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Lgr5介导的干细胞调控与消化系统类器官形成的研究进展
1
作者 姚拓新 李幸 +1 位作者 印遇龙 何流琴 《合成生物学》 北大核心 2026年第1期233-245,共13页
作为干细胞特异性标志物的富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)是细胞膜上的一段七次跨膜受体蛋白,它通过调控Wnt/β-catenin信号维持干细胞增殖与分化平衡,同时与... 作为干细胞特异性标志物的富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)是细胞膜上的一段七次跨膜受体蛋白,它通过调控Wnt/β-catenin信号维持干细胞增殖与分化平衡,同时与BMP、Notch等通路耦合,协同促进类器官的形成。类器官是一种在体外培养的、具有类似真实器官结构和功能的3D细胞团,不仅能还原组织复杂的结构,也能模拟组织的生理环境,是各种组织器官研究比较精准的体外模型。近年来,类器官为营养吸收、疾病建模、药物筛选和基因编辑等方面的研究提供了比细胞更真实的模型,在生物医学领域引起了广泛关注。因此,本文重点综述了Lgr5通过与R-spondins结合并增强Wnt/β-catenin信号通路,进而调控干细胞自更新与定向分化的分子机制,阐述了其作为核心驱动力在构建微型肠道、肝脏及胰腺类器官中的关键作用,同时,详细探讨了消化道类器官在模拟结直肠癌、非酒精性脂肪肝等疾病病理,以及作为供体组织用于肠黏膜损伤修复和胆管重建等再生医学领域的具体应用,最后,针对目前类器官技术面临的基质胶成分不明确、缺乏血管化和免疫微环境等挑战,提出了结合微流控芯片、合成生物支架及多细胞共培养技术实现类器官复杂化、标准化的未来发展方向,旨在为消化系统疾病的精准治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(Lgr5) 类器官 Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin) 干细胞功能调控 疾病建模
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过表达5型腺病毒前体末端蛋白HEK-293T细胞系的构建
2
作者 郝香琪 谢清香 +1 位作者 曲哲会 邓凯伟 《贵州畜牧兽医》 2026年第1期35-39,共5页
为探究5型腺病毒(Ad5)在HEK-293T-pTP细胞系内的包装及扩增效果,通过构建过表达Ad5前体末端蛋白(Ad5-pTP)的HEK-293T细胞系,采用Ad-Easy方法包装腺病毒,观察其应用效果。结果:HEK-293T-pTP细胞系中pTP基因的相对表达量提升约150倍(P<... 为探究5型腺病毒(Ad5)在HEK-293T-pTP细胞系内的包装及扩增效果,通过构建过表达Ad5前体末端蛋白(Ad5-pTP)的HEK-293T细胞系,采用Ad-Easy方法包装腺病毒,观察其应用效果。结果:HEK-293T-pTP细胞系中pTP基因的相对表达量提升约150倍(P<0.01),包装的腺病毒培养约7 d可见病毒池出现,收获的腺病毒可以进行多轮扩繁。结论:构建的HEK-293T-pTP细胞系能极显著提高5型腺病毒的包装效率,加快病毒生长繁殖,并支持多轮扩繁。 展开更多
关键词 5型腺病毒 前体末端蛋白 HEK-293T细胞系
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重组胶原蛋白的不同表达体系研究进展
3
作者 王啸尘 黄伟 +5 位作者 刘英杰 徐荣荣 王艺纯 张硕 高琛 杨素珍 《山东化工》 2026年第1期99-104,共6页
胶原蛋白是一类具有特征性纤维状结构的细胞外基质蛋白,作为人体结缔组织的主要结构成分,广泛分布于皮肤、骨骼、关节、血管等关键生理部位。胶原蛋白获得途径有传统提取和重组生物技术表达两种,传统提取法可以通过从天然来源,如植物和... 胶原蛋白是一类具有特征性纤维状结构的细胞外基质蛋白,作为人体结缔组织的主要结构成分,广泛分布于皮肤、骨骼、关节、血管等关键生理部位。胶原蛋白获得途径有传统提取和重组生物技术表达两种,传统提取法可以通过从天然来源,如植物和动物中提取获得,而重组生物技术表达则是通过重组蛋白表达系统获得。本文对不同重组胶原蛋白表达体系的开发、研究状况进行系统说明,重点阐述了不同表达体系及其特点,包括原核生物、酵母、杆状病毒、植物及动物细胞,最后对重组胶原蛋白存在的问题进行了综述。 展开更多
