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碱性成纤维细胞生长因子诱导表皮细胞去分化的初步研究 被引量：12
1
作者 孙晓艳 付小兵 +2 位作者 伊海英 刘惠玲 孙同柱 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期2003-2007,共5页
目的初步探索表皮细胞体外去分化模型的建立方法。方法HEKa细胞体外培养6～7代时开始出现老化迹象,细胞体积膨大,形态发生明显改变。加入浓度为100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fac-tor,bFGF)诱导液分别培养6... 目的初步探索表皮细胞体外去分化模型的建立方法。方法HEKa细胞体外培养6～7代时开始出现老化迹象,细胞体积膨大,形态发生明显改变。加入浓度为100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fac-tor,bFGF)诱导液分别培养6、12、24、48、72h后,MTT法检测bFGF对表皮细胞体外生长的促进作用。同时采用免疫细胞化学染色法、流式细胞检测技术、RT-PCR法检测bFGF诱导培养后,表皮细胞的表型及功能的改变。结果MTT检测结果显示浓度为100ng/ml,诱导时间为36～48h为诱导表皮细胞去分化的最佳实验条件。在bFGF的作用之下,老化的HEKa细胞周围开始出现新生的表皮干细胞样克隆。免疫细胞化学检测结果表明,实验组细胞中β1整合素、CK19、CK14的表达增强,而CK10作为终末分化细胞的标志,在bFGF诱导组中的表达明显降低。流式细胞检测分析显示bFGF作用后,实验组CK19表达阳性的细胞与对照组相比明显增多(分别为74.77%和15.74%);CK14表达阳性的细胞也由原来的67.26%增加至被检测细胞总数的87.14%。而bFGF诱导作用后,被检测细胞中表达CK10阳性的细胞数量较对照组明显下降(分别为4.56%和98.56%)。此外,RT-PCR检测结果同样再次支持了表皮细胞去分化的理论。在bFGF诱导组中,β1整合素、CK19、CK14mRNA转录水平明显上调,而CK10mRNA表达则明显下降。结论bFGF能够在体外诱导表皮细胞逆转分化形成幼稚型表皮前体干细胞,但其涉及具体机制需要进一步研究。 展开更多
关键词 表皮细胞 去分化 干细胞 免疫细胞化学 流式细胞检测 MTT RT—PCR
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轴型血管蒂股前外侧真皮下血管网皮瓣的应用解剖 被引量：25
2
作者 肖添有 司徒朴 +2 位作者 陈伯华 徐达传 李蕾 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第1期7-10,共4页
在１２侧灌注颜料的新鲜下肢上，解剖观察了以旋股外侧动脉降支为蒂的股前外侧真皮下血管网皮瓣血供、真皮下血管网的构筑及静脉回流，结果显示：①皮动脉穿出深筋膜后随即分成２～６支主要分支各自斜行浅筋膜途中发出浅筋膜分支、真皮... 在１２侧灌注颜料的新鲜下肢上，解剖观察了以旋股外侧动脉降支为蒂的股前外侧真皮下血管网皮瓣血供、真皮下血管网的构筑及静脉回流，结果显示：①皮动脉穿出深筋膜后随即分成２～６支主要分支各自斜行浅筋膜途中发出浅筋膜分支、真皮下血管网分支和混合型三种分支；②真皮下血管网分支在真皮下层形成“血管树”或“蜘蛛痣”状吻合稠密的血管网；③在制备股前外侧真皮下血管网皮瓣时需保留血管蒂周围２．５ｃｍ不超薄，其余周边部分超薄至保留皮下脂肪２～３ｍｍ；④真皮下静脉也吻合成网，通过皮动脉伴行静脉或股外侧浅静脉回流。文中讨论了皮瓣的血供特点和优点。 展开更多
关键词 真皮下血管网 股前外侧 皮瓣 移植 应用解剖
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毛乳头细胞凝集性生长对诱导毛囊样结构形成能力的影响 被引量：15
3
作者 麦跃 刘荣卿 +3 位作者 伍津津 程波 唐书谦 钟白玉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1197-1200,共4页
目的　以细胞外基质成分纤维连接蛋白促进培养的人头皮毛乳头细胞凝集性生长行为 ,观察毛乳头细胞的凝集性生长对诱导毛囊形成能力的影响。方法　传代培养的人头皮毛乳头细胞经细胞外基质纤维连接蛋白预处理后 ,促进形成凝集性生长团 ,... 目的　以细胞外基质成分纤维连接蛋白促进培养的人头皮毛乳头细胞凝集性生长行为 ,观察毛乳头细胞的凝集性生长对诱导毛囊形成能力的影响。方法　传代培养的人头皮毛乳头细胞经细胞外基质纤维连接蛋白预处理后 ,促进形成凝集性生长团 ,再与毛囊上皮细胞共同移植于裸鼠皮下 ,分别于 8、12周进行组织学检查 ,观察毛囊形成及分化程度。结果　 8周后纤维连接蛋白预处理的毛乳头细胞组可见有毛囊样结构形成 ,未处理组仅见松散细胞团 ;12周后两组均可见有毛囊样结构形成 ,但纤维连接蛋白预处理组较未处理组诱导形成毛囊样结构分化更成熟 ;真皮成纤维细胞组未见有毛囊样结构形成。结论　毛乳头细胞的凝集性生长特性对其诱导毛囊形成的能力有密切的关系 ,细胞呈凝集性生长后 ,其生物学功能增强。 展开更多
