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旱生植物霸王ZxCER6的基因克隆及功能分析
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作者 未丽 邓育轩 +3 位作者 赵静 刘俊良 马克华 王锁民 《草业学报》 北大核心 2026年第1期154-169,共16页
角质层蜡质在旱生植物霸王抵御不良生境中发挥着重要作用。β-酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是催化蜡质前体物质合成的关键酶。本研究克隆得到霸王ZxKCS6/CER6的cDNA全长1548 bp,具有2个决定底物选择性的高度保守跨膜区和3个酶催化位点,属于... 角质层蜡质在旱生植物霸王抵御不良生境中发挥着重要作用。β-酮脂酰辅酶A合成酶(KCS)是催化蜡质前体物质合成的关键酶。本研究克隆得到霸王ZxKCS6/CER6的cDNA全长1548 bp,具有2个决定底物选择性的高度保守跨膜区和3个酶催化位点,属于缩合酶超家族成员。与其他高等植物同源蛋白的氨基酸序列比对发现,ZxCER6属于KCS家族中CER6亚家族,具有第224位的半胱氨酸高度保守激活位点。系统进化树分析发现,ZxCER6与拟南芥AtCER6的亲缘关系最近。表达模式分析表明,ZxCER6主要在地上部组织中表达,尤其在叶表皮中表达丰度最高;且受50 mmol·L^(-1)NaCl处理的强烈诱导,其表达丰度在36 h时达到峰值。利用表皮特异性启动子驱动ZxCER6在拟南芥中表达发现,干旱处理后转基因拟南芥的地上部干鲜重、叶绿素含量、净光合速率和水分利用效率均显著高于野生型,而离体叶片失水率、叶绿素浸出率和叶片相对质膜透性均低于野生型;转基因植株地上部角质层蜡质含量,尤其是烷烃含量显著增加。表明ZxCER6的超表达可增加转基因植株表皮中烷烃的含量,减少水分散失,从而提高其抗旱性。本研究初步揭示了ZxCER6介导的蜡质积累在荒漠植物霸王抗旱性中的作用,为优良牧草及农作物抗旱性的遗传改良提供了优异的基因资源。 展开更多
关键词 霸王 角质层蜡质 β-酮脂酰辅酶A合成酶 抗旱性
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梭梭WOX转录因子家族鉴定及HaWOX29和HaWOX54在根生长中的功能研究
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作者 孙朗 任燕萍 +5 位作者 娜菲莎·木则帕尔 谌能双 马丽 程聪 李俐 张桦 《草业学报》 北大核心 2026年第1期192-205,共14页
荒漠植物梭梭具有发达的根系,其侧根可寄生中药肉苁蓉,使得梭梭在荒漠治理和荒漠区社会发展中具有重要的生态和经济价值。WOX转录因子参与植物根的生长发育,本研究从梭梭全基因组数据中鉴定出64个WOX转录因子家族成员,根据前期转录组分... 荒漠植物梭梭具有发达的根系,其侧根可寄生中药肉苁蓉,使得梭梭在荒漠治理和荒漠区社会发展中具有重要的生态和经济价值。WOX转录因子参与植物根的生长发育,本研究从梭梭全基因组数据中鉴定出64个WOX转录因子家族成员,根据前期转录组分析结果,筛选克隆了在根中表达量高的HaWOX29和HaWOX54;qPCR分析表明,HaWOX29和HaWOX54在根中的表达量明显高于其他组织,干旱、盐及高温胁迫下下调表达,低温和吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)处理下上调表达;利用农杆菌介导法侵染梭梭种胚,获得过表达HaWOX29和HaWOX54的植株,表型和根系扫描分析发现过表达HaWOX29的梭梭平均主根根长是转空载体对照组的2.49倍;过表达HaWOX54植株主根根长是空载体的2.08倍,平均分支数是4.34倍。因此初步推测HaWOX29基因可能参与梭梭主根的伸长,HaWOX54基因可能参与梭梭侧根的发育和主根的伸长。本研究筛选鉴定参与梭梭根生长发育的WOX转录因子,为研究梭梭根发育的分子机制和筛选优异的梭梭种质资源提供了理论和技术指导。 展开更多
关键词 梭梭 WOX转录因子 根发育 分子机制
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植物胆碱单加氧酶基因家族的进化与表达分析
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作者 王婷 段武丽 +1 位作者 王蕊 刘海岚 《作物学报》 北大核心 2026年第1期44-55,共12页
