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桔梗中黄酮类糖基转移酶基因PgUGT72B21的克隆与功能验证
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作者 李涛 郝志鹏 +3 位作者 任星榕 赵钰萤 王彩霞 薛强 《中草药》 北大核心 2026年第1期270-281,共12页
目的以桔梗Platycodon grandiflorus中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶PgUGT72B21基因的生物信息学分析、基因克隆与重组质粒构建、蛋白表达与纯化、催化功能验证、酶学性质研究、底物宽泛性考察。方法基于桔梗转录组数据筛选得到... 目的以桔梗Platycodon grandiflorus中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶PgUGT72B21基因的生物信息学分析、基因克隆与重组质粒构建、蛋白表达与纯化、催化功能验证、酶学性质研究、底物宽泛性考察。方法基于桔梗转录组数据筛选得到桔梗中关键糖基转移酶PgUGT72B21,进行基因克隆;利用基因重组技术构建了原核表达载体pET-28a-PgUGT72B21,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态;根据His标签蛋白纯化试剂盒说明进行蛋白纯化,应用SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白的表达情况;通过HPLC和LC-MS系统检测酶促反应产物。结果通过克隆得到的桔梗糖基转移酶基因PgUGT72B21开放阅读框(open reading frame,ORF)长度1407 bp,编码468个氨基酸残基,相对分子质量约为51000,C末端存在高度保守的植物次生产物糖基转移酶(plant secondary product glycosyltransferase,PSPG)基序。系统进化分析表明,该糖基转移酶属于UGT72家族。体外酶促结果显示,PgUGT72B21可催化槲皮素C3位羟基糖基化生成异槲皮苷。通过异源表达与纯化得到重组蛋白后对其酶学性质进行了分析,表明PgUGT72B21催化反应的最适pH为6.0,最适温度为60℃,反应2 h后的底物转化率达到最高。其催化槲皮素的酶动力学参数米氏常数(Km)为390.10μmol/L,转化数(kcat)为11.10/min。进一步的底物宽泛性研究显示PgUGT72B21不仅能够催化槲皮素等黄酮醇类化合物,还能够催化芹菜素等黄酮类化合物。结论发现的新糖基转移酶PgUGT72B21对于丰富糖基化工具酶库具有重要意义,且能为进一步解析桔梗中黄酮糖苷的糖基化过程奠定基础。 展开更多
关键词 桔梗 糖基转移酶 UDP-葡萄糖 槲皮素 功能验证 酶动力学
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转录组分析揭示杯茎蛇菰三萜酯生物合成途径的关键基因
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作者 李翠霞 王益娜 +3 位作者 赵秀 向贵生 张广辉 杨生超 《中草药》 北大核心 2026年第1期282-294,共13页
目的探究杯茎蛇菰Balanophora subcupularis中五环三萜酯生物合成途径的关键酶基因,为其生物合成机制及蛇菰属药用植物资源开发利用奠定了一定的研究思路和理论基础。方法对杯茎蛇菰花柄、根茎和花序3个组织进行转录组测序与分析,通过Pf... 目的探究杯茎蛇菰Balanophora subcupularis中五环三萜酯生物合成途径的关键酶基因,为其生物合成机制及蛇菰属药用植物资源开发利用奠定了一定的研究思路和理论基础。方法对杯茎蛇菰花柄、根茎和花序3个组织进行转录组测序与分析,通过PfamScan搜索三萜酯生物合成候选酶基因,并构建了BsubOSCs基因的酵母表达载体,将其导入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae羊毛甾醇合酶基因(erg7)缺陷突变株GIL77中以表征其功能。结果从杯茎蛇菰转录组中挖掘到可能参与五环三萜酯生物合成的相关酶基因共87条,其中大多数基因在花序中表达量最高,说明花序可能是五环三萜酯的主要合成部位。2条BsubOSCs基因的酶功能表征发现BsubOSC2能够催化2,3-氧化鲨烯生成β-香树脂醇,并没有检测到BsubOSC1的催化产物。结论通过转录组分析发现了杯茎蛇菰五环三萜酯的生物合成关键酶基因,其中BsubOSC2为β-香树脂醇合成酶基因,是蛇菰素A生物合成的关键酶基因之一。为进一步解析蛇菰素等三萜酯化合物的生物合成途径提供了基因资源,促进了杯茎蛇菰分子育种的研究。 展开更多
关键词 杯茎蛇菰 转录组 三萜酯生物合成 氧化鲨烯环化酶 酰基转移酶
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薯蓣属叶绿体基因组特征、密码子偏好性与机器学习分子鉴别研究
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作者 郑梦迪 徐笑雨 +3 位作者 黄美琳 高明晨 赵阳 宋茜 《中草药》 北大核心 2026年第2期640-651,共12页
