defect repair is a complex process that involves multiple cell types;perineurial cells play a pivotal role.Hair follicle neural crest stem cells promote perineurial cell proliferation and migration via paracrine signaling;however,their clinical applications are limited by potential risks such as tumorigenesis and xenogeneic immune rejection,which are similar to the risks associated with other stem cell transplantations.The present study therefore focuses on small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells,which preserve the bioactive properties of the parent cells while avoiding the transplantation-associated risks.In vitro,small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells significantly enhanced the proliferation,migration,tube formation,and barrier function of perineurial cells,and subsequently upregulated the expression of tight junction proteins.Furthermore,in a rat model of sciatic nerve defects bridged with silicon tubes,treatment with small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells resulted in higher tight junction protein expression in perineurial cells,thus facilitating neural tissue regeneration.At 10 weeks post-surgery,rats treated with small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells exhibited improved nerve function recovery and reduced muscle atrophy.Transcriptomic and micro RNA analyses revealed that small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells deliver mi R-21-5p,which inhibits mothers against decapentaplegic homolog 7 expression,thereby activating the transforming growth factor-β/mothers against decapentaplegic homolog signaling pathway and upregulating hyaluronan synthase 2 expression,and further enhancing tight junction protein expression.Together,our findings indicate that small extracellular vesicles derived from hair follicle neural crest stem cells promote the proliferation,migration,and tight junction protein formation of perineurial cells.These results provide new insights into peripheral nerve regeneration from the perspective of perineurial cells,and present a novel approach for the clinical treatment of peripheral nerve defects. 展开更多
关键词 hair follicle neural crest stem cells HAS2 MIGRATION miR-21-5p perineurial cells proliferation peripheral nerve injury SMAD7 small extracellular vesicles transforming growth factor-β/SMAD signaling pathway
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舒芬太尼通过调节HIF-1α-Kcnq1ot1影响缺氧-复氧导致的心肌细胞损伤 被引量:1