植物甘氨酸甜菜碱(glycine betaine,GB)普遍存在于植物、动物、细菌、藻类中,可在细胞质中累积达到一定水平以后调节渗透压,维持细胞的水分平衡,对于植物的渗透胁迫具有重要的作用。胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,CMO)是植物GB生... 植物甘氨酸甜菜碱(glycine betaine,GB)普遍存在于植物、动物、细菌、藻类中,可在细胞质中累积达到一定水平以后调节渗透压,维持细胞的水分平衡,对于植物的渗透胁迫具有重要的作用。胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,CMO)是植物GB生物合成途径的限速酶。本研究对168个基因组进行分析,其中131个基因组中含CMO同源基因,鉴定得到169个CMO成员。通过基因对选择压分析,结果表明该基因主要受纯化选择,只有7个基因对受到正向选择。另外,CMO基因家族被划分为6个亚家族,除F亚家族外,5个亚家族中均检测到正选择位点。Ring hydroxyl A结构域和Rieske结构域的选择压分析结果表明,2个结构域的dN/dS值呈极显著正相关,发生了协同进化。通过qRT-PCR分析显示玉米CMO基因在MgSO_(4)胁迫下表达整体表现为上调。本研究结果从多方面探讨了CMO基因的进化与表达情况,以期为后续深入利用该基因进行作物抗逆育种提供了理论依据。 展开更多
关键词 植物甘氨酸甜菜碱 胆碱单加氧酶基因 选择压 纯化选择 玉米
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沉水樟GRAS基因家族全基因组鉴定与分子进化研究
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作者 周晨 尹修洋 +2 位作者 姚骥 陈飞雪 王晓立 《现代园艺》 2026年第5期23-28,32,共7页
GRAS(Growing point Activating Sequence)蛋白是植物发育中一类重要的转录因子家族。本研究基于拟南芥GRAS的氨基酸序列,在沉水樟基因组数据库鉴定GRAS基因家族成员,对沉水樟GRAS基因家族成员的基本结构信息、保守结构域、氨基酸序列... GRAS(Growing point Activating Sequence)蛋白是植物发育中一类重要的转录因子家族。本研究基于拟南芥GRAS的氨基酸序列,在沉水樟基因组数据库鉴定GRAS基因家族成员,对沉水樟GRAS基因家族成员的基本结构信息、保守结构域、氨基酸序列比对、进化树、模体分析以及共线性分析等方法,从而揭示沉水樟GRAS基因家族转录因子在进化中的特点,为进一步研究沉水樟GRAS基因家族的功能和逆境胁迫响应机制提供理论依据。结果表明,拟南芥GRAS的氨基酸序列与沉水樟基因组数据具有一定的序列相似性和结构同源性,这表明它们在进化上具有一定的亲缘关系,并通过功能同源分析,推测其可能的生理功能及其在植物抗逆性中的潜在作用机制。本研究为GRAS基因家族在植物中的功能定位和应用提供了重要依据。 展开更多
关键词 沉水樟 GRAS基因家族 生物信息学
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越南参PAL基因家族鉴定及PvPAL 2和PvPAL4功能分析
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作者 侯家娥 李健斌 +5 位作者 李雷林 艾明涛 唐最奕 崔秀明 刘源 杨千 《植物资源与环境学报》 北大核心 2026年第1期36-47,共12页
为探究PAL基因家族在越南参(Panax vietnamensis Ha et Grushv.)中的功能,通过同源比对和隐马尔可夫模型检索对PAL基因家族成员进行鉴定,对其相关的理化性质、系统发育关系、基因结构、启动子顺式作用元件、共线性特征、组织特异性表达... 为探究PAL基因家族在越南参(Panax vietnamensis Ha et Grushv.)中的功能,通过同源比对和隐马尔可夫模型检索对PAL基因家族成员进行鉴定,对其相关的理化性质、系统发育关系、基因结构、启动子顺式作用元件、共线性特征、组织特异性表达及其在水杨酸处理下的表达模式进行了系统解析,并在越南参愈伤组织中对PvPAL 2和PvPAL4进行了功能验证。结果显示:在越南参中共鉴定出4个PAL基因,依据其染色体位置分别将命名为PvPAL1、PvPAL2、PvPAL3、PvPAL4。4个PvPAL蛋白的氨基酸数为712~719,相对分子质量为77732.84~78236.50,理论等电点为pI 6.00至pI 6.24。越南参PvPAL2与PvPAL4聚在同一个分支,亲缘关系较近,且PvPAL2与PvPAL4具有相似的外显子和内含子结构。PvPAL启动子区含有大量顺式作用元件,其中,非生物和生物胁迫响应元件数量最多。总体上看,PvPAL在大多数组织间的表达水平差异显著(P<0.05)。水杨酸处理6 h后,PvPAL1、PvPAL2和PvPAL4表达受到显著诱导。此外,愈伤组织瞬时过表达显示PvPAL2与PvPAL4可促进木质素和类黄酮积累。综上所述,4个PvPAL基因整体保守性较高,且基因表达水平显著受水杨酸诱导,PvPAL2和PvPAL4显著促进了木质素和类黄酮的积累,在越南参生长发育中发挥重要作用。 展开更多
关键词 越南参 PAL基因家族 木质素 类黄酮 功能分析
