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百合组织培养和遗传转化的研究进展 被引量:6
1
作者 狄翠霞 张满效 +2 位作者 谢忠奎 陈拓 安黎哲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期858-863,共6页
百合是单子叶球茎类观赏花卉,具有食用和药用的作用。本文综述了国内外百合组织培养和遗传转化研究进展。包括营养器官、生殖器官和原生质体再生系统的建立。详细介绍了基因转化的方法,例如农杆菌、基因枪、电激穿孔等。浅析百合外源基... 百合是单子叶球茎类观赏花卉,具有食用和药用的作用。本文综述了国内外百合组织培养和遗传转化研究进展。包括营养器官、生殖器官和原生质体再生系统的建立。详细介绍了基因转化的方法,例如农杆菌、基因枪、电激穿孔等。浅析百合外源基因的表达,例如GUS、半夏凝集素基因、几丁质酶基因等。同时,讨论了百合遗传转化中存在的问题,以期为百合基因工程方面的研究提供依据。 展开更多
关键词 百合 组织培养 遗传转化
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不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响 被引量:10
2
作者 宋明 汤青林 +2 位作者 邹建 李渝 刘荣 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第4期534-536,共3页
以观赏茄‘金蛋’为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L+LH 1 000 mg/L+G ln 500 mg/L+蔗糖50 g/L;低温预处理... 以观赏茄‘金蛋’为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L+LH 1 000 mg/L+G ln 500 mg/L+蔗糖50 g/L;低温预处理和短期热激处理都能显著提高花药愈伤组织的诱导率,但2者效应没有叠加作用。 展开更多
关键词 茄子 离体培养 花药培养 愈伤组织
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针叶树离体培养研究进展 被引量:5
3
作者 吴丽君 《福建农业学报》 CAS 2006年第4期415-419,共5页
高效的针叶树离体培养植株再生体系是应用现代生物技术进行遗传改良和良种繁育的基础。综述了针叶树种离体培养与植株再生的几种方式及其研究进展,提出当前针叶树离体培养植株再生体系研究和应用中存在的问题。
关键词 针叶树种 器官发生 胚胎发生 研究现状
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金背大红花瓣的组织培养方法 被引量:2
4
作者 蔡汉权 《韩山师范学院学报》 2005年第6期72-75,共4页
以菊花花瓣为外植体,在无菌条件下诱导愈伤组织,再由愈伤组织进行芽诱导.利用 花瓣组织培养易变异的特性,以期培养出新品种.本实验中探讨了6-BA、NAA在诱导愈伤 组织和芽诱导中的影响,并获得MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L为芽诱导的最... 以菊花花瓣为外植体,在无菌条件下诱导愈伤组织,再由愈伤组织进行芽诱导.利用 花瓣组织培养易变异的特性,以期培养出新品种.本实验中探讨了6-BA、NAA在诱导愈伤 组织和芽诱导中的影响,并获得MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L为芽诱导的最佳培养方 案. 展开更多
关键词 菊花 花瓣 愈伤组织 芽诱导
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胎鼠海马神经元培养及其鉴定 被引量:6
5
作者 李玉 王波 但齐琴 《昆明医学院学报》 2011年第5期17-19,共3页
目的建立胎鼠海马神经元体外培养方法,观察细胞生长情况,免疫组织化学染色鉴定神经元特异性.方法取胎鼠海马,分裂获得细胞悬液,接种于24孔板,经2 h差速帖壁去除成纤维细胞,将细胞液转移并继续培养,以获娶纯度较高的海马神经元.培养第5... 目的建立胎鼠海马神经元体外培养方法,观察细胞生长情况,免疫组织化学染色鉴定神经元特异性.方法取胎鼠海马,分裂获得细胞悬液,接种于24孔板,经2 h差速帖壁去除成纤维细胞,将细胞液转移并继续培养,以获娶纯度较高的海马神经元.培养第5、11、15天观察细胞和突起生长情况,用NeuN抗体以免疫组化SP二步法染色鉴立神经细胞.结果培养头3 d.细胞生长缓慢,5 d时细胞开始生长,可见突起,11 d时突起连成网状.经Neun染色培养细胞呈阳性反应,证明是神经元.结论本方法获取生长良好,纯度较高的海马神经元. 展开更多