关键词 重组胶原蛋白 重组胶原蛋白表达体系 重组类人胶原蛋白
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融合计划采样的增强物理信息神经网络用于单克隆抗体细胞培养过程建模 被引量：1
4
作者 徐钊 陈杭 瞿海斌 《生物工程学报》 北大核心 2026年第2期942-954,共13页
物理信息神经网络(physics-informed neural networks,PINN)将机理方程融入神经网络以提升模型预测精度,已初步应用于细胞培养过程建模。虽然PINN凭借物理规律对解空间进行约束减少了对数据量的依赖,但在小样本场景下,仍有可能收敛到次... 物理信息神经网络(physics-informed neural networks,PINN)将机理方程融入神经网络以提升模型预测精度,已初步应用于细胞培养过程建模。虽然PINN凭借物理规律对解空间进行约束减少了对数据量的依赖,但在小样本场景下,仍有可能收敛到次优解。本研究提出了一种改进的混合物理信息神经网络(improved hybrid-physics-informed neural network with scheduled sampling,SSIHPINN),通过物理引导初始化和计划采样模块为单克隆抗体细胞培养过程建立更稳健的模型。通过对比实验和消融实验对SS-IHPINN进行了评估和比较,结果表明这2个功能模块的协同作用使SS-IHPINN具有更高的预测性能。即使细胞培养过程参数发生变化,该框架也表现出良好的泛化和迁移学习能力。本研究提出的方法有效提升了小样本条件下的建模性能,为生物过程的监测提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 单克隆抗体 杂交瘤细胞 物理信息神经网络 迁移学习 计划采样
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间充质干细胞外泌体在治疗衰老相关退行性疾病中的应用
5
作者 刘晴晴 李可蕊 +2 位作者 张嘉奕 李西川 刘岭霞 《生命科学》 2026年第1期133-149,共17页
随着全球老龄化趋势的加剧,老年人口健康需求的持续增长为医疗领域带来了重大挑战。间充质干细胞外泌体(mesenchymal stem cell exosomes,MSC-exosomes)含有具备炎症调节、促进组织修复及抗衰老等作用的生物活性分子,能通过多种机制改... 随着全球老龄化趋势的加剧,老年人口健康需求的持续增长为医疗领域带来了重大挑战。间充质干细胞外泌体(mesenchymal stem cell exosomes,MSC-exosomes)含有具备炎症调节、促进组织修复及抗衰老等作用的生物活性分子,能通过多种机制改善衰老引起的组织功能衰退和病理变化,在抗衰老及衰老相关退行性疾病的治疗中发挥重要作用。尽管MSC-exosomes在临床应用中的效果还需要进一步验证,但其表现出的抗炎和组织修复特性与当前衰老相关的退行性疾病治疗中的再生医学和炎症消退方向相契合。本文概述了MSC-exosomes的生物活性分子组成,并根据当前MSC-exosomes应用基础技术的研究进展,重点讨论MSC-exosomes作为新兴治疗手段在衰老相关退行性疾病治疗中的应用。 展开更多
关键词 间充质干细胞外泌体 退行性疾病 抗衰老 抗炎 组织修复
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CGF/Bio-Oss复合物结合引导骨组织再生术在牙槽骨缺损患者种植修复中的应用:一项随机对照试验
6
作者 肖连旺 吴秀英 张续岩 《现代生物医学进展》 2026年第2期196-202,209,共8页