关键词 毛乳头细胞 毛囊重建 细胞外基质 裸鼠
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大鼠骨髓间充质干细胞向表皮细胞分化的初步研究 被引量：8
4
作者 邹丽琴 苏踊跃 +3 位作者 孙荣距 陈建 梁光萍 罗向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期584-586,共3页
目的 体外分离培养骨髓间充质干细胞，并探索表皮细胞生长因子诱导MSCs分化的潜能及条件。方法 采用直接贴壁法，分离培养大鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞，应用免疫细胞化学法检测细胞CD44、CD106、CD29、CD90、CD34等，对分离的细胞... 目的 体外分离培养骨髓间充质干细胞，并探索表皮细胞生长因子诱导MSCs分化的潜能及条件。方法 采用直接贴壁法，分离培养大鼠股骨和胫骨骨髓间充质干细胞，应用免疫细胞化学法检测细胞CD44、CD106、CD29、CD90、CD34等，对分离的细胞进行鉴定。以10～40ng／ml的表皮生长因子处理第3代MSCs，观察细胞角蛋白的表达。用Western blot方法摸索integrin β1的表达与MSCs分化状态的关系。结果 原代培养的骨髓间充质细胞CD44、CDl06、CD29、CD90免疫细胞化学染色为阳性，CD34为阴性，符合骨髓间充质干细胞特征。MSCs经不同浓度的EGF体外诱导7d后，免疫细胞化学结果显示，EGF浓度为30ng／ml和40ng／ml时，细胞角蛋白出现阳性表达；体外诱导14d，呈角蛋白染色阳性的细胞比例进一步增加，同时integrin131表达量下降。结论 体外培养的MSCs在EGF诱导下，具有分化为表皮细胞的倾向，同时integrin β1可能在MSCs分化中具有一定的作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 表皮细胞 表皮生长因子 分化 大鼠
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表皮真皮分离方法的探索 被引量：12
5
作者 伍津津 朱堂友 +1 位作者 鲁元刚 杨宏珍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第24期2242-2244,共3页
目的　探索一种适合细胞培养的分离真表皮的酶消化法。方法　将分离酶配成 0 1%、0 2 %、0 5 % 3个浓度 ,在 4℃或 3 7℃条件下消化头皮或包皮 ,摸索消化的时间 ,并与 0 2 5 %胰蛋白酶消化法进行对比。结果　 0 5 %分离酶在 4℃条... 目的　探索一种适合细胞培养的分离真表皮的酶消化法。方法　将分离酶配成 0 1%、0 2 %、0 5 % 3个浓度 ,在 4℃或 3 7℃条件下消化头皮或包皮 ,摸索消化的时间 ,并与 0 2 5 %胰蛋白酶消化法进行对比。结果　 0 5 %分离酶在 4℃条件下消化 16～ 18h ,或 3 7℃条件下消化 1h ,能够很好地分离表皮与真皮 ,再用胰蛋白酶将表皮游离成角质形成细胞 ,活细胞率高 ,培养后细胞融合时间短。结论　分离酶能够选择性消化基底膜成分而起到很好的分离表皮与真皮的作用 ,分离酶和胰蛋白酶联合消化法是一种非常理想的分离角质形成细胞的方法 ,同时又能够避免成纤维细胞的污染。 展开更多
关键词 表皮 真皮 酶消化法 分离酶
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角质层的含水量及其对皮肤生物功能的影响 被引量：32
6
作者 蔄茂强 刘俐 吕成志 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期816-818,共3页
角质层的水分含量对皮肤乃至整个机体都具有重要的生物调节作用,其因机体的内在因素(性别、年龄、遗传、营养及代谢等)及生活环境(湿度)的不同而不同。角质层含水量的多少对皮肤的生理功能也有重要的调节作用。通过观察角质层的含水量,... 角质层的水分含量对皮肤乃至整个机体都具有重要的生物调节作用,其因机体的内在因素(性别、年龄、遗传、营养及代谢等)及生活环境(湿度)的不同而不同。角质层含水量的多少对皮肤的生理功能也有重要的调节作用。通过观察角质层的含水量,有助于了解机体的生物状态;适当地调节角质层的含水量有利于延缓皮肤老化和防治某些皮肤病。 展开更多
关键词 表皮 角质层 皮肤含水量
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全身照射大鼠骨髓提取液对真皮多能干细胞趋化作用的实验研究 被引量：7
7
