应用亲和层析制备萝卜叶溶菌酶 被引量：7

1

作者 卢顺舵 徐凤彩 李明启 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1995年第4期78-81,共4页

应用脱氨几丁质亲和层析直接从萝卜叶粗提液中制备溶菌酶，所得精酶比活力为４２１６２Ｕ／ｍｇ蛋白，活力回收为６５％，得率为１Ｏ．６μｇ／ｇ鲜叶，纯化倍数为７７．４倍。效果优于应用几丁质、ＣＭ－几丁质的纯化效果。

关键词 萝卜 叶溶菌酶 脱氨几丁质 亲和层析

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植物叶片超氧物歧化酶活性及其从象草叶片的提取 被引量：5

2

作者 卢少云 郭振飞 李明启 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期92-96,共5页

测定了华南农业大学校园内１８种常见植物叶片的超氧物歧化酶活性，发现鸡蛋花、白兰花、鸡蛋果、羊蹄甲和象草叶片的酶活性较高，以每ｇ鲜重计大于４００单位。经过热处理、硫酸铵沉淀和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等步骤，部分提纯了象草... 测定了华南农业大学校园内１８种常见植物叶片的超氧物歧化酶活性，发现鸡蛋花、白兰花、鸡蛋果、羊蹄甲和象草叶片的酶活性较高，以每ｇ鲜重计大于４００单位。经过热处理、硫酸铵沉淀和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等步骤，部分提纯了象草叶片超氧物歧化酶。 展开更多

关键词 植物叶片 超氧物歧化酶 象草

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克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶发酵条件研究 被引量：19

3

作者 陈宏文 王蔚 +1 位作者 方柏山 胡宗定 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期621-627,共7页

研究了克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶(甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶、甘油脱水酶)的发酵条件。研究各种碳源、无机氮源、有机氮源及无机盐对产酶的影响,应用均匀设计、神经网络和遗传算法优化发酵培养基组成,结果为(gL-1):甘油30... 研究了克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶(甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶、甘油脱水酶)的发酵条件。研究各种碳源、无机氮源、有机氮源及无机盐对产酶的影响,应用均匀设计、神经网络和遗传算法优化发酵培养基组成,结果为(gL-1):甘油30、KCl 1.6、NH4Cl 6.7、CaCl2 0.28、酵母浸膏2.8。在温度37C、初始pH 7.0、摇床转速200rmin-1和接种量5%条件下,发酵24h,无细胞抽提液中甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱水酶活力(U·mg-1)分别为9.16、18.72、0.48,发酵34h,发酵液中1,3-丙二醇(1,3-PD)最大浓度为7.96gL-1。代谢过程中关键酶酶活与1,3-PD峰值出现时间不一致,且提早于1,3-PD峰值的出现。此外,结果表明优化后的培养基去除了多种微量元素,克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇关键酶可以在微氧条件下进行。 展开更多

关键词 1 3-丙二醇 甘油脱氢酶 1 3-丙二醇氧化还原酶 甘油脱水酶 发酵 优化

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碳酸酐酶的生物学研究进展 被引量：18

4

作者 张蓬 李学军 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期359-361,共3页

碳酸酐酶（ＣＡ）是一组参与体内酸碱平衡调节及离子交换等过程的含锌金属酶。迄今至少发现８种同工酶，各同工酶的催化活性、生理功能及其对抑制剂的敏感性有明显差异。其中ＣＡⅡ、Ⅳ分布广泛，功能多元化。ＣＡⅡ的生物学结构研究表... 碳酸酐酶（ＣＡ）是一组参与体内酸碱平衡调节及离子交换等过程的含锌金属酶。迄今至少发现８种同工酶，各同工酶的催化活性、生理功能及其对抑制剂的敏感性有明显差异。其中ＣＡⅡ、Ⅳ分布广泛，功能多元化。ＣＡⅡ的生物学结构研究表明，Ｈ９４、Ｈ９６、Ｔ１９９、Ｈ６４、Ｌ１９８等是酶催化活性的主要氨基酸残基，其中１９８位残基还与酶和抑制剂的亲和力、酶在催化ＣＯ２水化反应中的ｐＨ依赖性有关。此外，类固醇及某些表面活性剂影响ＣＡ功能。 展开更多

关键词 碳酸酐酶 生物学特性

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褐藻胶裂解酶AlyE2酶学性质研究 被引量：3

5

作者 郑智 张红秀 +1 位作者 刘伟治 律倩倩 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期44-50,共7页

