海南龙血树的组织培养与快速繁殖 被引量：9

1

作者 李克烈 李志英 +4 位作者 徐立 马千全 罗联忠 黄碧兰 陈伟 《热带农业科学》 2006年第5期21-23,共3页

用种子作外植体,建立了海南龙血树(DracaenacambodianaPierreexGagnepain)的组织培养和再生体系。结果表明:海南龙血树种子诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L,诱导率达80%;附加6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L的MS培养基有利于... 用种子作外植体,建立了海南龙血树(DracaenacambodianaPierreexGagnepain)的组织培养和再生体系。结果表明:海南龙血树种子诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L,诱导率达80%;附加6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L的MS培养基有利于芽的分化和增殖,培养60d左右,每个外植体分化形成的再生小植株数达8～20个;在1/2MS+NAA0.5mg/L的培养基中诱导生根效果最好。 展开更多

关键词 海南龙血树 组织培养 快速繁殖

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水平显微注射法制备转基因小鼠的研究 被引量：1

2

作者 苗向阳 杨文胜 方昌阁 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第12期57-59,共3页

由于传统显微注射法具有操作繁琐、技术要求高和外源基因导入率低等局限性,本试验对常规显微注射法进行改进,旨在建立一套比较完善的水平显微注射方法。采用水平微注射系统,将外源DNA片段导入胚胎的雄原核中,获得子代鼠,分娩后3周提取... 由于传统显微注射法具有操作繁琐、技术要求高和外源基因导入率低等局限性,本试验对常规显微注射法进行改进,旨在建立一套比较完善的水平显微注射方法。采用水平微注射系统,将外源DNA片段导入胚胎的雄原核中,获得子代鼠,分娩后3周提取鼠尾基因组DNA,PCR法筛选转基因阳性鼠。本试验采用Puc/BLG IN S和Chym os in基因,共使用710枚鼠原核胚进行研究,胚胎经注射后移植了25只受体,产下仔鼠77只;妊娠率分别为33.3%(5/15)和50%(5/10),胚胎成活率分别为9.47%(41/433)和l3.00%(36/277),阳性率分别为4.88%(2/41)和8.33%(3/36)。将阳性雌鼠配种妊娠后,对外源基因整合情况进行检测,结果表明初步获得了转基因阳性小鼠。 展开更多

关键词 小鼠 水平显微注射 转基因

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巴戟天的组织培养及快速繁殖 被引量：3

3

作者 陈伟 徐立 +1 位作者 李志英 李克烈 《热带农业科学》 2006年第4期8-9,13,共3页

以巴戟天苗的叶片、茎尖、茎段为外植体,通过诱导出不定芽进行快速繁殖。比较了不同外植体在添加不同浓度BA和NAA培养基上的诱导效果,结果表明:带节的茎段在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L上的不定芽诱导率为95%,不定芽在不添加任何激素的M... 以巴戟天苗的叶片、茎尖、茎段为外植体,通过诱导出不定芽进行快速繁殖。比较了不同外植体在添加不同浓度BA和NAA培养基上的诱导效果,结果表明:带节的茎段在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L上的不定芽诱导率为95%,不定芽在不添加任何激素的MS培养基上生根率为85%,移栽成活率为90%。 展开更多

关键词 巴戟天 组织培养 快速繁殖

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NGF对大鼠胚胎脊髓神经细胞分化和增殖作用

4

作者 李君荣 唐艳林 端礼荣 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第7期1282-1283,共2页