作者 宗兆文 程天民 +2 位作者 冉新泽 粟永萍 史春梦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期279-281,共3页
目的　观察 5Gyγ射线全身照射后大鼠骨髓提取液对真皮多能干细胞 (dermalmultipotentstemcells ,dMSCs)的趋化作用 ,并定量分析尾静脉输注的dMSCs在大鼠体内的分布。方法　在Transwell培养体系中 ,观察骨髓提取液对dMSCs的趋化作用。3H... 目的　观察 5Gyγ射线全身照射后大鼠骨髓提取液对真皮多能干细胞 (dermalmultipotentstemcells ,dMSCs)的趋化作用 ,并定量分析尾静脉输注的dMSCs在大鼠体内的分布。方法　在Transwell培养体系中 ,观察骨髓提取液对dMSCs的趋化作用。3H TdR标记dMSCs ,经尾静脉输注到大鼠体内后 ,液闪法测量各组织内dMSCs的含量。结果　Transwell培养体系中 ,照射组骨髓提取液组从上层迁移到下层的细胞明显多于不照射的正常对照组和生理盐水组 (P <0 0 1)。照射后 1周始 ,照射组骨髓dMSCs含量明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;伤后 3周和 4周 ,照射组单位重量骨髓dMSCs含量也明显高于同组的肺脏、肝脏等组织。结论　全身照射大鼠骨髓提取液对dMSCs有很强的趋化作用 ,从而促进静脉输注的dMSCs偏向分布于损伤的骨髓。 展开更多
关键词 全身照射 真皮多能干细胞 骨髓提取液 趋化
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Baumann皮肤分型问卷在中国的适用性研究 被引量：10
8
作者 王学民 谈益妹 +4 位作者 周玉田 吴琰瑜 邹颖 程英 叶曼莉 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期550-552,共3页
目的:用Baumann皮肤分型问卷判定皮肤类型和对相应客观参数的测试,验证其准确性和适用性。方法:选取326名符合要求的健康女性志愿者,分5个年龄组,分别用Baumann皮肤分型的4套问卷进行皮肤分型调查和单一问题自我皮肤类型判定,分别测定... 目的:用Baumann皮肤分型问卷判定皮肤类型和对相应客观参数的测试,验证其准确性和适用性。方法:选取326名符合要求的健康女性志愿者,分5个年龄组,分别用Baumann皮肤分型的4套问卷进行皮肤分型调查和单一问题自我皮肤类型判定,分别测定客观参数。用SPSS11.5软件分析问卷/问题调查结果和客观参数之间的相关性。结果:油性/干性问卷判定的皮肤类型和皮脂测定有良好的相关性(P<0.01),其余3套评定结果和对应的皮肤生物物理参数之间均无相关性(P>0.05)。单一问题调查中,油性/干性皮肤分型和皮肤水分测定结果、敏感型/耐受型皮肤分型和刺痛试验分值呈现良好的相关性(P<0.05),而色素型/非色素型、皱纹型/紧致型皮肤和黑色素指数、皱纹参数之间均无相关性(P>0.05)。结论:Baumann皮肤分型问卷并不适合中国人的皮肤分型判定。 展开更多
关键词 Baumann皮肤分型问卷 皮肤水分/油分/黑色素/皱纹/敏感性 适用性
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胶布撕脱皮肤角质层对皮肤刺激性斑贴试验结果的影响 被引量：5
9
作者 吴琰瑜 王学民 +3 位作者 秦鸥 谈益妹 程英 刘娜 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期553-556,共4页
目的：比较直接进行斑贴试验（patchtest，PT）与先反复多次进行胶带粘贴（tapestripping，TAP）再进行斑贴试验（tapestripping＋pacthtest，TAPPT）后皮肤反应的异同，探讨已受到亚临床刺激的皮肤对再次发生的刺激性皮炎严重程度的影... 目的：比较直接进行斑贴试验（patchtest，PT）与先反复多次进行胶带粘贴（tapestripping，TAP）再进行斑贴试验（tapestripping＋pacthtest，TAPPT）后皮肤反应的异同，探讨已受到亚临床刺激的皮肤对再次发生的刺激性皮炎严重程度的影响。方法：30名健康女性双前臂屈侧按随机原则分别进行TAP、PT、TAPPT及空白对照4种处理。TAP共5d，PT于第6天进行。试验期间每天进行临床评估，第0、第6天胛前及第7、第8天进行经表皮水分丢失率、表皮含水量、Chromameter a＊值及皮肤表面pH值的检测。结果：①PT、TAPPT刺激率分别为60％、100％，TAPPT刺激率高于PT（P〈0．05）。（2）TAPPT评分高于PT（P〈0．05）。③与基础值相比，第8天，PT与TAPPT的经表皮水分丢失率值均升高，TAP门部位△B-8表皮水分丢失率值大于PT部位△B-8表皮水分丢失率值（P〈0．05）。与第7天相比，第8天PT、TAPPT的经表皮水分丢失率值均下降，TAPPT△7-8经表皮水分丢失率值小于PT△7-8经表皮水分丢失率值（P〈0．