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干旱胁迫对旱地冬小麦产量及其抗旱相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 杨虓 陈德来 +3 位作者 刘自成 李静 施万喜 孟建军 《干旱地区农业研究》 北大核心 2025年第1期69-75,共7页
为研究陇东旱地育成冬小麦品系的抗旱性与抗旱功能基因的关系,以6个旱地冬小麦新品系为试验材料,于2021—2022年、2022—2023年2个生长季在陇东学院西峰旱作农业试验站设置雨养无灌溉(CK)、旱棚防雨(干旱胁迫)和调控灌溉3个水分处理,测... 为研究陇东旱地育成冬小麦品系的抗旱性与抗旱功能基因的关系,以6个旱地冬小麦新品系为试验材料,于2021—2022年、2022—2023年2个生长季在陇东学院西峰旱作农业试验站设置雨养无灌溉(CK)、旱棚防雨(干旱胁迫)和调控灌溉3个水分处理,测定各品系冬小麦产量,评价其抗旱性,并分析了抗旱相关功能基因的相对表达量。结果表明,在水分胁迫和供水充足(含水量为70%田间持水量)情况下,6个小麦品系产量差值变化不一致,品系C(‘1576-2-0-2’)和品系D(‘15119-1-0-2’)两年试验结果的差值均最小,其余4个品系差值均超过平均差值。由雨养无灌溉试验结果可知,2022年为大旱年份,品系C、D的产量在6个供试品系中分别位居第1和第3,抗旱系数分别为0.89和1.02;2023年为相对丰水年,品系C、D的抗旱系数分别为0.77和1.12,说明这两个品系对气候异常不敏感,抗旱性良好。通过荧光定量PCR技术分析6个小麦品系在灌浆期干旱胁迫下旗叶中的相对表达量,结果显示TaCRT-D基因在6个品系中的表达水平最高,Wdreb2、XTH-7A、WIip19、TaCRT-D在品系C、D中的表达量高于其他品系。田间试验结果与PEG-6000高渗溶液模拟发芽期和苗期干旱胁迫的鉴定结果相一致,表明6个品系中‘1576-2-0-2’和‘15119-1-0-2’品系抗旱性强,且干旱胁迫下灌浆期旗叶中抗旱功能基因TaCRT-D的表达量可以作为冬小麦早期世代抗旱选择参考指标。 展开更多
关键词 旱地冬小麦 早期世代 干旱胁迫 抗旱基因 育种筛选
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梭梭bZIP转录因子HabZIP60在二次高温胁迫响应中的功能分析 被引量:2
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作者 袁梦 车丽娟 +5 位作者 任文静 魏琪 陈建茹 王旭 刘媛媛 王波 《植物生理学报》 北大核心 2025年第3期249-262,共14页
前期发现梭梭(Haloxylon ammodendron)中的HabZIP60基因表达受二次高温胁迫诱导。本研究构建了HabZIP60在拟南芥中的过表达株系,并分析其在二次高温胁迫下的功能。研究发现,二次高温胁迫下,HabZIP60过表达株系的种子萌发势和幼苗存活率... 前期发现梭梭(Haloxylon ammodendron)中的HabZIP60基因表达受二次高温胁迫诱导。本研究构建了HabZIP60在拟南芥中的过表达株系,并分析其在二次高温胁迫下的功能。研究发现,二次高温胁迫下,HabZIP60过表达株系的种子萌发势和幼苗存活率均高于野生型。此外,过表达株系幼苗在二次高温胁迫下细胞死亡率更低,抗氧化酶活性、叶绿素和脯氨酸含量更高。进一步的分子生物学分析显示,在二次高温胁迫下,过表达株系幼苗中内质网应激响应基因HSP70及HabZIP60的靶基因(BiP3、PDI8/9、CNX1)表达量显著增加。酵母单杂交实验显示HabZIP60可能通过结合植物特异未折叠蛋白响应元件(P-UPRE)调控靶基因转录。本研究表明HabZIP60过表达显著提高拟南芥的二次高温胁迫耐受性,为其在梭梭的高温胁迫适应中的功能研究提供参考。 展开更多
关键词 HabZIP60 高温胁迫记忆 细胞死亡率 二次高温胁迫
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生物育种科技创新助力种业发展及展望 被引量:1
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作者 徐振华 高世伟 +7 位作者 高大伟 于艳敏 刘海英 武洪涛 张书利 孙忠义 王昕 闫平 《生物技术进展》 2025年第4期557-564,共8页
近年来,我国生物育种技术研究与应用虽取得了长足发展,但在基础理论研究、核心技术开发及市场重大品种培育等方面仍有待突破。生物育种是现代生物种业创新的核心,通过科技手段对育种技术、方法和产品进行创新,可以提高作物产量、质量和... 近年来,我国生物育种技术研究与应用虽取得了长足发展,但在基础理论研究、核心技术开发及市场重大品种培育等方面仍有待突破。生物育种是现代生物种业创新的核心,通过科技手段对育种技术、方法和产品进行创新,可以提高作物产量、质量和适应性,满足不断增长的全球粮食需求并应对环境挑战。发达国家和国际巨头种业利用生物技术结合大数据信息、人工智能等,推动种业进入“种业4.0时代”智能时代,育种模式从“杂交选育”向“智能选育”转变。基于此,综述梳理了生物育种技术的发展历程、国内外生物育种产业的发展现状,总结了生物育种关键技术创新及应用,讨论了目前生物育种产业化存在的问题和面临的挑战,并展望了未来的发展趋势,以期为提升我国的生物育种创新能力和种业发展提供借鉴。 展开更多