目的:探讨浓缩生长因子CGF(concentrate growth factor,CGF)/Bio-Oss复合物结合引导骨组织再生术(guided bone regeneration,GBR)在牙槽骨缺损患者种植修复中的应用效果。方法:本研究为一项随机对照试验,前瞻性纳入我院2022年2月至2024... 目的:探讨浓缩生长因子CGF(concentrate growth factor,CGF)/Bio-Oss复合物结合引导骨组织再生术(guided bone regeneration,GBR)在牙槽骨缺损患者种植修复中的应用效果。方法:本研究为一项随机对照试验,前瞻性纳入我院2022年2月至2024年2月期间收治的67例接受GBR治疗的牙槽骨缺损患者,根据随机数字表法分为参照组(Bio-Oss骨粉植入,n=33)和研究组(CGF/Bio-Oss复合物植入,n=34)。对比两组临床疗效、疼痛情况、骨缺损再生情况、龈沟液细胞因子[碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)]和术后不良情况。结果:研究组的临床总有效率高于参照组(P<0.05)。研究组术后3 d、术后3个月、术后6个月VAS评分低于参照组(P<0.05)。研究组植骨高度、成骨高度高于参照组,牙周探诊深度、临床附着丧失、出血指数小于参照组(P<0.05)。研究组术后6个月VEGF、bFGF、BMP-2水平高于参照组(P<0.05)。研究组术后不良情况总发生率低于参照组(P<0.05)。结论:CGF/Bio-Oss复合物结合GBR应用于牙槽骨缺损患者,可提高临床总有效率,促进骨缺损再生,降低疼痛程度,调节龈沟液细胞因子水平,安全性高。 展开更多
关键词 CGF/Bio-Oss复合物 引导骨组织再生术 牙槽骨缺损 种植修复
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基于微流控技术的工程细胞高通量表型测试技术与装备研究进展 被引量：2
7
作者 李爽 郭肖杰 +7 位作者 陈海博 陈思思 笪鑫 李峥辉 刘芹秀 王怡 邢新会 张翀 《中国科学院院刊》 北大核心 2025年第1期91-106,共16页
工程细胞是绿色生物制造的重要基础,如何高效测试并获得目标表型的工程细胞是影响生物制造应用的关键因素之一。近年来,基于微流控技术开发了非培养类型单细胞表型高通量测试装备,以及通过微液滴和微腔室等微型生物反应器实现单细胞生... 工程细胞是绿色生物制造的重要基础,如何高效测试并获得目标表型的工程细胞是影响生物制造应用的关键因素之一。近年来,基于微流控技术开发了非培养类型单细胞表型高通量测试装备,以及通过微液滴和微腔室等微型生物反应器实现单细胞生长代谢的培养类型高通量表型测试装备,实现了工程细胞表型的高通量、自动化、微型化和集成化测试,为工程细胞选育提供了强有力的工具。文章系统综述基于荧光信号、拉曼信号、图像信号、磁信号的非培养类型单细胞表型测试技术与装备,基于皮纳升、微升多尺度微型生物反应器的液滴、微腔室单细胞培养类型测试技术与装备研究进展,并探讨工程细胞高通量测试仪器创制发展趋势,为绿色生物制造工程细胞测试技术研究提供借鉴。 展开更多
关键词 微流控 单细胞 高通量测试 合成生物学 生物制造
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膀胱平滑肌细胞原代培养技术研究进展
8
作者 胡晋堂 双卫兵 《医学新知》 2026年第2期217-223,共7页
膀胱平滑肌细胞原代培养存在易发生去分化、易受杂质污染、操作复杂等问题,本文对膀胱平滑肌细胞的分离方法(组织块分离法、酶消化分离法)、提纯方法(差速贴壁法、选择性培养基法、差速离心法、筛网分离法)、生物物理刺激(机械拉伸、膀... 膀胱平滑肌细胞原代培养存在易发生去分化、易受杂质污染、操作复杂等问题,本文对膀胱平滑肌细胞的分离方法(组织块分离法、酶消化分离法)、提纯方法(差速贴壁法、选择性培养基法、差速离心法、筛网分离法)、生物物理刺激(机械拉伸、膀胱内压、碱性成纤维细胞因子、胶原基质,缺氧刺激)、鉴定方法(组织学观察、免疫荧光染色法)和操作要点进行了总结,并通过比较不同方法的优缺点,为后续相关研究的开展提供参考。 展开更多
关键词 膀胱 平滑肌细胞 原代细胞分离方法 原代细胞培养 细胞鉴定
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3D培养血管基质成分自组装复杂结构血管化成骨类器官
9
作者 吴佳洲 钱陶 +4 位作者 刘泽贤 武艳斌 何莹 李亚洲 彭江 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第11期2681-2690,共10页
