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基于微流控技术的工程细胞高通量表型测试技术与装备研究进展 被引量：2
1
作者 李爽 郭肖杰 +7 位作者 陈海博 陈思思 笪鑫 李峥辉 刘芹秀 王怡 邢新会 张翀 《中国科学院院刊》 北大核心 2025年第1期91-106,共16页
工程细胞是绿色生物制造的重要基础,如何高效测试并获得目标表型的工程细胞是影响生物制造应用的关键因素之一。近年来,基于微流控技术开发了非培养类型单细胞表型高通量测试装备,以及通过微液滴和微腔室等微型生物反应器实现单细胞生... 工程细胞是绿色生物制造的重要基础,如何高效测试并获得目标表型的工程细胞是影响生物制造应用的关键因素之一。近年来,基于微流控技术开发了非培养类型单细胞表型高通量测试装备,以及通过微液滴和微腔室等微型生物反应器实现单细胞生长代谢的培养类型高通量表型测试装备,实现了工程细胞表型的高通量、自动化、微型化和集成化测试,为工程细胞选育提供了强有力的工具。文章系统综述基于荧光信号、拉曼信号、图像信号、磁信号的非培养类型单细胞表型测试技术与装备,基于皮纳升、微升多尺度微型生物反应器的液滴、微腔室单细胞培养类型测试技术与装备研究进展,并探讨工程细胞高通量测试仪器创制发展趋势,为绿色生物制造工程细胞测试技术研究提供借鉴。 展开更多
关键词 微流控 单细胞 高通量测试 合成生物学 生物制造
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3D培养血管基质成分自组装复杂结构血管化成骨类器官
2
作者 吴佳洲 钱陶 +4 位作者 刘泽贤 武艳斌 何莹 李亚洲 彭江 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第11期2681-2690,共10页
背景:相较于2D培养技术,3D培养技术能够更准确地模拟细胞自然生长的体内环境,成为基础科学研究和转化医学领域的关键焦点。目的:通过3D培养技术构建预血管化的成骨类器官。方法:从同一人体脂肪组织中分别分离提取血管基质成分、脂肪间... 背景:相较于2D培养技术,3D培养技术能够更准确地模拟细胞自然生长的体内环境,成为基础科学研究和转化医学领域的关键焦点。目的:通过3D培养技术构建预血管化的成骨类器官。方法:从同一人体脂肪组织中分别分离提取血管基质成分、脂肪间充质干细胞,通过流式细胞学鉴定细胞组分。将血管基质成分、脂肪间充质干细胞分别接种于96孔U型板内,培养3 d后血管基质成分自组装成型、脂肪间充质干细胞成球,培养第14天,通过苏木精-伊红染色与细胞骨架染色观察球体内部结构和细胞形态;培养0,7,14,21 d,Presto Blue实验检测细胞活性;培养3 d后分别进行成骨、成软骨与成脂诱导分化,诱导14 d后,茜素红染色观察成骨分化,阿利新蓝染色观察成软骨分化,油红O染色观察成脂分化,免疫荧光染色共定位成骨诱导后CD31(内皮细胞标志物)、RUNX2(早期成骨标志物)、CD44(间充质干细胞标志物)、Ⅰ型胶原(晚期成骨标志物)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(成脂标志物)的表达,qRT-PCR检测成骨诱导后RUNX2、骨桥蛋白、Ⅰ型胶原、Sp7转录因子、CD31和血管内皮生长因子mRNA表达。结果与结论:①流式细胞分析表明,血管基质成分包含脂肪间充质干细胞和内皮细胞等多种细胞类型,脂肪间充质干细胞球主要由脂肪间充质干细胞构成;②苏木精-伊红染色及细胞骨架染色显示,相对于脂肪间充质干细胞球,血管基质成分类器官结构更贴近天然组织,细胞排列有序,细胞外基质更丰富;细胞活性测试显示,脂肪间充质干细胞球培养7 d的细胞活性高于血管基质成分类器官(P<0.05),培养21 d的细胞活性低于血管基质成分类器官(P<0.05),说明血管基质成分类器官的细胞活性持续时间更长;③相较于脂肪间充质干细胞球,血管基质成分类器官具有更优的骨、软骨和脂肪形成能力;多色免疫荧光共定位显示,血管基质成分类器官中血管网络和成骨标志物表达丰富,细胞间和细胞-基质相互作用复杂,脂肪间充质干细胞球结构单一且缺乏内皮细胞基因表达;qRT-PCR检测结果显示,血管基质成分类器官中RUNX2、骨桥蛋白、Ⅰ型胶原、Sp7转录因子、CD31和血管内皮生长因子mRNA表达均高于脂肪间充质干细胞球(P<0.05);④结果表明,血管基质成分类器官具备复杂的生理结构和更强的血管形成和骨形成能力,以及更持久的细胞活性。 展开更多
关键词 三维培养 血管基质成分 脂肪间充质干细胞 内皮细胞 类器官 成骨分化 血管生成 工程化材料