关键词 生物育种 科技创新 种业
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植物ABCB亚家族基因功能的研究进展 被引量:1
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作者 杨阳 裴文霞 +4 位作者 孙丽娟 秦秦 杨湜烟 薛永 孙雅菲 《上海农业学报》 2025年第4期170-180,共11页
腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABC转运蛋白)是一种跨膜蛋白,其主要通过结合并水解ATP释放能量实现底物逆浓度梯度运输。根据ABC转运蛋白的序列相似度、系统发育及结构域的组织形式,将其分成ABCA~ABCH 8... 腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABC转运蛋白)是一种跨膜蛋白,其主要通过结合并水解ATP释放能量实现底物逆浓度梯度运输。根据ABC转运蛋白的序列相似度、系统发育及结构域的组织形式,将其分成ABCA~ABCH 8个亚家族。ABCB是ABC转运蛋白超家族的一个亚家族,其与植物生长素的极性运输和调控密切相关。ABCB亚家族成员通过调节植物体内激素的运输应对外部环境的变化,通过介导镉、铬、铝和铅等重金属离子的转运提高植物重金属耐受性。本文从ABCB亚家族的结构组成、ABCB亚家族对植物生长发育的影响、ABCB亚家族调控机制以及ABCB亚家族对胁迫环境的响应等方面进行了系统的综述,并对此进行了展望,为了解ABCB亚家族基因功能提供一定的参考。 展开更多
关键词 ABCB转运蛋白 拟南芥 生长素 功能
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基于跨物种转录组解析影响不定根发生的保守基因
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作者 谢露露 李福 +1 位作者 张思远 高建昌 《中国农业科学》 北大核心 2025年第6期1195-1209,共15页
【目的】不定根(adventitious root)有利于扩大根系和增强抗逆性,其诱导发生已广泛应用于作物的无性繁殖技术中。通过比较不同物种不定根发生的差异表达基因,分析其中的跨物种保守基因,为全面了解不定根发生的调控机制提供候选基因。【... 【目的】不定根(adventitious root)有利于扩大根系和增强抗逆性,其诱导发生已广泛应用于作物的无性繁殖技术中。通过比较不同物种不定根发生的差异表达基因,分析其中的跨物种保守基因,为全面了解不定根发生的调控机制提供候选基因。【方法】基于公共数据库中矮牵牛、康乃馨、黄瓜、欧美杨、荞麦的不定根发生转录组,采用HISAT和Cufflinks转录组分析流程计算基因转录本丰度,使用DESeq2统计和筛选差异表达基因。将同源比对获得的每个物种差异表达基因(拟南芥最似同源基因),通过集合分析获得处于交集中的基因,进行AmiGO功能注释和富集分析。并使用qPCR对5个物种以外作物的不定根发生相关表达模式进行检验。【结果】共获得保守上调基因15个,参与胁迫响应、细胞分裂、过氧化物、甲羟戊酸等调控路径。下调的保守基因和路径则主要参与离子和化合物稳态调节功能。上调的保守基因随不定根发育进程呈现出两类表达模式(Ⅰ和Ⅱ),NRT3.1和WRKY75在诱导24 h之前,即不定根原基产生时达到峰值(Ⅰ类),而CYCB2;4和KNOLLE表达量在诱导后48—96 h,即不定根凸出表皮时逐渐升高并维持到伸长期(Ⅱ类)。在番茄、西瓜、玉米的不定根诱导发生过程中检验保守基因的表达水平,在试验的双子叶植物类作物番茄、西瓜中,保守基因的表达模式一致,在试验的单子叶类作物玉米中,序列相似性高的WRKY75、CYCB2;4、KNOLLE具有相似的表达模式,序列相似性低的NRT3.1则不同。【结论】在不同物种、不同组织、不同诱导条件下,不定根诱导发生都有赖于胁迫响应和细胞分裂等保守路径和基因的功能发挥。保守上调基因NRT3.1、WRKY75、CYCB2;4、KNOLLE可作为不定根发生的候选基因,在一些双子叶物种中进行深入分析。 展开更多
关键词 不定根发生 不定根诱导 跨物种转录组 保守基因分析 单子叶植物 双子叶植物
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木碱蓬磷酸乙醇胺甲基转移酶基因SdNMT的原核表达及分离纯化
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作者 马盼盼 祝建波 孙国清 《西北农业学报》 北大核心 2025年第8期1476-1483,共8页