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作者 邓方方 李继勇 +4 位作者 张力 邹高锐 陈治军 辛欢 乐薇 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期500-507,共8页
目的探讨舒芬太尼(sufentanil,Suf)能否通过调节缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)-KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,Kcnq1ot1)改善缺氧-复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)导致的... 目的探讨舒芬太尼(sufentanil,Suf)能否通过调节缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)-KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,Kcnq1ot1)改善缺氧-复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)导致的心肌细胞损伤。方法生物信息学分析预测HIF-1α与Kcnq1ot1的相互作用。将H9c2细胞分为Ctrl组、H/R组、Suf组;oe-HIF-1α组、oe-HIF-1α+Suf组、sh-HIF-1α组、sh-HIF-1α+Kcnq1ot1组。MTT法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞上清液中的CK-MB与HBDH浓度,Western blot分析细胞中HIF-1α蛋白表达,逆转录定量PCR(RT-qPCR)测定Kcnq1ot1的mRNA表达水平。构建心肌缺血/再灌注大鼠模型,评估Suf对体内心肌缺血/再灌注的治疗潜力。结果生物信息学分析发现,HIF-1α与Kcnq1ot1之间存在直接的相互作用。与Ctrl组相比,H/R组的H9c2细胞活性降低,细胞凋亡增加,CK-MB与HBDH浓度上调,HIF-1α与Kcnq1ot1的表达增强(均P<0.05)。转染oe-HIF-1α后,进一步加剧了上述结果(均P<0.05);而Suf干预抑制了以上结果(均P<0.05)。与H/R组相比,sh-HIF-1α组的细胞活性明显改善,凋亡减少,CK-MB与HBDH浓度降低(均P<0.05);转染Kcnq1ot1则部分逆转了这些结果(均P<0.05)。动物实验发现,Suf能够改善大鼠心肌缺血/再灌注损伤。结论Suf通过抑制HIF-1α-Kcnq1ot1改善心肌H/R损伤。 展开更多
关键词 舒芬太尼 缺氧诱导因子-Α KCNQ1重叠转录物1 心肌缺氧-复氧损伤 缺血/再灌注损伤 心肌损伤
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牙源性间充质干细胞分泌生物活性物质用于骨修复的治疗潜力
5
作者 张钊伟 陈欧子乐 +1 位作者 白明茹 汪成林 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第1期163-174,共12页
背景:牙源性间充质干细胞由于具备较强的增殖能力、成骨分化能力与免疫调节特性,是骨组织修复的理想干细胞来源。但一些干细胞的异体应用仍存在潜在的致癌作用和免疫排斥风险。近年来许多研究关注到牙源性间充质干细胞分泌的生物活性物... 背景:牙源性间充质干细胞由于具备较强的增殖能力、成骨分化能力与免疫调节特性,是骨组织修复的理想干细胞来源。但一些干细胞的异体应用仍存在潜在的致癌作用和免疫排斥风险。近年来许多研究关注到牙源性间充质干细胞分泌的生物活性物质介导的旁分泌效应可促进骨组织修复,其中包括可溶性因子和细胞外囊泡。目的:综述牙源性间充质干细胞通过旁分泌作用修复骨缺损的研究进展。方法:以“牙源性间充质干细胞,旁分泌,成骨,条件培养基,细胞外囊泡;dental mesenchymal stem cell,paracrine,osteogenesis,conditioned medium,extracellular vesicle”为检索词,检索中国知网、PubMed、Elsevier ScienceDirect数据库2019-2024年发表的相关文献,最终纳入104篇文献进行综述。结果与结论:①牙源性间充质干细胞条件培养基中含有多种有益于骨修复的生物活性因子,不仅通过骨钙素、骨桥蛋白、骨形态发生蛋白、牙本质涎磷蛋白等促进骨形成的调节因子对骨组织修复直接发挥促进作用,还通过神经营养因子、血管内皮生长因子、免疫调节与抗炎因子对骨组织修复间接发挥促进作用;②牙源性间充质干细胞衍生细胞外囊泡除包被有牙源性条件培养基中的一些细胞因子,还含有各种miRNA,通过促进成骨、促进血管形成、调节免疫细胞以及炎症控制等对骨修复发挥促进作用,还能通过各种组织工程的方式搭载于各种支架材料中实现缓释或控释,以发挥更好的效果。 展开更多
关键词 牙源性间充质干细胞 旁分泌 成骨 分泌组 条件培养基 外泌体 骨组织修复 工程化干细胞
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铜死亡研究进展可视化分析:全球视野下的热点与前沿
6
作者 李瑞颖 夏翃 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第17期4529-4541,共13页