本研究通过重组表达,亲和层析后利用PreScission蛋白酶切除标签,纯化获得了高纯度的重组AlyE2蛋白。AlyE2对polyG表现出明显的降解偏好性,产物的聚合度(DP)为3~5。AlyE2在不同温度、pH、NaCl浓度条件下的活性分析表明,其最适温度为30℃,... 本研究通过重组表达,亲和层析后利用PreScission蛋白酶切除标签,纯化获得了高纯度的重组AlyE2蛋白。AlyE2对polyG表现出明显的降解偏好性,产物的聚合度(DP)为3~5。AlyE2在不同温度、pH、NaCl浓度条件下的活性分析表明,其最适温度为30℃,在20℃时活性为最高活性的70%;最适pH为7.5,且在pH=7.0~9.0的弱碱性范围均保持较高的活性;AlyE2的活性和热稳定性随着NaCl浓度的增加而升高,在1.0 mol/L NaCl条件下活性最高,并且当继续提高NaCl浓度至2.0 mol/L时,AlyE2的活性几乎不受影响;同时,在1.0~2.0 mol/L NaCl条件下AlyE2的T_(m)提高8~14℃。 展开更多

关键词 褐藻胶裂解酶 PL7家族 polyG特性 NaCl浓度 热稳定性

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溶剂极性对碳酸酐酶热变性的影响 被引量：2

6

作者 傅亚珍 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期471-474,共4页

以差示扫描量热技术为手段研究了具不同碳氢链长度及不同浓度的醇－水溶剂对碳酸酐酶热变性温度及热变性焓的影响，以探讨两性分子对蛋白质构象及热稳定性的影响。结果表明，随着甲醇、乙醇及丙醇各自浓度的增加碳酸酐酶的变性温度降低... 以差示扫描量热技术为手段研究了具不同碳氢链长度及不同浓度的醇－水溶剂对碳酸酐酶热变性温度及热变性焓的影响，以探讨两性分子对蛋白质构象及热稳定性的影响。结果表明，随着甲醇、乙醇及丙醇各自浓度的增加碳酸酐酶的变性温度降低；在相同的醇浓度下随着醇的碳氢链的加长，碳酸酐酶的变性温度明显下降；当醇在低浓度，例如１０％时，碳酸酐酶的热变性焓比在纯缓冲液中要高。而在高浓度时其变性焓比在纯缓冲液中要低，且随着碳氢链的加长和醇浓度的增加其变性焓的降低更趋明显。 展开更多

关键词 碳酸酐酶 醇 热变性 溶剂

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不同亚型ZnMT使脱金属碳酸酐酶复活的比较研究 被引量：2

7

作者 帖建科 李令媛 +1 位作者 茹炳根 慈云祥 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第1期78-82,共5页

通过荧光探针、酶的活力测定及对金属硫蛋白（ＭＴ）分子中金属与巯基配位键的特征吸收检测，比较研究了锌诱导兔肾不同亚型ＺｎＭＴ使脱金属碳酸酐酶（ＡｐｏＣＡ）复活的能力大小。结果表明，不同亚型ＺｎＭＴ对ＡｐｏＣＡ具有不同的... 通过荧光探针、酶的活力测定及对金属硫蛋白（ＭＴ）分子中金属与巯基配位键的特征吸收检测，比较研究了锌诱导兔肾不同亚型ＺｎＭＴ使脱金属碳酸酐酶（ＡｐｏＣＡ）复活的能力大小。结果表明，不同亚型ＺｎＭＴ对ＡｐｏＣＡ具有不同的反应活性，ＭＴ１比ＭＴ_２对于ＡｎｏＣＡ的复活具有更强的反应活性，此结论与我们在研究不同亚型ＭＴ清除自由基时的结果相一致。这两种亚型ＭＴ在反应活性上的差异，很可能与其在生物体内功能上的分化密切相关。 展开更多

