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球孢白僵菌高毒力菌株的诱变选育及固态发酵工艺优化
1
作者 钱森和 杨子成 +1 位作者 阮永海 侯树敏 《安徽农学通报》 2025年第7期53-59,共7页
为筛选出产孢量高、致病力强以及遗传稳定的球孢白僵菌突变菌株以及适宜的固态发酵培养条件,本研究将球孢白僵菌孢子菌悬液置于紫外灯下进行诱变处理,筛选菌落直径和面积大、单位面积产孢量高以及对小菜蛾毒力强的突变菌株;并采用单因... 为筛选出产孢量高、致病力强以及遗传稳定的球孢白僵菌突变菌株以及适宜的固态发酵培养条件,本研究将球孢白僵菌孢子菌悬液置于紫外灯下进行诱变处理,筛选菌落直径和面积大、单位面积产孢量高以及对小菜蛾毒力强的突变菌株;并采用单因素试验和响应面试验对筛选出的突变菌株进行固态发酵工艺优化。结果表明,S2突变菌株的产孢量是原始菌株的3.05倍,其校正死亡率和半致死时间比原始菌株分别提高了8.7%和缩短了17.2%;在连续传代培养5代后,其平均产孢量稳定在4.74×10^(9)个/cm^(2)左右,表现出良好的遗传稳定性。进一步优化得到S2突变菌株的最佳固态发酵工艺条件:麦麸和米糠质量比1.34∶1.00,无机盐含量0.26%,接种量9.32%,含水量50%,发酵温度26℃;在此条件下突变菌株的实际产孢量达到11.762×10^(8)个/g。本研究为球孢白僵菌杀虫剂的研发提供了试验基础。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 高毒力 紫外诱变 产孢量 固态发酵
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基于合成生物学微生物底盘细胞构建与优化的研究进展 被引量：2
2
作者 孙天丽 黄明珠 +1 位作者 刘斌 陈雪岚 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2025年第1期394-402,共9页
微生物菌株的改造优化是现代工业生物技术的核心,其中工业微生物底盘细胞的构建已成为合成生物学的研究热点之一。基于合成生物学“设计-构建-测试-学习”策略,对微生物底盘细胞理想设计和改造是优良细胞工厂构建的重要手段,本文对合成... 微生物菌株的改造优化是现代工业生物技术的核心,其中工业微生物底盘细胞的构建已成为合成生物学的研究热点之一。基于合成生物学“设计-构建-测试-学习”策略,对微生物底盘细胞理想设计和改造是优良细胞工厂构建的重要手段,本文对合成生物学和微生物底盘细胞的改造优化策略进行了相关概述,同时总结了基于合成生物学各工业微生物底盘细胞的构建及应用,最后对在构建底盘细胞时所遇到的障碍及未来的前景进行了展望,以推动具有优良性状的微生物细胞工厂的构建。 展开更多
关键词 合成生物学 底盘细胞 基因组精简 工业微生物 微生物细胞工厂
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嗜水气单胞菌非编码RNA的功能研究
3
作者 王嘉璐 蔡彤璇 +4 位作者 陈甜梦 李娜 刘瑶瑶 赵宝华 刘东 《天津师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期13-21,共9页
为了探究原核生物嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)中非编码RNA(sRNA)的功能,以嗜水气单胞菌A.hydrophila ATCC 7966菌株为实验材料,采用转录组测序技术进行转录组学分析,预测得到非编码RNA,构建了sRNA基因缺失突变体(△sRNA),并对△... 为了探究原核生物嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)中非编码RNA(sRNA)的功能,以嗜水气单胞菌A.hydrophila ATCC 7966菌株为实验材料,采用转录组测序技术进行转录组学分析,预测得到非编码RNA,构建了sRNA基因缺失突变体(△sRNA),并对△sRNA的生理特性和致病性进行测定.结果显示:△sRNA菌株与野生型菌株的生长状况、运动能力和溶血现象基本一致,且在高渗环境下2种菌株受到的抑制程度相同;同野生型菌株相比,△sRNA菌株的生物被膜形成能力与蛋白酶活性均显著降低(P<0.01),且△sRNA菌株对青霉素和红霉素的敏感度增强;sRNA基因的缺失导致A.hydrophila的致病性降低. 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 转录组测序 非编码RNA 基因敲除 致病性