背景:铜死亡作为一种新兴的细胞死亡方式,近年来受到广泛关注。然而,目前对于铜死亡的全球研究态势,尤其是在不同国家和学术群体中的研究重点与发展趋势尚缺乏系统性的认识。为了更全面地把握铜死亡领域的研究进展,亟需进行多数据库、... 背景:铜死亡作为一种新兴的细胞死亡方式,近年来受到广泛关注。然而,目前对于铜死亡的全球研究态势,尤其是在不同国家和学术群体中的研究重点与发展趋势尚缺乏系统性的认识。为了更全面地把握铜死亡领域的研究进展,亟需进行多数据库、多角度的文献计量分析。目的:通过文献计量学方法系统分析铜死亡领域的研究现状、热点及发展趋势。方法:采用文献计量学方法,结合CiteSpace和VOSviewer可视化分析工具,分别对国际权威的Web of Science核心合集数据库与中国知网数据库(CNKI)中2022-2024年间的1378篇铜死亡相关文献进行分析,包括年发文量、科研合作网络、关键词共现聚类与热点变动特征以及高被引文献。通过对比分析这两个数据库的数据,旨在揭示全球视野下铜死亡研究的整体态势。结果与结论:铜死亡研究呈现快速增长趋势,中国发文量居首,以上海交通大学、中南大学等为核心机构。研究主题集中于铜死亡机制、肿瘤治疗应用(化学动力学疗法)及与铁死亡的交叉调控。关键词突现分析表明“免疫微环境”“肿瘤治疗”是研究热点。机器学习基因预测模型和单细胞测序技术正在推动精准医学发展。英文研究多集中于机制探索和技术应用,其研究方法、技术路线和热点方向对正处于快速发展期的国内铜死亡研究具有重要的借鉴意义。尤其是在肿瘤治疗等重大疾病领域开展跨学科合作和多中心临床转化研究,有望为包括中国人群在内的恶性肿瘤等重大疾病诊疗提供更具针对性和有效性的新策略。 展开更多
关键词 铜死亡 文献计量学 可视化分析 CITESPACE VOSviewer 研究进展 肿瘤治疗 免疫浸润
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人骨髓间充质干细胞增龄衰老不依赖于内源性反转录病毒的介导
7
作者 王亚萍 高天芸 王斌 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第1期10-20,共11页
背景:人体增龄衰老可能是由于体内各种干细胞的衰老和耗竭。骨髓间充质干细胞具有重要的生理功能并对多种疾病展现出一定的疗效,研究骨髓间充质干细胞的衰老及机制具有重要意义。目的:探讨人骨髓间充质干细胞是否伴随供者年龄的增加而... 背景:人体增龄衰老可能是由于体内各种干细胞的衰老和耗竭。骨髓间充质干细胞具有重要的生理功能并对多种疾病展现出一定的疗效,研究骨髓间充质干细胞的衰老及机制具有重要意义。目的:探讨人骨髓间充质干细胞是否伴随供者年龄的增加而呈现衰老表型,并进一步检测内源性反转录病毒是否驱动骨髓间充质干细胞的增龄衰老,为干细胞衰老机制研究提供新参考。方法:采用流式细胞术、β-半乳糖苷酶染色、qPCR、免疫印迹法及EdU荧光成像对不同年龄段的骨髓间充质干细胞进行衰老表征研究。收集不同年龄段供者的骨髓间充质干细胞及细胞培养上清,通过qPCR法检测人内源性反转录病毒的含量,进一步采用高灵敏的液滴式数字PCR检测细胞培养上清中内源性反转录病毒颗粒的表达,并用ELISA检测不同年龄段骨髓血浆样本中的内源性反转录病毒含量。结果与结论:骨髓间充质干细胞具有明显的增龄衰老,包括显著的形态学改变、β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例升高、衰老标志物P16和P21蛋白表达升高,LMNB1蛋白表达下降,细胞增殖能力减弱。不同年龄段骨髓间充质干细胞中的内源性反转录病毒含量无显著性差异,培养上清中几乎不存在内源性反转录病毒颗粒,不同年龄段骨髓血浆样本中内源性反转录病毒无显著性差异。结果表明,人骨髓间充质干细胞具有正常生理性增龄衰老,但不是通过内源性反转录病毒的异常激活介导的,可能具有更加复杂的驱动机制。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 衰老机制 细胞衰老 骨髓血浆 内源性反转录病毒 内源性反转录病毒颗粒 液滴式数字PCR
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骨形态发生蛋白7在小鼠肾发育中的时空表达
8
作者 孙亚洁 赵欣晨 薄双玲 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第5期1156-1161,共6页
背景:骨形态发生蛋白7主要在肾脏合成,在肾脏发育的不同阶段均有表达,但其表达的时空分布以及与肾脏发生发育的关系尚未见系统报道。目的:观察骨形态发生蛋白7在小鼠肾脏不同发育时期的表达,从而探索骨形态发生蛋白7与肾脏发生发育的潜... 背景:骨形态发生蛋白7主要在肾脏合成,在肾脏发育的不同阶段均有表达,但其表达的时空分布以及与肾脏发生发育的关系尚未见系统报道。目的:观察骨形态发生蛋白7在小鼠肾脏不同发育时期的表达,从而探索骨形态发生蛋白7与肾脏发生发育的潜在联系。方法:通过免疫组织化学技术、体视学方法和蛋白免疫印迹法,对胚龄(E)12,14,16,18 d及生后日龄(N)1,3,7,14,24,40,70 d小鼠肾脏组织中骨形态发生蛋白7的表达进行观察和分析。结果与结论:①免疫组织化学结果显示,在肾脏发育早期,骨形态发生蛋白7主要表达于生肾区以及未成熟的肾小体,随后定位在成熟肾小体及其周围的远曲小管,且表达范围逐渐增加;N40 d后,骨形态发生蛋白7在肾间质中出现阳性表达;②体视学和蛋白免疫印迹结果显示,随着肾脏的发育,骨形态发生蛋白7的表达量逐渐降低,N7 d降至最低,随后缓慢升高;③结果表明,在肾脏发育过程中,骨形态发生蛋白7表达具有显著的时空特异性,推测可能与肾小体和远曲小管的发育及成熟有关。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白7 肾脏 发育 小鼠 肾小体 远曲小管 工程化组织构建
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雌雄大鼠脂肪间充质干细胞代谢、增殖、分化及向血管平滑肌细胞分化的差异性
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作者 王秋花 杜孜玮 +2 位作者 王文双 赵冬梅 张晓晴 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1687-1698,共12页