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生殖性克隆技术:突破、应用与伦理审视
3
作者 朱昀 闫路娜 孔德晶 《生物学教学》 北大核心 2025年第6期87-89,共3页
体细胞核移植,是生殖性克隆实现的核心技术。本文回顾了体细胞核移植技术3次突破:从格登的两栖动物克隆,到多莉羊的诞生与灵长类动物克隆成功。介绍了克隆在优良种畜繁育、医学治疗、濒危物种保护和非人灵长类疾病动物模型建立方面的重... 体细胞核移植,是生殖性克隆实现的核心技术。本文回顾了体细胞核移植技术3次突破:从格登的两栖动物克隆,到多莉羊的诞生与灵长类动物克隆成功。介绍了克隆在优良种畜繁育、医学治疗、濒危物种保护和非人灵长类疾病动物模型建立方面的重要应用。2024年非人灵长类生殖性克隆再次取得重大的进展。但是,人类生殖性克隆会涉及伦理的争议。 展开更多
关键词 生殖性克隆 体细胞核移植 伦理审视
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替代蛋白食品工业化发展思考 被引量：4
4
作者 胡海娟 王守伟 +4 位作者 李宇轩 孙金沅 李石磊 李莹莹 孙宝国 《中国工程科学》 北大核心 2025年第1期258-268,共11页
替代蛋白食品是利用合成生物学、细胞工程等生物制造技术获取的新型蛋白食品,具有可持续、合成高效等优势;推进替代蛋白工程化和工业化,对加快发展新质生产力、保障国家粮食安全具有重要意义。本文从国际竞争加剧、“大食物观”格局构... 替代蛋白食品是利用合成生物学、细胞工程等生物制造技术获取的新型蛋白食品,具有可持续、合成高效等优势;推进替代蛋白工程化和工业化,对加快发展新质生产力、保障国家粮食安全具有重要意义。本文从国际竞争加剧、“大食物观”格局构建、新质生产力培育、可持续发展4个方面阐述了替代蛋白食品的发展价值,从科技、监管、工业化3个方面系统梳理了国内外替代蛋白食品的发展现状。研究认为,种子细胞系、无血清培养基、专用生物反应器、高效底盘菌株筛选及制备、植物蛋白肉塑形和赋味等关键技术有待突破,食品安全标准及监管框架亟需建立,关键要素的自主研发与生产能力以及产业链的细分领域也需加快拓展。针对性提出了加快替代蛋白食品工业化进程的发展建议,以期为我国替代蛋白工业化研究、实践、监管等提供参考和启示。 展开更多
关键词 替代蛋白食品 细胞培育肉 微生物蛋白肉 植物蛋白肉 工业化生产 产业链 安全标准 监管体系
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免疫细胞治疗科技创新与产业发展态势 被引量：1
5
作者 范月蕾 李荣 +3 位作者 李斌 张博文 赵若春 毛开云 《生命科学》 2025年第1期97-106,共10页
免疫细胞治疗是全球生物医药领域具有潜力的新赛道之一。随着技术的成熟与产品的研发和临床应用,免疫细胞治疗已从探索期进入到全面产业化阶段。本文从基础研究、临床研究转化和产业化的角度梳理和分析了2024年免疫细胞治疗领域的科技... 免疫细胞治疗是全球生物医药领域具有潜力的新赛道之一。随着技术的成熟与产品的研发和临床应用,免疫细胞治疗已从探索期进入到全面产业化阶段。本文从基础研究、临床研究转化和产业化的角度梳理和分析了2024年免疫细胞治疗领域的科技创新与产业发展态势,并对免疫细胞治疗未来的发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 细胞治疗 免疫细胞 发展态势
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CHO细胞培养过程中柠檬酸积累特性研究
6
作者 何永梅 张欣然 +2 位作者 赵亮 谭文松 叶倩 《中国生物工程杂志》 北大核心 2025年第4期15-24,共10页
目的:探究中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary cell,CHO cell)流加培养过程中柠檬酸积累现象及特征,为认识和调控柠檬酸积累奠定基础。方法:以CHO细胞为研究对象,采用实验室前期建立的流加培养工艺,考察流加培养过程中柠檬酸积累特... 目的:探究中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary cell,CHO cell)流加培养过程中柠檬酸积累现象及特征,为认识和调控柠檬酸积累奠定基础。