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化学发光法测定脑组织中-氧化氮合成酶活性 被引量：4
1
作者 徐顺清 舒柏华 +1 位作者 周宜开 朱遂强 《中国卫生检验杂志》 CAS 1997年第3期131-133,共3页
在NADPH等辅助因子的参与下，一氧化氛合成酶（NOS）能催化L一精氨酸生成一氧化氮（NO）。NO与过氧化氢反应生成过氧亚硝酸，过氧亚硝酸能与鲁米诺产生化学发光反应，当NO浓度为0.1～1000pmol／L时，发光强度与NO量成正比。根据这一原... 在NADPH等辅助因子的参与下，一氧化氛合成酶（NOS）能催化L一精氨酸生成一氧化氮（NO）。NO与过氧化氢反应生成过氧亚硝酸，过氧亚硝酸能与鲁米诺产生化学发光反应，当NO浓度为0.1～1000pmol／L时，发光强度与NO量成正比。根据这一原理，利用化学发光分析建立了一种新的NOS活性测定方法。用该方法测量10只大鼠脑组织中的NOS活性，其NOS活性为28．3±6．9pmolNO／mg蛋白／min。 展开更多
关键词 一氧化氮合成酶 酶活性 化学发光
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银染端粒重复序列检测端粒酶活性方法的研究
2
作者 金礼吉 戴峰 +1 位作者 杨桦 安利佳 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第2期4-7,共4页
为了建立一种便于检测端粒酶活性的方法 ,在Kim等开发的TRAP法的基础上作了一些改进。即把细胞提取液与TS引物混合 ,30℃保温 30min以延伸TS引物之后经过酚 /氯仿抽提、乙醇沉淀 ,再做PCR扩增。PCR产物经 12 %非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ... 为了建立一种便于检测端粒酶活性的方法 ,在Kim等开发的TRAP法的基础上作了一些改进。即把细胞提取液与TS引物混合 ,30℃保温 30min以延伸TS引物之后经过酚 /氯仿抽提、乙醇沉淀 ,再做PCR扩增。PCR产物经 12 %非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,用银染法来显示电泳结果。结果表明该方法可以有效去除抑制Taq酶活性的因素 ,得到清晰的 6bp阳性条带 ,具有特异性好、灵敏度高、易操作、无放射性危害等优点。 展开更多
关键词 端粒DNA 端粒酶 银染 酶性 检测方法 肿瘤细胞
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离子对反相HPLC测定小鼠骨髓BFU-E、CFU-E中PRPP合成酶活性 被引量：1
3
作者 刘立鹏 卢义钦 刘俊凡 《生命科学研究》 CAS CSCD 2000年第2期124-129,共6页
采用离子对反相高效液相色谱法 ( IPr HPLC)的单液等度洗脱 ,测定了小鼠骨髓红系爆增性集落形成单位 ( BFU- Es)与红系集落形成单位 ( CFU- Es)的 PRPP合成酶活性 .方法学研究表明 ,加入离子对试剂硫酸氢四丁基铵 ( TBAHS)后 ,ADP谱峰... 采用离子对反相高效液相色谱法 ( IPr HPLC)的单液等度洗脱 ,测定了小鼠骨髓红系爆增性集落形成单位 ( BFU- Es)与红系集落形成单位 ( CFU- Es)的 PRPP合成酶活性 .方法学研究表明 ,加入离子对试剂硫酸氢四丁基铵 ( TBAHS)后 ,ADP谱峰分离完全 ,其反应增加量易于计算 .本法的批内变异系数平均值为 - 2 .30 %～ - 1 .0 6%与 1 .0 6%～ 2 .30 % ,平均相对偏差为 0 .81 %～ 1 .74% ,回收率为 93.9%～ 98.5% ,能达到操作简便、灵敏和准确的要求 .采用本法测得 2 0只正常昆明小鼠的 BFU- E和 CFU- E中该酶活性各为 ( 0 .563± 0 .0 2 7)μmol/( min·g· m L- 1)与 ( 0 .41 6± 0 .0 2 6) μmol/( min·g·m L- 1) . 展开更多
关键词 红系祖细胞 PRPP合成酶 IPrHPLC 核苷酸代谢
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用染料配体亲和色谱纯化DNA聚合酶α
4
作者 徐德明 李碧羽 陈石根 《贵阳医学院学报》 CAS 1994年第4期323-326,共4页
将７７１２系正常小鼠的胸腺、肝、脾等制成匀浆，经３７０００×ｇ离心，所得上清液用平衡缓冲液透析后，通过三嗪蓝色染料－琼脂糖（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）亲和色谱，用氯化钠溶液梯度洗脱，获得较纯的ＤＮＡ聚合酶α，比活性... 将７７１２系正常小鼠的胸腺、肝、脾等制成匀浆，经３７０００×ｇ离心，所得上清液用平衡缓冲液透析后，通过三嗪蓝色染料－琼脂糖（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）亲和色谱，用氯化钠溶液梯度洗脱，获得较纯的ＤＮＡ聚合酶α，比活性为３４０Ｕ／ｍｇ，提纯倍数为１８．７，回收率为６９．２％，表明：采用染料配体亲和色谱从匀浆中分离纯化ＤＮＡ聚合酶α，其所得产率高，方法简便快速，色谱柱可反复使用。 展开更多
关键词 聚合酶Ⅱ类 亲和色谱法 DNA 染料
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