05）。④与基础值相比，第8天PT的表皮含水量下降，TAPPT的表皮含水量上升，PT部位△B-8。表皮含水量与TAPPT部位△B-8表皮含水量差异有显著性（P〈0．05）。⑤与基础值相比，PT、TAPPT部位的a＊值均升高，TAPPT△B-8 a＊值高于PT△B-8 a＊值（P〈0．05）。⑥PT部位临床评分与经表皮水分丢失率、a＊值正相关，TAPPT部位临床评分与经表皮水分丢失率、表皮含水量、a＊值、pH值之间正相关。结论：①当皮肤屏障经胶带粘贴后产生亚临床刺激的破坏，如再次发生刺激性皮炎，会增加其发生率，增强其严重程度。②经表皮水分丢失率、表皮含水量、Chromameter a＊值能反映皮肤受到TAP及PT刺激后的变化，可作为评判刺激性接触性皮炎的客观参数。 展开更多
关键词 亚临床刺激 刺激性皮炎 斑贴试验 胶带粘贴 经表皮水分丢失率 表皮含水量 皮肤表面pH值 a＊值
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甲氧沙林脂质体对小鼠黑素瘤细胞黑素生成影响的研究 被引量：11
10
作者 韩瑞玲 罗顺德 何文 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期594-596,共3页
目的:探讨甲氧沙林脂质体(8-MOPL)对小鼠B16F黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响。方法:采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株,以等浓度的甲氧沙林(8-MOP)为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑... 目的:探讨甲氧沙林脂质体(8-MOPL)对小鼠B16F黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响。方法:采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株,以等浓度的甲氧沙林(8-MOP)为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果:与等浓度8-MOP相比,低浓度8-MOPL(10-25μmol/L)能显著提高酪氨酸酶活性和黑素含量(P<0.05)。高浓度8-MOPL(100-200μmol/L)对细胞的抑制作用更显著(P<0.05)。结论:用脂质体作为8-MOP的载体可以显著提高8-MOP对靶细胞的作用,为8-MOPL制剂治疗白癜风的临床应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 甲氧沙林 脂质体 黑素瘤 黑素 白癜风 小鼠
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大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养 被引量：9
11
作者 陈伟 杨恬 +2 位作者 连小华 杨珂 黄恩毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期376-379,共4页
目的研究大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养。方法用免疫组织化学技术研究大鼠表皮干细胞的分布;用DispaseⅡ、胰酶二步法消化新生大鼠皮肤,获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原筛选,体外培养大鼠表皮干细胞,进行免疫组化鉴定,荧光标记流式细胞... 目的研究大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养。方法用免疫组织化学技术研究大鼠表皮干细胞的分布;用DispaseⅡ、胰酶二步法消化新生大鼠皮肤,获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原筛选,体外培养大鼠表皮干细胞,进行免疫组化鉴定,荧光标记流式细胞仪分析。结果在表皮基底层、毛囊外根鞘区α6-integrin、K15等表皮干细胞标记物染色阳性,而分化指标CD71染色阴性;CD34在表皮基底层阴性表达,而在毛囊隆突区阳性表达;体外分离的基底层表皮干细胞生长良好,具有较高的克隆形成率;干细胞标记物α6-integrin、K15呈阳性表达,流式细胞仪检测α6-integrin达到84%,说明较为成功地体外分离培养出大鼠表皮基底层干细胞。结论在表皮基底层、毛囊外根鞘区存在表皮干细胞。 展开更多
关键词 表皮干细胞 细胞培养 体外
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真皮来源成体多能干细胞体外自发恶性转化现象及机制研究 被引量：8
12