目的 结合叶绿体基因组、密码子偏好性与DNA条形码、机器学习技术,为薯蓣属Dioscorea系统发育、遗传多样性及物种鉴定提供理论指导。方法 通过IRscope比对11种植物的叶绿体基因结构,并构建系统发育树;用CodonW、CUSP等工具分析密码子偏... 目的 结合叶绿体基因组、密码子偏好性与DNA条形码、机器学习技术,为薯蓣属Dioscorea系统发育、遗传多样性及物种鉴定提供理论指导。方法 通过IRscope比对11种植物的叶绿体基因结构,并构建系统发育树;用CodonW、CUSP等工具分析密码子偏好性;收集薯蓣材料并扩增测序DNA条形码序列,基于成熟酶K基因(maturase K gene,matK)、光系统Ⅱ蛋白D1基因—组氨酸tRNA基因间隔区(photosystem b a protein gene-transfer RNA-histidine intergenic spacer,psbAtrnH)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因(ribulose-bisphosphate carboxylase/oxygenase large subunit gene,rbcL)条形码和机器学习算法进行分子鉴别。结果 薯蓣属叶绿体基因组保守稳定,密码子显著A/T偏好,第3位倾向A/U结尾。自然选择是影响密码子偏差的主因,共有最优密码子为GGA和UCA。3种条形码均能成功鉴别物种,基于BLOG算法的单一条形码鉴别成功率100%,WEKA的SMO和NaïveBayes分类器鉴别率较高。结论 薯蓣叶绿体基因组保守,密码子偏好模式以自然选择为主,为薯蓣属基因表达调控、物种鉴定、资源保护等提供依据和指导。 展开更多
关键词 薯蓣属 叶绿体全基因组 密码子偏好性 DNA条形码 机器学习 分子鉴别
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不同成熟期桃儿七果实氨基酸代谢及相关基因表达水平的变化
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作者 张玲瑜 韩江媛 +3 位作者 李霞 苏红彦 刘迪 栗孟飞 《中草药》 北大核心 2026年第1期295-303,共9页
目的揭示桃儿七Sinopodophyllum hexandrum果实成熟过程中形态特征和氨基酸代谢的变化。方法以不同成熟期(S1~S9)果实为材料,分别对形态特征、氨基酸含量及相关基因表达水平进行测定与分析。结果在果实成熟过程中,形态特征(如果实颜色... 目的揭示桃儿七Sinopodophyllum hexandrum果实成熟过程中形态特征和氨基酸代谢的变化。方法以不同成熟期(S1~S9)果实为材料,分别对形态特征、氨基酸含量及相关基因表达水平进行测定与分析。结果在果实成熟过程中,形态特征(如果实颜色、长度和直径)、氨基酸含量及相关基因表达水平均发生显著变化;其中,S6相比S1,果实长度、直径、鲜质量和干质量分别增加2.21、2.18、31.42和49.05倍;氨基酸含量在S5和S9显著高于其他时期;10个候选氨基酸代谢相关基因(如精氨酸脱羧酶2、芳香酸脱水酶6和天冬酰胺合成酶)在S4~S8相比S2均呈现不同程度的下调表达。结论随着发育成熟,果实形态特征、氨基酸代谢及相关基因表达水平发生了动态变化,将对桃儿七果实的开发利用提供重要参考。 展开更多
关键词 桃儿七 果实 成熟期 形态特性 氨基酸代谢 基因表达
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黄连P450基因家族全基因组鉴定及CYP719基因的进化特异性分析
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作者 王雨婷 李国凤 +3 位作者 陶琦 刘迪 裴柳玲 刘义飞 《中草药》 北大核心 2026年第1期256-269,共14页
目的基于基因组数据挖掘黄连Coptis chinensis细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP)基因家族成员,并分析黄连CYP719基因的进化特异性。方法基于拟南芥Arabidopsis thaliana和水稻Oryza sativa的CYP基因序列鉴定黄连CYP基因家族成员,利用... 目的基于基因组数据挖掘黄连Coptis chinensis细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP)基因家族成员,并分析黄连CYP719基因的进化特异性。方法基于拟南芥Arabidopsis thaliana和水稻Oryza sativa的CYP基因序列鉴定黄连CYP基因家族成员,利用生物信息学对黄连CYP基因家族成员进行蛋白理化性质、系统分类、基因结构、表达图谱和顺式作用元件等分析;基于23条已报道的CYP719基因鉴定黄连中CYP719家族成员,基于同源序列比对进行共线性分析。结果在黄连基因组数据中共鉴定得到308个CYP基因,归属9个家族簇的45个家族。编码蛋白的氨基酸数量分布在103~2008 aa,相对分子质量介于11010~230370,等电点介于4.85~9.79。黄连CYP基因外显子数量范围为1~38个,变化范围较大。308个黄连CYP基因不均一地分布在9条染色体上,主要通过分散复制(dispersed duplication,DSD)和邻近复制(proximal duplication,PD)进行扩张。CYP基因表达具有组织特异性,有9个基因在根茎和须根中表达显著上调。胁迫响应元件是黄连CYP基因启动子区预测最多的顺式作用元件。比较基因组分析表明,CYP719基因在耧斗菜、毛黄堇、罂粟和马兜铃中有分布,在拟南芥、大豆、桃、菊花脑、葡萄、黄草乌、水稻和无油樟中均没有同源基因。结论黄连中拥有丰富的CYP超基因家族,且CYP719基因呈现支系特异性进化,为解析该类基因的功能奠定基础。 展开更多
关键词 黄连 细胞色素P450 生物信息学分析 表达模式 分散复制 邻近复制
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乌天麻TIFY基因家族的全基因组鉴定及表达模式分析
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作者 王秀雯 冉丹丹 +4 位作者 欧小宏 袁青松 周涛 江维克 徐娇 《中草药》 北大核心 2026年第2期618-626,共9页