磷酸乙醇胺甲基转移酶是一种S-腺苷甲硫氨酸依赖性甲基转移酶,是催化磷酸乙醇胺三步甲基化合成磷酸胆碱的关键酶,而磷酸胆碱是植物中磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱生物合成的重要前体。木碱蓬转录组测序分析结果显示,磷酸乙醇胺甲基转移酶... 磷酸乙醇胺甲基转移酶是一种S-腺苷甲硫氨酸依赖性甲基转移酶,是催化磷酸乙醇胺三步甲基化合成磷酸胆碱的关键酶,而磷酸胆碱是植物中磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱生物合成的重要前体。木碱蓬转录组测序分析结果显示,磷酸乙醇胺甲基转移酶基因在盐胁迫下显著上调表达。本研究以800 mmol/L NaCl处理1 d的cDNA为模板扩增获得木碱蓬磷酸乙醇胺甲基转移酶基因SdNMT的编码区序列,构建原核表达载体pET28a-SdNMT并导入大肠杆菌菌株BL21。对重组蛋白进行IPTG诱导表达、表达条件筛选优化及可溶性分析,采用镍亲和层析柱纯化目标蛋白。结果显示,成功克隆的SdNMT基因编码区序列长1 485 bp,编码494个氨基酸,预测蛋白分子质量为56.56 ku,理论等电点为5.52。重组蛋白在大肠杆菌中得到可溶性表达。1.0 mmol/L IPTG,15℃培养振荡16 h是目的蛋白诱导表达的最佳条件。通过Ni NTA beads 6FF纯化获得在毫克级范围内获得纯度达85%的SdNMT蛋白。研究结果为蛋白酶活性检测提供足够的材料,为深入分析SdNMT在植物生长、发育及环境胁迫响应中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 木碱蓬 SdNMT 原核表达 蛋白纯化
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山新杨谷胱甘肽转移酶基因的生物信息学与表达模式分析
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作者 黄颖 遇文婧 +1 位作者 刘雪峰 刁桂萍 《生物技术通报》 北大核心 2025年第2期248-256,共9页
【目的】分析山新杨谷胱甘肽转移酶(GST)基因的表达模式,为深入研究木本植物GST基因的功能提供基础。【方法】克隆山新杨GST基因并进行生物信息学分析,通过荧光定量PCR技术分析GST基因在植物激素及非生物胁迫下的表达模式。【结果】克隆... 【目的】分析山新杨谷胱甘肽转移酶(GST)基因的表达模式,为深入研究木本植物GST基因的功能提供基础。【方法】克隆山新杨GST基因并进行生物信息学分析,通过荧光定量PCR技术分析GST基因在植物激素及非生物胁迫下的表达模式。【结果】克隆了3个PdbGST基因家族成员,分别命名为PdbGST1、PdbGST2和PdbGST3,cDNA全长分别为678、660和690 bp,编码氨基酸分别为225、219和229个,形成的蛋白质均为稳定亲水酸性蛋白,且均定位于细胞质。同时,这3个蛋白质均具有谷胱甘肽转移酶的典型结构,且其启动子区域具有能够响应生物或非生物胁迫以及植物激素的元件。此外,这3个基因的表达不同程度地受外源植物激素或非生物胁迫诱导。【结论】3个PdbGST基因均能够不同程度地响应非生物胁迫或外源植物激素的诱导,可能参与到杨树对逆境胁迫的响应过程中。 展开更多
关键词 谷胱甘肽转移酶 生物信息学分析 基因表达模式 山新杨
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植物miR397及其靶基因调控的研究进展
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作者 吴鹏 王丽 +2 位作者 郭茜茜 范明玉 丁楚琦 《分子植物育种》 北大核心 2025年第20期6738-6744,共7页
miR397是高度保守的miRNA之一,大多有1~3个成员组成,作为一种重要的调控因子,在植物基因组中普遍存在,并且广泛参与了植物的细胞和生理过程。在PmiREN数据库和miRBase数据库已收录了不同植物的miR397家族,目前已有研究表明miR397会与特... miR397是高度保守的miRNA之一,大多有1~3个成员组成,作为一种重要的调控因子,在植物基因组中普遍存在,并且广泛参与了植物的细胞和生理过程。在PmiREN数据库和miRBase数据库已收录了不同植物的miR397家族,目前已有研究表明miR397会与特定的靶基因结合参与植物六大器官的生长过程,且参与植物的胁迫响应,进而影响不同物种的产量。本研究综述了植物miR397同源性、二级结构预测、靶基因预测以及靶基因的调控功能,以期了解其进化机制并清晰地阐明miR397在各属植物生长过程中扮演的重要角色,并指出近年来miR397在植物研究中的各种问题并对其未来发展情况提出展望,为进一步研究miR397的生物学功能提供参考。 展开更多
关键词 miR397 生物信息学 靶基因 非生物胁迫 生物胁迫