背景:相较于2D培养技术,3D培养技术能够更准确地模拟细胞自然生长的体内环境,成为基础科学研究和转化医学领域的关键焦点。目的:通过3D培养技术构建预血管化的成骨类器官。方法:从同一人体脂肪组织中分别分离提取血管基质成分、脂肪间... 背景:相较于2D培养技术,3D培养技术能够更准确地模拟细胞自然生长的体内环境,成为基础科学研究和转化医学领域的关键焦点。目的:通过3D培养技术构建预血管化的成骨类器官。方法:从同一人体脂肪组织中分别分离提取血管基质成分、脂肪间充质干细胞,通过流式细胞学鉴定细胞组分。将血管基质成分、脂肪间充质干细胞分别接种于96孔U型板内,培养3 d后血管基质成分自组装成型、脂肪间充质干细胞成球,培养第14天,通过苏木精-伊红染色与细胞骨架染色观察球体内部结构和细胞形态;培养0,7,14,21 d,Presto Blue实验检测细胞活性;培养3 d后分别进行成骨、成软骨与成脂诱导分化,诱导14 d后,茜素红染色观察成骨分化,阿利新蓝染色观察成软骨分化,油红O染色观察成脂分化,免疫荧光染色共定位成骨诱导后CD31(内皮细胞标志物)、RUNX2(早期成骨标志物)、CD44(间充质干细胞标志物)、Ⅰ型胶原(晚期成骨标志物)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(成脂标志物)的表达,qRT-PCR检测成骨诱导后RUNX2、骨桥蛋白、Ⅰ型胶原、Sp7转录因子、CD31和血管内皮生长因子mRNA表达。结果与结论:①流式细胞分析表明,血管基质成分包含脂肪间充质干细胞和内皮细胞等多种细胞类型,脂肪间充质干细胞球主要由脂肪间充质干细胞构成;②苏木精-伊红染色及细胞骨架染色显示,相对于脂肪间充质干细胞球,血管基质成分类器官结构更贴近天然组织,细胞排列有序,细胞外基质更丰富;细胞活性测试显示,脂肪间充质干细胞球培养7 d的细胞活性高于血管基质成分类器官(P<0.05),培养21 d的细胞活性低于血管基质成分类器官(P<0.05),说明血管基质成分类器官的细胞活性持续时间更长;③相较于脂肪间充质干细胞球,血管基质成分类器官具有更优的骨、软骨和脂肪形成能力;多色免疫荧光共定位显示,血管基质成分类器官中血管网络和成骨标志物表达丰富,细胞间和细胞-基质相互作用复杂,脂肪间充质干细胞球结构单一且缺乏内皮细胞基因表达;qRT-PCR检测结果显示,血管基质成分类器官中RUNX2、骨桥蛋白、Ⅰ型胶原、Sp7转录因子、CD31和血管内皮生长因子mRNA表达均高于脂肪间充质干细胞球(P<0.05);④结果表明,血管基质成分类器官具备复杂的生理结构和更强的血管形成和骨形成能力,以及更持久的细胞活性。 展开更多
关键词 三维培养 血管基质成分 脂肪间充质干细胞 内皮细胞 类器官 成骨分化 血管生成 工程化材料
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生殖性克隆技术:突破、应用与伦理审视
10
作者 朱昀 闫路娜 孔德晶 《生物学教学》 北大核心 2025年第6期87-89,共3页
体细胞核移植,是生殖性克隆实现的核心技术。本文回顾了体细胞核移植技术3次突破:从格登的两栖动物克隆,到多莉羊的诞生与灵长类动物克隆成功。介绍了克隆在优良种畜繁育、医学治疗、濒危物种保护和非人灵长类疾病动物模型建立方面的重... 体细胞核移植,是生殖性克隆实现的核心技术。本文回顾了体细胞核移植技术3次突破:从格登的两栖动物克隆,到多莉羊的诞生与灵长类动物克隆成功。介绍了克隆在优良种畜繁育、医学治疗、濒危物种保护和非人灵长类疾病动物模型建立方面的重要应用。2024年非人灵长类生殖性克隆再次取得重大的进展。但是,人类生殖性克隆会涉及伦理的争议。 展开更多
关键词 生殖性克隆 体细胞核移植 伦理审视
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替代蛋白食品工业化发展思考 被引量：5
11
作者 胡海娟 王守伟 +4 位作者 李宇轩 孙金沅 李石磊 李莹莹 孙宝国 《中国工程科学》 北大核心 2025年第1期258-268,共11页
替代蛋白食品是利用合成生物学、细胞工程等生物制造技术获取的新型蛋白食品,具有可持续、合成高效等优势;推进替代蛋白工程化和工业化,对加快发展新质生产力、保障国家粮食安全具有重要意义。本文从国际竞争加剧、“大食物观”格局构... 替代蛋白食品是利用合成生物学、细胞工程等生物制造技术获取的新型蛋白食品,具有可持续、合成高效等优势;推进替代蛋白工程化和工业化,对加快发展新质生产力、保障国家粮食安全具有重要意义。本文从国际竞争加剧、“大食物观”格局构建、新质生产力培育、可持续发展4个方面阐述了替代蛋白食品的发展价值,从科技、监管、工业化3个方面系统梳理了国内外替代蛋白食品的发展现状。研究认为,种子细胞系、无血清培养基、专用生物反应器、高效底盘菌株筛选及制备、植物蛋白肉塑形和赋味等关键技术有待突破,食品安全标准及监管框架亟需建立,关键要素的自主研发与生产能力以及产业链的细分领域也需加快拓展。针对性提出了加快替代蛋白食品工业化进程的发展建议,以期为我国替代蛋白工业化研究、实践、监管等提供参考和启示。 展开更多