目的 系统解析乌天麻Gastrodia elata f. glauca TIFY基因家族成员,并探究其在乌天麻-蜜环菌Armillaria gallica互作过程中的潜在分子机制。方法 基于乌天麻全基因组数据,结合生物信息学方法系统分析其系统进化、基因结构及染色体分布,... 目的 系统解析乌天麻Gastrodia elata f. glauca TIFY基因家族成员,并探究其在乌天麻-蜜环菌Armillaria gallica互作过程中的潜在分子机制。方法 基于乌天麻全基因组数据,结合生物信息学方法系统分析其系统进化、基因结构及染色体分布,通过qRT-PCR检测基因表达特征,利用质谱检测茉莉酸(jasmonic acid,JA)含量,分析基因表达与JA含量的相关性。结果 共鉴定到30个乌天麻TIFY家族成员,分属TIFY、JAZ、PPD与ZML 4个亚家族,具有高度保守的蛋白基序和相似的外显子/内含子结构,不均匀分布于7条染色体上,与石斛Dendrobium nobile的保守同源基因对多于拟南芥Arabidopsis thaliana,存在特异性扩张。顺式作用元件分析发现,乌天麻TIFY家族成员启动子区富集大量激素响应、胁迫响应及生长发育相关元件。转录组分析表明,蜜环菌侵染诱导乌天麻19个TIFY家族成员差异表达,母麻中GeJAZ4-3、GeJAZ8、GeJAZ1-1显著上调表达,且多个成员表达量与JA含量呈显著正相关,尤以Ge JAZ4-3表达量变化最为显著。结论 乌天麻TIFY基因家族呈现特异性扩张,GeJAZ4-3作为关键调控因子,通过介导JA信号通路调控乌天麻-蜜环菌互作平衡,为天麻共生机制解析及抗病育种奠定重要基础。 展开更多
关键词 天麻 乌天麻 TIFY基因家族 生物信息学 茉莉酸 表达模式
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基于转录组与sRNA测序的栝楼ERF基因家族鉴定及功能研究
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作者 宋佳辉 张文玉 +3 位作者 胡秀芹 于秀月 张效振 辛杰 《中草药》 北大核心 2026年第2期627-639,共13页
目的 基于转录组测序数据鉴定栝楼Trichosanthes kirilowii ERF基因家族(TkERFs)成员,解析其在栝楼生长发育中的生物学功能,为深入研究栝楼性别分化机制提供理论依据。方法 采用生物信息学方法系统鉴定栝楼ERF基因家族成员,并筛选性别... 目的 基于转录组测序数据鉴定栝楼Trichosanthes kirilowii ERF基因家族(TkERFs)成员,解析其在栝楼生长发育中的生物学功能,为深入研究栝楼性别分化机制提供理论依据。方法 采用生物信息学方法系统鉴定栝楼ERF基因家族成员,并筛选性别分化关键候选基因TkERF2进行功能解析。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析其组织表达模式;构建TkERF2过表达载体,通过亚细胞定位及拟南芥遗传转化实验,结合表型观察、相关基因表达量检测及乙烯含量测定,探究其生物学功能;整合转录组与small RNA组学数据,筛选靶向调控TkERFs的miRNAs,完善其调控网络。结果 基于转录组数据,经开放阅读框(open reading frame,ORF)及保守结构域分析,共鉴定出54个TkERF基因(TkERF1~TkERF54)。其编码蛋白序列长度为101~389个氨基酸,相对分子质量为11 580~43 310,理论等电点(pI)为4.66~10.60。亚细胞定位预测显示74%的TkERFs定位于细胞核,26%分布于叶绿体及细胞质。蛋白质保守基序分析鉴定出10种motif。系统发育树将该家族划分为8个亚族。筛选鉴定出TkERF2、TkERF20和TkERF45受特异性miRNA靶向调控。转基因拟南芥实验表明,TkERF2显著调控乙烯合成途径,且生长素合成基因(AtYUC2、AtYUC6)、生长素响应因子(AtARF8)及生长素转运基因(AtPIN2)的表达量均显著高于野生型(P<0.05),证实TkERF2通过正向调控生长素合成与转运参与发育进程。结论 完成栝楼ERF基因家族的系统鉴定与功能初探,为解析栝楼性别决定机制及遗传改良提供了理论基础。 展开更多
关键词 栝楼 ERF基因 性别分化 乙烯 生长素
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金银花糖基转移酶基因的原核表达及其编码蛋白纯化 被引量:2
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作者 蔡芷辰 赵君谊 +2 位作者 陈海杰 刘训红 王进 《中草药》 北大核心 2025年第4期1338-1345,共8页
目的以金银花Lonicerae Japonicae Flos中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶LjUGT73C1基因的生物信息学分析、基因合成与亚克隆、表达分析和纯化。方法利用前期盐胁迫金银花组学研究构建的金银花转录组数据库注释信息,筛选得到金银... 目的以金银花Lonicerae Japonicae Flos中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶LjUGT73C1基因的生物信息学分析、基因合成与亚克隆、表达分析和纯化。方法利用前期盐胁迫金银花组学研究构建的金银花转录组数据库注释信息,筛选得到金银花中关键糖基转移酶LjUGT73C1,进行基因合成和亚克隆;利用基因重组技术构建了原核表达载体Pet-30a-LjUGT73C1,遗传转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态;应用SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting检测蛋白的表达量、检测不同诱导条件下基因的表达情况,最后经亲和色谱进行纯化。结果通过基因合成与亚克隆得到糖基转移酶LjUGT73C1的全长序列,理论编码氨基酸数目为493,等电点(PI)预测为6.27,理论相对分子质量为55530。构建了LjUGT73C1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,应用His亲和色谱柱进行蛋白纯化并经SDS-PAGE凝胶电泳检测,确定为金银花LjUGT73C1蛋白。结论首次报道了盐胁迫金银花中糖基转移酶基因LjUGT73C1,并进行表达分析和纯化,为进一步研究金银花中苯丙素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。 展开更多