关键词 胎鼠 海马神经元 NEUN 培养
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不同培养基对成年大鼠心肌细胞形态、存活率、收缩功能的影响 被引量:3
6
作者 宫海滨 王洁 王雷 《中国微循环》 2009年第1期55-59,共5页
目的研究不同培养基对成年大鼠心肌细胞形态、存活率和收缩功能的影响。方法本实验采用Langendorff装置行恒流灌流分离成年大鼠心肌细胞,分别用无血清M199、DMEM高糖、DMEM低糖三种培养基培养,比较培养24h和48h的细胞存活率(即杆状率)... 目的研究不同培养基对成年大鼠心肌细胞形态、存活率和收缩功能的影响。方法本实验采用Langendorff装置行恒流灌流分离成年大鼠心肌细胞,分别用无血清M199、DMEM高糖、DMEM低糖三种培养基培养,比较培养24h和48h的细胞存活率(即杆状率)、形态和单个细胞收缩功能的变化。结果培养24h后,M199培养基中细胞存活率校正值(培养细胞杆状率/刚培养细胞杆状率)明显高于其他两种培养基(P<0.05),细胞平均长度(Length)、细胞缩短率(细胞收缩幅度/细胞原始长度)、达到峰值收缩时间(TTP)、50%舒张时间(R50)、90%舒张时间(R90)亦最接近新鲜分离心肌细胞;培养48h后,M199培养基中细胞Length、TTP、R50、R90各指标均明显优于其他两种培养基(P<0.05)。结论三种培养基培养成年大鼠心肌细胞M199对维持细胞的存活状态、形态和功能的效果最好。 展开更多
关键词 心肌细胞 细胞培养 存活率 收缩功能 大鼠
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植物细胞固定化条件对海南粗榧细胞生产三尖杉酯碱的影响 被引量:2
7
作者 潘亚华 蒋旋娴 李永成 《海南大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第2期155-160,共6页
为了研究海南粗榧细胞的固定化条件及其对细胞的生长和三尖杉酯碱合成的影响,本研究利用海藻酸钠凝胶包埋法对海南粗榧悬浮细胞进行固定化,并改变了其固定化条件,同时测定了生物量、PAL酶活性、凝胶球硬度、蔗糖含量和三尖杉酯碱产量等... 为了研究海南粗榧细胞的固定化条件及其对细胞的生长和三尖杉酯碱合成的影响,本研究利用海藻酸钠凝胶包埋法对海南粗榧悬浮细胞进行固定化,并改变了其固定化条件,同时测定了生物量、PAL酶活性、凝胶球硬度、蔗糖含量和三尖杉酯碱产量等指标,结果显示:海南粗榧固定化细胞的生长周期为40 d,其中,在0~15 d其细胞生长停滞,在15~30 d其细胞生长缓慢,而30~40 d为缓慢衰亡期;海南粗榧细胞固定化培养的最佳产物提取时间为第15 d;包埋过程中Ca Cl_2的最适质量浓度为0.023 g/m L;鲜重细胞的最适接种量为10%.由此得出结论:海南粗榧细胞固定化培养抑制了细胞的生长,延长了细胞的生长周期,但缩短了细胞生产三尖杉酯碱的周期. 展开更多
关键词 海南粗榧 固定化 海藻酸钠 三尖杉酯碱
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血清体积分数对培养黑山羊成纤维细胞的影响 被引量:2
8
作者 张荣华 王曦 +1 位作者 郑彦伟 李武峰 《山西农业科学》 2018年第2期268-271,275,共5页
为了建立并完善吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞培养体系,为进一步的克隆试验提供最佳生长状态的供体细胞,在常规培养液的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0,5%,10%,20%,40%),每天在倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,并用台盼蓝染色法统计... 为了建立并完善吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞培养体系,为进一步的克隆试验提供最佳生长状态的供体细胞,在常规培养液的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0,5%,10%,20%,40%),每天在倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,并用台盼蓝染色法统计细胞数目,连续观察7 d,绘制生长曲线,比较不同血清体积分数的培养液对吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞体外培养的影响。结果表明,吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞虽然在不同血清体积分数的5组中均有生长增殖,但生长状态不同,差距较大;其中,10%的血清培养液试验组培养的细胞生长状况最好,细胞形态完整清晰,增殖快,数量多,更适合此细胞的生长。不同体积分数血清的培养液对成纤维细胞的生长具有一定影响,10%血清体积分数的培养液最适合吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞的培养。结果可为进一步研究克隆、基因转染、构建基因文库等提供生物学材料。 展开更多