关键词 替代蛋白食品 细胞培育肉 微生物蛋白肉 植物蛋白肉 工业化生产 产业链 安全标准 监管体系
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免疫细胞治疗科技创新与产业发展态势 被引量：2
12
作者 范月蕾 李荣 +3 位作者 李斌 张博文 赵若春 毛开云 《生命科学》 2025年第1期97-106,共10页
免疫细胞治疗是全球生物医药领域具有潜力的新赛道之一。随着技术的成熟与产品的研发和临床应用,免疫细胞治疗已从探索期进入到全面产业化阶段。本文从基础研究、临床研究转化和产业化的角度梳理和分析了2024年免疫细胞治疗领域的科技... 免疫细胞治疗是全球生物医药领域具有潜力的新赛道之一。随着技术的成熟与产品的研发和临床应用,免疫细胞治疗已从探索期进入到全面产业化阶段。本文从基础研究、临床研究转化和产业化的角度梳理和分析了2024年免疫细胞治疗领域的科技创新与产业发展态势,并对免疫细胞治疗未来的发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 细胞治疗 免疫细胞 发展态势
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马尾松原生质体制备及瞬时转化体系的建立 被引量：1
13
作者 李岩硕 王民炎 +2 位作者 刘殿宽 李伟 殷恒福 《植物研究》 北大核心 2025年第2期202-210,共9页
该研究旨在通过建立马尾松(Pinus massoniana)原生质体的分离和制备系统,实现基因的瞬时转化,从而推动马尾松基因功能研究和遗传转化体系的发展。研究选取了马尾松不同发育时期的外植体材料,包括针叶、下胚轴和愈伤组织,探讨了不同酶解... 该研究旨在通过建立马尾松(Pinus massoniana)原生质体的分离和制备系统,实现基因的瞬时转化,从而推动马尾松基因功能研究和遗传转化体系的发展。研究选取了马尾松不同发育时期的外植体材料,包括针叶、下胚轴和愈伤组织,探讨了不同酶解条件对原生质体分离效率的影响,并通过试验优化了马尾松原生质体的制备流程,涉及不同类型的组织、不同的渗透压和酶解时间。研究结果表明:在0.5 mol⋅L-1甘露醇渗透液中,使用马尾松针叶组织进行6 h酶解处理是提取原生质体的最佳条件。基于此,该研究构建了一个适合马尾松的瞬时转化体系,并通过对比不同转化条件,实现了外源基因在马尾松原生质体中的瞬时表达。研究还发现,经过优化的原生质体制备体系能够显著提升原生质体的质量和转化效率,在使用聚乙二醇(PEG)介导的转化方法时,转化效率高达47.83%。综上,该研究成功构建了马尾松原生质体高效分离体系,为针叶树种基因功能解析提供了可靠的瞬时表达系统。 展开更多
关键词 马尾松 原生质体 瞬时转化 基因功能
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多发性骨髓瘤的免疫治疗:成果与挑战 被引量：2
14
作者 王萌 孙春艳 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第6期774-782,共9页
多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种以恶性浆细胞增殖为特征的血液系统肿瘤。目前,蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitors, PIs)、免疫调节剂(immunomodulatory drugs, IMiDs)和自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic ste... 多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种以恶性浆细胞增殖为特征的血液系统肿瘤。目前,蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitors, PIs)、免疫调节剂(immunomodulatory drugs, IMiDs)和自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation, ASCT)是改善MM患者生存预后的主要手段,但随着治疗的深入,大多数患者仍面临难治和复发问题,治愈之路依然充满挑战。