背景:在血管壁结构中,血管平滑肌细胞通过调节血管张力维持压力稳定,确保组织血液供应。血管平滑肌细胞具有高度可塑性,是血管再生的关键细胞类型。然而,成熟的血管平滑肌细胞难以获取且体外扩增能力有限。相比之下,脂肪间充质干细胞易... 背景:在血管壁结构中,血管平滑肌细胞通过调节血管张力维持压力稳定,确保组织血液供应。血管平滑肌细胞具有高度可塑性,是血管再生的关键细胞类型。然而,成熟的血管平滑肌细胞难以获取且体外扩增能力有限。相比之下,脂肪间充质干细胞易于获取、扩增能力强,并具备向血管平滑肌细胞分化的潜能。目前,雌雄来源脂肪间充质干细胞的代谢活性、增殖、集落形成等生物学特性及向血管平滑肌细胞分化的能力是否存在差异仍需深入研究。目的:比较雌性和雄性大鼠脂肪间充质干细胞的代谢活性、增殖、分化能力等生物学特征及向血管平滑肌细胞分化潜能的差异。方法:①分别从雌、雄大鼠腹股沟区获取脂肪组织,采用胶原酶消化法提取脂肪间充质干细胞,通过流式细胞术检测表面抗原(CD90、CD29、CD45),并利用WST-1实验、细胞倍增实验、集落形成实验及成脂、成骨、成软骨分化实验比较雌雄大鼠脂肪间充质干细胞的生物学特征。②用5 ng/mL转化生长因子β诱导雌雄大鼠脂肪间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化,通过qRT-PCR检测α-SMA、SM22α、Calponin、Caldesmon、SMMHC、Smoothelin基因表达,免疫荧光染色检测α-SMA、Caldesmon、Smoothelin蛋白表达,并通过胶原晶格收缩实验评估血管平滑肌细胞的收缩功能。结果与结论:①原代培养3 d后,显微镜下观察雌性和雄性大鼠脂肪干细胞形态均一,呈纺锤状;②流式细胞术检测大鼠脂肪间充质干细胞高表达CD90、CD29,低表达CD45;③与雄性大鼠脂肪间充质干细胞相比,雌性大鼠脂肪间充质干细胞代谢活性更好(P<0.05);④雌性和雄性大鼠脂肪间充质干细胞在倍增时间、集落形成、成脂、成骨、成软骨分化能力方面相似;⑤向血管平滑肌细胞诱导分化后,在基因层面,相较于雄性大鼠脂肪间充质干细胞,雌性大鼠脂肪间充质干细胞α-SMA、Caldesmon和SMMHC高表达(P<0.05);在蛋白层面,相较于雄性大鼠脂肪间充质干细胞,雌性大鼠脂肪间充质干细胞α-SMA高表达(P<0.05);在收缩功能层面,雌性和雄性大鼠脂肪间充质干细胞在收缩功能上相似。由此可见,在代谢活性和向血管平滑肌细胞分化方面,雌性大鼠脂肪间充质干细胞更有优势。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 血管平滑肌细胞 诱导分化 雌性 雄性 小口径人工血管
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蛇床子素改善高糖环境下骨髓间充质干细胞的成骨分化功能
10
作者 李镇宇 张思明 +1 位作者 柏家祥 朱晨 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1641-1648,共8页
背景:糖尿病患者的高血糖状态会损害骨髓间充质干细胞的功能,导致骨愈合障碍等并发症。蛇床子素作为一种天然香豆素类化合物,具有促进成骨分化的潜在作用。目的:探讨蛇床子素对高糖环境下骨髓间充质干细胞成骨分化功能的影响。方法:采用... 背景:糖尿病患者的高血糖状态会损害骨髓间充质干细胞的功能,导致骨愈合障碍等并发症。蛇床子素作为一种天然香豆素类化合物,具有促进成骨分化的潜在作用。目的:探讨蛇床子素对高糖环境下骨髓间充质干细胞成骨分化功能的影响。方法:采用CCK-8方法确定高糖环境影响骨髓间充质干细胞的最适浓度及作用时间,以及蛇床子素的最佳作用浓度和时间;将骨髓间充质干细胞分为4组:空白组仅添加基础培养基培养,对照组添加成骨诱导培养基培养,高糖组在成骨诱导培养基的基础上添加25 mmol/L葡萄糖,蛇床子素组在高糖组的基础上添加80μg/mL蛇床子素。采用碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色定量分析评估骨髓间充质干细胞的成骨分化表型;实时荧光定量PCR和免疫荧光技术检测成骨相关因子的表达变化。结果与结论:①CCK-8实验确定使用25 mmol/L高糖培养基培养3 d构建体外高糖环境模型,蛇床子素的最佳作用质量浓度为80μg/mL,最佳作用时间为3 d;②在高糖环境下,蛇床子素显著增强了骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力;③与高糖组相比,蛇床子素组Runx2、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原和骨钙素基因表达显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001);④与高糖组相比,蛇床子素组Runx2和骨钙素蛋白表达显著增加(P<0.0001)。结果表明,蛇床子素在高糖环境中可改善骨髓间充质干细胞的成骨分化功能。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 蛇床子素 高糖环境 成骨分化 糖尿病 骨愈合
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神经化肠黏膜组织工程模型的构建及体外评价
11
作者 王明琦 冯诗雅 +4 位作者 韩银河 于朋鑫 郭丽娜 贾子萱 王秀丽 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第4期892-900,共9页