关键词 吕梁黑山羊 成纤维细胞 体外培养 血清体积分数
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Zn^(2+)和Ag^+对薰衣草愈伤组织诱导的影响 被引量:1
9
作者 李春一 李杰 刘秋月 《牡丹江师范学院学报(自然科学版)》 2015年第1期32-33,共2页
探讨Zn2+和Ag+对薰衣草(lavandulaspp.)组织培养中愈伤组织诱导的影响.以MS为基本培养基,附加五个水平的Ag+和Zn2+,探讨Ag+和Zn2+对薰衣草子叶和下胚轴愈伤组织诱导的影响.实验结果表明:Ag+和Zn2+的加入能提高薰衣草愈伤组织的诱导率并... 探讨Zn2+和Ag+对薰衣草(lavandulaspp.)组织培养中愈伤组织诱导的影响.以MS为基本培养基,附加五个水平的Ag+和Zn2+,探讨Ag+和Zn2+对薰衣草子叶和下胚轴愈伤组织诱导的影响.实验结果表明:Ag+和Zn2+的加入能提高薰衣草愈伤组织的诱导率并抑制外植体的褐化;当Zn2+浓度为15μmol/L时,效果最佳,薰衣草愈伤组织诱导率最高可达到91.67%;当Ag+浓度为60μmol/L时,效果最佳,薰衣草愈伤组织诱导率最高可达到87.67%. 展开更多
关键词 薰衣草 组织培养 金属离子
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大规模细胞培养中控制污染的举措 被引量:2
10
作者 曹忠玲 《中国兽药杂志》 2010年第2期56-58,共3页
从人员培训、环境控制、百级台的无菌操作、原辅材料的管理等方面介绍了大规模细胞培养中避免污染的举措。
关键词 大规模细胞培养 污染 人员培训 环境控制 无菌操作 原辅材料管理
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人脐带间充质干细胞分离培养及鉴定的相关研究 被引量:2
11
作者 青莹 黄梦琦 +2 位作者 石琦 曹颖光 宋珂 《临床口腔医学杂志》 2016年第4期198-202,共5页
目的:原代培养并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs),对h UCMSCs的生物学性状、表面抗原、多向分化潜能等进行研究,并初步检测其内源性Hedgehog(Hh)信号通路主要因子的RNA水平。方法:取足... 目的:原代培养并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs),对h UCMSCs的生物学性状、表面抗原、多向分化潜能等进行研究,并初步检测其内源性Hedgehog(Hh)信号通路主要因子的RNA水平。方法:取足月健康剖宫产胎儿脐带,提取h UCMSCs,贴壁培养。绘制生长曲线,检测细胞周期。进行体外成骨、成脂及成软骨诱导。流式细胞仪检测细胞表面标志物。Real-time PCR检测原代细胞内源性Hh信号通路主要因子的m RNA水平。结果:脐带剪碎经胶原酶消化后24 h细胞即可贴壁,7 d可生长达培养皿底面积85%融合。P_3代h UCMSCs的生长曲线呈上升趋势,传代后第3 d进入倍数生长期。并具有成骨分化、成脂分化及成软骨分化的能力。流式细胞仪检测99.04%的细胞高表达整合素分子CD29,98.80%的细胞高表达粘附分子CD44,85.09%的细胞高表达内皮糖蛋白分子CD105,只有0.19%的细胞表达造血干细胞标记物CD45,0.58%的细胞表达血管内皮分子CD34。脐带来源的间充质干细胞内能检测到Hh信号通路中主要因子的内源性表达,其中Shh水平相对较高。结论:原代培养的h UCMSCs为进一步探索Hh信号通路在颅颌骨缺损修复中的作用机制提供可靠的细胞来源。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 生物学性状 Hh信号通路
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牙髓干细胞来源外泌体修复兔颞下颌关节软骨损伤后软骨组织修复的实验研究 被引量:10
12
作者 骆瑜 李若涵 彭友俭 《临床口腔医学杂志》 2020年第4期202-205,共4页