关键词 金属硫蛋白 结构与功能 碳酸酐酶

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溶剂极性及盐酸胍对碳酸酐酶构象的影响 被引量：3

8

作者 傅亚珍 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期295-298,共4页

以紫外荧光光谱为检测手段，比较研究了溶剂极性及盐酸胍对碳酸酐酶构象的影响。结果表明，当盐酸胍浓度小于１ｍｏｌ／Ｌ时酶呈天然构象，１．５ｍｏｌ／Ｌ－２．０ｍｏｌ／Ｌ的盐酸胍导致碳酸酐酶呈稳定的中间态构象，大于３ｍｏｌ／... 以紫外荧光光谱为检测手段，比较研究了溶剂极性及盐酸胍对碳酸酐酶构象的影响。结果表明，当盐酸胍浓度小于１ｍｏｌ／Ｌ时酶呈天然构象，１．５ｍｏｌ／Ｌ－２．０ｍｏｌ／Ｌ的盐酸胍导致碳酸酐酶呈稳定的中间态构象，大于３ｍｏｌ／Ｌ的盐酸胍致该酶呈伸展构象；而乙醇不能导致该酶产生稳定的中间态构象。１ｍｏｌ／Ｌ和３ｍｏｌ／Ｌ的甲醇以及３ｍｏｌ／Ｌ的乙醇对盐酸胍致碳酸酐酶中间态的影响不大，甲醇略使致中间态的盐酸胍浓度下降，乙醇略使之上升。 展开更多

关键词 碳酸酐酶 构象 盐酸胍 溶剂极性

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碳酸酐酶构象变化的热力学研究 被引量：1

9

作者 刘云娜 韩布兴 谈夫 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第15期1628-1630,共3页

采用示差扫描量热法研究了溶液 pH值的变化对牛红细胞碳酸酐酶结构稳定性的影响 .通过热力学分析得到了该酶的构象变化随 pH变化的规律 ,并进行了初步讨论 .实验结果也提供了该酶结构方面的有价值信息 ,在 pH =5 .2 6～ 9 0 4范围内 ,DS... 采用示差扫描量热法研究了溶液 pH值的变化对牛红细胞碳酸酐酶结构稳定性的影响 .通过热力学分析得到了该酶的构象变化随 pH变化的规律 ,并进行了初步讨论 .实验结果也提供了该酶结构方面的有价值信息 ,在 pH =5 .2 6～ 9 0 4范围内 ,DSC热谱图上出现了 2个独立的吸热转变峰 ,表明酶分子中存在 2个结构域 ,而且 展开更多

关键词 碳酸酐酶 构象 示差扫描量热法 热力学

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杜氏盐藻碳酸酐酶N/C结构域耐盐性的研究 被引量：1

10

作者 杨爽 蒋彦 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期949-954,共6页

为研究杜氏盐藻碳酸酐酶的两个结构域的耐盐性,将杜氏盐藻碳酸酐酶的两个串联结构域分别表达与纯化,利用酶学方法和光谱学方法分别研究这两个结构域各自的活性及其对盐的耐受性.研究发现,N端结构域不具有催化活性,仅有C端结构域具有活性... 为研究杜氏盐藻碳酸酐酶的两个结构域的耐盐性,将杜氏盐藻碳酸酐酶的两个串联结构域分别表达与纯化,利用酶学方法和光谱学方法分别研究这两个结构域各自的活性及其对盐的耐受性.研究发现,N端结构域不具有催化活性,仅有C端结构域具有活性,而且其活性随着盐浓度的增加而增加,这同杜氏盐藻碳酸酐酶在广泛的盐浓度内的活性变化趋势一致.光谱学方法发现,随着盐浓度的增加,C端结构域的二级结构和三级结构并不发生显著变化,活性中心结构逐渐松弛,从而增加了C端结构域活性中心的活力,提高了盐藻碳酸酐酶的活性. 展开更多

关键词 杜氏盐藻 碳酸酐酶 耐盐性 结构域 酶学 光谱学

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碳酸脱水酶催化CO_2可逆水化机制的理论研究

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作者 曹泽星 张乾二 +1 位作者 MiquelSolà MiquelDuran 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第12期1292-1295,共4页

碳酸脱水酶(Carbonic anhydrase,CA)是一种含二价Zn的金属酶,对CO_2可逆水化这一重要过程具有极高催化活性.CA在CO_2可逆水化过程中的生理活性与催化机制是酶学、生物学和生物化学等学科关心的重要课题.CA催化CO_2可逆水化整体上包括以... 碳酸脱水酶(Carbonic anhydrase,CA)是一种含二价Zn的金属酶,对CO_2可逆水化这一重要过程具有极高催化活性.CA在CO_2可逆水化过程中的生理活性与催化机制是酶学、生物学和生物化学等学科关心的重要课题.CA催化CO_2可逆水化整体上包括以下4个过程: 展开更多

关键词 碳酸脱水酶 可逆水化 二氧化碳 催化

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