作者 史春梦 麦跃 +6 位作者 程天民 粟永萍 徐辉 郑怀恩 王军平 黄跃生 蒋建新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期71-73,共3页
目的　研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制。方法　对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养 ,观察其生长性状的改变 ,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化 ;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表... 目的　研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制。方法　对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养 ,观察其生长性状的改变 ,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化 ;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表达谱的改变。结果　经过长期体外连续传代培养后 ,真皮多能干细胞可发生恶性转化 ,在裸鼠体内形成肉瘤样组织 ;基因芯片技术检测显示 ,转化后细胞仍表达多种类型细胞特异性基因的转录子 ,提示其仍具有多向分化的潜能 ;但转化后细胞多种增殖相关基因的表达升高 ,代谢反应酶类基因表达升高 ,生长因子和受体的表达下调 ,符合肿瘤细胞的特征 ;c ki ras基因及其相关信号分子的表达上调可能在转化过程中起重要作用 ;初步筛选鉴定了一个与干细胞增殖调控相关的候选基因。结论　体外长期连续传代培养可诱发真皮多能干细胞的恶性转化 。 展开更多
关键词 干细胞 恶性转化 皮肤
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人角质形成细胞库的建立 被引量：8
13
作者 李伟 伍津津 +2 位作者 吴国选 朱堂友 鲁元刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期987-989,共3页
目的　探索人皮肤表皮细胞分离、培养、传代、冻存及复苏技术。方法　采用细胞培养技术及免疫组化染色鉴定技术。结果　采用细胞培养技术体外分离培养了小儿包皮表皮细胞 ,培养的表皮角质形成细胞 ,经冻存、复苏后 ,此角质形成细胞仍既... 目的　探索人皮肤表皮细胞分离、培养、传代、冻存及复苏技术。方法　采用细胞培养技术及免疫组化染色鉴定技术。结果　采用细胞培养技术体外分离培养了小儿包皮表皮细胞 ,培养的表皮角质形成细胞 ,经冻存、复苏后 ,此角质形成细胞仍既能增殖 ,又能分化 ,生长状态与新鲜分离的角质形成细胞相类似。 展开更多
关键词 表皮细胞 细胞培养 细胞库
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无血清K-SFM培养条件下大鼠毛囊Bu lge细胞生物学特性的研究 被引量：5
14
作者 符刚 高强国 +2 位作者 杨恬 余瑾 向明明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1538-1540,共3页
目的研究无血清K-SFM培养条件下,大鼠毛囊Bu lge细胞的生物学特性。方法分离大鼠毛囊Bu lge细胞,分别置于无血清的K-SFM培养基(实验组)及有血清DMEM/F12培养基(对照组)的培养条件下培养。比较Bu lge细胞在两种培养体系中的生长增殖和K1... 目的研究无血清K-SFM培养条件下,大鼠毛囊Bu lge细胞的生物学特性。方法分离大鼠毛囊Bu lge细胞,分别置于无血清的K-SFM培养基(实验组)及有血清DMEM/F12培养基(对照组)的培养条件下培养。比较Bu lge细胞在两种培养体系中的生长增殖和K19的表达状况。结果无血清培养的Bu lge细胞在克隆形成率及K19的表达率均明显高于对照组(P<0.05)。结论体外培养和扩增大鼠毛囊Bu lge细胞,无血清的K-SFM培养基较有血清DMEM/F12培养基更有利于Bu lge细胞的扩增和表型的维持。 展开更多
关键词 毛囊 Bulge细胞 细胞培养 分化
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创伤早期伤口液对体外培养真皮多能干细胞增殖迁移特性的影响 被引量：6
15
作者 屈纪富 江德鹏 +3 位作者 郑怀恩 郝利 文亮 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第24期2393-2395,共3页