方法:以CHO细胞为研究对象,采用实验室前期建立的流加培养工艺,考察流加培养过程中柠檬酸积累特征,探究培养工艺参数(温度和葡萄糖浓度)对柠檬酸积累的影响,建立关键代谢参数[平均葡萄糖比消耗速率(Q_(Gluc))、乳酸比生成速率(q_(Lac))、抗体比生成速率(q_(p))和三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCA cycle)的总碳流量]与柠檬酸积累的相关性。结果:温度影响CHO细胞流加培养过程中柠檬酸积累,较低温度(31℃)条件下柠檬酸比生成速率显著增大;葡萄糖浓度对柠檬酸积累过程的影响有限,葡萄糖浓度控制在2~55 mmol/L的范围内不影响柠檬酸积累过程;通过考察多批不同培养工艺参数条件下的柠檬酸积累过程,发现柠檬酸比生成速率与葡萄糖比消耗速率、抗体比生成速率、TCA循环总碳流量呈正相关,与乳酸的比生成速率呈负相关。结论:柠檬酸在细胞外积累可能反映营养物质供给充足,细胞TCA循环代谢旺盛,细胞抗体生产能力增强。 展开更多
关键词 CHO细胞 TCA循环 柠檬酸 温度 葡萄糖浓度 抗体生产
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HEK293细胞悬浮培养技术及其应用研究进展
7
作者 岳欣豫 吉雯娜 +7 位作者 周锦鱼 靳莉武 杨迪 刘振斌 孙娜 乔自林 马忠仁 王家敏 《生物技术通报》 北大核心 2025年第8期82-91,共10页
生物制药产品的生产主要依赖于哺乳动物细胞,尤其是在制造复杂的蛋白质药物,因为其能够进行复杂的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs),对于蛋白质的功能和稳定性至关重要,一些生物制药商品如重组治疗蛋白、疫苗、抗癌... 生物制药产品的生产主要依赖于哺乳动物细胞,尤其是在制造复杂的蛋白质药物,因为其能够进行复杂的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs),对于蛋白质的功能和稳定性至关重要,一些生物制药商品如重组治疗蛋白、疫苗、抗癌药物和其他临床相关药物等大多数都是利用了哺乳动物细胞平台生产。HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cells)是所有人类细胞系中最常用的宿主细胞之一,但由于贴壁细胞在生产应用中的高投资成本,以及血清添加有可能携带的外源风险等问题,导致其最初在生产应用方面受到限制,而HEK293悬浮细胞相比于贴壁细胞更具优势,其不仅生产成本大大降低,没有血清的添加更增加了生产生物制品的安全性。目前,HEK293悬浮细胞已广泛应用于多个领域,并已成为生产蛋白质、疫苗和基因治疗药物的强大载体和新平台。本文综述了HEK293细胞的来源及其衍生细胞系,总结目前贴壁细胞的悬浮驯化技术以及用于HEK293细胞的无血清培养基,并描述目前HEK293细胞在疫苗生产、基因治疗药物生产以及实验室基础研究方面的应用进展,讨论了HEK293细胞大规模生产的意义及存在的问题,最后对未来HEK293细胞的研究方向以及大规模生产的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 HEK293细胞 悬浮驯化 生物制药
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空间细胞培养用低扰动脉冲泵设计与流体仿真优化
8
作者 郭淼 谭映军 +5 位作者 王春艳 施镠佳 巩陶婉 曹雪 李越 李莹辉 《载人航天》 北大核心 2025年第5期653-661,共9页
细胞在空间微重力环境下进行培养具有地面实验无法比拟的优势,为了控制试剂流量进行连续精确给液同时适应装置体积有限的局限,需要研究合适的泵结构。现有的注射给液或蠕动泵等输液流量或者精度有限,设计一种新型低扰动陶瓷脉冲泵,主要... 细胞在空间微重力环境下进行培养具有地面实验无法比拟的优势,为了控制试剂流量进行连续精确给液同时适应装置体积有限的局限,需要研究合适的泵结构。现有的注射给液或蠕动泵等输液流量或者精度有限,设计一种新型低扰动陶瓷脉冲泵,主要包括泵芯、滑轨、滑块以及泵体等,可实现持续、高精度给液。滑轨表面根据特殊设计曲线加工而成,使滑块在其表面低扰动滑动。设计泵芯豁口开度分别为80°、100°以及120°的脉冲泵,通过有限体积法仿真模拟脉冲泵工作过程,比较其内部流场分布和输出流量曲线。利用高精度天平测量输出流量,仿真和实验结果表明:泵芯豁口开度为100°的脉冲泵泵芯旋转一圈输出流体体积更固定,体积曲线更平滑,可应用于面向空间细胞培养装置中,实现连续、精确的流体控制。 展开更多
关键词 低扰动脉冲泵 重叠网格 有限体积法 流量曲线 空间细胞培养
