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OPA-FMOC联用柱前衍生HPLC法测定水牛角药材中氨基酸含量 被引量：5
1
作者 裴玉 应旭辉 +3 位作者 谢媛媛 罗国安 张金莲 王义明 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期58-63,80,共7页
通过建立HPLC分析方法,测定水牛角药材中氨基酸,为水牛角药材质量标准的制订提供科学依据.通过OPA-FMOC柱前衍生化法,建立了同时测定水牛角药材中18种常见氨基酸的液相方法.色谱柱为Prevail-C18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相A为0.... 通过建立HPLC分析方法,测定水牛角药材中氨基酸,为水牛角药材质量标准的制订提供科学依据.通过OPA-FMOC柱前衍生化法,建立了同时测定水牛角药材中18种常见氨基酸的液相方法.色谱柱为Prevail-C18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相A为0.025mol/L磷酸二氢钠溶液（5mL/L四氢呋喃,40%氢氧化钠溶液调pH7.2）,流动相B为0.025mol/L磷酸二氢钠溶液∶甲醇∶乙腈（体积比为500∶350∶150,pH 7.2）,梯度洗脱;流速0.8mL/min;柱温25℃;检测波长：0~51min为338nm,51min以后为262nm.所测18种氨基酸在各自的高、低浓度范围内线性关系良好;10个批次水牛角药材中,氨基酸平均含量为60%.所建立的氨基酸定量方法结果准确可靠,重现性好,为控制水牛角药材的质量控制,制订水牛角药材质量标准具有参考意义. 展开更多
关键词 高效液相色谱 水牛角药材 柱前衍生化法 氨基酸
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Q层析的加入对人纤维蛋白溶酶原亲和层析回收率的影响
2
作者 岳胜兰 李陶敬 +10 位作者 李娟 彭焱 林连珍 周雁翔 汪菲菲 朱晨 王上 纪德铭 曾双迎 胡勇 周志军 《中国输血杂志》 2025年第10期1382-1388,共7页
目的通过比较人纤维蛋白溶酶原(plasminogen,Pg)全层析工艺加入Q层析步骤前后的过程,样品的质量控制(相对纯度和比活性)和工艺控制(Pg抗原回收率和效价回收率)指标,确定该步骤的加入能否提高Pg亲和层析的回收率。方法在原有的Pg全层析... 目的通过比较人纤维蛋白溶酶原(plasminogen,Pg)全层析工艺加入Q层析步骤前后的过程,样品的质量控制(相对纯度和比活性)和工艺控制(Pg抗原回收率和效价回收率)指标,确定该步骤的加入能否提高Pg亲和层析的回收率。方法在原有的Pg全层析纯化工艺中的Pg亲和层析前加入Q层析步骤,收集Q层析和Pg亲和层析的上样液、流穿液和洗脱液,用凝固法进行凝血因子Ⅱ((FactorⅡ,FⅡ)、凝血因子Ⅶ(FactorⅦ,FⅦ)、凝血因子Ⅷ(FactorⅧ,FⅧ)、凝血因子Ⅸ(FactorⅨ,FⅨ)、凝血因子Ⅹ(FactorⅩ,FⅩ)效价检测,用BCA法进行总蛋白含量检测,用发色底物法进行Pg效价检测,用免疫比浊法进行特定血浆蛋白的含量检测,计算凝血因子的效价回收率,分析凝血因子的流向;计算不同血浆蛋白抗原含量的回收率,分析杂蛋白的分布;计算目标组分中Pg相对纯度和比活性,抗原含量和效价回收率,与原始工艺指标进行比较,判断Q层析步骤的加入对原始工艺的影响,并考察工艺变更后的重复性。结果Q层析去除了过滤后血浆中100%的FⅡ、FⅩ、FⅨ,87.81%的FⅧ、40.44%的FⅦ,其流穿液中残留的FⅦ(53.26%)和FⅧ(13.30%),被Pg亲和层析完全去除。