关键词 金银花 LjUGT73C1基因 生物信息分析 原核表达 蛋白纯化
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基于全长转录组的白蜡树WRKY基因家族的鉴定与密码子偏好性分析 被引量:1
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作者 孙晓春 李爽 +3 位作者 刘雅君 蔡兴航 黄文静 李会容 《中草药》 北大核心 2025年第7期2482-2494,共13页
目的对白蜡树Fraxinus chinensis WRKY基因家族进行鉴定、生物信息学和密码子偏好性分析。方法基于白蜡树全长转录组数据,利用生物信息学方法对其WRKY基因家族进行鉴定,并对其理化性质、系统发育、保守基序进行分析;基于白蜡树叶片和枝... 目的对白蜡树Fraxinus chinensis WRKY基因家族进行鉴定、生物信息学和密码子偏好性分析。方法基于白蜡树全长转录组数据,利用生物信息学方法对其WRKY基因家族进行鉴定,并对其理化性质、系统发育、保守基序进行分析;基于白蜡树叶片和枝皮的二代转录组数据,对白蜡树WRKY基因家族的表达模式进行分析,并采用实时荧光定量PCR方法进行验证;利用CodonW、EMBOSS等程序对密码子偏好性进行分析,并进行最优密码子分析、中性绘图、ENC-plot和PR2偏倚分析。结果共鉴定得到49个WRKY转录因子,均为酸性、亲水蛋白,编码氨基酸数目为426~2175,相对分子质量33933.48~179137.94,理论等电点4.91~5.27,不稳定蛋白占比65.31%,预测均定位到细胞核;系统进化表明FcWRKY基因家族成员归为Ⅰ(11个)、Ⅱ(30个)、Ⅲ(7个)大类以及2个特殊成员(FcWRKY23和FcWRKY37),其中第Ⅱ类分为Ⅱa(5个)、Ⅱb(5个)、Ⅱc(8个)、Ⅱd(7个)、Ⅱe(7个)5个亚类;Motif 1和Motif 2存在于所有的WRKY转录因子中,是其保守序列;二代转录组数据筛选到16个WRKY基因在叶片和枝皮中具有显著差异表达,其中仅有FcWRKY11在枝皮中的表达量高于叶片。白蜡树FcWRKYs偏好使用以A/U结尾的密码子,并且偏好性较弱;确定了3个最优密码子,分别是CUU、AGG、和UAU;中性绘图分析和ENC-plot分析均表明自然选择是影响其密码子偏好性的主要因素,PR2偏倚分析结果表明突变压力亦影响其密码子偏好性。结论鉴定了白蜡树WRKY基因,其中8个WRKY基因表达量与转录组学测序结果趋势一致,为研究白蜡树WRKY的基因功能奠定基础。 展开更多
关键词 白蜡树 WRKY转录因子 生物信息学 密码子偏好性分析 全长转录组
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转录组学联合代谢组学分析挖掘佛手黄酮类物质生物合成途径关键基因
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作者 潘媛 谭均 陈大霞 《中草药》 北大核心 2025年第14期5179-5189,共11页
目的基于转录组和代谢组联合挖掘佛手Citrus medica中关键黄酮类物质生物合成关键基因,为进一步探究佛手中黄酮类物质的合成调控机制提供基础。方法采用Illumina HiSeqTM 4000高通量测序平台对佛手不同发育时期的果实组织进行转录组测序... 目的基于转录组和代谢组联合挖掘佛手Citrus medica中关键黄酮类物质生物合成关键基因,为进一步探究佛手中黄酮类物质的合成调控机制提供基础。方法采用Illumina HiSeqTM 4000高通量测序平台对佛手不同发育时期的果实组织进行转录组测序,借助LC-MS/MS技术,对其黄酮类物质进行表征,通过KEGG数据库和关联分析,充分挖掘佛手黄酮类物质生物合成关键基因。结果通过代谢组学和转录组学分析共获得21个差异黄酮类物质和25个差异表达基因,均存在明显差异。佛手黄酮类物质生物合成途径中,香橙素-7-O-葡萄糖苷、圣草次苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、橙皮素-3-O-葡萄糖苷等随果实的发育逐渐降低,芹菜素-5-O-葡萄糖苷、木犀草素-4-O-葡萄糖苷等物质随果实的发育逐渐升高;在佛手黄酮类物质代谢途径中,成功鉴定到苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase,PAL)、4-香豆酸辅酶a连接酶(4-comarate coenzyme a ligase,4CL)、查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)、查耳酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)、黄酮3-羟化酶(flavonol-3-dehydrogenase,F3H)、黄酮3’-羟化酶(flavonol-3’-dehydrogenase,F3’H)、黄酮合酶(flavone synthase,FNS)、花青素合成酶(anthocyanidin synthase,ANS)、糖基转移酶(UDP-glyotransferases,UGTs)等关键酶基因。关键酶基因PAL、4CL、CHS、F3H、FNS等负向调控下游代谢物,CHI、UGTs等正向调控下游代谢物,均与下游代谢物显著相关。结论揭示了佛手在不同发育阶段黄酮类代谢物和相关基因的差异表达模式,为阐明佛手黄酮类物质生物合成调控机制奠定理论基础。 展开更多