目的:研究牙髓干细胞来源外泌体在兔体内对颞下颌关节软骨损伤的修复能力。方法:由兔前牙及磨牙获取牙髓干细胞,差速离心法分离外泌体并利用透射电子显微镜、纳米颗粒追踪分析,免疫印迹法鉴定。将获得的外泌体种植到兔的损伤软骨组织中... 目的:研究牙髓干细胞来源外泌体在兔体内对颞下颌关节软骨损伤的修复能力。方法:由兔前牙及磨牙获取牙髓干细胞,差速离心法分离外泌体并利用透射电子显微镜、纳米颗粒追踪分析,免疫印迹法鉴定。将获得的外泌体种植到兔的损伤软骨组织中,实验组为外泌体组,阳性对照组为透明质酸钠组,对照组为常规手术组,在4、8、12周处死,HE染色观察软骨组织再生情况。结果:成功提取兔牙髓干细胞并提取鉴定外泌体,将外泌体种植到兔损伤软骨组织中,发现其可有效促进损伤软骨组织的修复。结论:牙髓干细胞的外泌体能够有效促进兔颞下颌关节软骨损伤后软骨组织修复能力,为外泌体对组织再生的调控提供依据。 展开更多
关键词 兔牙髓干细胞 外泌体 组织再生 颞下颌关节软骨损伤
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体外研究BMSCs中HIF-1α过表达与低表达对成骨和成血管相关因子的影响研究 被引量:6
13
作者 左新慧 李君 +2 位作者 韩祥祯 周琦琪 何惠宇 《临床口腔医学杂志》 2020年第4期206-211,共6页
目的:探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对成骨和成血管相关细胞因子的影响。方法:分离并培养BMSCs采用流式细胞术... 目的:探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对成骨和成血管相关细胞因子的影响。方法:分离并培养BMSCs采用流式细胞术进行鉴定;分别构建过表达与低表达质粒载体上调和下调HIF-1α基因的表达,将含绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的质粒转染至BMSCs。RT-PCR检测成骨分化特异标志物骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),以及成血管特异标志物血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)、血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)的mRNA表达水平。结果:流式细胞术鉴定BMSCs表面标记物CD29阳性率为98.5%,CD45阳性率为4.2%。RT-PCR结果显示过表达实验组BMSCs中HIF-1α的mRNA表达显著升高(P<0.001),BMP-2、ALP、VEGF和Ang-1表达均显著增高(P<0.001);低表达实验组BMSCs中HIF-1α的mRNA表达显著降低(P<0.001),BMP-2、Ang-1表达均显著降低(P<0.001),VEGF表达降低(P<0.05),ALP表达显著增高(P<0.001)。结论:HIF-1α可调控BMSCs的成骨分化及成血管能力。 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1Α 骨髓间充质干细胞 成骨细胞相关因子 血管化细胞相关因子 骨组织工程
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p-STAT3在小鼠实验性根尖周炎中的作用研究 被引量:3
14
作者 王紫君 余静静 彭彬 《临床口腔医学杂志》 2020年第5期266-269,共4页
目的:检测小鼠根尖周炎中磷酸化信号转导和转录激活因子3(phosphorylated-signal transducers and activators of transcription 3,p-STAT3)的表达,初步探讨其在根尖周骨吸收中的作用机制。方法:将20只雄性8周龄的C57小鼠下颌第一磨牙开... 目的:检测小鼠根尖周炎中磷酸化信号转导和转录激活因子3(phosphorylated-signal transducers and activators of transcription 3,p-STAT3)的表达,初步探讨其在根尖周骨吸收中的作用机制。方法:将20只雄性8周龄的C57小鼠下颌第一磨牙开髓,分别于术后0、7、14和28 d取下颌骨,HE染色观察根尖周炎症进展,酶组织化学染色检测破骨细胞,免疫组化和免疫荧光双染检测巨噬细胞和p-STAT3。结果:小鼠根尖周炎症病损和破骨细胞数量随实验时间的延长而持续扩大。p-STAT3在正常组织偶有表达,随病损扩大表达逐渐上升,且与破骨细胞数目呈现一致的变化趋势。巨噬细胞数量的变化也与p-STAT3的表达呈正相关,且存在明显共定位。结论:p-STAT3与根尖周炎病理密切相关,可能通过巨噬细胞参与根尖周骨吸收。 展开更多
关键词 P-STAT3 巨噬细胞 破骨细胞
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