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Gm49394对胰岛β细胞凋亡的调控及机制研究
1
作者 刘东 赵清远 +5 位作者 杨数数 张梦军 黎婕 李雨浩 王莉 吴玉章 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第18期2211-2222,共12页
目的研究功能未知基因Gm49394参与糖尿病背景下胰岛β细胞凋亡的调控及可能机制。方法通过RNA荧光原位杂交技术(RNA fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)、Western blot、免疫荧光染色(immunofluorescence,IF)、实时荧光定量P... 目的研究功能未知基因Gm49394参与糖尿病背景下胰岛β细胞凋亡的调控及可能机制。方法通过RNA荧光原位杂交技术(RNA fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)、Western blot、免疫荧光染色(immunofluorescence,IF)、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测Gm49394在胰岛β细胞系(NIT-1和Min6)及非胰岛β细胞系(293T、3T3L1、B16、LS174T)的表达及翻译活性;通过构建过表达/敲低稳转细胞株(NIT-1/Min6),在稳态以及葡萄糖(30 mmol/L)、单独IFN-γ(10 ng/mL)或联合IL-6(10 ng/mL)、H_(2)O_(2)(100μmol/L)等病理应激条件下,采用流式细胞术和Western blot检测β细胞增殖、凋亡、线粒体功能,及氧化应激和内质网应激标志。结果RNA-FISH和qPCR结果显示基因Gm49394在胰岛β细胞系中特异性表达,并受高糖或炎症因子刺激而上调;IF及Western blot结果显示Gm49394具有蛋白编码活性;流式细胞术和Western blot结果显示Gm49394过表达不影响β细胞增殖,但显著促进稳态和病理应激条件下的β细胞凋亡,并增加活性氧(reactive oxygen species,ROS)及线粒体超氧化物(mitochondrial superoxide,MitoSOX)水平(P<0.05);稳态条件下,Gm49394敲低对β细胞增殖、凋亡、ROS及MitoSOX均无显著影响,但Gm49394敲低能显著抑制病理应激条件下的β细胞凋亡,同时显著抑制氧化应激和内质网应激(P<0.05)。结论基因Gm49394可能通过氧化应激和内质网应激促进胰岛β细胞的凋亡。 展开更多
关键词 糖尿病 胰岛Β细胞 氧化应激 内质网应激 凋亡
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基于连续血糖监测的葡萄糖目标范围内时间(TIR)在糖尿病肾病早期筛查中的临床应用价值
2
作者 张晖 冯颖瑜 +2 位作者 邓承宗 王筱菁 黎雅清 《现代生物医学进展》 2025年第21期3398-3405,共8页
目的:探讨基于连续血糖监测(CGM)的葡萄糖目标范围内时间(TIR)在2型糖尿病(T2DM)患者糖尿病肾病(DKD)早期筛查中的临床价值。方法:采用前瞻性对照设计,纳入2024年4月至2025年3月在我院住院的206例T2DM患者,根据UACR和e GFR分为DKD组(64... 目的:探讨基于连续血糖监测(CGM)的葡萄糖目标范围内时间(TIR)在2型糖尿病(T2DM)患者糖尿病肾病(DKD)早期筛查中的临床价值。方法:采用前瞻性对照设计,纳入2024年4月至2025年3月在我院住院的206例T2DM患者,根据UACR和e GFR分为DKD组(64例)和单纯T2DM组(142例)。收集患者临床资料,通过CGM计算TIR、高血糖时间(TAR)、低血糖时间(TBR)及血糖波动指标,比较两组差异;分析TIR与肾脏损伤指标的相关性并分析DKD的独立危险因素,TIR对DKD的诊断效能。结果:DKD组TIR水平显著低于单纯T2DM组(52.3±10.8%vs 68.5±12.3%, P<0.001),TAR、TBR、血糖标准差(SD)及变异系数(CV)显著升高(P<0.05)。TIR与UACR呈负相关(r=-0.586, P<0.001),与eGFR呈正相关(r=0.492, P<0.001)。多因素Logistic回归显示,TIR降低(OR=0.926, 95%CI:0.887~0.966, P<0.001)是DKD的独立危险因素。ROC曲线分析中,TIR诊断DKD的AUC为0.852(95%CI:0.790~0.914),最佳截断值为≤58.3%,灵敏度和特异度分别为78.1%和76.8%;四者联合诊断AUC达0.913。结论:TIR与DKD发生密切相关,是DKD的独立危险因素,具有较高的早期诊断价值,联合传统指标可进一步提升DKD风险分层准确性。 展开更多