关键词 佛手 转录组 代谢组 黄酮类 关键基因 香橙素-7-O-葡萄糖苷 圣草次苷 柚皮苷 芸香柚皮苷 橙皮素-3-O-葡萄糖苷 芹菜素-5-O-葡萄糖苷 木犀草素-4-O-葡萄糖苷
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基于HPLC指纹图谱及化学模式识别的山慈菇(冰球子)及其潜在代用品的鉴定研究
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作者 张超 高一军 +4 位作者 孙启慧 郭衍珩 刘延娟 容蓉 赵丹彤 《中草药》 北大核心 2025年第12期4419-4426,共8页
目的建立山慈菇Pleiones Pseudobulbus(冰球子)及其潜在代用品的HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别寻找山慈菇(冰球子)及其潜在代用品的差异性成分,筛选山慈菇(冰球子)最佳代用品。方法使用乙腈-0.1%磷酸水溶液作流动相进行梯度洗脱,Agil... 目的建立山慈菇Pleiones Pseudobulbus(冰球子)及其潜在代用品的HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别寻找山慈菇(冰球子)及其潜在代用品的差异性成分,筛选山慈菇(冰球子)最佳代用品。方法使用乙腈-0.1%磷酸水溶液作流动相进行梯度洗脱,Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长224 nm,进样量25μL,柱温为30℃,体积流量为0.8 mL/min,建立40批样品HPLC指纹图谱,结合相似度评价、特征图谱、聚类热图分析、主成分分析(principalcomponent analysis,PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对特征成分进行数据分析。结果40批样品共有5个共有峰,经对照品比对指认出了5个成分,分别为天麻素、对羟基苯甲醇、dactylorhin A、militarine、山药素III。聚类热图和PCA分析结果可将山慈菇(冰球子)及其潜在代用品进行区分,并结合相似度评价,初步判断带唇兰Tainia dunnii为山慈菇(冰球子)最佳代用品。不同基原样品的HPLC典型特征图谱结合OPLS-DA分析与PCA分析,筛选出山慈菇(冰球子)正品基原与其潜在代用品的主要差异性指标成分为loroglossin、dactylorhin A和militarine。结论建立的指纹图谱结合化学模式识别方法可用于山慈菇(冰球子)及其潜在代用品的区分及山慈菇(冰球子)最佳代用品的筛选。 展开更多
关键词 山慈菇(冰球子) 指纹图谱 相似度 化学模式识别 代用品 天麻素 对羟基苯甲醇 dactylorhin A militarine 山药素Ⅲ
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芍药属4种药用植物叶绿体基因组比较及系统发育分析
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作者 范丙友 陈盈 +4 位作者 郝明扬 高凯 刘改秀 王萌瑶 吴疆 《中草药》 北大核心 2025年第13期4765-4778,共14页
目的研究芍药属4种药用植物叶绿体基因组特征、变异程度及芍药属和毛茛科植物的系统发育关系,为芍药属药用植物的分类地位和系统发育提供参考。方法应用二代高通量测序技术测定芍药Paeonia lactiflora叶绿体基因组,利用比较基因组学方... 目的研究芍药属4种药用植物叶绿体基因组特征、变异程度及芍药属和毛茛科植物的系统发育关系,为芍药属药用植物的分类地位和系统发育提供参考。方法应用二代高通量测序技术测定芍药Paeonia lactiflora叶绿体基因组,利用比较基因组学方法分析了芍药与川赤芍P.Veitchii、牡丹P.suffruticosa及杨山牡丹P.ostii等芍药属药用植物叶绿体基因组之间的结构特征及变异程度,以山地虎耳草Saxifraga sinomontana等植物为外类群,分析了芍药属植物与毛茛科植物的系统发育关系。结果芍药属4种药用植物的叶绿体基因组均为典型的四分结构,包含1个大单拷贝区(large single copy,LSC)、1个小单拷贝区(small single copy,SSC)和2个反向重复区(inverted repeats,IRa和IRb)。芍药叶绿体基因组序列长度为152731 bp,GC含量为38.43%,共注释到基因126个,其中82个蛋白质编码基因、36个t RNA基因和8个核糖体rRNA基因。重复序列分析发现芍药叶绿体基因组重复序列数量最多为48个,杨山牡丹最少为39个;只有芍药同时含有4种类型的重复序列。芍药含有最多的SSR序列达52个,4种植物SSR序列中单核苷酸重复占比达81%~86%,绝大多数为A/T重复。密码子偏好性分析表明芍药属4种药用植物中氨基酸出现频率均以亮氨酸最高,半胱氨酸最低;31种密码子具偏好性,且密码子偏好性与密码子第3位碱基具显著相关性。LSC/IRb、IRb/SSC、SSC/IRa和IRa/LSC边界附近的基因类型相同,相对保守,但牡丹组和芍药组之间仍具有差异。选择压力分析结果表明,绝大多数基因Ka/Ks值均小于1,受纯化选择,matK、ndhB和rpoA受到正选择。叶绿体基因组比较分析发现芍药属内4种药用植物的叶绿体基因组中非编码区比基因编码区的变异程度大,筛选出了6个基因间区和2个基因编码区的高变异区。系统发育分析结果显示,芍药与美丽芍药亲缘关系最近,所有芍药属植物被聚为一个分支,外类群把芍药属和毛茛科植物分隔开来,芍药属植物与毛茛科植物亲缘关系较远。结论芍药属4种植物在叶绿体基因组结构特征方面较为保守,但其变异程度存在一定差异;筛选出的8个高变异区可为芍药属药用植物的条形码开发、物种鉴定及药用植物质量控制提供候选片段;系统发育分析表明芍药属植物与外类群植物亲缘关系较近,而与毛茛科植物亲缘关系较远,为芍药属植物系统进化、芍药属药用植物的物种鉴定、质量控制及保护开发等研究奠定基础。 展开更多
