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木瓜蛋白酶的开发与应用 被引量：40
1
作者 吴显荣 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期11-15,共5页
本文总结了近年来我校木瓜蛋白酶的研究及应用进展。1)对国产木瓜乳汁粗酶进行了分离与纯化,得到了重结晶的木瓜蛋白酶和木瓜凝乳酶,结晶分别为柱状和针状;2)为了提高木瓜蛋白酶活性检测的准确性,增强国际市场的竞争能力,采用紫外分光... 本文总结了近年来我校木瓜蛋白酶的研究及应用进展。1)对国产木瓜乳汁粗酶进行了分离与纯化,得到了重结晶的木瓜蛋白酶和木瓜凝乳酶,结晶分别为柱状和针状;2)为了提高木瓜蛋白酶活性检测的准确性,增强国际市场的竞争能力,采用紫外分光光度法,茚三酮显色法及BAEE法对国内外不同来源的木瓜蛋白酶进行了比较,找出以上3种方法的最适反应条件、提出了在工农业生产中的应用途径;3)在研制木瓜蛋白酶的基础上,利用酶工程方法,制备了纤维素固定化木瓜蛋白酶和琼脂固定化木瓜蛋白酶,增强了酶的热稳定性及保存性,用于啤酒生产可以提高防浊效果、增进氨基酸营养;4)与广州园艺公司、广州酶制剂厂及前进食品厂等合作,进行了木瓜蛋白酶的系列产品开发,陆续研制出国产嫩肉粉、啤酒澄清剂、饼干松化剂、饲料添加剂等新产品,在食品工业和饲料工业中获得了较好的效益。 展开更多
关键词 木瓜蛋白酶 木瓜凝乳酶 固定化酶 嫩肉粉
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基于LS-SVM的NBA前锋/中锋球员综合能力评价 被引量：1
2
作者 刘国璧 孙群 赵姝 《西安文理学院学报（自然科学版）》 2012年第4期10-14,共5页
为了评价现役NBA前锋/中锋球员的综合能力,先利用SPSS16.0软件对36位NBA前锋/中锋球员进行聚类分析,然后根据聚类结果,利用MATLAB软件,构建了基于LS-SVM的球员能力评价模型,对36位球员的综合能力进行评价,结果表明:该模型在球员能力的... 为了评价现役NBA前锋/中锋球员的综合能力,先利用SPSS16.0软件对36位NBA前锋/中锋球员进行聚类分析,然后根据聚类结果,利用MATLAB软件,构建了基于LS-SVM的球员能力评价模型,对36位球员的综合能力进行评价,结果表明:该模型在球员能力的评价上具有较高的精度、较好的拟合效果,是一种科学可行的评价方法. 展开更多
关键词 LS—SVM MATLAB 前锋/中锋
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枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究 被引量：1
3
作者 秦岭 刘克武 +4 位作者 莫宏春 江琰 国锦林 刘祝君 喻东 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期939-944,共6页
采用DEAE Sepharose离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B特异结合层析和SephadexG 200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6 磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化.纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%.纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电... 采用DEAE Sepharose离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B特异结合层析和SephadexG 200凝胶过滤技术,对枯草芽孢杆菌中的6 磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化.纯化倍数为112.3倍,比活为1.46U/mg,回收率为8.2%.纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带.测得全酶相对分子质量为107kD,具有两个分子量相同的亚基,亚基相对分子质量为51kD.最适pH值为8.0,最适温度为30℃,对热不稳定.以6 磷酸葡萄糖酸和NADP+为底物,其Km值分别为Km1(NADP+)=19.8μmol/L和Km2(6 GPA)=22.6μmol/L.在5mmol/L～50mmol/L浓度范围内,Mg2+,Ca2+和Mn2+对酶有激活作用,Fe3+和Cu2+对酶有抑制作用,K+,Na+,Cl-,NO-3,SO-4对酶几乎没有影响.用PMSF,TNBS,NBS,DTT和BrAc对酶进行修饰,实验结果表明,丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 分离纯化 性质
