目的建立超高效液相色谱-串联质谱法快速测定自制草乌药酒中9种乌头类生物碱含量的方法。方法以云南野生的滇草乌为主要原料,将草乌制成5种不同形状(整块、去皮、片状、块状、粉末状),分别取250 g浸泡于900 mL 52度玉米酿制白酒中,浸泡...目的建立超高效液相色谱-串联质谱法快速测定自制草乌药酒中9种乌头类生物碱含量的方法。方法以云南野生的滇草乌为主要原料,将草乌制成5种不同形状(整块、去皮、片状、块状、粉末状),分别取250 g浸泡于900 mL 52度玉米酿制白酒中,浸泡时间约为1.5年。移取1 mL药酒样品,加入30%甲醇水溶液(3:7,V:V)至100 mL,经0.22μm滤膜过滤后备测。利用C18色谱柱和乙腈-0.1%甲酸水的流动相进行梯度洗脱分离,多反应监测模式检测,通过基质工作曲线外标法定量。结果9种乌头类生物碱在1~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.63~0.98μg/L,定量限为2.11~3.26μg/L,低、中、高3种浓度水平下加标回收率为81.14%~116.01%,相对标准偏差为0.97%~11.26%(n=6)。经实际样品测定分析,药酒中9种乌头类生物碱的双酯型生物碱含量居高,其中以乌头碱含量最多,毒性较强。结论该方法前处理简便,灵敏度高,准确性好,检测效率高,适用于卫生应急中毒事件中自制草乌药酒9种乌头类生物碱的快速筛查,为医疗救治的快速诊断和采取对应急救治疗措施提供强有力技术支撑。展开更多
目的 结合叶绿体基因组、密码子偏好性与DNA条形码、机器学习技术,为薯蓣属Dioscorea系统发育、遗传多样性及物种鉴定提供理论指导。方法 通过IRscope比对11种植物的叶绿体基因结构,并构建系统发育树;用CodonW、CUSP等工具分析密码子偏...目的 结合叶绿体基因组、密码子偏好性与DNA条形码、机器学习技术,为薯蓣属Dioscorea系统发育、遗传多样性及物种鉴定提供理论指导。方法 通过IRscope比对11种植物的叶绿体基因结构,并构建系统发育树;用CodonW、CUSP等工具分析密码子偏好性;收集薯蓣材料并扩增测序DNA条形码序列,基于成熟酶K基因(maturase K gene,matK)、光系统Ⅱ蛋白D1基因—组氨酸tRNA基因间隔区(photosystem b a protein gene-transfer RNA-histidine intergenic spacer,psbAtrnH)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因(ribulose-bisphosphate carboxylase/oxygenase large subunit gene,rbcL)条形码和机器学习算法进行分子鉴别。结果 薯蓣属叶绿体基因组保守稳定,密码子显著A/T偏好,第3位倾向A/U结尾。自然选择是影响密码子偏差的主因,共有最优密码子为GGA和UCA。3种条形码均能成功鉴别物种,基于BLOG算法的单一条形码鉴别成功率100%,WEKA的SMO和NaïveBayes分类器鉴别率较高。结论 薯蓣叶绿体基因组保守,密码子偏好模式以自然选择为主,为薯蓣属基因表达调控、物种鉴定、资源保护等提供依据和指导。展开更多
文摘目的 结合叶绿体基因组、密码子偏好性与DNA条形码、机器学习技术,为薯蓣属Dioscorea系统发育、遗传多样性及物种鉴定提供理论指导。方法 通过IRscope比对11种植物的叶绿体基因结构,并构建系统发育树;用CodonW、CUSP等工具分析密码子偏好性;收集薯蓣材料并扩增测序DNA条形码序列,基于成熟酶K基因(maturase K gene,matK)、光系统Ⅱ蛋白D1基因—组氨酸tRNA基因间隔区(photosystem b a protein gene-transfer RNA-histidine intergenic spacer,psbAtrnH)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因(ribulose-bisphosphate carboxylase/oxygenase large subunit gene,rbcL)条形码和机器学习算法进行分子鉴别。结果 薯蓣属叶绿体基因组保守稳定,密码子显著A/T偏好,第3位倾向A/U结尾。自然选择是影响密码子偏差的主因,共有最优密码子为GGA和UCA。3种条形码均能成功鉴别物种,基于BLOG算法的单一条形码鉴别成功率100%,WEKA的SMO和NaïveBayes分类器鉴别率较高。结论 薯蓣叶绿体基因组保守,密码子偏好模式以自然选择为主,为薯蓣属基因表达调控、物种鉴定、资源保护等提供依据和指导。