关键词 芍药属 药用植物 芍药 川赤芍 牡丹 杨山牡丹 叶绿体基因组 变异 进化 系统发育
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药用芍药栽培品种的SNP标记开发及品种鉴定 被引量:3
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作者 刘宇辰 张振宇 +3 位作者 尹旻臻 储姗姗 彭华胜 黄璐琦 《中草药》 北大核心 2025年第1期239-247,共9页
目的基于简化基因组,建立一种准确鉴定药用芍药Paeonia lactiflora栽培品种的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分子标记方法。方法利用特异位点扩增片段测序(specific-locus smplified fragment sequencing,SLAFseq... 目的基于简化基因组,建立一种准确鉴定药用芍药Paeonia lactiflora栽培品种的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分子标记方法。方法利用特异位点扩增片段测序(specific-locus smplified fragment sequencing,SLAFseq)技术对浙江、安徽、四川和湖南的13个药用芍药栽培品种进行SNP标记开发。通过多个指标如杂合率、缺失率和多态性来筛选候选标记,并通过遗传多样性、群体结构和主成分分析等方法进一步评估候选标记。最后采用能够区分药用芍药栽培品种的最简SNP组合绘制指纹图谱。结果通过SLAF-seq测序共获得3703329个SLAF标签,其中多态性标签有60749个,共获得412873个群体SNP标记,最后筛选的47个核心SNP标记位点表现出高多态性,可以很好地区分药用芍药栽培品种。结论基于简化基因组,建立了主要药用芍药栽培品种的SNP标记开发和指纹图谱绘制的方法,为药用芍药的品种鉴定和白芍药材的临床应用提供借鉴。 展开更多
关键词 药用芍药 栽培品种 SLAF-seq 单核苷酸多样性 指纹图谱
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北柴胡苗期根系发育中植物激素信号通路关键基因研究 被引量:1
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作者 师倩囡 莫传鑫 +8 位作者 魏桢 田林 罗亚东 李玉婵 闫明月 余马 赵军 辛超 陈华 《中草药》 北大核心 2025年第11期4019-4028,共10页
目的发掘植物激素信号通路中与北柴胡Bupleurum chinense侧根发育紧密关联的基因。方法以自组拼接的北柴胡基因组为模板,对北柴胡推广品种川北柴1号苗期根系进行有参考基因组的转录组分析,筛选参与植物激素信号转导的关键基因,利用实时... 目的发掘植物激素信号通路中与北柴胡Bupleurum chinense侧根发育紧密关联的基因。方法以自组拼接的北柴胡基因组为模板,对北柴胡推广品种川北柴1号苗期根系进行有参考基因组的转录组分析,筛选参与植物激素信号转导的关键基因,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术验证关键基因对外源生长素处理的表达应答。结果有参转录组分析得到32259个基因,681个基因在有侧根成熟区(RO)样本中特异表达。加权基因共表达网络分析将基因分为56个模块,2个模块与主根长度和侧根数目显著相关。与侧根形成高度相关的生长素信号转导与运输通路上共发掘到88个差异基因,其中26个基因表达模式高度相关。转录组差异基因表达相关性与外源生长素处理后的基因表达结果联合分析表明,BcIAA13、BcARF19、BcSAUR55和BcSAUR72基因可能是侧根生长发育的关键基因。结论进一步揭示了在RO样本中表达量高的基因可能与侧根发育密切相关,并筛选到转录因子BcARF19与BcIAA13密切相关,其可能调控下游基因的表达,进而影响侧根的生长发育。 展开更多
关键词 北柴胡 转录组 植物激素信号转导 侧根发育 外源生长素
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点地梅属10种植物叶绿体基因组密码子偏好性分析 被引量:2
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作者 郭玉朋 史明伟 +2 位作者 马虎 马彦军 姚步青 《中草药》 北大核心 2025年第4期1355-1365,共11页
目的研究点地梅属Androsace L.物种叶绿体基因组蛋白编码基因密码子的偏好性及其影响因素。方法测序了点地梅属1个物种(西藏点地梅)的叶绿体基因组,其他9物种的序列从NCBI下载。根据序列筛选条件,共得到41条共有序列。用CodonW 1.4.2计... 目的研究点地梅属Androsace L.物种叶绿体基因组蛋白编码基因密码子的偏好性及其影响因素。方法测序了点地梅属1个物种(西藏点地梅)的叶绿体基因组,其他9物种的序列从NCBI下载。根据序列筛选条件,共得到41条共有序列。用CodonW 1.4.2计算相关参数,Python整理数据,R做相关性分析并绘图。结果点地梅属各物种密码子第1、2、3位置碱基组成GC含量表现为GC1>GC2>GC3,其中第3位GC含量最小。各位点GC含量相关性为GC1、GC2极显著,而两者与GC3相关性都不显著,说明3个位置GC含量变化机制不同。3个位置GC含量都小于50%,表明密码子倾向于使用A/U碱基,尤其是第3位。从10个物种中共鉴定到13~17个最优密码子。所有基因的有效密码子数(effective number of codons,ENC)均大于35,说明密码子使用整体偏性较弱。中性绘图、ENC-plot及PR2-plot分析显示,造成密码子使用偏性的主要因素是自然选择,但突变压对大部分基因的密码子偏性也有重要影响。系统发育及聚类分析显示密码子偏性在物种间是保守的。结论点地梅属叶绿体基因组蛋白编码基因倾向于使用A/U碱基编码的密码子,自然选择是影响密码子偏好性的主要因素。研究结果能为点地梅属的分子进化、系统发育及叶绿体基因工程提供基础。 展开更多