背景:组织工程化肠道模型的体外构建在肠道再生与肠道疾病研究中均扮演重要角色。肠道神经系统和肠上皮屏障相互作用共同维持机体稳态,是组织工程化肠道仿生构建中的研究热点。目的:体外构建可模拟体内肠道神经系统的仿生模型。方法:以... 背景:组织工程化肠道模型的体外构建在肠道再生与肠道疾病研究中均扮演重要角色。肠道神经系统和肠上皮屏障相互作用共同维持机体稳态,是组织工程化肠道仿生构建中的研究热点。目的:体外构建可模拟体内肠道神经系统的仿生模型。方法:以带有绒毛结构的丝素蛋白为支架,待人诱导神经干细胞与胶原固化后(培养7 d)加入肠上皮细胞(Caco-2细胞和HT29-MTX-E12细胞)培养3 d,构建肠道上皮细胞与神经细胞共培养体系(肠上皮细胞-人诱导神经干细胞共培养组),同时将单独培养的人诱导神经干细胞或肠上皮细胞接种于丝素蛋白支架设为对照。通过扫描电镜与苏木精-伊红染色观察细胞形态,Live/Dead细胞活性染色检测细胞活性,β-微管蛋白免疫荧光染色检测人诱导神经干细胞分化情况,微绒毛蛋白、蔗糖酶-异麦芽糖酶、紧密连接蛋白1、E-钙黏蛋白及黏蛋白2免疫荧光染色检测肠上皮组织学特性与屏障功能,阿利新蓝染色检测肠上皮细胞分泌黏液的功能,碱性磷酸酶染色检测肠上皮细胞的分化情况,同时进行蔗糖酶-异麦芽糖酶、紧密连接蛋白1及碱性磷酸酶RT-qPCR检测。结果与结论:实验成功构建了带有绒毛结构的神经化肠黏膜共培养模型,丝素蛋白支架上的神经干细胞和肠上皮细胞均具有良好的细胞活性。神经化后的肠上皮细胞蔗糖酶-异麦芽糖酶、碱性磷酸酶含量增多,同时紧密连接蛋白1表达水平上调。结果表明,神经化的仿生肠上皮模型有利于肠黏膜上皮细胞的功能成熟和屏障功能形成。 展开更多
关键词 肠黏膜 组织工程 肠道神经系统 肠上皮细胞 工程化组织构建
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利拉鲁肽通过激活Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠心肌损伤的影响 被引量:2
12
作者 高媛 王宇亮 王少兰 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期538-543,共6页
目的探究利拉鲁肽通过激活Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠心肌损伤的影响。方法将40只大鼠分为正常组、糖尿病模型组、二甲双胍组、利拉鲁肽组,建模后正常组与模型组不干预,二甲双胍组灌胃二甲双胍250 g·kg^(-1),利拉鲁肽组注射0.3... 目的探究利拉鲁肽通过激活Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠心肌损伤的影响。方法将40只大鼠分为正常组、糖尿病模型组、二甲双胍组、利拉鲁肽组,建模后正常组与模型组不干预,二甲双胍组灌胃二甲双胍250 g·kg^(-1),利拉鲁肽组注射0.324 g·kg^(-1)利拉鲁肽,均每天1次,共1个月。采用ELISA法检测血糖、胰岛素水平;HE染色观察病理学变化;免疫印迹及荧光定量PCR分别检测Nrf2、HO-1、NLRP3、IL-1β、caspase-1表达。结果与模型组比较,各治疗组空腹血糖、NLRP3、caspase-1、IL-1β降低,胰岛素、Nrf2、HO-1升高(P<0.05),其中利拉鲁肽组效果更明显。结论利拉鲁肽对糖尿病心肌具有保护作用,其机制可能与调节Nrf2/HO-1信号通路、改善细胞焦亡等因素相关。 展开更多
关键词 糖尿病 利拉鲁肽 NRF2 HO-1 细胞焦亡 心肌损伤
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组织处理致组织体积变化对体视学估计影响的校正 被引量:2
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作者 杨正伟 《川北医学院学报》 2025年第8期955-967,共13页
器官内组织结构的量(体积、表面积、长度、数量等)可用体视学(形态定量)方法通过测量组织切片进行估计,但切片组织通常经过了固定、脱水、包埋、切片和染色等处理,测量结果反映的是结构处理后的定量特征。组织处理后结构的体积等可能会... 器官内组织结构的量(体积、表面积、长度、数量等)可用体视学(形态定量)方法通过测量组织切片进行估计,但切片组织通常经过了固定、脱水、包埋、切片和染色等处理,测量结果反映的是结构处理后的定量特征。组织处理后结构的体积等可能会发生改变,从而影响体视学估计结果;为了校正结果以反映结构处理前的定量特征,需要分别获得器官组织处理前和处理后的体积以估计组织处理后总的体积变化以及组织内所测结构的相应变化。本文较系统、全面地论述了用处理前后器官体积校正体视学估计的理论基础,如何获得这些体积,如何运用它们校正不同的体视学结果,什么情况下需要单独的校正实验,以及如何进行校正实验。本文的一个重要且新颖之处是引入了一个新概念:组织处理后的器官体积应该分为实际体积和虚拟体积两种,基于三维空间内(实际切片组织内)的测量和基于二维平面上(切片平面上)的测量的体视学估计,要分别基于实际体积和虚拟体积进行校正。 展开更多
关键词 组织处理 包埋 切片 组织学 形态定量 体视学
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姜黄素衍生物C0818对非小细胞肺癌细胞的作用及机制
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作者 范莹娟 刘洋 许建华 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第12期2260-2268,共9页