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猪胰腺干细胞分离与培养 被引量：2
9
作者 王赟 窦忠英 +2 位作者 乔海 赵婷 杨春荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期2554-2562,共9页
【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的... 【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的小圆细胞。而后将血清浓度提高到15%以上继续培养;采用免疫组化方法对获得的细胞是否具有胰腺干细胞特征予以检测,并测定了细胞的生长曲线。【结果】在血清浓度提高后每个小圆细胞能快速增殖并形成一个克隆,经过这样增殖后的细胞可以连续传代,目前已传至60代。经免疫组化检测,细胞表达PDX-1、GLUT-2、vimentin等胰腺干细胞的标志;细胞也表达Glucagon、insulin、somatostatin、polypeptide等胰腺内分泌细胞的标志.【结论】通过本方法获得的细胞经检测确定为胰腺干细胞,在体外可自发分化形成胰胰内分泌部4种主要细胞。 展开更多
关键词 胎猪 胰岛 胰腺干细胞 糖尿病
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改变表观遗传修饰和供体细胞代谢状态可提高犬-猪异种克隆胚胎的发育效率
10
作者 闫艳霞 张雨涵 +1 位作者 吴珍芳 李紫聪 《遗传》 北大核心 2025年第12期1365-1376,共12页
为了探索能提高犬体细胞克隆效率的新方法,本研究比较了糖酵解促进剂PS48和表观遗传修饰剂(DNA甲基化酶抑制剂RG108和组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid)的不同处理浓度和时间对犬-猪异种体细胞核移植(interspecies somatic cell nuclear... 为了探索能提高犬体细胞克隆效率的新方法,本研究比较了糖酵解促进剂PS48和表观遗传修饰剂(DNA甲基化酶抑制剂RG108和组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid)的不同处理浓度和时间对犬-猪异种体细胞核移植(interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)胚胎发育效率的影响。结果显示:(1) 5μmol/L PS48处理犬耳成纤维细胞(canine ear fibroblasts,cEFs)和犬脂肪间充质干细胞(canine adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,cAd-MSCs) 24 h显著增强了其后续iSCNT胚胎的发育能力,PS48处理cEFs组的iSCNT胚胎的卵裂率、4-细胞期率和8-细胞期率均显著高于对照组(46.90±1.64%vs 13.30±1.61%,32.30±1.55%vs 8.26±0.88%,10.62±1.68%vs 5.50±0.84%;P<0.05),PS48处理cAd-MSCs组的iSCNT胚胎的卵裂率和4-细胞期率显著高于对照组(49.51±3.00%vs 31.25±2.73%,26.21±2.08%vs 15.18±1.58%;P<0.05);(2) 20μmol/L RG108处理cEFs和cAd-MSCs 48 h对iSCNT胚胎发育效率无显著影响,0 nmol/L、400 nmol/L、500 nmol/L和600 nmol/L Scriptaid分别处理cEFs和cAd-MSCs 24 h对iSCNT胚胎发育效率无显著影响;(3) 20μmol/L RG108处理两种供体细胞来源iSCNT胚胎对其发育有显著促进作用(P<0.05),500 nmol/L Scriptaid处理cEFs来源的iSCNT胚胎16 h可显著提高其卵裂率和4-细胞期率(23.08±2.94%vs 9.47±1.70%,18.68±3.25%vs 6.32±1.07%;P<0.05)。本研究建立了能显著提高犬-猪iSCNT胚胎发育效率的新方法,有助于促进犬体细胞克隆技术的应用和发展。 展开更多
关键词 供体细胞代谢 表观遗传修饰 犬克隆 体细胞核移植 PS48 RG108 Scriptaid
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基于3D微流控芯片的水凝胶微胶囊可控生成系统