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uge1基因缺失对粟酒裂殖酵母生长生殖的影响及其分子机制
4
作者 青昕 张丁 +3 位作者 余雯 刘可 丁祥 侯怡铃 《河北大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第6期623-636,共14页
为明确粟酒裂殖酵母uge1基因缺失后生殖情况、有丝分裂间期动力学变化及异常的关键表达基因和关键代谢通路,采用活细胞成像分析uge1基因缺失(Δuge1)后产孢情况及有丝分裂间期动力学变化,结合RNA测序(RNA-Seq)技术对野生型和Δuge1菌株... 为明确粟酒裂殖酵母uge1基因缺失后生殖情况、有丝分裂间期动力学变化及异常的关键表达基因和关键代谢通路,采用活细胞成像分析uge1基因缺失(Δuge1)后产孢情况及有丝分裂间期动力学变化,结合RNA测序(RNA-Seq)技术对野生型和Δuge1菌株测序并进行生物信息学分析,同时采用荧光定量PCR对关键基因的表达水平进行验证.活细胞成像结果表明,uge1基因缺失导致酵母产4个正常孢子数的细胞减少,孢子直径增大,6%的Δuge1菌株出现细胞核解聚,微管束在细胞壁上的停留时间减少了(0.526±0.08)min.RNA测序结果显示,Δuge1菌株中mat2-Pc、mat2-Pi基因的上调表达与mfm1、mfm2基因的下调表达导致了粟酒裂殖酵母的异常生殖过程,aat1基因的表达量增加使纺锤体延伸时间变长,acp2和cdc8基因的过量表达则导致了肌动蛋白环收缩减慢.KEGG富集分析表明,脂肪酸合成代谢中fas1、fas2和cut6基因的表达下调干扰了脂肪酸合成代谢,促使核膜合成障碍,导致核解聚的发生.研究结果揭示了粟酒裂殖酵母uge1基因缺失导致细胞生长生殖异常的关键表达基因和关键代谢通路,为深入研究uge1基因对细胞动力学影响的分子机制提供了一定的科学依据. 展开更多
关键词 uge1基因缺失 粟酒裂殖酵母 RNA测序 有性生殖 有丝分裂
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病原菌免疫逃逸机制的研究进展
5
作者 伍绍举 周长林 《药物生物技术》 2025年第4期555-559,共5页
病原菌感染严重威胁人类健康,它们通过参与调节宿主细胞的多种细胞死亡途径来逃避宿主的免疫应答,这一策略极大地促进了它们的传播和生存。文章从抗吞噬作用、抗自噬作用、抗氧化和硝化压力、抑制细胞焦亡、诱导细胞铁死亡和细胞坏死等... 病原菌感染严重威胁人类健康,它们通过参与调节宿主细胞的多种细胞死亡途径来逃避宿主的免疫应答,这一策略极大地促进了它们的传播和生存。文章从抗吞噬作用、抗自噬作用、抗氧化和硝化压力、抑制细胞焦亡、诱导细胞铁死亡和细胞坏死等方面阐述了病原菌感染宿主细胞后逃脱细胞杀伤实现免疫逃逸的机制,并综述了针对病原菌免疫逃逸相关靶点的抗感染药物的开发,对这些机制的深入研究将有助于确定治疗靶点,为解决临床治疗病原菌感染问题提供策略。 展开更多
关键词 病原菌感染 免疫逃逸 吞噬溶酶体 细胞自噬 氧化和硝化压力 细胞焦亡 细胞铁死亡 细胞坏死
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超高压灭活枯草芽孢杆菌(AS1.140)的参数优化 被引量：26
6
作者 曾庆梅 潘见 +4 位作者 谢慧明 杨毅 徐慧群 黄训端 赵阳楠 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期158-162,共5页
该文采用响应曲面方法中的Box-Behnken模式,对超高压灭活枯草芽孢杆菌进行了试验优化设计,并进行了实验分析验证。试验结果表明:压力、温度、保压时间是超高压灭活枯草芽孢杆菌的显著影响因子,分析表明其显著度顺序为压力>温度>... 该文采用响应曲面方法中的Box-Behnken模式,对超高压灭活枯草芽孢杆菌进行了试验优化设计,并进行了实验分析验证。试验结果表明:压力、温度、保压时间是超高压灭活枯草芽孢杆菌的显著影响因子,分析表明其显著度顺序为压力>温度>保压时间;在本试验条件范围内建立并验证的超高压杀灭枯草芽孢杆菌的回归模型准确有效;优化得出10组杀灭106cfu/mL枯草芽孢杆菌工艺参数的取值范围为压力343.79～475.75MPa,温度27.47～57.44℃,保压时间14.14～19.72min。 展开更多