[目的]研究神经生长因子(NGF)对大鼠胚胎脊髓神经细胞分化和增殖的作用。[方法]加入NGF到大鼠胚胎脊髓神经细胞进行培养,显微镜下计数存活脊髓神经细胞集落数及测定细胞相对蛋白质的含量。[结果]脊髓神经细胞胞体增大、突起延长且有丰... [目的]研究神经生长因子(NGF)对大鼠胚胎脊髓神经细胞分化和增殖的作用。[方法]加入NGF到大鼠胚胎脊髓神经细胞进行培养,显微镜下计数存活脊髓神经细胞集落数及测定细胞相对蛋白质的含量。[结果]脊髓神经细胞胞体增大、突起延长且有丰富的神经纤维连结成网络状,细胞集落数增加,细胞相对蛋白质含量增加,显示出剂量—效应关系。[结论]一定剂量的NGF能促进大鼠脊髓神经细胞分化和增殖,增强其活性。 展开更多

关键词 神经生长因子(NGF) 脊髓神经细胞 分化和增殖 体外培养

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骨髓基质细胞成年大鼠脑内移植

5

作者 郑佳坤 杨立业 +1 位作者 林小聪 惠国桢 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第B09期17-19,F0003,共4页

【目的】研究骨髓基质细胞脑内移植后的分布和移行 ,为细胞移植治疗疾病奠定基础。【方法】常规培养大鼠骨髓基质细胞 ,应用免疫组织化学方法对细胞进行鉴定 ,Hoechst332 5 8标记细胞 ,立体定向移植到大鼠的纹状体 ,经过一段时间后处死... 【目的】研究骨髓基质细胞脑内移植后的分布和移行 ,为细胞移植治疗疾病奠定基础。【方法】常规培养大鼠骨髓基质细胞 ,应用免疫组织化学方法对细胞进行鉴定 ,Hoechst332 5 8标记细胞 ,立体定向移植到大鼠的纹状体 ,经过一段时间后处死大鼠 ,脑组织切片 ,直接在荧光显微镜下检查存活的细胞。【结果】细胞移植到大鼠脑内能够长时间存活 ,移植细胞与宿主细胞有很好的相容性 ,宿主脑组织的结构无破坏 ,移植细胞能够移行一段距离 ,说明脑内存在的信号诱导细胞向一定的方向迁徒。【结论】骨髓基质细胞脑内移植后 ,能够与宿主脑组织整合在一起 ,无细胞过度增生和胶质瘢痕形成 ,这种细胞可能成为中枢神经系统自体移植的细胞来源。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 培养 移植

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不同条件延缓未受精卵激活对鱼类细胞电融合的影响

6

作者 吴滟 傅洪拓 +2 位作者 龚永生 何新龙 熊贻伟 《湛江海洋大学学报》 2006年第6期1-4,共4页

泥鳅未受精卵先在合成卵巢液、郝氏液中分别浸泡15、20、30min,然后再受精孵化,统计发育情况,结果表明,合成卵巢液可有效延缓未受精卵遇水后被激活的时间,郝氏液对延缓未受精卵被激活也有一定作用,但效果比合成卵巢液差。用合成卵巢液... 泥鳅未受精卵先在合成卵巢液、郝氏液中分别浸泡15、20、30min,然后再受精孵化,统计发育情况,结果表明,合成卵巢液可有效延缓未受精卵遇水后被激活的时间,郝氏液对延缓未受精卵被激活也有一定作用,但效果比合成卵巢液差。用合成卵巢液配制不同浓度胰酶处理受体卵进行细胞电融合实验,胰酶质量浓度为5 mg/mL时,融合卵发育至囊胚期的比例比对照组(郝氏液)高2%,统计分析表明该差异是显著的(P<0.05);但发育至原肠期及孵出期的比例则与对照组无显著差异。胰酶质量浓度为2和1 mg/mL时,融合卵发育到各阶段的比例均低于对照组,统计分析表明两者的差异是显著的(P<0.05)。研究表明,溶液种类、胰酶浓度等对电融合卵的发育有明显的影响,但延缓受体卵的激活时间并不能提高电融合卵的出苗率。用郝氏液配制的2 mg/mL的胰酶溶液处理受体卵,可获得较高比例的融合鱼。 展开更多