关键词 葡萄糖目标范围内时间 糖尿病肾病 连续血糖监测 早期筛查 诊断价值
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大鼠胰岛分离纯化和功能分析的研究 被引量：9
3
作者 刘翠萍 徐宽枫 +2 位作者 武晓泓 茅晓东 刘超 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期242-245,F0004,共5页
目的:探讨大鼠胰岛分离纯化的方案。方法:采用胰管内灌注胶原酶Ⅴ消化、Histopaque-1077密度梯度离心分离纯化20只雄性SD大鼠胰岛。椎虫蓝染色判断胰岛存活率,双硫腙染色后计数胰岛,葡萄糖刺激胰岛素释放实验评估胰岛功能,同种异体胰岛... 目的:探讨大鼠胰岛分离纯化的方案。方法:采用胰管内灌注胶原酶Ⅴ消化、Histopaque-1077密度梯度离心分离纯化20只雄性SD大鼠胰岛。椎虫蓝染色判断胰岛存活率,双硫腙染色后计数胰岛,葡萄糖刺激胰岛素释放实验评估胰岛功能,同种异体胰岛门静脉移植治疗5只链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠,监测血糖变化。结果:分离纯化后平均胰岛得率为(646±67)个/大鼠,存活率达到90%以上。新鲜分离的胰岛呈椭圆或圆形,悬浮于培养液面,胞膜光滑完整,直径大于150μm的细胞团占95%以上。葡萄糖刺激的胰岛素释放试验结果表明:第1、3、5天胰岛的刺激指数分别为2.6倍、1.7倍和1.4倍,两组间低糖和高糖的胰岛分泌量差异均有显著性(P<0.05)。胰岛门静脉移植术后,第2天大鼠血糖降至11.1mmol/L,8天内血糖可控制在15mmol/L以下,随后血糖逐步升高。结论:采用胰管内灌注胶原酶Ⅴ消化联合Histopaque-1077分离纯化是一种较好的大鼠胰岛分离方法,胰岛得率较高且功能良好。 展开更多
关键词 胰岛 分离 纯化 移植
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链脲佐菌素敏感的胰岛细胞表达亨廷顿蛋白相关蛋白1 被引量：4
4
作者 刘晶晶 陈樱花 +5 位作者 陈小伟 郭剑锋 陈星星 廖敏 张亦农 李和 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期299-302,共4页
目的探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)在大鼠胰岛中的定位。方法应用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin)的方法选择性破坏大鼠胰岛B细胞复制糖尿病模型,免疫组织化学ABC法显示胰岛内HAP1和胰岛素免疫反应性。结果在正常大鼠... 目的探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)在大鼠胰岛中的定位。方法应用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin)的方法选择性破坏大鼠胰岛B细胞复制糖尿病模型,免疫组织化学ABC法显示胰岛内HAP1和胰岛素免疫反应性。结果在正常大鼠胰腺内,HAP1选择性表达于胰岛内,HAP1免疫反应阳性细胞呈短条索状或团状分布在每个胰岛内,主要位于胰岛的中央部,与胰岛B细胞的分布十分相似。注射链脲佐菌素的大鼠,胰岛中含HAP1的细胞数量在注射链脲佐菌素3d后已明显减少,并随着注射后动物存活时间的延长而进一步进行性减少;在注射后4周的大鼠,胰岛中仅有少数散在分布的HAP1免疫反应弱阳性细胞。链脲佐菌素对胰岛中表达HAP1细胞的影响与对表达胰岛素细胞的影响一致。结论HAP1也存在于胰岛内,并主要定位于链脲佐菌素敏感的B细胞内。 展开更多
关键词 亨廷顿蛋白相关蛋白1 胰岛素 链脲佐菌素 胰岛 免疫组织化学 大鼠
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血红素加氧酶/一氧化碳系统在1,6-二磷酸果糖抗IL-1β致胰岛细胞凋亡中的作用 被引量：4
5
作者 郑倩 刘红 +5 位作者 曹弟勇 兰海涛 刘华 敬华娥 张能 方海立 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期548-552,共5页
