目的建立双侧迷走神经干切断术动物模型,研究迷走神经对Oddi括约肌(Sphincter of Oddi,SO)的调节作用。方法成年杂种犬禁食16~18 h(可自由饮水)麻醉后,实验组行膈肌水平双侧迷走神经干切断术加幽门成形术,对照组仅行幽门成形术。手...目的建立双侧迷走神经干切断术动物模型,研究迷走神经对Oddi括约肌(Sphincter of Oddi,SO)的调节作用。方法成年杂种犬禁食16~18 h(可自由饮水)麻醉后,实验组行膈肌水平双侧迷走神经干切断术加幽门成形术,对照组仅行幽门成形术。手术8周后行Oddi括约肌测压(SOM)及肌电记录(SOE),SOM和SOE前超声检查测定胆总管内径,SOM和SOE后取胆囊内胆汁肉眼观察。结果对照组比较,实验组胆总管内压明显升高,内径明显增粗,胆汁内全部出现絮状泥沙样沉淀;实验组SO基础压明显升高,收缩幅度、频率及收缩时间无显著性变化,慢波幅度明显升高,快波无显著性变化。结论迷走神经对SO运动具有抑制作用,膈肌水平双侧迷走神经干切断术导致SO肌电慢波幅度明显增高,基础压明显提高,胆道动力学发生明显变化。展开更多
目的构建含有人三叶因子3(trefoil factor family 3,TFF3)基因的腺病毒载体,并观察其对胆管上皮细胞迁移的调控作用。方法利用PCR技术对目的基因TFF3全长进行扩增,测序后亚克隆至腺病毒穿梭质粒构建载体pAdTrack-CMV-TFF3,转化至含腺病...目的构建含有人三叶因子3(trefoil factor family 3,TFF3)基因的腺病毒载体,并观察其对胆管上皮细胞迁移的调控作用。方法利用PCR技术对目的基因TFF3全长进行扩增,测序后亚克隆至腺病毒穿梭质粒构建载体pAdTrack-CMV-TFF3,转化至含腺病毒骨架质粒pAd-Easy的大肠杆菌株BJ5183感受态细胞中进行同源重组,筛选重组子并经内切酶PacⅠ线性化,转染293细胞进行病毒包装及扩增,并进行滴度测定。构建的TFF3腺病毒载体感染人胆管上皮细胞后用RT-PCR及Western blot检测目的基因表达水平,并进行划痕实验观察细胞迁移能力的变化。结果成功扩增了大小约为458 bp的人TFF3基因,测序报告显示目的基因序列与NCBI报道一致;成功构建了TFF3的同源重组腺病毒穿梭载体,经293细胞包装及扩增的病毒滴度为1.3×109CPU/mL。RT-PCR及Western blot结果显示转染人胆管上皮细胞后其TFF3表达明显增强,细胞迁移能力也明显高于对照组。结论成功构建含TFF3基因的腺病毒载体,为进一步研究TFF3在胆管上皮损伤修复中的作用奠定了基础。展开更多
文摘目的建立双侧迷走神经干切断术动物模型,研究迷走神经对Oddi括约肌(Sphincter of Oddi,SO)的调节作用。方法成年杂种犬禁食16~18 h(可自由饮水)麻醉后,实验组行膈肌水平双侧迷走神经干切断术加幽门成形术,对照组仅行幽门成形术。手术8周后行Oddi括约肌测压(SOM)及肌电记录(SOE),SOM和SOE前超声检查测定胆总管内径,SOM和SOE后取胆囊内胆汁肉眼观察。结果对照组比较,实验组胆总管内压明显升高,内径明显增粗,胆汁内全部出现絮状泥沙样沉淀;实验组SO基础压明显升高,收缩幅度、频率及收缩时间无显著性变化,慢波幅度明显升高,快波无显著性变化。结论迷走神经对SO运动具有抑制作用,膈肌水平双侧迷走神经干切断术导致SO肌电慢波幅度明显增高,基础压明显提高,胆道动力学发生明显变化。