关键词 细胞电融合 鱼类未受精卵 激活 胰酶 泥鳅

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大鼠骨髓间充质干细胞与成纤维细胞差异蛋白质组学研究

7

作者 孙阳 赵亮 +2 位作者 魏旭峰 易蔚 郭树忠 《中国美容医学》 CAS 2008年第7期1021-1025,共5页

目的:进行大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)与成纤维细胞(FBs)细胞的蛋白质组学研究,寻找出重要的差异蛋白质。方法:采用二维电泳的方法(2DE)分别分离两种细胞的蛋白质,用PDQuest软件分析蛋白表达差异,并采用质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结... 目的:进行大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)与成纤维细胞(FBs)细胞的蛋白质组学研究,寻找出重要的差异蛋白质。方法:采用二维电泳的方法(2DE)分别分离两种细胞的蛋白质,用PDQuest软件分析蛋白表达差异,并采用质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:发现了MSCs和FBs之间存在差异表达的15种蛋白质,其中4种蛋白质差异显著且与细胞功能密切相关,即SM22-α、鸟嘌呤脱氨基酶(Guanine deaminase,GD)、膜联蛋白(Annexin A5)、过氧化物岐化酶-2(superoxide dismutase2,SOD-2)。MSCs的SM22-α和Annexin A5的表达分别比FBs低26倍和8倍,而MSCs的GD和SOD-2表达分别比FBs高16倍和21倍。结论:与大鼠FBs相比,MSCs存在更多防止细胞损伤相关的蛋白质和更少的与细胞衰老过程密切相关的蛋白质,具有高分化潜能,更适合于作为组织工程种子细胞。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 成纤维细胞 蛋白质组学

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基于水凝胶的内皮细胞三维培养

8

作者 王涛 林涛 +1 位作者 郑兆斌 蒋学俊 《北京生物医学工程》 2009年第4期391-394,共4页

目的研究可注射温度敏感性水凝胶的生物相容性，探讨其做为三维培养材料的可行性。方法将人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞接种于水凝胶，体外共同培养后进行形态结构观察，用MTT法检测ECV304细胞增殖活性，AO／EB试剂盒观察细胞凋亡，NO... 目的研究可注射温度敏感性水凝胶的生物相容性，探讨其做为三维培养材料的可行性。方法将人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞接种于水凝胶，体外共同培养后进行形态结构观察，用MTT法检测ECV304细胞增殖活性，AO／EB试剂盒观察细胞凋亡，NO试剂盒测量细胞分泌NO等功能。结果ECV304细胞在水凝胶中生长及功能均比较理想。AO／EB双重染色有少量黄色荧光，显示仅有少量细胞凋亡。细胞在水凝胶中培养后上清液体中分泌的NO浓度与二维培养组之间差异显著性无统计学意义（P=0．948）。结论可注射温度敏感性水凝胶生物相容性好，是一种良好的三维培养材料，可作为种子细胞的载体应用于组织工程中。 展开更多

关键词 水凝胶 内皮细胞 三维培养

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腊梅和浙江腊梅的染色体核型分析

9

作者 宋晓琛 刘玉香 江香梅 《江西林业科技》 2013年第2期10-12,共3页

对腊梅属的山腊梅和浙江腊梅2种植物的染色体核型进行了研究,结果表明:2种植物的染色体基数都是11,其中山腊梅核型公式为2n=2x=22=18m+4sm,浙江腊梅核型公式为2n=2x=22=20m+2sm。山腊梅核型属于Stebbins核型分类中的"2A"核型... 对腊梅属的山腊梅和浙江腊梅2种植物的染色体核型进行了研究,结果表明:2种植物的染色体基数都是11,其中山腊梅核型公式为2n=2x=22=18m+4sm,浙江腊梅核型公式为2n=2x=22=20m+2sm。山腊梅核型属于Stebbins核型分类中的"2A"核型,浙江腊梅属于"2A"核型。根据核型不对称系数,浙江腊梅在腊梅属中较山蜡梅属于较原始的物种。 展开更多