关键词 超高压 枯草芽孢杆菌 响应曲面法 优化
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东海区小黄鱼伏季休渔效果及其资源合理利用探讨 被引量：41
7
作者 程家骅 林龙山 +2 位作者 凌建忠 李建生 丁峰元 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期554-560,共7页
以1991-2002年东海区渔业资源监测调查资料为基础,系统分析研究了伏季休渔制度对东海区小黄鱼(Larim-ichthys polyactis Bleeker)资源的养护效果及其局限性,并根据Ricker繁殖模型解析现行资源状况下的最大持续产量,探讨巩固伏季休渔效... 以1991-2002年东海区渔业资源监测调查资料为基础,系统分析研究了伏季休渔制度对东海区小黄鱼(Larim-ichthys polyactis Bleeker)资源的养护效果及其局限性,并根据Ricker繁殖模型解析现行资源状况下的最大持续产量,探讨巩固伏季休渔效果的相关管理措施。结果表明,伏季休渔措施对小黄鱼资源的养护作用十分明显,经3个月休渔期,海域中小黄鱼资源增重率达1.71倍,开捕时刻(9月)的相对资源密度为全年最高。但伏季休渔的效果在当年的秋冬汛后即被消耗殆尽,12月份时的资源残存量仅为伏季休渔结束时刻的11％;与伏季休渔制度实施前相比,目前东海区小黄鱼资源的群体结构已发生了质的变化,当龄鱼的渔获比例由伏季休渔制度实施前的43.14％上升至近年来的74.64％,剩余群体的渔获比例由56.86％下降至25.36％,资源结构的脆弱程度进一步加剧;伏季休渔制度对小黄鱼资源的长期恢复效果因捕捞力量的居高不下而难以持续体现。坚持产出控制,在现行资源状况下实行9.34×104t最大持续产量的管理目标,伏季休渔制度对东海区小黄鱼资源保护和恢复的长期效果才能得以逐步实现。 展开更多
关键词 东海区 小黄鱼 伏季休渔
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红芪中微量元素与活性成分含量的相关性研究 被引量：17
8
作者 强正泽 王燕 +2 位作者 李成义 李硕 王明伟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1801-1810,1770,共11页
以甘肃不同产地红芪为研究对象,研究红芪活性成分与微量元素含量的相关性。采用火焰原子吸收光谱法测定红芪中12种微量元素含量,HPLC法测定红芪中毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量,紫外分光光度计法测定红芪总多糖含量,并进行相关性及回归分... 以甘肃不同产地红芪为研究对象,研究红芪活性成分与微量元素含量的相关性。采用火焰原子吸收光谱法测定红芪中12种微量元素含量,HPLC法测定红芪中毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量,紫外分光光度计法测定红芪总多糖含量,并进行相关性及回归分析。结果表明毛蕊异黄酮与Fe、Mg含量呈极显著正相关;芒柄花素与Fe、Ca、Ni、Mg含量呈极显著正相关,与K含量呈显著正相关,而与Cr、Li、Co含量呈显著负相关;多糖与Zn含量呈显著负相关,与Mg含量呈极显著负相关。说明红芪中微量元素与活性成分含量之间存在密切相关关系,具体量化关系需进一步研究。 展开更多
关键词 红芪 微量元素 毛蕊异黄酮 芒柄花素 多糖 相关性
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橡胶树与白粉病菌Oidium heveae亲和互作组织细胞学研究 被引量：21
9
作者 万三连 梁鹏 +3 位作者 刘文波 张宇 缪卫国 郑服丛 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期26-36,共11页