11
作者 金聪 赵旭晟 +4 位作者 郭嘉灏 欧阳立明 姜国俊 顾震 王慧锋 《华东理工大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第6期783-792,共10页
围绕水凝胶微胶囊制备需求,利用3D微纳打印在快速、低成本和高精度等方面的优势,发展了基于3D微流控芯片的微胶囊制备系统,该系统通过构建具有3D微结构的液滴微流控芯片,以双层鞘流生成微胶囊颗粒,并实现微胶囊核壳比例的可控生成。实... 围绕水凝胶微胶囊制备需求,利用3D微纳打印在快速、低成本和高精度等方面的优势,发展了基于3D微流控芯片的微胶囊制备系统,该系统通过构建具有3D微结构的液滴微流控芯片,以双层鞘流生成微胶囊颗粒,并实现微胶囊核壳比例的可控生成。实验结果显示,利用3D微纳打印得到的模具,通过翻模制造微流控芯片,可达到高精度与高平整度,通道尺寸误差均小于2μm。所生成微胶囊的内、外径变异系数均小于3%且一致性优异。细胞增殖实验表明,所生成微胶囊可用于3D细胞培养,证实了所提出方法在规模化细胞培养及再生医学等领域具有广泛应用潜力。 展开更多
关键词 微纳加工 3D微流控芯片 液滴微流控 微胶囊 3D细胞培养
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马尾松原生质体制备及瞬时转化体系的建立
12
作者 李岩硕 王民炎 +2 位作者 刘殿宽 李伟 殷恒福 《植物研究》 北大核心 2025年第2期202-210,共9页
该研究旨在通过建立马尾松(Pinus massoniana)原生质体的分离和制备系统,实现基因的瞬时转化,从而推动马尾松基因功能研究和遗传转化体系的发展。研究选取了马尾松不同发育时期的外植体材料,包括针叶、下胚轴和愈伤组织,探讨了不同酶解... 该研究旨在通过建立马尾松(Pinus massoniana)原生质体的分离和制备系统,实现基因的瞬时转化,从而推动马尾松基因功能研究和遗传转化体系的发展。研究选取了马尾松不同发育时期的外植体材料,包括针叶、下胚轴和愈伤组织,探讨了不同酶解条件对原生质体分离效率的影响,并通过试验优化了马尾松原生质体的制备流程,涉及不同类型的组织、不同的渗透压和酶解时间。研究结果表明:在0.5 mol⋅L-1甘露醇渗透液中,使用马尾松针叶组织进行6 h酶解处理是提取原生质体的最佳条件。基于此,该研究构建了一个适合马尾松的瞬时转化体系,并通过对比不同转化条件,实现了外源基因在马尾松原生质体中的瞬时表达。研究还发现,经过优化的原生质体制备体系能够显著提升原生质体的质量和转化效率,在使用聚乙二醇(PEG)介导的转化方法时,转化效率高达47.83%。综上,该研究成功构建了马尾松原生质体高效分离体系,为针叶树种基因功能解析提供了可靠的瞬时表达系统。 展开更多
关键词 马尾松 原生质体 瞬时转化 基因功能
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企业生产任务驱动课程教学任务开发——以“动物细胞培养技术”课程为例
13
作者 刘影 卢洪秀 +4 位作者 徐莉 代书玲 蒋惠男 汤梦远 范丽平 《教育进展》 2025年第12期963-968,共6页
为了培养符合企业需求的动物细胞培养人才,聚焦高职《动物细胞培养技术》课程教学改革。以生物医药企业典型生产任务为切入点,开发“动物细胞培养”教学任务,运用BOPPPS教学模式实施任务教学,有效解决“学校培养与岗位需求脱节”问题。
关键词 动物细胞培养 典型生产任务 教学任务 BOPPPS教学模式
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肠道类器官在活性物质吸收代谢研究中的应用进展
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作者 郑兰艳 余远迪 +1 位作者 付利芝 朱买勋 《动物营养学报》 北大核心 2025年第8期5022-5032,共11页
肠道的吸收过程是营养物质与药物进入血液循环的主要途径,涉及上皮屏障通透性、转运蛋白活性和肠道代谢等多个复杂过程。为研究活性物质在肠道的吸收代谢机制,开发一个高效、安全、便捷且可靠的体外吸收预测模型一直是研究中的挑战和热... 肠道的吸收过程是营养物质与药物进入血液循环的主要途径,涉及上皮屏障通透性、转运蛋白活性和肠道代谢等多个复杂过程。为研究活性物质在肠道的吸收代谢机制,开发一个高效、安全、便捷且可靠的体外吸收预测模型一直是研究中的挑战和热点。肠道类器官,作为一种重要的肠吸收模型,由多种肠细胞构成,能够表达多种转运载体,并形成具有吸收代谢功能的肠道结构,已成为预测活性物质吸收代谢的理想工具。本文综述了肠道吸收机能及其细胞组成,肠道类器官的生物学特性、构建方法及其在活性物质吸收代谢研究中的应用,旨在为开发高效、低毒且促进动物生长的活性物质提供参考。 展开更多