目的:探讨1,6-二磷酸果糖(FDP)对白介素-1β(IL-1β)致胰岛细胞凋亡的保护作用及其机制与血红素加氧酶/一氧化碳(HO-1/CO)系统的关系。方法:应用离体培养乳鼠的胰岛细胞,分别检测IL-1β、FDP作用后细胞形态、细胞活性、细胞凋亡率、细胞... 目的:探讨1,6-二磷酸果糖(FDP)对白介素-1β(IL-1β)致胰岛细胞凋亡的保护作用及其机制与血红素加氧酶/一氧化碳(HO-1/CO)系统的关系。方法:应用离体培养乳鼠的胰岛细胞,分别检测IL-1β、FDP作用后细胞形态、细胞活性、细胞凋亡率、细胞HO-1的活性和细胞培养上清液中胰岛素的基础和高糖刺激分泌量以及CO的含量的变化,同时设立正常对照组。结果:正常胰岛细胞HO-1活性较低,CO含量少,凋亡细胞率为4.71±0.62。IL-1β作用20 h后,与正常组比较胰岛细胞活性明显降低,基础和高糖刺激胰岛素分泌减少,胰岛细胞凋亡率明显增加(P<0.01);细胞HO-1活性有所增加,上清液中CO生成增多(P<0.05),损伤后与FDP共同孵育细胞活性显著升高,胰岛素基础和高糖分泌量增多,胰岛凋亡率明显降低,HO-1活性和CO生成显著提高(P<0.01),具有统计学意义。结论:FDP能降低IL-1β诱导胰岛细胞的凋亡,改善细胞活性,促进细胞的分泌功能,机制可能与FDP增加HO-1活性,从而CO生成增多有关。 展开更多
关键词 1 6-二磷酸果糖 IL-1Β 胰岛 细胞凋亡 血红素加氧酶 一氧化碳
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高脂饮食诱导的胰岛素抵抗研究进展 被引量：15
6
作者 唐远谋 陈祥贵 焦士蓉 《西华大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第2期98-102,共5页
胰岛素抵抗是代谢综合症疾病发生的中心环节,而高脂环境是胰岛素抵抗发生的重要的危险因素。为此,本文归纳了高脂饮食诱导的胰岛素抵抗发生的基本特征,并从胰岛素作用的肌肉组织、肝脏组织、脂肪组织角度对近年来国内外关于高脂饮食诱... 胰岛素抵抗是代谢综合症疾病发生的中心环节,而高脂环境是胰岛素抵抗发生的重要的危险因素。为此,本文归纳了高脂饮食诱导的胰岛素抵抗发生的基本特征,并从胰岛素作用的肌肉组织、肝脏组织、脂肪组织角度对近年来国内外关于高脂饮食诱导的胰岛素抵抗研究报道进行了综述。长期高脂饮食可明显改变机体糖脂代谢,并诱导胰岛素抵抗的发生。 展开更多
关键词 高脂饮食 诱导 胰岛素抵抗
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胰腺发育相关maf基因在胰腺导管和胰岛的表达 被引量：3
7
作者 张贤玲 顾燕云 +2 位作者 周文中 张宏利 李果 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第4期431-436,共6页
为探讨胰岛功能和发育相关maf基因在胰腺导管上皮中的表达情况,对新鲜小鼠胰腺组织切片进行显微切割,分离纯化胰腺组织中的导管和胰岛,以及外分泌腺组织细胞作为对照,利用荧光实时定量PCR的方法完成对目的基因的相对定量.结果显示,mafam... 为探讨胰岛功能和发育相关maf基因在胰腺导管上皮中的表达情况,对新鲜小鼠胰腺组织切片进行显微切割,分离纯化胰腺组织中的导管和胰岛,以及外分泌腺组织细胞作为对照,利用荧光实时定量PCR的方法完成对目的基因的相对定量.结果显示,mafamRNA,mafbmRNA水平在胰岛及导管中非常接近,无统计学差异.而c-maf在导管的表达高于胰岛(P<0.05),外分泌腺则无上述基因的表达.胰腺导管中mafa,mafb,cmaf均有表达,肯定了导管上皮细胞向内分泌细胞分化的潜能,而c-maf在导管中的表达高于胰岛,提示导管上皮c-maf的下调可能有助于导管上皮细胞向内分泌细胞的分化成熟. 展开更多
关键词 激光显微切割 胰腺导管上皮细胞 maf家族基因 实时定量PCR
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“人参-黄芪-葛根”角药修复胰岛形态功能的潜在机制预测及验证
8
作者 倪英群 李居一 +3 位作者 林逸轩 叶蕾 张喆 方朝晖 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期574-582,共9页
目的运用网络药理学预测“人参-黄芪-葛根”角药保护胰岛形态,改善胰岛素抵抗的潜在机制并验证。方法角药活性成分及靶点由TCMSP、TCMIP、BATMAN 3个平台获得。2型糖尿病靶点由TTD、OMIM、disgeNET 3个平台获得。利用STRING数据库和Cyto... 目的运用网络药理学预测“人参-黄芪-葛根”角药保护胰岛形态,改善胰岛素抵抗的潜在机制并验证。方法角药活性成分及靶点由TCMSP、TCMIP、BATMAN 3个平台获得。2型糖尿病靶点由TTD、OMIM、disgeNET 3个平台获得。利用STRING数据库和Cytoscape 3.9.1构建PPI网络;进行GO和KEGG分析;POCASA 1.1预测蛋白结合位点,AutoDock Vina1.1.2进行对接,并进行实验验证。结果角药筛选出2021个靶点,其中152个与2型糖尿病密切相关,鉴定出10个关键基因和AGE-RAGE信号通路。分子对接显示,槲皮素与RAGE、INS、PI3K之间具有较好的结合。角药提高胰岛素结合率和分泌指数,降低血清胰岛素水平、胰岛素抵抗指数等,其作用机制可能是角药降低AGE-RAGE的表达,激活PI3K-Akt,抑制NF-κB,降低IL-6、IL-1β和TNF-α的表达。结论“人参-黄芪-葛根”角药通过调节AGE-RAGE/PI3K-Akt/NF-κB信号转导,修复受损胰岛形态,改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 “人参-黄芪-葛根”角药 胰岛素抵抗 AGE-RAGE PI3K-AKT NF-ΚB 胰岛功能
