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全自动分析仪对BC6900脑脊液细胞学检测的性能验证和评价 被引量:2
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作者 李虓 赵晖 +2 位作者 史丛宁 李玉文 康熙雄 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第8期1421-1425,共5页
目的探讨全自动分析仪对脑脊液细胞计数及分类结果的准确性。方法采用全自动血细胞分析仪体液模式对20份脑脊液标本进行分析,按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)的规定对全自动血细胞分... 目的探讨全自动分析仪对脑脊液细胞计数及分类结果的准确性。方法采用全自动血细胞分析仪体液模式对20份脑脊液标本进行分析,按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)的规定对全自动血细胞分析仪上检测的脑脊液中白细胞、红细胞的空白计数、携带污染率、精密度、线性范围和相关性等性能指标进行验证和评价。结果脑脊液中红细胞和白细胞的空白计数与携带污染率均符合厂家技术指标;低值的精密度变异系数低于20%,高值和中值均小于10%,符合临床要求,2个项目的检测结果与稀释倍数呈良好的线性关系(r>0.99)。结论脑脊液细胞计数及分类结果在全自动血细胞分析仪上的指标性能良好,能较好地满足临床需求。 展开更多
关键词 血细胞分析仪 体液常规 性能评价 细胞计数
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改良原代大鼠骨源间充质干细胞的体外培养方法及鉴定 被引量:1
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作者 刘海琴 马华根 唐元瑜 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2022年第1期61-67,共7页
目的改良原代大鼠骨源间充质干细胞体外分离培养方法,以获得纯度高、增殖活力强、分化潜能大的理想工程细胞。方法基于“仿原位生态培养”方法及原理,剪取大鼠前后肢股骨、胫骨,剔除附着的肌肉、筋膜组织,完全不用冲洗骨髓腔,直接将其... 目的改良原代大鼠骨源间充质干细胞体外分离培养方法,以获得纯度高、增殖活力强、分化潜能大的理想工程细胞。方法基于“仿原位生态培养”方法及原理,剪取大鼠前后肢股骨、胫骨,剔除附着的肌肉、筋膜组织,完全不用冲洗骨髓腔,直接将其剪碎成约1 mm^(3)骨块后,移入0.1%Ⅱ型胶原酶中消化90 min;经洗涤、离心后,接种于培养皿中进行原代培养。当细胞融合度达80%~90%时,予0.25%胰蛋白酶消化液进行二次消化,按1:3比例进行传代培养。采用流式细胞仪检测第4代细胞表面CD分子标志物,并进行成脂、成骨诱导分化实验。结果接种48 h后,少量长梭形细胞从骨块周围爬出;96 h后,细胞逐渐融合成片;传至第4代时,细胞形态均一,以“成纤维样”细长梭形为主,融合后呈“涡旋式”生长,具有一定方向性;传至第10代,细胞形态仍基本保持不变。流式细胞仪检测结果提示CD44、CD90和CD29表达阳性,CD34、CD11b/c和CD45呈阴性表达;成脂、成骨诱导分化实验均为阳性。结论基于“仿原位生态培养”原理,采用组织块结合酶消化法,能够简单、高效分离培养出大鼠骨源间充质干细胞,值得推广。 展开更多
关键词 间充质干细胞 原代培养 仿原位生态培养 组织块结合酶消化法 免疫表型 细胞分化
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两种不同培养基对体外培养脊髓神经元的影响
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作者 袁玉静 傅志俭 孙涛 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第4期65-68,共4页
目的建立体外稳定获取大数量及高纯度脊髓神经元的培养方案,比较当前国内外最常用的无血清培养基(Neurobasal+B27,NCM)与传统含血清培养基(DMEM/F12+10%胎牛血清+5%马血清,SCM)对体外培养脊髓神经元生长状态的影响。方法取E14-15d Wista... 目的建立体外稳定获取大数量及高纯度脊髓神经元的培养方案,比较当前国内外最常用的无血清培养基(Neurobasal+B27,NCM)与传统含血清培养基(DMEM/F12+10%胎牛血清+5%马血清,SCM)对体外培养脊髓神经元生长状态的影响。方法取E14-15d Wistar大鼠的胚胎脊髓组织行胰酶消化获取脊髓神经元的单细胞悬液,分别用NCM与SCM进行培养,差速贴壁法及Ara-C干预纯化培养的神经元。于接种后第1、2、3、4、5、6、7d倒置相差显微镜下观察细胞生长状态的变化,并用免疫荧光细胞化学法比较两种培养基培养下获取的神经元纯度。结果采用NCM培养的脊髓神经元生长良好,对环境变化如换液及加入Ara-C更为耐受;NCM培养的神经元的纯度为(87.70±8.70)%,SCM培养的神经元纯度为(78.61±7.00)%,前者纯度更高(P=0.019)。结论NCM较之SCM更加适合脊髓神经元的体外培养。 展开更多