近年来,单克隆抗体(monoclonal antibodies, mAbs)、嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cells, CAR-T)、抗体药物耦联物(antibody-drug conjugates, ADCs)和双特异性抗体(bispecific antibodies, BsAbs)均在临床研究和/或临床应用中取得了良好的疗效,这些基于抗体和细胞的免疫治疗为难治复发性MM(refractory and relapsed multiple myeloma, RRMM)患者带来了新的希望。各类免疫治疗产品在激活免疫细胞、靶向肿瘤以及改善患者预后方面各有优势,但同时也面临安全性和耐药性的挑战。未来,随着分子生物学和抗体工程技术的不断进步,新型免疫治疗产品有望通过联合疗法等多种策略实现协同增效,从而为RRMM患者带来更长久的生存获益和生活质量的改善。本文旨在综述多发性骨髓瘤免疫治疗的研究成果与现存挑战,探讨单克隆抗体、CAR-T、抗体药物耦联物和双特异性抗体的作用机制、临床应用现状及未来发展趋势,为相关领域研究者和临床医生提供一个全面和系统的参考,推动MM精准免疫治疗的发展。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 免疫治疗 单克隆抗体 嵌合抗原受体T细胞 抗体药物耦联物 双特异性抗体
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CHO细胞培养过程中柠檬酸积累特性研究
15
作者 何永梅 张欣然 +2 位作者 赵亮 谭文松 叶倩 《中国生物工程杂志》 北大核心 2025年第4期15-24,共10页
目的:探究中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary cell,CHO cell)流加培养过程中柠檬酸积累现象及特征,为认识和调控柠檬酸积累奠定基础。方法:以CHO细胞为研究对象,采用实验室前期建立的流加培养工艺,考察流加培养过程中柠檬酸积累特... 目的:探究中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary cell,CHO cell)流加培养过程中柠檬酸积累现象及特征,为认识和调控柠檬酸积累奠定基础。方法:以CHO细胞为研究对象,采用实验室前期建立的流加培养工艺,考察流加培养过程中柠檬酸积累特征,探究培养工艺参数(温度和葡萄糖浓度)对柠檬酸积累的影响,建立关键代谢参数[平均葡萄糖比消耗速率(Q_(Gluc))、乳酸比生成速率(q_(Lac))、抗体比生成速率(q_(p))和三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCA cycle)的总碳流量]与柠檬酸积累的相关性。结果:温度影响CHO细胞流加培养过程中柠檬酸积累,较低温度(31℃)条件下柠檬酸比生成速率显著增大;葡萄糖浓度对柠檬酸积累过程的影响有限,葡萄糖浓度控制在2~55 mmol/L的范围内不影响柠檬酸积累过程;通过考察多批不同培养工艺参数条件下的柠檬酸积累过程,发现柠檬酸比生成速率与葡萄糖比消耗速率、抗体比生成速率、TCA循环总碳流量呈正相关,与乳酸的比生成速率呈负相关。结论:柠檬酸在细胞外积累可能反映营养物质供给充足,细胞TCA循环代谢旺盛,细胞抗体生产能力增强。 展开更多
关键词 CHO细胞 TCA循环 柠檬酸 温度 葡萄糖浓度 抗体生产
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HEK293细胞悬浮培养技术及其应用研究进展
16
作者 岳欣豫 吉雯娜 +7 位作者 周锦鱼 靳莉武 杨迪 刘振斌 孙娜 乔自林 马忠仁 王家敏 《生物技术通报》 北大核心 2025年第8期82-91,共10页