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可变剪切在植物胁迫响应过程中的调控机制研究进展
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作者 谭泗桥 尹轶格 +3 位作者 张宁 段佳胜 王立峰 陈克 《植物科学学报》 北大核心 2025年第5期693-702,共10页
植物扎根于不断变化的生态环境中,已进化出多种复杂机制以应对极端环境下的胁迫压力。可变剪切(Alternative splicing,AS)是真核生物中普遍存在的一类转录后调控机制,能够增加转录本和蛋白质的多样性。植物在高温、低温、干旱、病原体... 植物扎根于不断变化的生态环境中,已进化出多种复杂机制以应对极端环境下的胁迫压力。可变剪切(Alternative splicing,AS)是真核生物中普遍存在的一类转录后调控机制,能够增加转录本和蛋白质的多样性。植物在高温、低温、干旱、病原体侵入等多种逆境条件下,均会激发出一系列的AS调控机制,以抵抗胁迫,维持自身的正常生长发育。本文综述了近年来有关AS调控植物胁迫响应过程的研究进展,揭示了其在调控过程中的关键作用,并论述了最新测序技术对AS研究的推动作用,展望了AS研究在植物育种领域的理论与应用价值,以期为植物抗逆机制研究和抗逆品种选育提供理论指导。 展开更多
关键词 植物 可变剪切 生物胁迫 非生物胁迫
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莱茵衣藻ChR2多克隆抗体的制备
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作者 张媛媛 刘雁霞 樊振川 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期63-70,共8页
【目的】制备一支莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii,C.reinhardtii)光敏通道蛋白2(ChR2)多克隆抗体,研究ChR2在鞭毛内通过感应光信号来影响细胞趋光性的应答机制。【方法】将构建的表达载体pET-28a(+)-chr2转化至大肠杆菌(Escherichi... 【目的】制备一支莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii,C.reinhardtii)光敏通道蛋白2(ChR2)多克隆抗体,研究ChR2在鞭毛内通过感应光信号来影响细胞趋光性的应答机制。【方法】将构建的表达载体pET-28a(+)-chr2转化至大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达6×His-ChR2融合蛋白,用镍柱对其进行亲和纯化。以此融合蛋白作为抗原进行动物免疫,产生相应抗体,再采用Protien A处理抗血清,使得抗体富集,获得纯度较高的莱茵衣藻ChR2多克隆抗体。通过免疫印迹检测莱茵衣藻ChR2多克隆抗体的特异性,并通过免疫荧光试验来确定ChR2在鞭毛中的位置。【结果】6×His-ChR2融合蛋白纯化结果表明其纯度>85%;间接ELISA法检测莱茵衣藻ChR2多克隆抗体的效价为1∶25600;在野生型莱茵衣藻CC-125细胞的全蛋白质提取物中出现了目的条带(相对分子质量93000),而在突变型莱茵衣藻CC-5499(chr1和chr2双基因敲除的突变体)细胞的全蛋白质提取物中未出现目的条带,说明所得到的莱茵衣藻ChR2多克隆抗体特异性较高;ChR2定位于莱茵衣藻细胞的眼点和鞭毛。【结论】该研究为后续探索ChR2在鞭毛内通过感应光信号影响细胞趋光性的机制奠定了基础。 展开更多
关键词 莱茵衣藻 ChR2 原核表达 多克隆抗体
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一个新的沙冬青C_(2)H_(2)锌指蛋白基因克隆和功能初步分析
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作者 王志林 任美艳 +1 位作者 殷玉梅 唐宽高 《分子植物育种》 北大核心 2025年第21期7098-7104,共7页
本研究从强抗逆植物沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中得到一个受低温诱导的新的锌指蛋白基因,命名为AmZFP2,发现其蛋白序列由245个氨基酸组成,包含2个高度保守的C_(2)H_(2)锌指蛋白基序(QALGGH)及一个NLS,即B-box,故属于C_(2)H_(2)... 本研究从强抗逆植物沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中得到一个受低温诱导的新的锌指蛋白基因,命名为AmZFP2,发现其蛋白序列由245个氨基酸组成,包含2个高度保守的C_(2)H_(2)锌指蛋白基序(QALGGH)及一个NLS,即B-box,故属于C_(2)H_(2)型锌指蛋白。半定量RT-PCR表明,生长于室内的沙冬青幼苗中,低温处理24~48 h,AmZFP2表达水平呈现上升趋势;野外不同季节生长的沙冬青植株幼叶,AmZFP2在秋末冬初表达量明显增高,隆冬季节达到最高,在春、夏、秋初表达水平很低。构建AmZFP2植物表达载体,低温胁迫发现转AmZFP2植株存活率高于对照,证明AmZFP2能提高转基因植株的耐冷性。 展开更多