关键词 肠道类器官 活性物质 吸收代谢
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悬浮MDCK-STAT1-KO工程细胞的流感病毒生产过程研究
15
作者 姚鸿 崔乃香 +2 位作者 谭文松 赵亮 叶倩 《中国生物工程杂志》 北大核心 2025年第5期1-12,共12页
目的:MDCK-STAT1-KO工程细胞已被证实可高效生产H1N1流感病毒,但受限于培养规模和血清依赖性等贴壁培养固有的性质,该细胞株难以应用到实际的疫苗生产中。单细胞悬浮培养易于放大,操作简便,备受疫苗生产青睐。但MDCK-STAT1-KO工程细胞... 目的:MDCK-STAT1-KO工程细胞已被证实可高效生产H1N1流感病毒,但受限于培养规模和血清依赖性等贴壁培养固有的性质,该细胞株难以应用到实际的疫苗生产中。单细胞悬浮培养易于放大,操作简便,备受疫苗生产青睐。但MDCK-STAT1-KO工程细胞在悬浮培养条件下的病毒生产情况及其病毒感染应激特征尚不清楚,限制了其进一步应用。方法:采用生产上的常规培养方式(传代培养和批式培养)和接毒条件[感染复数(MOI)=0.001],考察悬浮MDCK-STAT1-KO工程细胞(susMDCK-STAT1^(-))的生长和病毒生产情况;改变关键接毒参数,考察MOI、营养条件和毒株类型对susMDCK-STAT1^(-)细胞产毒的影响。设置同步感染实验,考察该细胞在病毒感染后的细胞凋亡水平和细胞免疫应激水平。结果:susMDCK-STAT1^(-)细胞生产H1N1病毒的最大HA滴度和最大Svy分别为(12.40±0.11)log2HAU/100μL和(15.86±1.34)×10^(3) virions/cell,均为H1N1病毒生产较高水平,同时改变关键工艺参数均不会影响该细胞株高效生产流感病毒的特性。此外,susMDCK-STAT1^(-)细胞具有一定抗凋亡特性,以及其胞内全局性的低免疫防御水平,有利于病毒快速扩增。结论:susMDCK-STAT1^(-)细胞可高效生产流感病毒,同时其抗凋亡特性及胞内低免疫水平是该细胞株高效生产的关键因素。该细胞有望未来应用于流感病毒疫苗的实际生产中,提高流感病毒生产水平。 展开更多
关键词 流感病毒疫苗 MDCK工程细胞 高效生产
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外周血巨噬细胞外泌体治疗肺损伤的动物实验
16
作者 李可 张阔 +4 位作者 杨毅 娜仁 于添逸 马慧 刘娜 《生物医学工程与临床》 2025年第6期741-746,共6页
目的探讨外周血巨噬细胞外泌体(PBM-Exo)对急性肺损伤(ALI)的治疗作用,并与人脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSC-Exo)进行对照研究。方法选择雄性健康SD大鼠20只,6周龄,SPF级,体质量180~200 g。脐带间充质干细胞由顺昊细胞生物技术(天津)... 目的探讨外周血巨噬细胞外泌体(PBM-Exo)对急性肺损伤(ALI)的治疗作用,并与人脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSC-Exo)进行对照研究。方法选择雄性健康SD大鼠20只,6周龄,SPF级,体质量180~200 g。脐带间充质干细胞由顺昊细胞生物技术(天津)股份有限公司提供。正常人新鲜抗凝外周血来源于天津市儿童医院血库采血管中留存检验血液。通过密度梯度离心和超速离心法分离hUCMSC-Exo和PBM-Exo,利用透射电子显微镜、Western blot(Wb)和纳米颗粒跟踪分析(NTA)进行外泌体鉴定。采用脂多糖(LPS)诱导SD幼鼠建立ALI模型,随机分为对照组(PBS)、模型组(LPS)、hUCMSC-Exo治疗组和PBM-Exo治疗组。通过肺功能检测、细胞因子检测和组织病理学检测,评价外泌体的治疗效果。结果透射电子显微镜、Wb和NTA显示分离的hUCMSC-Exo和PBM-Exo均符合外泌体鉴定标准。PBM-Exo颗粒直径分布范围集中在约100 nm左右。hUCMSC-Exo和PBM-Exo均能改善LPS诱导的ALL,幼鼠的潮气量、呼吸频率和每分钟通气量升高,幼鼠的TNF-α和IL-6浓度降低。对照组、模型组、hUCMSC-Exo治疗组、PBM-Exo治疗组病理操作评分分别为(0.000±0.000)分、(8.500±0.577)分、(3.750±0.578)分、(3.250±0.500)分,差异有显著统计学意义(F=235.600,P=0.000)。幼鼠的肺组织组织学损伤有所减轻,两种外泌体对ALL的的治疗效果差异无统计学意义。结论hUCMSC-Exo和PBM-Exo对幼鼠ALI具有相似的治疗效果,且PBM-Exo来源更易获取,具有更好的临床应用前景。 展开更多