生物制药产品的生产主要依赖于哺乳动物细胞,尤其是在制造复杂的蛋白质药物,因为其能够进行复杂的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs),对于蛋白质的功能和稳定性至关重要,一些生物制药商品如重组治疗蛋白、疫苗、抗癌... 生物制药产品的生产主要依赖于哺乳动物细胞,尤其是在制造复杂的蛋白质药物,因为其能够进行复杂的翻译后修饰(post-translational modifications, PTMs),对于蛋白质的功能和稳定性至关重要,一些生物制药商品如重组治疗蛋白、疫苗、抗癌药物和其他临床相关药物等大多数都是利用了哺乳动物细胞平台生产。HEK293细胞(human embryonic kidney 293 cells)是所有人类细胞系中最常用的宿主细胞之一,但由于贴壁细胞在生产应用中的高投资成本,以及血清添加有可能携带的外源风险等问题,导致其最初在生产应用方面受到限制,而HEK293悬浮细胞相比于贴壁细胞更具优势,其不仅生产成本大大降低,没有血清的添加更增加了生产生物制品的安全性。目前,HEK293悬浮细胞已广泛应用于多个领域,并已成为生产蛋白质、疫苗和基因治疗药物的强大载体和新平台。本文综述了HEK293细胞的来源及其衍生细胞系,总结目前贴壁细胞的悬浮驯化技术以及用于HEK293细胞的无血清培养基,并描述目前HEK293细胞在疫苗生产、基因治疗药物生产以及实验室基础研究方面的应用进展,讨论了HEK293细胞大规模生产的意义及存在的问题,最后对未来HEK293细胞的研究方向以及大规模生产的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 HEK293细胞 悬浮驯化 生物制药
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空间细胞培养用低扰动脉冲泵设计与流体仿真优化
17
作者 郭淼 谭映军 +5 位作者 王春艳 施镠佳 巩陶婉 曹雪 李越 李莹辉 《载人航天》 北大核心 2025年第5期653-661,共9页
细胞在空间微重力环境下进行培养具有地面实验无法比拟的优势,为了控制试剂流量进行连续精确给液同时适应装置体积有限的局限,需要研究合适的泵结构。现有的注射给液或蠕动泵等输液流量或者精度有限,设计一种新型低扰动陶瓷脉冲泵,主要... 细胞在空间微重力环境下进行培养具有地面实验无法比拟的优势,为了控制试剂流量进行连续精确给液同时适应装置体积有限的局限,需要研究合适的泵结构。现有的注射给液或蠕动泵等输液流量或者精度有限,设计一种新型低扰动陶瓷脉冲泵,主要包括泵芯、滑轨、滑块以及泵体等,可实现持续、高精度给液。滑轨表面根据特殊设计曲线加工而成,使滑块在其表面低扰动滑动。设计泵芯豁口开度分别为80°、100°以及120°的脉冲泵,通过有限体积法仿真模拟脉冲泵工作过程,比较其内部流场分布和输出流量曲线。利用高精度天平测量输出流量,仿真和实验结果表明:泵芯豁口开度为100°的脉冲泵泵芯旋转一圈输出流体体积更固定,体积曲线更平滑,可应用于面向空间细胞培养装置中,实现连续、精确的流体控制。 展开更多
关键词 低扰动脉冲泵 重叠网格 有限体积法 流量曲线 空间细胞培养
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猪胰腺干细胞分离与培养 被引量：2
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作者 王赟 窦忠英 +2 位作者 乔海 赵婷 杨春荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期2554-2562,共9页
【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的... 【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的小圆细胞。而后将血清浓度提高到15%以上继续培养;采用免疫组化方法对获得的细胞是否具有胰腺干细胞特征予以检测,并测定了细胞的生长曲线。【结果】在血清浓度提高后每个小圆细胞能快速增殖并形成一个克隆,经过这样增殖后的细胞可以连续传代,目前已传至60代。经免疫组化检测,细胞表达PDX-1、GLUT-2、vimentin等胰腺干细胞的标志;细胞也表达Glucagon、insulin、somatostatin、polypeptide等胰腺内分泌细胞的标志.【结论】通过本方法获得的细胞经检测确定为胰腺干细胞,在体外可自发分化形成胰胰内分泌部4种主要细胞。 展开更多
关键词 胎猪 胰岛 胰腺干细胞 糖尿病
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改变表观遗传修饰和供体细胞代谢状态可提高犬-猪异种克隆胚胎的发育效率
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作者 闫艳霞 张雨涵 +1 位作者 吴珍芳 李紫聪 《遗传》 北大核心 2025年第12期1365-1376,共12页
