目的建立一种固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱的非衍生化检测方法,用于同时定量检测畜禽类和水产类预制菜中尸胺、腐胺、组胺、酪胺、色胺和苯乙胺6种生物胺。方法预制菜样品经5%高氯酸水溶液-乙腈(2∶8,V/V)提取、Oasis PRiME ...目的建立一种固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱的非衍生化检测方法,用于同时定量检测畜禽类和水产类预制菜中尸胺、腐胺、组胺、酪胺、色胺和苯乙胺6种生物胺。方法预制菜样品经5%高氯酸水溶液-乙腈(2∶8,V/V)提取、Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,采用ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.8μm)分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,于电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)正离子源模式和多反应扫描监测模式检测,内标法定量。结果尸胺、腐胺、组胺、酪胺、色胺和苯乙胺等6种目标化合物在色谱柱上有很好的保留,在10~2000μg/L范围内线性良好(R^(2)>0.999),检出限为5μg/kg,定量限为10μg/kg。6种化合物的回收率为71.6%~105.2%,相对标准偏差为0.73%~12.64%(n=6)。对103件畜禽和水产类预制菜进行目标化合物的检测,腐胺、酪胺、色胺、尸胺和苯乙胺的检出率依次为96.1%、60.2%、22.3%、34.0%和58.2%。结论该方法前处理操作简单、分析速度快、准确度和灵敏度高,适用于畜禽和水产类预制菜中6种生物胺的测定。展开更多
目的 基于高分子量谷蛋白Tri a 26建立小麦中过敏蛋白的定性定量检测方法,对基因编辑小麦和普通对照小麦样品进行过敏蛋白含量分析与比较。方法 选择小麦中的致敏蛋白Tri a 26作为目标蛋白,筛选出该致敏蛋白的特异肽段IFWGIPALLK,人工...目的 基于高分子量谷蛋白Tri a 26建立小麦中过敏蛋白的定性定量检测方法,对基因编辑小麦和普通对照小麦样品进行过敏蛋白含量分析与比较。方法 选择小麦中的致敏蛋白Tri a 26作为目标蛋白,筛选出该致敏蛋白的特异肽段IFWGIPALLK,人工合成特异肽段,样品用100 mmol/L含4 mol/L尿素和0.1 mol/L二硫苏糖醇的Tris-HCl缓冲液(pH 8.5)匀浆提取,提取液经半胱氨酸残基烷基化后,与胰蛋白酶混匀在37℃酶解消化16 h,采用电喷雾正离子模式下多反应监测外标法定量,测定并对比基因编辑小麦和普通对照小麦中高分子量谷蛋白Tri a 26含量。结果 特异水解肽段标准溶液在10~2000 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.999),样本中IFWGIPALLK肽段定量限为0.328 ng/g,3个浓度加标回收率在84.8%~95.4%,相对标准偏差为2.99%~6.12%(n=6)。基因编辑小麦和普通对照小麦Tri a 26含量为1.976~2.069 mg/g。结论 该方法灵敏度和特异性高,可以有效地应用于小麦中高分子量谷蛋白的检测,研究发现基因编辑小麦中高分子量谷蛋白Tri a 26的含量不高于普通对照小麦。展开更多
文摘目的建立一种固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱的非衍生化检测方法,用于同时定量检测畜禽类和水产类预制菜中尸胺、腐胺、组胺、酪胺、色胺和苯乙胺6种生物胺。方法预制菜样品经5%高氯酸水溶液-乙腈(2∶8,V/V)提取、Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,采用ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.8μm)分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,于电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)正离子源模式和多反应扫描监测模式检测,内标法定量。结果尸胺、腐胺、组胺、酪胺、色胺和苯乙胺等6种目标化合物在色谱柱上有很好的保留,在10~2000μg/L范围内线性良好(R^(2)>0.999),检出限为5μg/kg,定量限为10μg/kg。6种化合物的回收率为71.6%~105.2%,相对标准偏差为0.73%~12.64%(n=6)。对103件畜禽和水产类预制菜进行目标化合物的检测,腐胺、酪胺、色胺、尸胺和苯乙胺的检出率依次为96.1%、60.2%、22.3%、34.0%和58.2%。结论该方法前处理操作简单、分析速度快、准确度和灵敏度高,适用于畜禽和水产类预制菜中6种生物胺的测定。
文摘目的 基于高分子量谷蛋白Tri a 26建立小麦中过敏蛋白的定性定量检测方法,对基因编辑小麦和普通对照小麦样品进行过敏蛋白含量分析与比较。方法 选择小麦中的致敏蛋白Tri a 26作为目标蛋白,筛选出该致敏蛋白的特异肽段IFWGIPALLK,人工合成特异肽段,样品用100 mmol/L含4 mol/L尿素和0.1 mol/L二硫苏糖醇的Tris-HCl缓冲液(pH 8.5)匀浆提取,提取液经半胱氨酸残基烷基化后,与胰蛋白酶混匀在37℃酶解消化16 h,采用电喷雾正离子模式下多反应监测外标法定量,测定并对比基因编辑小麦和普通对照小麦中高分子量谷蛋白Tri a 26含量。结果 特异水解肽段标准溶液在10~2000 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.999),样本中IFWGIPALLK肽段定量限为0.328 ng/g,3个浓度加标回收率在84.8%~95.4%,相对标准偏差为2.99%~6.12%(n=6)。基因编辑小麦和普通对照小麦Tri a 26含量为1.976~2.069 mg/g。结论 该方法灵敏度和特异性高,可以有效地应用于小麦中高分子量谷蛋白的检测,研究发现基因编辑小麦中高分子量谷蛋白Tri a 26的含量不高于普通对照小麦。