白粉病是橡胶树生产中最重要的病害之一,是由粉孢属病菌Oidium heveae Steinm.引起。目前,对该病原菌在寄主中侵染行为及其与寄主互作的组织细胞学尚缺乏系统研究。本文利用显微技术,结合多种染色方法,观察了橡胶树白粉菌侵染橡胶树叶... 白粉病是橡胶树生产中最重要的病害之一,是由粉孢属病菌Oidium heveae Steinm.引起。目前,对该病原菌在寄主中侵染行为及其与寄主互作的组织细胞学尚缺乏系统研究。本文利用显微技术,结合多种染色方法,观察了橡胶树白粉菌侵染橡胶树叶组织的细胞学变化及寄主的抗性反应。O.heveae在寄主上发育要经历5个关键发育时间点,即分生孢子萌发高峰(4hpi)、附着胞形成高峰(8hpi)、侵入结构(初生吸器)形成高峰(15hpi)、次生菌丝形成高峰(24hpi)、分生孢子梗形成高峰(5dpi);分生孢子萌发侵入寄主前,其能量来自自身贮存的能量物质。在互作过程中,病原菌初生吸器形成之后,橡胶树叶组织开始出现明显的氧暴发、胼胝质和乳突等抗性反应,活性氧在橡胶树与病原菌互作中起到了重要的作用,当橡胶树叶片中活性氧积累较低时,有利于O.heveae的发育及入侵,活性氧积累较高时,则引发寄主氧暴发等以阻止病原菌进一步扩展。O.heveae在寄主上发育的5个关键发育时间点分别属于病原菌侵染前期、潜育期和侵染后期,橡胶树叶组织早期亲和互作与中后期非亲和互作保持了专性寄生菌与寄主间发育平衡的进化关系。 展开更多
关键词 橡胶树 橡胶树白粉菌 侵染 细胞学
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海洋细菌S-12-86的产溶菌酶条件 被引量：12
10
作者 张琇 王跃军 +2 位作者 孙谧 王清印 刘均忠 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期425-429,共5页
从中国东海海域底泥中筛选获得一株产溶菌酶的海洋细菌S-12-86,采用摇瓶发酵的方式,分别从培养基组分与发酵条件两个方面对海洋细菌S-12-86产酶的影响进行研究。结果表明,菌株S-12-86能够利用麦芽糖、淀粉、甘油和葡萄糖作为碳源,不能... 从中国东海海域底泥中筛选获得一株产溶菌酶的海洋细菌S-12-86,采用摇瓶发酵的方式,分别从培养基组分与发酵条件两个方面对海洋细菌S-12-86产酶的影响进行研究。结果表明,菌株S-12-86能够利用麦芽糖、淀粉、甘油和葡萄糖作为碳源,不能利用蔗糖与甘露醇;能够利用牛肉膏、酵母膏、蛋白胨和硫酸铵作为氮源,其中牛肉膏效果最佳,而硝酸钾、氯化铵和尿素几乎不能被利用;Zn2+、Mn2+、Cu2+对菌株S-12-86的生长和产酶均有抑制作用;Fe2+对菌体生长无明显影响,但明显抑制菌体产酶;Na+、K+对菌体的生长和产酶无明显影响;Ca2+对菌体生长有促进作用;Mg2+对菌体生长和产酶均有促进作用。菌株S-12-86最适发酵条件为:培养温度30℃、接种体积比4.0%、装液量体积比10.0%、产酶高峰在发酵开始后24 h。与白色链霉菌G(Streptomyces albusG)、灰色链霉菌P-51(S.griseusP-51)、枯草芽孢杆菌77(Bacillus subtilis77)等产溶菌酶微生物的产酶条件相比较,菌株S-12-86具有易培养、产酶量较高、生产成本较低等优点。因此,菌株S-12-86有较大的生产开发潜力。 展开更多
关键词 细菌S-12—86 溶菌酶 发酵
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酶法糖化玉米芯发酵生产乙醇的研究 被引量：11
11
作者 赵晶 陈明 +1 位作者 张靖方 夏黎明 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 2007年第4期7-10,共4页
研究了玉米芯的酶法水解及酶解液的乙醇发酵。采用里氏木霉ZU-02纤维素酶水解酸预处理后的玉米芯为原料,适宜的酶用量为20 FPIU(以每克底物计,下同),48 h后酶解得率为67.5%;添加黑曲霉ZU-07所产纤维二糖酶可有效解除纤维二糖累积引起的... 研究了玉米芯的酶法水解及酶解液的乙醇发酵。采用里氏木霉ZU-02纤维素酶水解酸预处理后的玉米芯为原料,适宜的酶用量为20 FPIU(以每克底物计,下同),48 h后酶解得率为67.5%;添加黑曲霉ZU-07所产纤维二糖酶可有效解除纤维二糖累积引起的反馈抑制作用,当纤维二糖酶用量为6.5 CB IU时,48 h后酶解得率提高到83.9%。采用分批补料酶解工艺,使底物质量浓度提高到200 g/L,酶解60 h后还原糖质量浓度达到116.3 g/L,酶解得率为80.1%。利用一株耐高温酿酒酵母HTR-11在38℃下对酶解液进行乙醇发酵,质量浓度95.3 g/L的葡萄糖在18 h内发酵生成质量浓度为45.7 g/L的乙醇,其得率达到理论值的94%。 展开更多
关键词 玉米芯 水解 纤维素酶 纤维二糖酶 乙醇发酵