关键词 细胞培养 脊髓 神经元 培养基 免疫荧光测定
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优化辛酸沉淀工艺参数后结合两步层析法分离纯化IgG效果 被引量:1
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作者 罗二华 雷鹏 +3 位作者 李雅文 陈婷婷 龚佳莉 匡青芬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期205-208,共4页
目的优化辛酸沉淀工艺参数,并结合两步层析纯化,评价10%静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)中杂蛋白去除效果。方法对溶解倍数、反应液终pH值、辛酸钠浓度3个因素进行优化,设计3因素3水平的正交试验方案,优选辛酸沉淀... 目的优化辛酸沉淀工艺参数,并结合两步层析纯化,评价10%静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)中杂蛋白去除效果。方法对溶解倍数、反应液终pH值、辛酸钠浓度3个因素进行优化,设计3因素3水平的正交试验方案,优选辛酸沉淀工艺参数;取100 g组分Ⅱ+Ⅲ沉淀,按最佳工艺参数进行辛酸沉淀,过滤收集上清经Q、QXP两步层析纯化后,进行IgG、IgA、IgM、Alb含量及纯度检测,评价杂蛋白去除效果。结果辛酸沉淀法最佳工艺参数为溶解倍数13倍,反应液终pH值5.1,反应液辛酸钠终浓度20 mmol/L;按最佳工艺参数获得的辛酸沉淀上清经两步层析纯化后纯度达99.99%,杂蛋白含量降至1 mg/L以下。结论辛酸沉淀法可最大限度提升IgG收率,给合后续两步层析纯化,可获得高纯度IgG。该工艺可用于临床安全的人免疫球蛋白产品开发。 展开更多
关键词 静注人免疫球蛋白 辛酸沉淀 工艺参数 优化 层析 IGG
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HPLC法测定人体血浆中哌拉西林的浓度
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作者 邓国彬 朱健春 +1 位作者 戎清清 董伟林 《实验室科学》 2013年第5期39-41,45,共4页
通过高效液相色谱法(HPLC)建立一种有效的测定人体血液中哌拉西林浓度的方法,为临床上合理使用哌拉西林提供理论依据。采用WatersC1s柱(250mmx4.6mm,5txm),流动相为乙腈-0.11%四丁基氢氧化铵溶液,卜安息香肟为内标,紫外检... 通过高效液相色谱法(HPLC)建立一种有效的测定人体血液中哌拉西林浓度的方法,为临床上合理使用哌拉西林提供理论依据。采用WatersC1s柱(250mmx4.6mm,5txm),流动相为乙腈-0.11%四丁基氢氧化铵溶液,卜安息香肟为内标,紫外检测器进行检测。实验结果显示哌拉西林的线性范围为0.5-100μg·mL-1,低、中、高3个浓度日内、日间精密度均小于5%,表明该方法灵敏度高,重现性好,可用于临床中哌拉西林血药浓度的测定以及临床药动学的研究。 展开更多
关键词 哌拉西林 HPLC 血浆
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醒脑静注射液细菌内毒素检查法研究 被引量:1
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作者 匡翠莲 王璐 张红宇 《中医临床研究》 2012年第20期114-115,117,共3页
目的:建立醒脑静注射液细菌内毒素检查方法。方法:按中国药典2005年版二部附录ⅪE收载的细菌内毒素检查方法进行试验和结果判断,计算醒脑静注射液的细菌内毒素限值。结果:醒脑静注射液的细菌内毒素限值为2.5EUmg。结论:可建立醒脑静注... 目的:建立醒脑静注射液细菌内毒素检查方法。方法:按中国药典2005年版二部附录ⅪE收载的细菌内毒素检查方法进行试验和结果判断,计算醒脑静注射液的细菌内毒素限值。结果:醒脑静注射液的细菌内毒素限值为2.5EUmg。结论:可建立醒脑静注射液的细菌内毒素检查方法。 展开更多
关键词 醒脑静注射液 细菌内毒素 鲎试剂 干扰试验
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