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应用壳核纳米微球固定乙醇脱氢酶联用HPLC对抑制剂筛选
4
作者 杜志云 潘文龙 +5 位作者 毛学圃 黄宝华 黄仲立 方岩雄 张坤 马林 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期455-458,共4页
对新型聚甲基丙烯酸甲酯/壳聚糖纳米微球进行制备、纯化和表征,采用该纳米微球对乙醇脱氢酶进行固定化。让多组分天然产物直接作用于固定化乙醇脱氢酶,通过高效液相色谱(HPLC)检测固定化酶吸附组分,研究多组分天然产物混合物对乙醇脱氢... 对新型聚甲基丙烯酸甲酯/壳聚糖纳米微球进行制备、纯化和表征,采用该纳米微球对乙醇脱氢酶进行固定化。让多组分天然产物直接作用于固定化乙醇脱氢酶,通过高效液相色谱(HPLC)检测固定化酶吸附组分,研究多组分天然产物混合物对乙醇脱氢酶具有抑制活性的有效成分。结果表明:由HPLC检测到的被固定化乙醇脱氢酶从多组分化合物中直接吸附的组分对乙醇脱氢酶均有较强的抑制作用,说明该方法从多组分直接筛选抑制剂是可行的,同时,本文所检测到的7种天然化合物对乙醇脱氢酶的抑制活性还没有报道。 展开更多
关键词 壳核纳米微球 乙醇脱氢酶 固定化 高效液相色谱 抑制剂
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重组hPRL-1的表达纯化及其理化和酶学性质研究
5
作者 巴特 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第12期1824-1828,共5页
目的:表达纯化hPRL-1重组蛋白,分析其理化性质及酶学特性。方法:热激法将重组pET15b质粒转化入E.coli BL21中,IPTG诱导表达出His-tagged hPRL-1蛋白。使用Ni-NTA亲和层析法结合Mono Q离子交换层析法纯化。用SDS-PAGE法和Western Blot法... 目的:表达纯化hPRL-1重组蛋白,分析其理化性质及酶学特性。方法:热激法将重组pET15b质粒转化入E.coli BL21中,IPTG诱导表达出His-tagged hPRL-1蛋白。使用Ni-NTA亲和层析法结合Mono Q离子交换层析法纯化。用SDS-PAGE法和Western Blot法进行表达情况的定性定量分析,并使用HPLC法鉴定蛋白纯度,计算出蛋白分子量,圆盘等电聚焦电泳分析重组蛋白等电点。比较分析以pNPP、4-MUP和DiFMUP为底物时的酶促反应动力学。同时以pNPP为底物测定酶的最适pH值;以4-MUP为底物测定酶的最适温度,分析探讨缓冲液离子强度与蛋白酪氨酸酶通用抑制剂钒酸钠对酶活力的影响。结果:以亲和层析和离子交换层析结合,可以纯化得到纯度约为95%的蛋白。测得蛋白分子量为24.54kD,等电点为9.11。以pNPP、4-MUP和DiFMUP为底物时Km分别为3720μmol/L,130μmol/L和50μmol/L。酶的最适pH值为7.6,最适温度为34℃。结论:纯化所得蛋白为目的蛋白hPRL-1;两步纯化相结合可以得到纯度较高的蛋白;三种底物特异性依次为DiFMUP>4-MUP>pNPP。 展开更多
关键词 hPLR-1 动力学 PNPP 4-MUP DiFMUP
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关于右旋糖酐生产新工艺的探讨 被引量：4
6
作者 韦肖锋 《企业科技与发展》 2012年第2期12-14,共3页
将传统工艺流程发酵、沉淀、捏洗、水解、划分、调粉、烘干改为发酵、膜分离、调粉、烘干,目的是提高经济效益,减少乙醇使用量,减轻工人的劳动强度,缩短生产周期。新工艺采用不同规格的搪瓷膜分离相对分子量较大的右旋糖酐聚合物和非聚... 将传统工艺流程发酵、沉淀、捏洗、水解、划分、调粉、烘干改为发酵、膜分离、调粉、烘干,目的是提高经济效益,减少乙醇使用量,减轻工人的劳动强度,缩短生产周期。新工艺采用不同规格的搪瓷膜分离相对分子量较大的右旋糖酐聚合物和非聚合物,实现了右旋糖酐按不同分子量分布进行分级,采用这种方式生产的右旋糖酐完全达到药典要求,比采用传统工艺减少使用70%～80%的酒精,且易于回收副产品——果糖,果糖可用于发酵生产乙醇,防止产生高营养的废水。 展开更多
关键词 右旋糖酐 乙醇 肠膜明串珠菌 发酵 膜分离
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