关键词 山腊梅 浙江腊梅 染色体 核型

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百合组织培养和遗传转化的研究进展 被引量：6

10

作者 狄翠霞 张满效 +2 位作者 谢忠奎 陈拓 安黎哲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期858-863,共6页

百合是单子叶球茎类观赏花卉,具有食用和药用的作用。本文综述了国内外百合组织培养和遗传转化研究进展。包括营养器官、生殖器官和原生质体再生系统的建立。详细介绍了基因转化的方法,例如农杆菌、基因枪、电激穿孔等。浅析百合外源基... 百合是单子叶球茎类观赏花卉,具有食用和药用的作用。本文综述了国内外百合组织培养和遗传转化研究进展。包括营养器官、生殖器官和原生质体再生系统的建立。详细介绍了基因转化的方法,例如农杆菌、基因枪、电激穿孔等。浅析百合外源基因的表达,例如GUS、半夏凝集素基因、几丁质酶基因等。同时,讨论了百合遗传转化中存在的问题,以期为百合基因工程方面的研究提供依据。 展开更多

关键词 百合 组织培养 遗传转化

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如皋鸡EX-FABP基因遗传多态性及其与肌内脂肪含量的相关分析 被引量：6

11

作者 周琼 常国斌 +3 位作者 王克华 窦套存 廖菁 陈国宏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期143-146,共4页

以60周龄和自繁后的12周龄的如皋鸡作为试验材料,采用PCR-SSCP技术对细胞外脂肪酸结合蛋白(EX-FABP)基因进行单核苷酸多态性及遗传特异性分析。结果检测到2个SNP突变,分别为4271 G/A、4281 G/A突变,有3种基因型。最小二乘差异显著性检... 以60周龄和自繁后的12周龄的如皋鸡作为试验材料,采用PCR-SSCP技术对细胞外脂肪酸结合蛋白(EX-FABP)基因进行单核苷酸多态性及遗传特异性分析。结果检测到2个SNP突变,分别为4271 G/A、4281 G/A突变,有3种基因型。最小二乘差异显著性检验结果表明,在60周龄时,AA型含量最高,显著高于AB型(P<0.05);12周龄时,AB型含量最高,BB型最低;60周龄的肌内脂肪含量显著低于12周龄时的含量(P<0.05)。 展开更多

关键词 细胞外脂肪酸结合蛋白(EX-FABP) 单核苷酸多态性 鸡 肌内脂肪

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不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响 被引量：9

12

作者 宋明 汤青林 +2 位作者 邹建 李渝 刘荣 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第4期534-536,共3页

以观赏茄‘金蛋’为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L+LH 1 000 mg/L+G ln 500 mg/L+蔗糖50 g/L;低温预处理... 以观赏茄‘金蛋’为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L+LH 1 000 mg/L+G ln 500 mg/L+蔗糖50 g/L;低温预处理和短期热激处理都能显著提高花药愈伤组织的诱导率,但2者效应没有叠加作用。 展开更多

关键词 茄子 离体培养 花药培养 愈伤组织

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胎鼠海马神经元培养及其鉴定 被引量：6

13

作者 李玉 王波 但齐琴 《昆明医学院学报》 2011年第5期17-19,共3页

目的建立胎鼠海马神经元体外培养方法,观察细胞生长情况,免疫组织化学染色鉴定神经元特异性.方法取胎鼠海马,分裂获得细胞悬液,接种于24孔板,经2 h差速帖壁去除成纤维细胞,将细胞液转移并继续培养,以获娶纯度较高的海马神经元.培养第5... 目的建立胎鼠海马神经元体外培养方法,观察细胞生长情况,免疫组织化学染色鉴定神经元特异性.方法取胎鼠海马,分裂获得细胞悬液,接种于24孔板,经2 h差速帖壁去除成纤维细胞,将细胞液转移并继续培养,以获娶纯度较高的海马神经元.培养第5、11、15天观察细胞和突起生长情况,用NeuN抗体以免疫组化SP二步法染色鉴立神经细胞.结果培养头3 d.细胞生长缓慢,5 d时细胞开始生长,可见突起,11 d时突起连成网状.经Neun染色培养细胞呈阳性反应,证明是神经元.结论本方法获取生长良好,纯度较高的海马神经元. 展开更多