目的研究姜黄素衍生物C0818对非小细胞肺癌细胞迁移、凋亡及增殖的影响。方法MTT法和CFSE染色法体外检测C0818对细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位、细胞凋亡及细胞周期;利用T... 目的研究姜黄素衍生物C0818对非小细胞肺癌细胞迁移、凋亡及增殖的影响。方法MTT法和CFSE染色法体外检测C0818对细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位、细胞凋亡及细胞周期;利用Transwell实验和划痕实验评估C0818对细胞运动迁移能力的影响;Western blot法检测凋亡、迁移相关蛋白的表达水平。结果C0818呈时间和剂量依赖性地抑制NCI-H1299和NCI-H460细胞的增殖,阻滞细胞周期于G 2/M期;C0818破坏细胞线粒体膜电位,随着C0818浓度(0.4~1.6μmol·L^(-1))的增加,细胞凋亡率呈现出明显上升的趋势,并伴随着促凋亡蛋白Bax、cleaved PARP、cleaved caspase-3/8上调,抗凋亡蛋白Bcl-2下调;C0818抑制细胞的迁移能力,能够有效抑制N-cadherin、β-catenin及Vimentin等与侵袭转移相关蛋白的表达。结论C0818诱导细胞caspase介导和ROS依赖性的凋亡,抑制细胞增殖,具有较强的体外抗转移能力。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 线粒体 半胱氨酸蛋白酶 线粒体活性氧
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锌指DHHC型棕榈酰转移酶5在组织稳态和疾病中的作用及机制
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作者 暨凯忠 孔一豪 +2 位作者 支忆清 金莹莹 陈建权 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第17期4430-4445,共16页
背景:蛋白质S-棕榈酰化是一种可逆的翻译后修饰,直接影响蛋白质的稳定性、亚细胞定位及与其他分子的相互作用。在哺乳动物细胞中,棕榈酰化由23-24种含有Asp-His-His-Cys(DHHC)共同基序的棕榈酰基转移酶催化。近年来,S-棕榈酰化在疾病中... 背景:蛋白质S-棕榈酰化是一种可逆的翻译后修饰,直接影响蛋白质的稳定性、亚细胞定位及与其他分子的相互作用。在哺乳动物细胞中,棕榈酰化由23-24种含有Asp-His-His-Cys(DHHC)共同基序的棕榈酰基转移酶催化。近年来,S-棕榈酰化在疾病中的重要作用引起了广泛关注,越来越多的研究试图通过靶向棕榈酰化及其催化酶,探索治疗疾病的新策略。其中,锌指DHHC型棕榈酰转移酶5(Palmitoyl transferase 5,ZDHHC5)是棕榈酰基转移酶家族中较为特殊的成员,它主要定位于质膜,通过催化棕榈酸酯添加到多种蛋白质底物上,参与多种生物过程。目的:简要介绍棕榈酰化的生物化学过程及其检测方法,阐明ZDHHC5在胞质分裂、突触形成与可塑性、细胞程序性死亡等生理过程中的作用,并总结近年来ZDHHC5在呼吸系统疾病、癌症等病理方面的研究进展。方法:由第一作者以“ZDHHC5、DHHC5或Palmitoyl transferase 5”为英文检索词,以“棕榈酰基转移酶5”为中文检索词,运用计算机在PubMed和CNKI数据库检索近年来有关于ZDHHC5研究的相关文献,检索时限设置为2011年1月至2025年3月,筛选后进行系统分析,对ZDHHC5在组织稳态和疾病中的作用机制进行归纳与总结。结果与结论:ZDHHC5作为一种关键的动态棕榈酰化修饰酶,通过直接修饰PCDH7、TrpM7、δ-catenin、NCX1、NOD2、MLKL等关键底物,或与GOLGA7等蛋白形成复合物,调控细胞分裂与分化、离子通量调节、突触形成与可塑性、细胞自噬与程序性死亡、细胞内膜运输、细胞黏附、少突胶质细胞及髓腔鞘形成,以及免疫信号调节等多种重要生理过程。在病理状态下,ZDHHC5的异常表达可能通过影响EZH2、SSTR5、INCENP等蛋白的棕榈酰化水平,促进神经胶质瘤、呼吸道疾病、心脏疾病、炎症、脂肪肝、糖尿病视网膜病变、精神分裂症等多种疾病的发生发展,表明其功能异常可能在多种疾病的发生机制中起到重要作用。未来研究应重点关注ZDHHC5的底物特异性识别机制,以及在不同生理和病理条件下的功能调控作用。同时,开发针对ZDHHC5的小分子抑制剂,并与跨学科技术整合应用,为基于棕榈酰化修饰的精准治疗策略提供新的方向,最终推动相关疾病的诊断和治疗。 展开更多
关键词 翻译后修饰 S-棕榈酰化 棕榈酰基转移酶 ZDHHC5 组织稳态 疾病 综述
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软骨细胞铁死亡在骨关节炎发病中的作用
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作者 苏介茂 齐岩松 +2 位作者 孔柯瑜 翟赞京 徐永胜 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第24期6282-6288,共7页