关键词 沙冬青 C_(2)H_(2)锌指蛋白 基因克隆 表达分析
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大麻类纤维素合酶基因家族生物信息学分析
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作者 郭蓉 吕品 +7 位作者 张庆滢 张园 陈璇 许艳萍 郭孟璧 字雪靖 杨若菡 杨明 《贵州农业科学》 2025年第1期1-9,共9页
【目的】探明大麻类纤维素合酶(Cellulose synthase-like,Csl)基因家族成员的结构和功能,为调控大麻生长发育提供参考。【方法】通过生物信息学方法对大麻Csl家族成员的理化性质、系统进化、基因结构和保守基序及启动子顺式作用元件等... 【目的】探明大麻类纤维素合酶(Cellulose synthase-like,Csl)基因家族成员的结构和功能,为调控大麻生长发育提供参考。【方法】通过生物信息学方法对大麻Csl家族成员的理化性质、系统进化、基因结构和保守基序及启动子顺式作用元件等进行分析。【结果】从大麻中共鉴定得到24个Csl家族成员,除7号染色体外其余9条染色体上均有成员分布,各成员外显子数目为3~9个。系统进化树分析显示,24个家族成员被分为CslA、CslB、CslC、CslD、CslE、CslG共6个亚族,其中CslC和CslD成员最多,均有6个。保守基序分析发现,Motif2和Motif3在6个亚族蛋白中均有分布,而Motif6、Motif8和Motif9仅在CslA和CslC亚族蛋白中分布,Motif1、Motif4、Motif7和Motif10仅在CslB、CslD、CslE和CslG亚族蛋白中分布。CsCsls基因启动子区域包含光响应、激素诱导元件、逆境响应元件和MYB结合位点。经公共转录组数据分析发现,除CsCslB2在叶中特异表达外,大部分成员在根和茎中表达水平明显高于叶片。不同亚族成员在茎秆不同组织和不同部位及下胚轴不同发育时期的表达量也存在一定差异。【结论】推测Csl家族基因除介导大麻纤维中半纤维素合成外,还参与大麻生长发育和逆境响应等其他生物学进程。 展开更多
关键词 大麻 半纤维素 类纤维素合酶 基因家族 生物信息学 逆境响应
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扭果花旗杆DePIP1;1基因的克隆及功能分析
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作者 葛风伟 邹丽媛 胡尔西旦·吐尔逊 《植物资源与环境学报》 北大核心 2025年第4期23-31,共9页
以扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim.)为研究材料,克隆了前期转录组分析获得的盐胁迫下高表达的水通道蛋白(AQP)基因,命名为DePIP1;1,GenBank登录号OM864582。利用生物信息学方法分析该基因及蛋白序列,并进行表达模式分析;为进一... 以扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim.)为研究材料,克隆了前期转录组分析获得的盐胁迫下高表达的水通道蛋白(AQP)基因,命名为DePIP1;1,GenBank登录号OM864582。利用生物信息学方法分析该基因及蛋白序列,并进行表达模式分析;为进一步研究该基因抗逆分子调控机制,构建了过表达重组载体pCAMBIA1300-GFP∷DePIP1;1并遗传转化拟南芥[Arabidopsis thaliana(Linn.) Heynh.],验证了转基因拟南芥的抗盐胁迫能力。结果表明:DePIP1;1基因cDNA全长864 bp,编码287个氨基酸;DePIP1;1蛋白的理论等电点为pI 9.14,相对分子质量为30 685.71,亲水性平均系数为0.384,无信号肽,定位于细胞膜,共有6个跨膜结构域,符合AQP家族典型结构特征。DePIP1;1蛋白的二级结构含49.48%无规卷曲、33.80%α螺旋和16.72%延伸链,三级结构预测结果显示该蛋白存在同型四聚体结构。系统进化树分析结果表明:DePIP1;1蛋白与盐芥[Eutrema salsugineum(Pall.) Al-Shehbaz et Warwick]和拟南芥PIP1;1蛋白的同源性较高。基因表达模式分析结果表明:DePIP1;1基因在花瓣、叶、雌雄蕊、茎和根中均有表达,其中,在茎中表达量最高,在根中表达量最低;在干旱(250 mmol·L^(-1)甘露醇)、盐(150 mmol·L^(-1)NaCl)和冷(4℃)胁迫及10μmol·L^(-1)脱落酸处理下,扭果花旗杆茎和叶中DePIP1;1基因表达上调明显,根中DePIP1;1基因仅对干旱和盐胁迫有轻微响应。在100和200 mmol·L^(-1)NaCl胁迫下,过表达DePIP1;1拟南芥株系的根长、侧根数、叶片数均高于野生型;在200 mmol·L^(-1)NaCl胁迫下,过表达DePIP1;1拟南芥株系的总叶绿素含量显著高于野生型;而过表达DePIP1;1拟南芥株系和野生型的相对含水量差异不明显。综上所述,DePIP1;1基因表达具有组织特异性,并受逆境和激素诱导;过表达DePIP1;1可提高拟南芥的抗盐性。 展开更多