关键词 点地梅属 密码子偏性 最优密码子 突变压 自然选择
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基于SCoT分子标记的黄精属不同种质遗传多样性研究 被引量:2
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作者 朱珏 石雨荷 +5 位作者 侯超文 李晓玲 刘泽湘 龚秀娟 刘湘丹 童巧珍 《中草药》 北大核心 2025年第3期966-974,共9页
目的探讨黄精属Polygonatum Mill.6个产区3个种质的遗传多样性及亲缘关系。方法以34份黄精属种质资源为供试材料,采用正交设计方法,优化黄精属目标起始密码子多态性-PCR(start codon targeted polymorphism-PCR,SCo T-PCR)反应体系并筛... 目的探讨黄精属Polygonatum Mill.6个产区3个种质的遗传多样性及亲缘关系。方法以34份黄精属种质资源为供试材料,采用正交设计方法,优化黄精属目标起始密码子多态性-PCR(start codon targeted polymorphism-PCR,SCo T-PCR)反应体系并筛选引物;并基于筛选出的引物对其进行遗传多样性分析、遗传结构以及遗传分化研究。结果得到黄精属SCo T-PCR最佳反应体系,筛选出15条多态性较好的引物,多态性条带比率为94.45%;在物种水平上,3个种质的平均观测等位基因数(observed number of alleles,N_(a))、平均有效等位基因数(effective number of alleles,N_(e))、平均Nei’s基因多样性指数(Nei’s gene diversity index,H)、平均香农指数(Shannon information index,I)分别为1.6783、1.2686、0.1740、0.2786,揭示群体间存在丰富的遗传多样性;聚类分析结果显示,多花黄精与长梗黄精聚成一类,表明亲缘关系较近;卷叶黄精作为单独分枝,其与另外2个种质的亲缘关系也较远;基因多样度(total genetic diversity,H_(t))、基因分化系数(gene diversity within population,H_(s))、遗传分化系数(coefficient of gene differentiation,G_(st))、基因流(gene flow,N_(m))分别为0.2104、0.1740、0.1733、2.3860,表明群体间存在较高水平的基因交流,AMOVA结果显示84%遗传差异来自于群体内,16%遗传差异来自于群体间;群体结构分析表明,当分析群体数(true number of clusters,K)为3时,34份材料可分为3个类群,且与聚类分析结果基本一致。结论SCoT分子标记可有效用于黄精属不同种质之间的亲缘关系及遗传多样性分析,为黄精属植物种质资源的鉴定保护、开发利用提供科学依据。 展开更多
关键词 黄精属 SCoT标记 遗传多样性 亲缘关系 群体结构
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宽叶十万错叶绿体基因组比较分析和系统进化关系研究 被引量:1
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作者 赵艳林 陈渊 +6 位作者 沈晓婷 安昌 王振华 黄泽豪 黄鸣清 林彦翔 郑燕芳 《中草药》 北大核心 2025年第5期1731-1746,共16页
目的以药用植物宽叶十万错Asystasia gangetica为研究对象,解析其叶绿体基因组结构特征,探究宽叶十万错在爵床族中的系统发育关系;方法利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对宽叶十万错叶绿体基因组进行测序,对其进行组装、注释和特征序... 目的以药用植物宽叶十万错Asystasia gangetica为研究对象,解析其叶绿体基因组结构特征,探究宽叶十万错在爵床族中的系统发育关系;方法利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对宽叶十万错叶绿体基因组进行测序,对其进行组装、注释和特征序列分析,并基于34种爵床族物种构建系统发育树。结果宽叶十万错叶绿体基因组为典型的四分体结构,总序列长度为150307 bp,包括一个大单拷贝区(LSC,82332 bp),一个小单拷贝区(SSC,17425 bp)和一对反向重复区(IRs,25275 bp);宽叶十万错叶绿体基因组共注释到光合作用基因、自我复制基因、其他基因和未知功能基因4类共133个基因,包括88个蛋白编码基因,37个tRNA基因和8个rRNA基因;宽叶十万错叶绿体基因组共检测到34个SSR位点,SSR类型以A/T为主,通过REPuter软件共检测到33个长重复序列;IR区边界分析表明,宽叶十万错比其他属物种保守,边界区域变异小;基于8个属8个物种全叶绿体基因组比较分析可知,基因间隔区atpH-atpI、petN-trnD-GUC、rps4-trnT-UGU、trnF-GAA-ndhJ等的变异大于编码区;宽叶十万错密码子偏好性分析表明,甘氨酸是宽叶十万错使用频次最高的氨基酸,以A或U结尾的密码子是宽叶十万错叶绿体基因组的偏好性密码子;ENC、PR2和中性绘图分析表明,自然选择是影响宽叶十万错密码子偏好性的主要原因;选择压力分析表明,有9个基因受到正选择,对宽叶十万错及其近缘属物种适应性进化具有重要作用;系统发育分析表明,宽叶十万错所在的十万错属和钩粉草属形成姊妹类群,亲缘关系最近,并具有较高的支持率,共同归为彩叶木亚族。结论对宽叶十万错叶绿体基因组结构进行了解析,并探讨了爵床族物种系统发育关系,丰富了爵床族药用植物遗传资源,为爵床族的物种分类提供了参考。 展开更多