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NOD小鼠胰岛分离与纯化的方法研究 被引量：7
9
作者 蒋铁建 苏恒 周智广 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期85-87,共3页
目的 :研究非肥胖性糖尿病 (NOD)小鼠胰岛分离与纯化的方法。方法 :采用改良的胰导管逆行灌注胶原酶静止消化胰腺 ,分离成年NOD小鼠胰岛 ,不连续密度梯度Ficoll液 (2 5 % ,2 3% ,2 0 5 % ,11% )离心、纯化胰岛。用双硫棕 (Dithizone ,D... 目的 :研究非肥胖性糖尿病 (NOD)小鼠胰岛分离与纯化的方法。方法 :采用改良的胰导管逆行灌注胶原酶静止消化胰腺 ,分离成年NOD小鼠胰岛 ,不连续密度梯度Ficoll液 (2 5 % ,2 3% ,2 0 5 % ,11% )离心、纯化胰岛。用双硫棕 (Dithizone ,DTZ)对胰岛进行特异性染色 ,以葡萄糖刺激胰岛素释放检测胰岛功能。结果 :不同浓度 (0 5mg·ml-1,1mg·ml-1,2mg·ml-1)的胶原酶在不同时间 (2 0min ,4 0min ,6 0min)内静止消化胰腺后收获的胰岛数量和胰岛活性不同 ,采用 1mg·ml-1浓度的Ⅺ型胶原酶消化 4 0min后效果最好 ,平均能得到 (195± 8)个胰岛 /胰腺 ,活性 >90 % ,纯度 >90 %。DTZ染色后胰岛呈红色 ,形态完整。高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激后的 2倍。结论 :改良的胰导管逆行灌注胶原酶静止消化NOD鼠胰腺 ,及不连续密度梯度Ficoll液纯化胰岛的方法 ,可获得数量较多 ,纯度较高和功能较好的胰岛。 展开更多
关键词 胰岛 分离 纯化 双硫棕 NOD小鼠 糖尿病
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有机铬对实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞形态结构及功能的影响 被引量：4
10
作者 杨利敏 杨子安 +2 位作者 姚海涛 聂清 张晓波 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期208-211,共4页
目的探讨有机铬(2-吡啶甲酸铬)对大鼠胰岛β细胞形态结构及内分泌功能的影响。方法首先通过尾静脉注射新鲜配制的1.5%四氧嘧啶溶液制备糖尿病大鼠模型;通过灌胃的方式提高糖尿病大鼠体内有机铬含量;治疗12周后,通过氧化酶法测定大鼠血... 目的探讨有机铬(2-吡啶甲酸铬)对大鼠胰岛β细胞形态结构及内分泌功能的影响。方法首先通过尾静脉注射新鲜配制的1.5%四氧嘧啶溶液制备糖尿病大鼠模型;通过灌胃的方式提高糖尿病大鼠体内有机铬含量;治疗12周后,通过氧化酶法测定大鼠血清葡萄糖水平,利用免疫组织化学方法和放射免疫学方法分别观察大鼠胰岛β细胞形态结构的改变及大鼠血清胰岛素含量的变化。结果两治疗组大鼠血清葡萄糖水平明显下降,与糖尿病模型组相比,差异均有显著性;400μg治疗组大鼠体内胰岛素水平明显升高,与糖尿病模型组相比差异有显著性,而200μg治疗组大鼠血清胰岛素水平虽有所增加但与糖尿病组相比,差异无显著性;免疫组化显示治疗组大鼠胰岛β细胞数量增多,胞质内胰岛素免疫反应阳性颗粒明显增多。结论有机铬对糖尿病大鼠具有明显的降低血糖功能,并能促进受损胰岛及β细胞形态结构功能的恢复,对糖尿病大鼠病理状态具有明显的改善作用。 展开更多
关键词 有机铬 糖尿病 胰岛 Β细胞 大鼠
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度拉糖肽对血糖控制不佳2型糖尿病患者体格检查指标、血糖代谢及胰岛功能的影响
11
作者 周钟玉 王聪 +4 位作者 王琳 陈壮森 黄莺 黄彩艳 冯琨 《现代生物医学进展》 2025年第17期2790-2796,2834,共8页