未加Q层析的原始工艺和加Q层析的变更工艺中能检测出的非目标血浆蛋白均主要存在于Pg亲和层析的流穿液中;Q层析流穿液中除了IgM、CER、FNC的抗原回收率稍低外,其它血浆蛋白(IgG、IgA、Pg、AlB、AAT、Fg)的抗原回收率均>90%,与原始工艺的亲和层析上样液的蛋白组成和比例基本一致;与原始工艺中Pg亲和洗脱液的Pg抗原回收率(74.4%)相比,变更工艺中Pg亲和洗脱液的Pg抗原总回收率明显升高(89.97%),与原始工艺中Pg亲和流穿液中IgG(97.48%)和Fg(95.32%)的回收率相比,变更工艺中的Pg亲和流穿液中IgG回收率略有减少(94.60%),Fg回收率不受影响(95.05%)。血浆Pg经过Q层析后流穿液的效价回收率为99.3%,其比活性为0.016 U/mg,相对纯度为0.15%,与原始工艺的Pg亲和层析上样液的指标基本一致,说明Q层析对Pg后续的亲和层析无影响;与3批原始工艺的Pg抗原回收率(66.49±1.02)%相比,加入Q层析后5次变更工艺批的亲和层析洗脱液中Pg抗原回收率(77.43±4.43)%有明显提高,效价回收率为(86.80±4.28)%,相对纯度为(81.99±1.25)%,比活性为(8.679±1.073)U/mg,工艺重复性好。结论Q层析的加入,能提高全层析工艺中Pg亲和层析的回收率。 展开更多
关键词 人纤维蛋白溶酶原 全层析工艺 相对纯度 效价回收率 抗原回收率 比活性
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温度对高效液相色谱分离选择性的影响 被引量：8
3
作者 成洪达 邢占芬 +1 位作者 李彤 张维冰 《福建分析测试》 CAS 2009年第1期16-19,共4页
温度是影响液相色谱分析的重要因素,但是其作用却一直没有得到很好应用。本文在液相色谱基础上构建了一套适合高温分析的色谱系统,并通过对苯同系物及芳香烃的分离,考察了温度对色谱分离选择性的影响。结果表明,对于结构差别大、保留不... 温度是影响液相色谱分析的重要因素,但是其作用却一直没有得到很好应用。本文在液相色谱基础上构建了一套适合高温分析的色谱系统,并通过对苯同系物及芳香烃的分离,考察了温度对色谱分离选择性的影响。结果表明,对于结构差别大、保留不同机理的物质,改变温度可以显著改善分离的选择性。 展开更多
关键词 液相色谱 温度 选择性
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薄层扫描法分析黄芪中黄芪甲苷含量 被引量：3
4
作者 张崇禧 王艳芳 +3 位作者 蔡恩博 丛登立 鞠会艳 郑友兰 《资源开发与市场》 CAS CSSCI 2010年第9期769-772,共4页
研究不同产地、不同生长期野生与栽培黄芪中黄芪甲苷含量的变化,确定其最佳采收期,为更好地开发利用黄芪资源提供理论依据。建立其分析方法,为黄芪的现代质量评价体系提供参考数据,扩大黄芪药源。采用薄层扫描法,结果表明黄芪甲苷在1.1... 研究不同产地、不同生长期野生与栽培黄芪中黄芪甲苷含量的变化,确定其最佳采收期,为更好地开发利用黄芪资源提供理论依据。建立其分析方法,为黄芪的现代质量评价体系提供参考数据,扩大黄芪药源。采用薄层扫描法,结果表明黄芪甲苷在1.1—5.5μg范围内具有良好的线性关系,R2=0.998,n=3;平均回收率(n=3)为100.50%,RSD=2.19%。吉林省临江种植基地10月20日采收的黄芪中黄芪甲苷含量最高为1.195%,10月15日采收的黄芪甲苷含量为1.164%。不同产地的黄芪中黄芪甲苷的含量为甘肃>吉林临江>内蒙古>黑龙江>吉林长春>河北。黄芪药材在贮存6个月之后的黄芪甲苷含量有所下降。该方法简便、精密度高、结果准确可靠,并确立了黄芪药材的最佳采收期为3年生10月中下旬。种植基地黄芪药材可代替野生黄芪药材使用,为黄芪药材的药用资源和深入开发利用提供了基础依据。 展开更多