关键词 宽叶十万错 叶绿体基因组 密码子偏好性 选择压力 序列变异 系统发育
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灰毡毛忍冬CHS1基因克隆及功能分析 被引量:1
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作者 敖志杰 张惊宇 +5 位作者 曾娟 何佳蔚 瞿美玲 童巧珍 周日宝 刘湘丹 《中草药》 北大核心 2025年第17期6334-6345,共12页
目的探究灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides中查耳酮合酶Lm CHS1基因对黄酮类成分合成的作用。方法以灰毡毛忍冬叶的c DNA为模板,利用RT-PCR技术克隆得到了LmCHS1基因开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并对其基因序列进行生物信... 目的探究灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides中查耳酮合酶Lm CHS1基因对黄酮类成分合成的作用。方法以灰毡毛忍冬叶的c DNA为模板,利用RT-PCR技术克隆得到了LmCHS1基因开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并对其基因序列进行生物信息学分析。通过农杆菌侵染的方式,构建本氏烟草瞬时转化体系,对Lm CHS1编码蛋白进行亚细胞定位;紫外分光光度法检测烟草叶片及灰毡毛忍冬样品中总黄酮含量;构建原核表达载体,诱导大肠杆菌得到重组蛋白;利用q RTPCR检测Lm CHS1基因在灰毡毛忍冬花、茎和叶中的表达情况。结果克隆得到的基因长度为1182 bp,共编码393个氨基酸,分子式为C1914H3070N514O563S17,理论等电点为6.34,属于亲水蛋白。亚细胞定位结果表明Lm CHS1蛋白主要定位在细胞质,与大部分物种中具催化黄酮前体合成功能的CHS蛋白的亚细胞定位一致。原核表达得到的重组蛋白,大小为43000。总黄酮的含量测定结果显示过表达Lm CHS1烟草叶片总黄酮含量高于空载组,并具统计学差异。联合表达量和总黄酮含量结果分析发现,LmCHS1表达量与总黄酮含量呈正相关。结论Lm CHS1蛋白定位在细胞质中,正向调控黄酮类物质的合成。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 查耳酮合酶 原核表达 总黄酮 功能分析
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HPLC-“内标”多控法测定四逆散中芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷 被引量:34
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作者 王跃生 饶毅 +4 位作者 魏惠珍 吴有根 张洁 方海红 陈银芳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1316-1319,共4页
目的以四逆散为研究载体,建立"内标"多控法中药复方质量评价模式,并对该评价模式进行方法学考察。方法选取芍药苷作为四逆散中各成分的参照"内标",在不同的波长下测定各成分相对于内标成分的校正因子,利用校正因子... 目的以四逆散为研究载体,建立"内标"多控法中药复方质量评价模式,并对该评价模式进行方法学考察。方法选取芍药苷作为四逆散中各成分的参照"内标",在不同的波长下测定各成分相对于内标成分的校正因子,利用校正因子和芍药苷对四逆散中柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷进行测定。结果芍药苷0.2812-1.6870μg(r=0.9996)、柚皮苷0.5700-3.4200μg(r=0.9994)、橙皮苷0.0502-0.3012μg(r=0.9999)、新橙皮苷0.523-3.1380μg(r=0.9999)、甘草酸铵0.3310-1.9860μg(r=0.9998)与峰面积呈良好线性关系。结论建立四逆散中柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷相对于芍药苷的校正因子。比较外标法与"内标"多控法测定的结果,表明"内标"多控法对中药复方多成分质量控制是可行的、实用的。 展开更多
关键词 四逆散 芍药苷 柚皮苷 橙皮苷 新橙皮苷 甘草酸铵 “内标”多控法 高效液相色谱
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黄酮类化合物抗抑郁作用的研究进展 被引量:65
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作者 龚金炎 吴晓琴 +1 位作者 毛建卫 张英 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期195-200,共6页
随着生活节奏加快,生活和工作压力增大,抑郁症已成为严重危害人类健康的常见疾病之一。近年来,黄酮类化合物的抗抑郁作用日益引起关注。黄酮类化合物抗抑郁作用机制复杂,涉及到多种神经递质和机制。从黄酮类化合物抗抑郁的不同作用机制... 随着生活节奏加快,生活和工作压力增大,抑郁症已成为严重危害人类健康的常见疾病之一。近年来,黄酮类化合物的抗抑郁作用日益引起关注。黄酮类化合物抗抑郁作用机制复杂,涉及到多种神经递质和机制。从黄酮类化合物抗抑郁的不同作用机制出发,对近5年来国内外黄酮类化合物抗抑郁作用的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 黄酮类化合物 抗抑郁活性 神经递质 抗氧化活性 构效关系
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