目的:探讨度拉糖肽对血糖控制不佳2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者体格检查指标、血糖代谢及胰岛功能的影响。方法:选择2023年1月至2024年7月期间我院收治的135例血糖控制不佳T2DM患者。采用前瞻性随机对照设计,按随机数... 目的:探讨度拉糖肽对血糖控制不佳2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者体格检查指标、血糖代谢及胰岛功能的影响。方法:选择2023年1月至2024年7月期间我院收治的135例血糖控制不佳T2DM患者。采用前瞻性随机对照设计,按随机数表法分为对照1组(接受利格列汀治疗,n=45)、对照2组(接受甘精胰岛素治疗,n=45)和观察组(接受度拉糖肽治疗,n=45)。对比三组体格检查指标、血糖指标、胰岛功能和不良反应发生情况。结果:治疗12周后,观察组的体质量指数(body mass index,BMI)、腰围、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,HbAlc)、餐后2 h血糖(postprandial 2-hour plasma glucose,2hPG)低于对照1组、对照2组(P<0.05)。治疗12周后,观察组HbAlc达标率最高,高达71.1%(P<0.05)。治疗12周后,观察组空腹C肽(fasting C-peptide,FC-P)、改良稳态模型的胰岛素功能指数HOMA-islet(C peptide-diabetes mellitus,CP-DM)高于对照1组、对照2组(P<0.05)。结论:度拉糖肽可有效改善血糖控制不佳T2DM患者体格检查指标、血糖指标及胰岛功能。 展开更多
关键词 度拉糖肽 2型糖尿病 二甲双胍 体格指标 血糖代谢 胰岛功能
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瘦素对大鼠体外胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的抑制作用 被引量：3
12
作者 王丽红 陈锦凤 +3 位作者 马红英 杨育清 林斌松 陈诺琦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期850-851,共2页
目的了解不同浓度瘦素对体外培养大鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响。方法用含11.1 mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养液体外培养大鼠胰岛β细胞系胰岛素-1(insulin-1,INS-1)细胞,实验分为5组,培养液瘦素浓度分别为0、5、10、20μg/L和50... 目的了解不同浓度瘦素对体外培养大鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响。方法用含11.1 mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养液体外培养大鼠胰岛β细胞系胰岛素-1(insulin-1,INS-1)细胞,实验分为5组,培养液瘦素浓度分别为0、5、10、20μg/L和50μg/L。培养24 h后分别以荧光定量PCR和ELISA方法检测胰岛β细胞前胰岛素原mRNA的表达及上清液胰岛素浓度。结果在葡萄糖浓度11.1 mmol/L、瘦素作用24 h情况下,胰岛β细胞前胰岛素原mRNA表达随培养液瘦素浓度的升高而逐渐下降,上清液胰岛素浓度随培养液瘦素浓度的升高而逐渐下降,瘦素可抑制胰岛β细胞胰岛素的合成与分泌。结论重组瘦素对体外培养大鼠胰岛β细胞(葡萄糖浓度11.1 mmol/L,瘦素作用24 h)胰岛素的合成与分泌具有抑制作用,随瘦素浓度的增加,抑制作用越明显。 展开更多
关键词 瘦素 胰岛Β细胞 胰岛素合成与分泌
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不同体重供体及理化因素对小鼠胰岛分离的影响 被引量：2
13
作者 张梅 刘超 +3 位作者 徐书杭 刘翠萍 徐瑜 徐宽枫 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期728-731,F0004,共5页
目的:探讨提高小鼠胰岛数量和质量的可靠方法。方法:采用胆管内胶原酶灌注和Histopaque1077密度离心法分离纯化胰岛。分别观察供体的体重、胶原酶的浓度、消化的时间及温度对胰岛分离起的作用。在体外,ELISA检测葡萄糖刺激引起的小鼠胰... 目的:探讨提高小鼠胰岛数量和质量的可靠方法。方法:采用胆管内胶原酶灌注和Histopaque1077密度离心法分离纯化胰岛。分别观察供体的体重、胶原酶的浓度、消化的时间及温度对胰岛分离起的作用。在体外,ELISA检测葡萄糖刺激引起的小鼠胰岛素分泌。在体内,胰岛移植评价胰岛对糖尿病小鼠血糖的调节功能。结果:高体重供体组胰岛的收获量显著高于低体重供体组(P<0.01)。胶原酶浓度、消化时间对胰岛收获量起重要作用。胰岛活率≥95%。体外胰岛素释放试验表明胰岛功能良好。同种异体胰岛移植的糖尿病小鼠高血糖状态得到逆转。结论:小鼠的体重、胶原酶的浓度、消化时间和温度是影响胰岛数量和功能的重要因素。 展开更多
关键词 小鼠 胰岛 分离 体重 胶原酶 移植
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高糖诱导氧化应激对胰岛细胞功能的影响 被引量：4