背景:铁死亡作为一种程序性细胞死亡,依赖铁过载所引发的脂质过氧化反应导致软骨细胞死亡,从而加剧关节退变。目的:总结软骨细胞铁死亡在骨关节炎进展中的分子机制以及针对这一机制的干预策略。方法:检索中国知网、PubMed、Web of Scie... 背景:铁死亡作为一种程序性细胞死亡,依赖铁过载所引发的脂质过氧化反应导致软骨细胞死亡,从而加剧关节退变。目的:总结软骨细胞铁死亡在骨关节炎进展中的分子机制以及针对这一机制的干预策略。方法:检索中国知网、PubMed、Web of Science数据库,中文检索词为“软骨,铁死亡,核因子E2相关因子2,沉默信息调节因子,PTEN诱导的推定激酶1,基质细胞衍生因子1,纳米颗粒,线粒体自噬,水凝胶”等,英文检索词为“cartilage,ferroptosis,Nrf2,NFE2-related factor 2,SIRT,Sirtuin,PINK1,PTEN induced putative kinase 1,stromal cell-derived factor 1,SDF1,nanoparticle,mitophagy,hydrogel”等,根据入选标准,最终纳入69篇文献进行综述。结果与结论:铁死亡的发生机制涉及铁沉积、脂质过氧化、氨基酸代谢异常,其中活性氧累积和脂质过氧化是产生铁死亡信号的必要条件。在骨关节炎中,软骨细胞铁死亡是导致软骨退变的关键病理机制之一。目前针对软骨细胞铁死亡机制及其相关材料的研究主要聚焦于抗氧化途径,多项研究尝试通过构建具有抗氧化性能或调控金属离子分布的材料,来减缓骨关节炎所致的软骨损伤并改善疾病进程;此外,研制通过其他途径干扰铁死亡的材料也是目前研究骨关节炎治疗的重点。然而,这些研究成果仅在细胞和动物实验中产生有效的治疗作用,尚未进行临床研究,未来的研究需进一步探索铁死亡相关信号网络及材料与生物界面之间的相互作用,开发更高效、安全的治疗策略。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 活性氧 纳米颗粒 水凝胶
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枫杨总黄酮调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及凋亡的作用及机制
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作者 包卓玛 侯孜明 +4 位作者 江露 李玮怡 张宗星 刘道忠 袁林 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第4期816-823,共8页
背景:研究证实枫杨总黄酮能够改善胶原诱导的大鼠关节炎水平,但它对成纤维样滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及对相关细胞功能的影响尚缺少研究。目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探究枫杨总黄酮对脂多糖诱导的成纤维样滑膜... 背景:研究证实枫杨总黄酮能够改善胶原诱导的大鼠关节炎水平,但它对成纤维样滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及对相关细胞功能的影响尚缺少研究。目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探究枫杨总黄酮对脂多糖诱导的成纤维样滑膜细胞增殖、迁移及凋亡的作用及机制。方法:成纤维样滑膜细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+枫杨总黄酮低、中、高剂量组(10,20,40μg/mL)、脂多糖+Wnt通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组、脂多糖+DKK1+枫杨总黄酮高剂量组(40μg/mL)。采用CCK-8法检测枫杨总黄酮对成纤维样滑膜细胞活力的影响并筛选最终用药浓度和时间;流式细胞术检测成纤维样滑膜细胞的凋亡情况;细胞划痕实验、EDU染色和细胞克隆实验检测成纤维样滑膜细胞的迁移和增殖能力;蛋白质免疫印迹检测成纤维样滑膜细胞Wnt3a、β-catenin、细胞致瘤基因、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果与结论:(1)与对照组相比,当枫杨总黄酮质量浓度>40μg/mL时细胞活力明显下降(P<0.01),故选择药物剂量≤40μg/mL进行后续实验;(2)与脂多糖组相比,枫杨总黄酮低、中、高剂量组细胞划痕愈合率、细胞克隆形成率、EDU阳性细胞数均显著降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05-0.01);(3)蛋白质免疫印迹结果显示,与脂多糖组相比,枫杨总黄酮低、中、高剂量组显著抑制细胞Wnt3a、β-catenin、细胞致瘤基因、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、Bcl-2蛋白表达,并促进Bax蛋白表达(P<0.01);(4)与单用Wnt通路抑制剂DKK1组相比,DKK1+枫杨总黄酮高剂量联合干预后,能够明显增强DKK1对细胞Wnt3a、β-catenin、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9、Bcl-2蛋白表达的抑制作用和对Bax蛋白表达的促进作用(P<0.01);(5)结果表明,枫杨总黄酮可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路下调脂多糖诱导的成纤维样滑膜细胞增殖、迁移能力,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 枫杨总黄酮 成纤维样滑膜细胞 类风湿关节炎 Wnt/β-catenin 凋亡 增殖
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热应激引起男性生殖系统损伤的机制及治疗研究进展 被引量:1
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作者 艾庆燕 张珂珂 +4 位作者 孟欣瑶 常子轩 宋萌萌 高金翠 樊佳旺 《延安大学学报(医学科学版)》 2025年第2期90-94,共5页