关键词 薄层扫描 黄芪 黄芪甲苷
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川西獐牙菜甲醇提取物的气相色谱-质谱分析 被引量：2
5
作者 江莉 臧立华 +2 位作者 刘广华 向凤宁 夏光敏 《山东大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期117-119,共3页
研究川西獐牙菜甲醇提取物的成分组成.川西獐牙菜全草经甲醇浸泡,超声波震荡提取后用气相色谱-质谱联用技术进行化学成分的分离鉴定,结合计算机检索技术,鉴定它们的结构,应用色谱峰面积归一法测定各组分的质量百分含数.共分离出34个色谱... 研究川西獐牙菜甲醇提取物的成分组成.川西獐牙菜全草经甲醇浸泡,超声波震荡提取后用气相色谱-质谱联用技术进行化学成分的分离鉴定,结合计算机检索技术,鉴定它们的结构,应用色谱峰面积归一法测定各组分的质量百分含数.共分离出34个色谱峰,鉴定了其中的26个组分,占总含量的97.3%.主要组分为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四烷六烯27.2%,棕榈酸14.6%,十八烷基三烯12.1%,油酸6.2%,香豆酮5.4%等.分析鉴定结果可作为川西獐牙菜藏药材的初步定性依据. 展开更多
关键词 川西獐牙菜 甲醇提取物 超声提取 气相色谱-质谱
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双波长薄层扫描法测定大山楂咀嚼片中熊果酸的含量 被引量：4
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作者 熊慧敏 《海峡预防医学杂志》 CAS 2003年第3期46-47,共2页
[目的 ]探讨测定大山楂咀嚼片中熊果酸含量的方法。[方法 ]采用双波长薄层扫描法。[结果 ]该法回收率10 0 86% ,RSD =1 90 %。[结论 ]本方法操作简单方便 ,结果可靠 。
关键词 薄层扫描法 大山楂咀嚼片 熊果酸
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连续流层析在单抗亲和层析中的应用
7
作者 秦宇 陈梅梅 +2 位作者 蒋波 魏莹 李盈淳 《药物生物技术》 CAS 2018年第5期395-401,共7页
亲和层析作为单克隆抗体分离纯化的关键步骤,其工艺设计对生产效率和成本具有重要影响。对比批次层析和连续流层析两种工艺模式,以期提高亲和层析填料的使用效率,降低生产成本。采用GE公司KTA PCC设备,对比考察两款亲和层析介质在批... 亲和层析作为单克隆抗体分离纯化的关键步骤,其工艺设计对生产效率和成本具有重要影响。对比批次层析和连续流层析两种工艺模式,以期提高亲和层析填料的使用效率,降低生产成本。采用GE公司KTA PCC设备,对比考察两款亲和层析介质在批次层析及连续流层析两种生产模式下产品的关键质量属性,如聚合物、降解物、电荷异构体、工艺杂质残留等,以及关键工艺属性,如回收率、生产效率、填料量等。连续流层析工艺稳定,纯化回收率与批次层析接近。此外,尽管多根层析柱串联上样,洗脱中间体产品关键质量属性无明显差异,但生产效率明显提高,填料用量显著减少。与批次层析工艺相比,连续流层析可显著减少亲和填料的用量,减少缓冲液的消耗,显著提高生产效率,降低生产成本。 展开更多
关键词 亲和层析 单克隆抗体 关键质量属性 连续流层析 批次层析 生产效率 生产成本
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