14
作者 陈莹晖 李裕明 +1 位作者 林松挺 谭光宏 《海南医学院学报》 CAS 2012年第1期12-14,共3页
目的:研究不同浓度葡萄糖对INS-1细胞及胰岛分泌功能的影响,并探讨氧化应激在葡萄糖对INS-1细胞功能损伤中的作用。方法:将不同浓度葡萄糖(11.1、16.7、22.2、33.3mmol/L)作用于INS-1细胞,镜下观察INS-1细胞的形态改变,应用可见分光光... 目的:研究不同浓度葡萄糖对INS-1细胞及胰岛分泌功能的影响,并探讨氧化应激在葡萄糖对INS-1细胞功能损伤中的作用。方法:将不同浓度葡萄糖(11.1、16.7、22.2、33.3mmol/L)作用于INS-1细胞,镜下观察INS-1细胞的形态改变,应用可见分光光度计测定丙二醛(MDA)含量,运用ELISA方法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)。结果:随着葡萄糖浓度的增加,INS-1细胞的凋亡增多,MDA含量逐渐增加,GSIS值逐渐下降,不同浓度葡萄糖组间MDA含量、GSIS值差异有统计学意义(P均<0.01)。结论:高糖可促进INS-1细胞凋亡,在高糖作用下活性氧物质(ROS)代谢产物MDA增多,胰岛细胞胰岛素分泌功能受损。 展开更多
关键词 氧化应激 胰岛Β细胞 胰岛功能
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NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用 被引量：2
15
作者 李晶 陈丹 +1 位作者 周宇 鲍翠玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1317-1321,共5页
目的探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用。方法不同浓度(0.1、0.3、0.5、0.8mmol·L^(-1))高脂刺激MIN6胰岛β细胞(24、48、72、96 h),MTT法检测细胞增殖情况;免疫印迹法检测细胞内p22^(phox)、p47^(phox)、p67... 目的探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用。方法不同浓度(0.1、0.3、0.5、0.8mmol·L^(-1))高脂刺激MIN6胰岛β细胞(24、48、72、96 h),MTT法检测细胞增殖情况;免疫印迹法检测细胞内p22^(phox)、p47^(phox)、p67^(phox)以及gp91^(phox)等NADPH氧化酶亚基的表达水平及凋亡相关蛋白(Bcl-2及Bax)的表达水平。结果 0.5mmol·L^(-1)高脂刺激MIN6胰岛细胞48 h时,细胞增殖率出现明显下降;p22^(phox)、p47^(phox)、p67^(phox)以及gp91^(phox)等NADPH氧化酶亚基和Bax的表达水平明显升高(P<0.05),而Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05);NADPH氧化酶抑制剂diphenyliodonium(DPI,10μmol·L^(-1))预处理后并高脂刺激MIN6胰岛β细胞48 h,与高脂刺激组相比,DPI处理组细胞Bcl-2表达明显上升(P<0.05),Bax表达明显下调(P<0.05)。结论 NADPH氧化酶活性对高脂引起的MIN6胰岛β细胞损伤的防治有重要意义。 展开更多
关键词 NADPH氧化酶 高脂 MIN6 胰岛Β细胞 Bcl-2 Bax
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小鼠PPARδ腺病毒载体的构建及其在INS-1细胞中的表达 被引量：3
16
作者 姜友昭 张玲 +1 位作者 周艳 陈兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期68-70,共3页
目的构建含有小鼠过氧化物酶增殖激活受体δ(peroxisom e proliferate activated receptor delta,PPARδ)基因的重组腺病毒表达载体。方法通过KpnⅠ和EcoRⅤ双酶切,从pCDNA3.0-mPPARδ载体中得到含有小鼠PPARδ全长编码序列的片段,将mP... 目的构建含有小鼠过氧化物酶增殖激活受体δ(peroxisom e proliferate activated receptor delta,PPARδ)基因的重组腺病毒表达载体。方法通过KpnⅠ和EcoRⅤ双酶切,从pCDNA3.0-mPPARδ载体中得到含有小鼠PPARδ全长编码序列的片段,将mPPARδ与pAdtrack-CMV相连接并用Pm eⅠ线性化后,转化含有pAdeasy骨架质粒的细菌B J5183,在细菌内同源重组后得到pAd-mPPARδ质粒。pAd-mPPARδ经PacⅠ线性化后用L ipofectam ineTM2000转染HEK293细胞,包装得到含PPARδ基因的病毒重组子,将病毒重组子在HEK293细胞中扩增后,反复冻融得到滴度较高的含PPARδ的病毒液。将收集的病毒液感染INS-1细胞,绿色荧光观察GFP和W estern b lot检测PPARδ蛋白的表达。结果成功构建了含有小鼠PPARδ基因的重组腺病毒载体,病毒滴度为1.5×1010pfu/m。l重组腺病毒感染后可使INS-1细胞PPARδ蛋白表达明显增加。结论该重组腺病毒载体的构建为研究PPARδ基因在胰岛细胞中生物学功能提供了一定的工作基础。 展开更多