精子发生过程对温度具有依赖性。阴囊温度升高是热应激的一种表现形式,会产生睾丸热应激,诱导睾丸细胞发生氧化应激、凋亡、DNA损伤、睾酮分泌下降等一系列反应,导致男性不育。生物碱类、氨基酸类、中药提取物、中药方剂、中药单体、褪... 精子发生过程对温度具有依赖性。阴囊温度升高是热应激的一种表现形式,会产生睾丸热应激,诱导睾丸细胞发生氧化应激、凋亡、DNA损伤、睾酮分泌下降等一系列反应,导致男性不育。生物碱类、氨基酸类、中药提取物、中药方剂、中药单体、褪黑素、益生菌药物等对睾丸热应激损伤具有一定的治疗效果。本文综述了热应激引起男性生殖系统损伤机制,以及上述药物的治疗机制,旨在为缓解热应激对男性生殖系统的损伤和提高男性生殖功能提供一定的理论参考。 展开更多
关键词 热应激 精子发生 精子 睾酮 男性不育 药物治疗
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瘤内和瘤周影像组学模型评估宫颈鳞癌分化程度的价值
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作者 李传贵 苏亚英 +2 位作者 左惠玲 周义 李娇娇 《放射学实践》 北大核心 2025年第6期749-756,共8页
目的:探讨瘤内和瘤周影像组学特征评估宫颈鳞癌分化程度的价值。方法:回顾性分析132例宫颈鳞癌患者的临床及影像资料,基于动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)提取影像组学特征,使用相关性分析和最小绝对收缩与选择算子(LASSO)算法进行降... 目的:探讨瘤内和瘤周影像组学特征评估宫颈鳞癌分化程度的价值。方法:回顾性分析132例宫颈鳞癌患者的临床及影像资料,基于动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)提取影像组学特征,使用相关性分析和最小绝对收缩与选择算子(LASSO)算法进行降维筛选,计算影像组学评分(Radscore)并建立logistic模型。对临床参数进行单因素和多因素logistic回归并建立临床模型,然后联合Radscore构建联合模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线、400次5折交叉验证评价模型的区分度和稳定性,以校准曲线、决策曲线分析(DCA)评估模型的校准度和临床适用性。计算综合判别改善指数(IDI)定量评估模型之间预测效能的改善情况。结果:ROC曲线显示瘤内模型、瘤周模型、瘤内-瘤周模型、临床模型和联合模型预测鳞癌分化程度的AUC分别为0.858、0.845、0.872、0.759和0.901,交叉验证表明模型均具有较高的稳定性和一致性。校准曲线显示模型均具有良好的校准度,DCA显示各个模型均具有一定临床应用价值,联合模型的临床净获益最大。IDI结果表明相比于瘤内模型,瘤内-瘤周模型的预测效能无明显提升,而较瘤周模型提升了10.1%。结论:结合肿瘤和瘤周影像组学特征可以更全面地表征肿瘤的生物学特性,对辅助临床医师制定个性化诊疗方案具有重要意义。 展开更多
关键词 影像组学 宫颈癌 细胞分化 机器学习 肿瘤微环境
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真菌血流感染菌株耐药性分析及热带念珠菌多位点序列分型
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作者 王影 周馨 +1 位作者 许良飞 金佩佩 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第6期619-625,共7页
目的探讨侵袭性真菌血流感染菌株分布及耐药情况,同时对热带念珠菌唑类耐药菌株进行流行病学分析,为临床抗真菌用药提供理论依据。方法收集中国科学技术大学附属第一医院临床血流感染患者分离的真菌菌株,采用基质辅助激光解吸电离飞行... 目的探讨侵袭性真菌血流感染菌株分布及耐药情况,同时对热带念珠菌唑类耐药菌株进行流行病学分析,为临床抗真菌用药提供理论依据。方法收集中国科学技术大学附属第一医院临床血流感染患者分离的真菌菌株,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的全自动快速微生物质谱检测系统(VITEK-MS)对菌种进行鉴定,同时用VITEK-2 AST-YS08试剂盒对菌株进行药敏试验。用PCR技术扩增热带念珠菌的6对管家基因并测序,测序结果与热带念珠菌多位点序列分型(MLST)数据库比对得到菌株的二倍体序列型别(diploid sequence type,DST),再利用goeBURST软件对结果进行亲缘性分析。结果2022年8月—2025年1月中国科学技术大学附属第一医院血培养阳性标本共分离47株真菌,排名前三位的分别是白念珠菌15株、热带念珠菌13株、近平滑念珠菌复合群11株。患者主要分布在重症监护病区(65.22%),其中重症医学科36.96%、心脏大血管外科重症监护室19.57%、神经重症监护室8.70%。真菌药物敏感性分析显示近平滑念珠菌和热带念珠菌对氟康唑不敏感率分别为22.22%和76.92%,但棘白菌素对大部分真菌有较低的MIC值。MLST型别分析显示13株热带念珠菌分属于9个DST,其中3个DST在该次研究中首次报道。菌株系统进化分析显示热带念珠菌唑类耐药菌株出现MLST型别聚集现象,对氟康唑和伏立康唑同时耐药的热带念珠菌都属于同一克隆簇。结论念珠菌是真菌血流感染最常见的病原体,白念珠菌对唑类抗真菌药耐药率低,近平滑念珠菌对唑类药物有一定的不敏感率,但热带念珠菌对唑类药物不敏感率较高,已不推荐唑类药物作为热带念珠菌感染一线用药。热带念珠菌唑类耐药菌株存在MLST型别聚集现象,应在临床工作中加强对热带念珠菌的流行病学研究。 展开更多
关键词 真菌血流感染 念珠菌 唑类耐药 多位点序列分型
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