关键词 外周血 巨噬细胞 外泌体 急性肺损伤 人脐带间充质干细胞 鼠
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早期胚胎发育母源向合子转换的调控机制研究进展
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作者 张武文 李凯 +3 位作者 尹萍 钟秀芳 李赟 严骅 《中国细胞生物学学报》 2025年第8期2105-2115,共11页
早期胚胎发育是一个高度精细且有序的过程,涉及多个关键的细胞和分子事件。这些事件包括起始母源物质的降解、合子基因组的激活、母源向合子转换(MZT)以及细胞命运的分化等。当前研究表明,母源物质的降解与合子基因组的激活是一个动态... 早期胚胎发育是一个高度精细且有序的过程,涉及多个关键的细胞和分子事件。这些事件包括起始母源物质的降解、合子基因组的激活、母源向合子转换(MZT)以及细胞命运的分化等。当前研究表明,母源物质的降解与合子基因组的激活是一个动态且复杂的过程,这一过程对MZT的顺利转换至关重要,涉及多种调控机制,包括DNA甲基化、非编码RNA和组蛋白修饰等。同时,MZT是早期胚胎发育过程中的关键转折点,且与胚胎的正常发育及其后续生物功能密切相关。近年来,研究者们在MZT机制方面取得了显著进展,但与此同时,仍存在一些未解之谜,例如不同物种之间MZT过程的差异以及各调控因子的具体作用机制。该文旨在总结和分析母源物质的降解、合子基因组的激活及其相关调控因子在MZT中的作用,探讨不同模式生物的共性与差异,并为深入理解MZT的分子机制提供新的视角。 展开更多
关键词 早期胚胎发育 母源物质降解 合子基因组激活 母源向合子转换 DNA甲基化 非编码RNA 组蛋白修饰
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多发性骨髓瘤的免疫治疗:成果与挑战
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作者 王萌 孙春艳 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第6期774-782,共9页
多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种以恶性浆细胞增殖为特征的血液系统肿瘤。目前,蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitors, PIs)、免疫调节剂(immunomodulatory drugs, IMiDs)和自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic ste... 多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种以恶性浆细胞增殖为特征的血液系统肿瘤。目前,蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitors, PIs)、免疫调节剂(immunomodulatory drugs, IMiDs)和自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation, ASCT)是改善MM患者生存预后的主要手段,但随着治疗的深入,大多数患者仍面临难治和复发问题,治愈之路依然充满挑战。近年来,单克隆抗体(monoclonal antibodies, mAbs)、嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cells, CAR-T)、抗体药物耦联物(antibody-drug conjugates, ADCs)和双特异性抗体(bispecific antibodies, BsAbs)均在临床研究和/或临床应用中取得了良好的疗效,这些基于抗体和细胞的免疫治疗为难治复发性MM(refractory and relapsed multiple myeloma, RRMM)患者带来了新的希望。