关键词 腺病毒载体 PPAR8 INS-1细胞
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不同糖耐量人群胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的比较研究 被引量：5
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作者 杨明 张敏 +6 位作者 周广朋 贾晓利 龙建竹 王钧慷 任敏 陈平 陈树 《实用医院临床杂志》 2012年第3期47-51,共5页
目的观察不同糖耐量人群胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)和胰岛β细胞功能改变的特点,为临床正确选择干预病变的靶点和治疗措施提供依据。方法对9922例初诊或疑诊为2型糖尿病(T2DM)患者的口服75 g葡萄糖耐量试验(Oral Glucose Tolera... 目的观察不同糖耐量人群胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)和胰岛β细胞功能改变的特点,为临床正确选择干预病变的靶点和治疗措施提供依据。方法对9922例初诊或疑诊为2型糖尿病(T2DM)患者的口服75 g葡萄糖耐量试验(Oral Glucose Tolerance Test,OGTT)及胰岛素释放结果进行分析。根据空腹血糖(FBG)6.1 mmol/L和7.0 mmol/L及餐后2 h血糖(2 hPG)7.8 mmol/L和11.1 mmol/L四个切点将人群分为正常糖耐量组1362例(NGT组)、单纯空腹血糖受损组982例(I-IFG组)、单纯糖耐量减低组778例(I-IGT组)、联合糖耐量减低组1300例(C-IGT组)、空腹正常型糖尿病组250例(NFD组)、空腹受损型糖尿病组1186例(IFD组)、餐后正常型糖尿病组14例(NPD组)、餐后受损型糖尿病组332例(IPD组)、空腹合并餐后型糖尿病组3708例(CFPD组)。结果①稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)由小到大依次为NGT组、I-IGT组、NFD组、I-IFG组、C-IGT组、IFD组、IPD组、CFPD组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);NPD组与NGT组、I-IGT组、C-IGT组比较差异有统计学意义(P<0.05),与其他组差异无统计学意义。②胰岛素分泌指数(ΔI30/ΔG30)由小到大依次为CFPD组、IFD组、NFD组、IPD组、C-IGT组、NPD组、I-IGT组、I-IFG组、NGT组,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。③校正IR影响后,胰岛β细胞分泌功能由弱到强依次为CFPD组、IPD组、IFD组、NPD组、NFD组、C-IGT组、I-IFG组、I-IGT组、NGT组,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同糖耐量人群IR和胰岛β细胞功能具有FBG越高基础胰岛素抵抗越严重,单纯以餐后增高为特征的糖尿病患者并未表现出基础胰岛素抵抗,主要是早晚相胰岛素分泌缺陷,空腹相当时餐后血糖越高胰岛分泌功能越弱,即随着空腹、餐后糖代谢紊乱的不断进展,IR逐渐加重,胰岛β细胞分泌功能进行性减退。针对此特点进行个体化干预及治疗尤为重要。 展开更多
关键词 胰岛Β细胞功能 胰岛素抵抗 糖耐量 糖尿病
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1型糖尿病患儿25羟维生素D水平及其对残存胰岛β细胞功能和血糖控制的影响 被引量：7
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作者 张晓红 袁高品 李艳红 《福建医科大学学报》 2020年第6期403-405,410,共4页