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细菌细胞间通讯的群感效应 被引量：12
12
作者 齐枝花 于鑫 +2 位作者 余萍 夏明芳 郑正 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期128-133,共6页
自然界中的细菌大多数以生物膜的形式存在,这种存在方式增强了细菌对环境的适应性和病原菌的致病性。近年来研究表明,细菌群感效应(quorumsensing)是调控生物膜形成和其它生物学功能的机制。细菌能够分泌特定的信号分子并感应它的浓度,... 自然界中的细菌大多数以生物膜的形式存在,这种存在方式增强了细菌对环境的适应性和病原菌的致病性。近年来研究表明,细菌群感效应(quorumsensing)是调控生物膜形成和其它生物学功能的机制。细菌能够分泌特定的信号分子并感应它的浓度,当信号分子浓度达到阈值时,细菌就能够引发包括致病基因在内的相关基因的表达以适应环境的变化。由于生物膜的形成是病原菌致病性和其它要求一定细胞密度才能产生功能的基础,所以细菌群感效应的发现为防止病原菌的毒害作用提供了新的思路。 展开更多
关键词 细菌群感效应 信号分子 细胞间通讯
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一株利用烟草废水红酵母的筛选鉴定及发酵性能研究 被引量：7
13
作者 席宇 吉彦龙 +3 位作者 李敏睿 曹瑞丽 王燕燕 朱大恒 《郑州大学学报（理学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期101-105,共5页
从废弃烟梗固态发酵物中筛选出一株酵母菌,根据培养、形态和生理生化特征初步鉴定为深红酵母(Rhodotorula rubra),标记为JLC.JLC在烟草废水中生长良好,5%接种量,28℃培养4 d,细胞干重为9.37 g/L.添加0.8%的NaH2PO4,可使细胞干重达到14.8... 从废弃烟梗固态发酵物中筛选出一株酵母菌,根据培养、形态和生理生化特征初步鉴定为深红酵母(Rhodotorula rubra),标记为JLC.JLC在烟草废水中生长良好,5%接种量,28℃培养4 d,细胞干重为9.37 g/L.添加0.8%的NaH2PO4,可使细胞干重达到14.87 g/L.JLC产类胡萝卜素,其色素最大吸收波长在485 nm,初步实验条件下最大色素产量为3.04 mg/L. 展开更多
关键词 烟草废水 筛选 鉴定 类胡萝卜素 深红酵母
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AiiA融合蛋白包涵体变性和复性的研究 被引量：9
14
作者 杨梅 郭丽清 +4 位作者 关夏玉 张峰 林彬辉 陈新华 黄志鹏 《福建师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期76-79,共4页
通过IPTG诱导含有pGEXaiiA-B15质粒的工程菌使其大量表达AiiA融合蛋白.由于所表达的融合蛋白多为不可溶的包涵体,须经分离、变性溶解,再经过一个合适的复性过程才能实现变性蛋白的正确折叠,得到具有生物活性的蛋白.通过含N-十二烷基肌... 通过IPTG诱导含有pGEXaiiA-B15质粒的工程菌使其大量表达AiiA融合蛋白.由于所表达的融合蛋白多为不可溶的包涵体,须经分离、变性溶解,再经过一个合适的复性过程才能实现变性蛋白的正确折叠,得到具有生物活性的蛋白.通过含N-十二烷基肌氨酸钠的缓冲液A溶液及尿素等变性剂使包涵体溶解,磷酸盐缓冲液透析复性.SDS-PAGE电泳表明包涵体已由不可溶转化成可溶的蛋白.抑菌试验证明复性后的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏软腐病菌引起的马铃薯软腐病有较明显的抑制作用. 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 AiiA蛋白 变性 复性
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谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧化物酶系统在微生物细胞抗氧胁迫系统中的作用 被引量：22
15
作者 付瑞燕 陈坚 李寅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期770-775,共6页
谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)系统在不同微生物细胞抵抗氧胁迫中的生理功能不尽相同。该系统在真核模式微生物酿酒酵母中是必需存在的,在维持胞内氧化还原平衡和抵抗氧胁迫中发挥主要作用。然而,在原核微生物中,该系统只是条... 谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)系统在不同微生物细胞抵抗氧胁迫中的生理功能不尽相同。该系统在真核模式微生物酿酒酵母中是必需存在的,在维持胞内氧化还原平衡和抵抗氧胁迫中发挥主要作用。然而,在原核微生物中,该系统只是条件性的,即部分胞内存在谷胱甘肽还原酶和GPx的原核微生物,如流感嗜血杆菌和乳酸乳球菌,可通过从胞外吸收GSH,形成条件性的依赖于GSH的GPx系统,参与抵抗氧胁迫。 展开更多
关键词 微生物细胞 谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧化物酶系统 抗氧胁迫
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纤维堆囊菌的多细胞形态发生过程 被引量：7
16
作者 吴斌辉 李越中 +2 位作者 胡玮 周璐 侯配斌 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期657-661,共5页
粘细菌是具有复杂多细胞行为的革蓝氏阴性细菌 ,纤维堆囊菌是粘细菌中唯一能够降解纤维素的粘细菌种属。本文通过扫描电子显微镜和相差光学显微镜 ,分析了纤维堆囊菌在纤维素基质上的生长和子实体形态发生的多细胞行为特征 。
关键词 粘细菌 纤维堆囊菌 多细胞 形态发生
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原生质体融合选育高产多糖的罗尔阿太菌菌株 被引量：6
17
作者 李鸿梅 赵慧 +3 位作者 魏明 闵伟红 张桂弘 刘景圣 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期91-97,共7页
【目的】选育罗尔阿太菌多糖高产、草酸低产的优良罗尔阿太菌菌株.【方法】采用原生质体融合技术,以罗尔阿太菌菌株AY6657741为原始菌株,以紫外和亚硝基胍复合诱变的2株多糖高产的诱变株Ar-1和Ar-2为双亲菌株;通过正交试验优化原生质体... 【目的】选育罗尔阿太菌多糖高产、草酸低产的优良罗尔阿太菌菌株.【方法】采用原生质体融合技术,以罗尔阿太菌菌株AY6657741为原始菌株,以紫外和亚硝基胍复合诱变的2株多糖高产的诱变株Ar-1和Ar-2为双亲菌株;通过正交试验优化原生质体的制备条件.【结果和结论】5.56 mmol·L-1的β-巯基乙醇处理菌悬液,0.4 mol·L-1的KCl作为渗透压稳定剂,3.1 mg·m L-1的复合酶液(纤维素酶φ为2%、蜗牛酶φ为2%、溶壁酶φ为4%),p H 5.5,32℃酶解55min,原生质体形成率93.534%,再生率18.921%.0.4 g·m L-1的聚乙二醇6000在30℃条件下融合25 min,选育出1株多糖高产、草酸低产的菌株,命名为AY-3.菌株AY-3多糖产量达24.673 g·L-1,比原始菌株AY6657741的产糖量提高了54.42%,草酸质量浓度降低至0.281 g·L-1,比原始菌株草酸的质量浓度降低了43.57%. 展开更多
关键词 罗尔阿太菌 原生质体融合 多糖 草酸
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苏云金芽胞杆菌AiiA蛋白对魔芋软腐病菌的抗病活性 被引量：20
18
作者 周燚 孙明 喻子牛 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期761-764,共4页