各类免疫治疗产品在激活免疫细胞、靶向肿瘤以及改善患者预后方面各有优势,但同时也面临安全性和耐药性的挑战。未来,随着分子生物学和抗体工程技术的不断进步,新型免疫治疗产品有望通过联合疗法等多种策略实现协同增效,从而为RRMM患者带来更长久的生存获益和生活质量的改善。本文旨在综述多发性骨髓瘤免疫治疗的研究成果与现存挑战,探讨单克隆抗体、CAR-T、抗体药物耦联物和双特异性抗体的作用机制、临床应用现状及未来发展趋势,为相关领域研究者和临床医生提供一个全面和系统的参考,推动MM精准免疫治疗的发展。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 免疫治疗 单克隆抗体 嵌合抗原受体T细胞 抗体药物耦联物 双特异性抗体
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邻苯二甲酸二丁酯人工抗原合成及单克隆抗体制备
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作者 刘静静 张琦 +2 位作者 刘雨茹 张文静 李春生 《河北省科学院学报》 2025年第4期47-52,共6页
以邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为研究目标,通过重氮化法合成了人工抗原DBAP-KLH、DBAP-BSA,经紫外光谱扫描分析鉴定,证实人工抗原合成成功。动物免疫后,经细胞融合和筛选得到杂交瘤细胞,制备出抗DBP单克隆抗体。研究结果表明,单克隆抗体DBP-... 以邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为研究目标,通过重氮化法合成了人工抗原DBAP-KLH、DBAP-BSA,经紫外光谱扫描分析鉴定,证实人工抗原合成成功。动物免疫后,经细胞融合和筛选得到杂交瘤细胞,制备出抗DBP单克隆抗体。研究结果表明,单克隆抗体DBP-2C7具有较高的亲和力和灵敏度,其效价为1∶1024000,对DBP的半数抑制浓度为24.3μg/L。特异性分析显示,该抗体与半抗原的交叉反应率为28.6%,与其他邻苯二甲酸酯类化合物的交叉反应率小于1%。本研究制备了DBP人工抗原和单克隆抗体,为邻苯二甲酸二丁酯免疫测定方法的建立和应用提供了重要的实验依据和基础原料。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二丁酯 单克隆抗体 免疫学检测
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T细胞归巢机制及其在实体瘤免疫治疗中的转化策略
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作者 谢妍 何玉婷 沈阳坤 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第7期997-1006,共10页
近年来,过继性T细胞免疫疗法成为癌症治疗的研究热点,其中T细胞向肿瘤组织的定向归巢是抗肿瘤免疫应答的核心,与良好的临床治疗结果紧密相关。然而,由于复杂的肿瘤微环境、肿瘤脉管障碍和趋化信号的缺失,T细胞向实体肿瘤的浸润仍存在挑... 近年来,过继性T细胞免疫疗法成为癌症治疗的研究热点,其中T细胞向肿瘤组织的定向归巢是抗肿瘤免疫应答的核心,与良好的临床治疗结果紧密相关。然而,由于复杂的肿瘤微环境、肿瘤脉管障碍和趋化信号的缺失,T细胞向实体肿瘤的浸润仍存在挑战。本综述系统概述了T细胞归巢的迁移路径包括静脉输注后的血液归巢、跨血管内皮迁移及其靶向实体瘤组织的浸润。在此基础上,本文还探讨了T细胞归巢的调控机制,尤其是趋化因子-受体轴之间的协同关系,以及肿瘤血管异常、TME塑造的浸润壁垒和肿瘤基质屏障对T细胞归巢的影响。针对上述障碍,本文综述了增强T细胞归巢效率的3个主要策略。其一,通过CRISPR基因编辑或慢病毒转导技术,修饰趋化因子受体(例如CXCR2、CXCR6)以匹配肿瘤趋化信号,或敲除免疫检查点分子(PD-1、LAG-3、SHP-1)以逆转T细胞耗竭。其二,靶向VEGF/VEGFR轴联合ATCT可促进血管正常化,改善T细胞浸润。其三,局部治疗(放疗、溶瘤病毒)或者系统药物(化疗、免疫检查点抑制剂等)的联合治疗策略,通过重塑肿瘤TME,促进T细胞归巢。这些策略将为过继性T细胞免疫疗法治疗实体瘤提供理论依据与研究方向。 展开更多
关键词 过继性T细胞免疫疗法 T细胞归巢 趋化因子 肿瘤治疗
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