为了探索能提高犬体细胞克隆效率的新方法,本研究比较了糖酵解促进剂PS48和表观遗传修饰剂(DNA甲基化酶抑制剂RG108和组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid)的不同处理浓度和时间对犬-猪异种体细胞核移植(interspecies somatic cell nuclear... 为了探索能提高犬体细胞克隆效率的新方法,本研究比较了糖酵解促进剂PS48和表观遗传修饰剂(DNA甲基化酶抑制剂RG108和组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid)的不同处理浓度和时间对犬-猪异种体细胞核移植(interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)胚胎发育效率的影响。结果显示:(1) 5μmol/L PS48处理犬耳成纤维细胞(canine ear fibroblasts,cEFs)和犬脂肪间充质干细胞(canine adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,cAd-MSCs) 24 h显著增强了其后续iSCNT胚胎的发育能力,PS48处理cEFs组的iSCNT胚胎的卵裂率、4-细胞期率和8-细胞期率均显著高于对照组(46.90±1.64%vs 13.30±1.61%,32.30±1.55%vs 8.26±0.88%,10.62±1.68%vs 5.50±0.84%;P<0.05),PS48处理cAd-MSCs组的iSCNT胚胎的卵裂率和4-细胞期率显著高于对照组(49.51±3.00%vs 31.25±2.73%,26.21±2.08%vs 15.18±1.58%;P<0.05);(2) 20μmol/L RG108处理cEFs和cAd-MSCs 48 h对iSCNT胚胎发育效率无显著影响,0 nmol/L、400 nmol/L、500 nmol/L和600 nmol/L Scriptaid分别处理cEFs和cAd-MSCs 24 h对iSCNT胚胎发育效率无显著影响;(3) 20μmol/L RG108处理两种供体细胞来源iSCNT胚胎对其发育有显著促进作用(P<0.05),500 nmol/L Scriptaid处理cEFs来源的iSCNT胚胎16 h可显著提高其卵裂率和4-细胞期率(23.08±2.94%vs 9.47±1.70%,18.68±3.25%vs 6.32±1.07%;P<0.05)。本研究建立了能显著提高犬-猪iSCNT胚胎发育效率的新方法,有助于促进犬体细胞克隆技术的应用和发展。 展开更多
关键词 供体细胞代谢 表观遗传修饰 犬克隆 体细胞核移植 PS48 RG108 Scriptaid
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基于3D微流控芯片的水凝胶微胶囊可控生成系统
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作者 金聪 赵旭晟 +4 位作者 郭嘉灏 欧阳立明 姜国俊 顾震 王慧锋 《华东理工大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第6期783-792,共10页
围绕水凝胶微胶囊制备需求,利用3D微纳打印在快速、低成本和高精度等方面的优势,发展了基于3D微流控芯片的微胶囊制备系统,该系统通过构建具有3D微结构的液滴微流控芯片,以双层鞘流生成微胶囊颗粒,并实现微胶囊核壳比例的可控生成。实... 围绕水凝胶微胶囊制备需求,利用3D微纳打印在快速、低成本和高精度等方面的优势,发展了基于3D微流控芯片的微胶囊制备系统,该系统通过构建具有3D微结构的液滴微流控芯片,以双层鞘流生成微胶囊颗粒,并实现微胶囊核壳比例的可控生成。实验结果显示,利用3D微纳打印得到的模具,通过翻模制造微流控芯片,可达到高精度与高平整度,通道尺寸误差均小于2μm。所生成微胶囊的内、外径变异系数均小于3%且一致性优异。细胞增殖实验表明,所生成微胶囊可用于3D细胞培养,证实了所提出方法在规模化细胞培养及再生医学等领域具有广泛应用潜力。 展开更多
关键词 微纳加工 3D微流控芯片 液滴微流控 微胶囊 3D细胞培养
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