目的探讨真皮多能干细胞在创伤修复启动中的作用。方法采用前期建立的技术分离、纯化并扩增真皮多能干细胞、真皮成纤维细胞和血管内皮细胞;利用四唑盐比色试验(MTT法)检测不同时间、不同浓度伤口液对上述细胞的影响。在此基础上,观察伤... 目的探讨真皮多能干细胞在创伤修复启动中的作用。方法采用前期建立的技术分离、纯化并扩增真皮多能干细胞、真皮成纤维细胞和血管内皮细胞;利用四唑盐比色试验(MTT法)检测不同时间、不同浓度伤口液对上述细胞的影响。在此基础上,观察伤后1d伤口液对真皮多能干细胞贴壁力和迁移力等与创伤修复密切相关的指标变化。结果伤后不同时相不同浓度伤口液对真皮多能干细胞增殖均具有显著刺激作用,但以伤后早期的伤口液作用最为明显。成纤维细胞和血管内皮细胞对伤口液反应均显著弱于真皮多能干细胞。伤口液作用后真皮多能干细胞贴壁力和迁移能力较对照组细胞显著增加。结论真皮多能干细胞是创伤愈合,特别是创伤修复启动过程中的一种重要的间充质干细胞,对其深入研究有望为阐明创伤修复启动分子机制提供依据。 展开更多
关键词 真皮多能干细胞 创伤修复启动 伤口液
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人毛乳头细胞在不同传代时期某些细胞因子表达的变化 被引量：7
16
作者 郭晓静 郝飞 +1 位作者 姜晓勇 宋志强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期2144-2145,共2页
目的观察毛乳头细胞在体外培养条件下的生长特性,为毛囊重建提供参考资料。方法采用二步酶消化法分离正常人头皮毛囊的毛乳头细胞,在体外进行传代培养,用免疫组化方法观察不同传代毛乳头细胞生长因子表达的差异。结果高代培养毛乳头细... 目的观察毛乳头细胞在体外培养条件下的生长特性,为毛囊重建提供参考资料。方法采用二步酶消化法分离正常人头皮毛囊的毛乳头细胞,在体外进行传代培养,用免疫组化方法观察不同传代毛乳头细胞生长因子表达的差异。结果高代培养毛乳头细胞逐渐丧失其凝集性生长的特性,生长因子的表达逐渐消失。结论毛乳头细胞的生长及其特性的保持受许多因素的影响,体外培养的毛乳头细胞与体内有差异。低代毛乳头条件培养基可恢复毛乳头细胞部分生长特性。 展开更多
关键词 毛囊 毛乳头细胞 生长因子 免疫组化
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黑素生成过程中黄芩的调节作用 被引量：12
17
作者 刘璋 胡佑伦 韩瑞玲 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2005年第1期66-67,72,共3页
目的 :观察中药黄芩对B16F小鼠黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响。方法 :采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株 ,用MTT法测定细胞增殖情况 ;NaOH裂解法测定黑素合成 ;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果 :在浓度为 0 .0 1～ ... 目的 :观察中药黄芩对B16F小鼠黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响。方法 :采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株 ,用MTT法测定细胞增殖情况 ;NaOH裂解法测定黑素合成 ;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果 :在浓度为 0 .0 1～ 1.0 g·L-1时 ,黄芩可浓度依赖性促进B16F细胞增殖 ,酪氨酸酶活性和黑素含量 ,以 1.0 g·L-1为最佳。结论 :黄芩可促进细胞增殖 ,激活酪氨酸酶活性 ,提高黑素含量 ,从而为黄芩治疗白癜风的临床应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 黑素 酪氨酸酶 黄芩 白癜风
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整合素β1在人表皮细胞株HaCaT增殖中影响的研究 被引量：4
18
作者 闫德雄 苏踊跃 +3 位作者 唐红英 梁光萍 陈建 罗向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期760-762,共3页
目的探讨β1整合素对表皮细胞增殖的影响。方法将重组整合素β1小干扰RNA表达载体(siIntegrinβ1)转染到HaCaT细胞株中,应用免疫印迹(Westernblotting)方法检测靶基因的抑制情况,应用细胞计数法检测表皮细胞增殖情况。结果重组siIntegri... 目的探讨β1整合素对表皮细胞增殖的影响。方法将重组整合素β1小干扰RNA表达载体(siIntegrinβ1)转染到HaCaT细胞株中,应用免疫印迹(Westernblotting)方法检测靶基因的抑制情况,应用细胞计数法检测表皮细胞增殖情况。结果重组siIntegrinβ1转染HaCaT细胞株能够抑制靶基因整合素β1的表达,抑制细胞增殖。结论在人表皮细胞株HaCaT中抑制整合素β1表达可抑制HaCaT增殖,为进一步研究整合素在表皮细胞中的基因表达调控奠定了基础。 展开更多