关键词 胎鼠 海马神经元 NEUN 培养

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发夹RNA(shRNA)在哺乳动物RNAi研究中的应用 被引量：2

14

作者 胡燕宾 聂奎 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期79-82,共4页

在哺乳动物的RNAi研究中,载体表达的shRNA分子比细胞同时表达的siRNA分子的正义链与反义链对靶基因的抑制效率要高。shRNA可由PolⅢ的启动子在体内表达产生,酶切cDNA和shRNA芯片是产生shRNA的最新方法。对shRNA的设计应注意靶基因序列... 在哺乳动物的RNAi研究中,载体表达的shRNA分子比细胞同时表达的siRNA分子的正义链与反义链对靶基因的抑制效率要高。shRNA可由PolⅢ的启动子在体内表达产生,酶切cDNA和shRNA芯片是产生shRNA的最新方法。对shRNA的设计应注意靶基因序列、环序列以及载体酶切位点的选择。诱导表达shRNA的载体系统的表达效率有所差异,质粒载体转染效率尚不稳定,且持续时间短,通过病毒载体介导是目前进行基因敲除最有效的工具。 展开更多

关键词 RNAI SHRNA 病毒载体

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针叶树离体培养研究进展 被引量：5

15

作者 吴丽君 《福建农业学报》 CAS 2006年第4期415-419,共5页

高效的针叶树离体培养植株再生体系是应用现代生物技术进行遗传改良和良种繁育的基础。综述了针叶树种离体培养与植株再生的几种方式及其研究进展,提出当前针叶树离体培养植株再生体系研究和应用中存在的问题。

关键词 针叶树种 器官发生 胚胎发生 研究现状

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不同培养基对成年大鼠心肌细胞形态、存活率、收缩功能的影响 被引量：3

16

作者 宫海滨 王洁 王雷 《中国微循环》 2009年第1期55-59,共5页

目的研究不同培养基对成年大鼠心肌细胞形态、存活率和收缩功能的影响。方法本实验采用Langendorff装置行恒流灌流分离成年大鼠心肌细胞,分别用无血清M199、DMEM高糖、DMEM低糖三种培养基培养,比较培养24h和48h的细胞存活率(即杆状率)... 目的研究不同培养基对成年大鼠心肌细胞形态、存活率和收缩功能的影响。方法本实验采用Langendorff装置行恒流灌流分离成年大鼠心肌细胞,分别用无血清M199、DMEM高糖、DMEM低糖三种培养基培养,比较培养24h和48h的细胞存活率(即杆状率)、形态和单个细胞收缩功能的变化。结果培养24h后,M199培养基中细胞存活率校正值(培养细胞杆状率/刚培养细胞杆状率)明显高于其他两种培养基(P<0.05),细胞平均长度(Length)、细胞缩短率(细胞收缩幅度/细胞原始长度)、达到峰值收缩时间(TTP)、50%舒张时间(R50)、90%舒张时间(R90)亦最接近新鲜分离心肌细胞;培养48h后,M199培养基中细胞Length、TTP、R50、R90各指标均明显优于其他两种培养基(P<0.05)。结论三种培养基培养成年大鼠心肌细胞M199对维持细胞的存活状态、形态和功能的效果最好。 展开更多