目的评估1型糖尿病患儿血清25羟维生素D[25-(OH)D]水平,探讨25-(OH)D与1型糖尿病患儿残存胰岛细胞功能和血糖控制的相关性。方法分别选取2018年1月-2019年1月确诊的1型糖尿病患儿56例和健康体检儿童56例作为研究组和对照组,比较两组间25... 目的评估1型糖尿病患儿血清25羟维生素D[25-(OH)D]水平,探讨25-(OH)D与1型糖尿病患儿残存胰岛细胞功能和血糖控制的相关性。方法分别选取2018年1月-2019年1月确诊的1型糖尿病患儿56例和健康体检儿童56例作为研究组和对照组,比较两组间25-(OH)D水平的差别。给予1型糖尿病患儿口服补充维生素D,对比补充前后患儿的血清25-(OH)D水平、C肽浓度、糖化血红蛋白(HbA1c)及胰岛素使用剂量。结果本地区各年龄段1型糖尿病患儿血清25-(OH)D水平均明显低于同年龄段健康儿童,差别有统计学意义(P<0.05)。规律补充维生素D后,患儿的血清25-(OH)D水平及C肽浓度明显升高,HbA1c水平下降,与补充前水平比较,差别有统计学意义(P<0.05),但胰岛素使用剂量变化不大(P>0.05)。结论1型糖尿病患儿普遍存在25-(OH)D缺乏,口服维生素D可以改善残存β细胞的功能,降低HbA1c水平。 展开更多
关键词 维生素D 糖尿病 1型 儿童 胰岛/细胞学 血糖/分析
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亨廷顿蛋白相关蛋白1基因沉默对小鼠胰岛β细胞系NIT细胞凋亡的影响 被引量：1
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作者 陈世新 张婵 +2 位作者 侯杰 任艳华 廖敏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期379-382,共4页
目的探讨沉默亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)基因表达对小鼠胰岛β细胞株-NIT细胞凋亡的影响。方法化学合成针对小鼠HAP1基因的siRNA,转染NIT细胞,观察干扰效果;通过膜联蛋白V/碘化丙啶(AnnexinⅤ/PI)染色和原位末端核苷酸标记法(TUNEL),检... 目的探讨沉默亨廷顿蛋白相关蛋白1(HAP1)基因表达对小鼠胰岛β细胞株-NIT细胞凋亡的影响。方法化学合成针对小鼠HAP1基因的siRNA,转染NIT细胞,观察干扰效果;通过膜联蛋白V/碘化丙啶(AnnexinⅤ/PI)染色和原位末端核苷酸标记法(TUNEL),检测沉默HAP1表达后NIT细胞的凋亡;通过AnnexinⅤ/PI染色检测沉默HAP1表达后,链脲佐菌素(STZ)所诱导的NIT细胞凋亡。结果靶向HAP1的siRNA能有效抑制NIT细胞HAP1的表达;HAP1 siRNA实验组,NIT细胞凋亡数增多,凋亡率显著高于空白对照组(P<0.01);STZ可明显诱导NIT细胞的凋亡,沉默HAP1的表达能增加STZ所诱导的NIT细胞凋亡。结论沉默HAP1的表达可以增加小鼠胰岛β细胞株NIT细胞的凋亡,同时也能促进凋亡诱导剂(STZ)所诱导的胰岛NIT细胞的凋亡。 展开更多
关键词 亨廷顿蛋白相关蛋白1 NIT细胞 SIRNA 膜联蛋白V/碘化丙啶涂色 原位末端核苷酸标记法 小鼠
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不同培养基对干细胞-胰岛复合物培养后形态和功能的影响 被引量：1
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作者 聂唯 马小倩 +2 位作者 刘亮 张娟 王维 《生命科学研究》 CAS CSCD 2015年第6期516-520,共5页
探讨3种培养基对干细胞包被胰岛形态和功能的影响。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)、内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)、新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)混合后分别用NICC培养... 探讨3种培养基对干细胞包被胰岛形态和功能的影响。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)、内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)、新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)混合后分别用NICC培养基(A组)、MSC培养基(B组)、EPC培养基(C组)培养,观察各组中NICCs形态、分泌功能、基因表达水平及混合细胞凋亡率。C组破碎细胞数量明显比A、B两组少,凋亡率低,胰岛素和胰高血糖素基因的mRNA相对表达量高(P<0.05)。EPC培养基对NICCs的保护作用最优。 展开更多
关键词 培养基 新生猪胰岛细胞(NICCs) 间充质干细胞(MSCs) 内皮祖细胞(EPCs) 共培养
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