AiiA蛋白通过破坏病原菌的信号分子来阻断病原菌的群体感应调节系统,达到抗病的目的,是一种新型的抗病蛋白.根据蜡状芽胞杆菌ATCC14579基因组中aiiA序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌中成功扩增出aiiA基因,其ORF为753bp,测序后经blast检测... AiiA蛋白通过破坏病原菌的信号分子来阻断病原菌的群体感应调节系统,达到抗病的目的,是一种新型的抗病蛋白.根据蜡状芽胞杆菌ATCC14579基因组中aiiA序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌中成功扩增出aiiA基因,其ORF为753bp,测序后经blast检测与已发表的序列相似性均在95%以上.将此基因克隆到pET28a表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,超量表达的蛋白在菌体中以包涵体形式存在,纯化的AiiA蛋白经SDS PAGE电泳检测,表达产物分子量为28×103,致病性测定表明该蛋白对魔芋软腐病菌CZY具有较强的抗病活性. 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 AiiA蛋白 魔芋软腐病菌CZY
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固定化基因重组酵母发酵木糖产乙醇 被引量：10
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作者 陈明 王周芳 夏黎明 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期290-293,共4页
采用海藻酸钙凝胶包埋法固定基因重组酵母Sacchromyces cerevisiae ZU-10,研究了固定化细胞的发酵特性.结果表明,在30℃、pH 5.5下发酵80 g/L木糖,游离细胞的发酵周期为96 h,乙醇得率为0.37,细胞固定化后发酵周期缩短至60 h,乙醇得率提... 采用海藻酸钙凝胶包埋法固定基因重组酵母Sacchromyces cerevisiae ZU-10,研究了固定化细胞的发酵特性.结果表明,在30℃、pH 5.5下发酵80 g/L木糖,游离细胞的发酵周期为96 h,乙醇得率为0.37,细胞固定化后发酵周期缩短至60 h,乙醇得率提高到0.40.利用固定化细胞重复分批发酵8次,木糖利用率均在95%以上,平均乙醇得率为0.39.与游离细胞相比,固定化细胞对乙酸的耐受性明显增强,当质量浓度低于1.2 g/L时乙酸对木糖发酵的影响很小.利用固定化重组酵母发酵玉米秸秆水解液中的葡萄糖和木糖,36 h内65.0 g/L葡萄糖和27.0g/L木糖被完全利用,生成36.9 g/L乙醇,对葡萄糖和木糖的乙醇得率为0.40. 展开更多
关键词 木糖 乙醇发酵 基因重组酵母 固定化细胞 玉米秸秆 水解液
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山豆根和苦参生物碱类成分UPLC/Q-TOF MS^E比较研究 被引量：6
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作者 曾祖平 郭智 +4 位作者 彭冰 沈胜楠 夏方博 刘亚旻 潘瑞乐 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期804-808,共5页
使用UPLC/Q-TOF MSE对山豆根和苦参的生物碱类成分进行详细的比较研究。色谱柱:Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相:乙腈-5 mmol/L甲酸铵水溶液;流速为0.5 m L/min;检测器:四极杆串联飞行时间质谱(Q-TOF),正离子... 使用UPLC/Q-TOF MSE对山豆根和苦参的生物碱类成分进行详细的比较研究。色谱柱:Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相:乙腈-5 mmol/L甲酸铵水溶液;流速为0.5 m L/min;检测器:四极杆串联飞行时间质谱(Q-TOF),正离子检测模式。根据离子流色谱图中色谱峰的分子量及其二级质谱碎片离子的裂解规律,结合参考文献进行结构推定;利用主成分分析及正交偏最小二乘法进行聚类分析。结果从山豆根总生物碱中鉴定12个主要成分,从苦参生物碱中鉴定了11个主要成分,其中有10个是相同的结构,但相同成分在两种药材中的含量差异很大;聚类分析表明山豆根和苦参具有显著的差异。本研究表明山豆根和苦参的主要生物碱成分虽然结构相同,但含量差异很大,二者临床疗效差异,可能由于生物碱含量的差异,或生物碱以外的其他成分所引起。 展开更多
关键词 山豆根 苦参 生物碱 UPLC/Q-TOF MS^E
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