关键词 扭果花旗杆 DePIP1 1 基因克隆 逆境胁迫 转基因
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辣椒转录因子基因 CaNAC100 的克隆及其对非生物胁迫和激素处理的响应表达
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作者 苏睿 李平平 +1 位作者 黄俊荣 文娜 《湖南生态科学学报》 2025年第4期36-45,共10页
【目的】探讨辣椒转录因子CaNAC100在非生物胁迫及激素处理条件下的响应表达规律,为进一步阐释其调控辣椒抗逆分子的机制奠定基础。【方法】以云南本地黄辣椒、皱皮黄和紫辣椒为试验材料,采用同源克隆法获得CaNAC100基因CDS序列,并对其... 【目的】探讨辣椒转录因子CaNAC100在非生物胁迫及激素处理条件下的响应表达规律,为进一步阐释其调控辣椒抗逆分子的机制奠定基础。【方法】以云南本地黄辣椒、皱皮黄和紫辣椒为试验材料,采用同源克隆法获得CaNAC100基因CDS序列,并对其编码蛋白及启动子区顺式作用元件等进行生物信息学分析,采用RT-qPCR技术对CaNAC100基因组织表达模式及其在非生物胁迫和激素处理条件下根中的表达水平进行定量分析。【结果】辣椒CaNAC100基因的CDS序列长954 bp,编码317个氨基酸;CaNAC100蛋白是一种亲水性的不稳定蛋白,分子量为36.12 kDa,定位于细胞核;系统发育分析表明,本研究克隆的CaNAC100蛋白与风铃辣椒(Capsicum baccatum)和中华辣椒(Capsicum chinense)的NAC100蛋白亲缘关系最近。表达模式分析表明,CaNAC100在花中表达量最高,其次为根,叶中最低;胁迫及激素响应分析表明,CaNAC100对不同胁迫和激素处理均有不同程度响应,其对高盐和干旱胁迫响应最慢,对低温胁迫响应最快,其次为高温胁迫及茉莉酸甲酯(MJ),胁迫24 h时,其对脱落酸(ABA)处理的响应强度最高,其次为低温、高盐和干旱胁迫。【结论】辣椒CaNAC100基因主要参与ABA应答,同时响应低温、高盐和干旱胁迫。研究结果为后续深入研究该基因的生物功能及抗逆分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 辣椒 CaNAC100 组织表达模式 非生物胁迫 干旱胁迫 脱落酸
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利用CRISPR/Cas9技术定向编辑水稻nsLTPs家族基因OsLTPL166
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作者 王伟 王俊敏 《分子植物育种》 北大核心 2025年第17期5727-5733,共7页
非特异性脂质转移蛋白(non-specific lipid transfer protein,nsLTPs)广泛存在于植物界中,参与许多关键的生物学过程,如花粉的发育、种子发育及细胞壁的延伸等。OsLTPL166基因编码区长度是465 bp,其编码的蛋白质由154个氨基酸组成;根据... 非特异性脂质转移蛋白(non-specific lipid transfer protein,nsLTPs)广泛存在于植物界中,参与许多关键的生物学过程,如花粉的发育、种子发育及细胞壁的延伸等。OsLTPL166基因编码区长度是465 bp,其编码的蛋白质由154个氨基酸组成;根据跨膜结构域及信号肽预测,OsLTPL166在13~35氨基酸处含有跨膜结构域,N端存在一个32个氨基酸残基的信号肽,切割位点位于氨基酸残基32和33之间,产生具有122个氨基酸残基的成熟蛋白质。组织表达分析发现,OsLTPL166仅在种子中特异性表达,且种子发育后期表达量较高。为了研究水稻Os LTPL166在种子发育中的功能,本研究以‘浙辐粳83’为遗传背景构建了敲除载体,利用CRISPR/Cas9技术对OsLTPL166进行定点编辑,共获得24个独立的转基因株系,其中纯合突变株系有7株,编辑方式主要为碱基的插入和缺失,导致氨基酸序列发生移码,成功获得OsLTPL166功能缺陷型突变体。本研究为进一步探究该基因在种子发育进程中的生物学功能提供了遗传材料。 展开更多
关键词 水稻 种子发育 非特异性脂质转移蛋白 CRISPR/Cas9
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