关键词 心肌细胞 细胞培养 存活率 收缩功能 大鼠

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鸡贫血病毒衣壳蛋白基因的原核表达 被引量：1

17

作者 郭淑华 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第8期3460-3462,共3页

[目的]为VP1蛋白的免疫学研究和鸡贫血病毒基因工程疫苗的研制奠定基础。[方法]将1个新克隆的鸡贫血病毒vp1基因(AF448446)在大肠杆菌DE3中进行表达,并对该蛋白进行纯化。[结果]结果表明:已成功构建了表达载体pET30(b+)v-p1;VP1蛋白已... [目的]为VP1蛋白的免疫学研究和鸡贫血病毒基因工程疫苗的研制奠定基础。[方法]将1个新克隆的鸡贫血病毒vp1基因(AF448446)在大肠杆菌DE3中进行表达,并对该蛋白进行纯化。[结果]结果表明:已成功构建了表达载体pET30(b+)v-p1;VP1蛋白已成功诱导表达并得以纯化;获得的VP1蛋白序列与已发表的VP1蛋白序列存在差异。[结论]试验克隆的vp1基因大小为1 347 bp,编码449个氨基酸的蛋白。 展开更多

关键词 鸡贫血病毒(CAV) 衣壳蛋白基因 原核表达 纯化

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金背大红花瓣的组织培养方法 被引量：2

18

作者 蔡汉权 《韩山师范学院学报》 2005年第6期72-75,共4页

以菊花花瓣为外植体,在无菌条件下诱导愈伤组织,再由愈伤组织进行芽诱导．利用 花瓣组织培养易变异的特性,以期培养出新品种．本实验中探讨了6-BA、NAA在诱导愈伤 组织和芽诱导中的影响,并获得MS+6-BA2mg／L+NAA0．5mg／L为芽诱导的最... 以菊花花瓣为外植体,在无菌条件下诱导愈伤组织,再由愈伤组织进行芽诱导．利用 花瓣组织培养易变异的特性,以期培养出新品种．本实验中探讨了6-BA、NAA在诱导愈伤 组织和芽诱导中的影响,并获得MS+6-BA2mg／L+NAA0．5mg／L为芽诱导的最佳培养方 案． 展开更多

关键词 菊花 花瓣 愈伤组织 芽诱导

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副猪嗜血杆菌的流行病学和分型 被引量：2

19

作者 赵瑜 Virginia Aragón 《国外畜牧学（猪与禽）》 2012年第2期1-3,共3页

澳大利亚和新西兰是泛太平洋地区最大的两个国家。两国的家禽产量数一数二。当前，产业整合是大趋势，肉蛋消费量也在增加。然而，肉蛋产品的价格处于压力下。动物福利越来越受重视。

关键词 副猪嗜血杆菌 流行病学 分型 太平洋地区 澳大利亚 产业整合 动物福利 蛋产品

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血清体积分数对培养黑山羊成纤维细胞的影响 被引量：2

20

作者 张荣华 王曦 +1 位作者 郑彦伟 李武峰 《山西农业科学》 2018年第2期268-271,275,共5页

为了建立并完善吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞培养体系,为进一步的克隆试验提供最佳生长状态的供体细胞,在常规培养液的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0,5%,10%,20%,40%),每天在倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,并用台盼蓝染色法统计... 为了建立并完善吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞培养体系,为进一步的克隆试验提供最佳生长状态的供体细胞,在常规培养液的基础上添加不同浓度的新生牛血清(0,5%,10%,20%,40%),每天在倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,并用台盼蓝染色法统计细胞数目,连续观察7 d,绘制生长曲线,比较不同血清体积分数的培养液对吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞体外培养的影响。结果表明,吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞虽然在不同血清体积分数的5组中均有生长增殖,但生长状态不同,差距较大;其中,10%的血清培养液试验组培养的细胞生长状况最好,细胞形态完整清晰,增殖快,数量多,更适合此细胞的生长。不同体积分数血清的培养液对成纤维细胞的生长具有一定影响,10%血清体积分数的培养液最适合吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞的培养。结果可为进一步研究克隆、基因转染、构建基因文库等提供生物学材料。 展开更多

关键词 吕梁黑山羊 成纤维细胞 体外培养 血清体积分数

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