关键词 整合素Β1 表皮细胞 增殖 RNA干扰
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Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞表型变化的影响 被引量：5
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作者 张翠萍 陈鹏 +1 位作者 付小兵 孙同柱 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期1716-1719,共4页
目的探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞表型变化的影响。方法差速贴壁法分离人成熟表皮细胞。并将细胞分为对照组和诱导组,诱导组又分为氯化锂(LiCl,20mmol/L)诱导组和GSK-3β抑制子(15μmol/L)诱导组,诱导6d后观察细胞的形... 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞表型变化的影响。方法差速贴壁法分离人成熟表皮细胞。并将细胞分为对照组和诱导组,诱导组又分为氯化锂(LiCl,20mmol/L)诱导组和GSK-3β抑制子(15μmol/L)诱导组,诱导6d后观察细胞的形态变化,并采用Westernblot检测表皮细胞内β-catenin的表达水平,免疫组织化学法检测表皮细胞表面标志性蛋白CK10、CK14、CK19和β1整合素的表达变化。结果人表皮细胞内β-catenin的表达在被LiCl(2.15±0.54)和GSK-3β(2.58±0.65)抑制子诱导后分别比对照组(0.71±0.23)增加了2倍和2.5倍(P<0.01)。而且诱导后细胞体积变小变圆,细胞核、细胞质比例变大。免疫组织化学检测结果表明,诱导前表皮细胞高表达CK10,部分细胞表达CK14,CK19和β1整合素表达阴性;诱导后已无CK10阳性细胞存在,有部分CK14阳性细胞,而且CK19和β1整合素的表达呈强阳性。结论 Wnt/β-catenin通路活化可引起人成熟表皮细胞的去分化,即Wnt/β-catenin通路可能是调控人表皮细胞去分化的关键环节。 展开更多
关键词 表皮细胞 Wnt/β-catenin信号通路 表型特征 去分化
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颗粒状脱细胞真皮基质的形态学特征及理化性能体外研究 被引量：4
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作者 左海斌 彭代智 +3 位作者 郑必祥 何升东 周新 刘敬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期4-8,共5页
目的研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能。方法收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和... 目的研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能。方法收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和DNA残留情况。将片状ADM切割成不同规格的PADM,并结合大体观察、组织学分析、电镜技术、激光粒度分析仪和傅里叶变换红外光谱仪检测其外观轮廓、形态学、粒径分布和胶原分子结构。并将其复合人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)体外培养24 h,观察PADM与HUVEC的黏附情况。结果脱细胞方法有效降低了ADM的DNA含量[(1.51±0.37)μg/mgvs(0.30±0.09)μg/mg]。制备的PADM为白色颗粒,外形近似于长方体或立方体,显微镜下HE染色观察显示颗粒内部胶原纤维束结构疏松。扫描电镜显示颗粒断面结构疏松,透射电镜显示胶原原纤维周期性横纹结构和均匀分布的胶原原纤维间隙。激光粒度分析仪检测显示其粒度分布集中,例如,规格为0.2 mm的PADM,其80%(d0.1～d0.9)的粒径分布于233～487μm。FTIR结果显示,PADM分别在1 659、1 549、1 239 cm-1处出现的特征吸收峰,表明其保留了胶原分子的α-helix、β-sheet和β-turn二级结构,且体外HUVEC较易黏附于PADM。结论室温条件下,切割法制备的新型PADM形态规则,粒径分布集中,胶原纤维束形态和胶原分子的二级结构保存良好。 展开更多
关键词 细胞外基质 颗粒状脱细胞真皮基质 粒径分布 傅里叶变换红外光谱仪
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