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米曲霉A-1植酸酶快速纯化及酶学性质 被引量：1
1
作者 何海燕 张健 覃拥灵 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第1期119-122,共4页
为进一步了解米曲霉A-1植酸酶,利用超滤及Mono Q阴离子纯化柱纯化,分离出米曲霉A-1的植酸酶Phy A1,分子量约为45kDa,Phy A1在pH 5.5时酶活最高,pH 4.0～9.0较稳定,最适温度为45℃,在60℃以下内切酶稳定性较好。Mg2+、Mn2+对Phy A1植酸... 为进一步了解米曲霉A-1植酸酶,利用超滤及Mono Q阴离子纯化柱纯化,分离出米曲霉A-1的植酸酶Phy A1,分子量约为45kDa,Phy A1在pH 5.5时酶活最高,pH 4.0～9.0较稳定,最适温度为45℃,在60℃以下内切酶稳定性较好。Mg2+、Mn2+对Phy A1植酸酶活性有较好的激活作用。以植酸钠为底物,应用Lineweaver-Burk双倒数作图法得到米氏常数Km为42μmol/L。 展开更多
关键词 米曲霉 植酸酶 纯化 酶学特性
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蜡状芽孢杆菌PX16的筛选及产β-葡萄糖苷酶的条件优化 被引量：6
2
作者 何海燕 秦燕娜 +3 位作者 麻琼英 林玲 蓝青萍 覃拥灵 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2014年第2期119-122,共4页
为丰富产β-葡萄糖苷酶的微生物菌种资源,利用β-葡萄糖苷酶平板筛选法,从原始森林腐木土壤中筛选得到1株微生物菌种PX16,并对其进行了鉴定和产β-葡萄糖苷酶的条件优化试验。结果表明:PX16为蜡状芽孢杆菌,通过正交试验优化发酵条件,即... 为丰富产β-葡萄糖苷酶的微生物菌种资源,利用β-葡萄糖苷酶平板筛选法,从原始森林腐木土壤中筛选得到1株微生物菌种PX16,并对其进行了鉴定和产β-葡萄糖苷酶的条件优化试验。结果表明:PX16为蜡状芽孢杆菌,通过正交试验优化发酵条件,即培养基初始pH为8、接种量3%、培养温度34℃和培养时间84h时,PX16产β-葡萄糖苷酶的酶活力达11.93U/mL。PX16蜡状芽孢杆菌产β-葡萄糖苷酶的酶活力较高,在生物质能源、纺织等行业具有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 蜡状芽孢杆菌 Β-葡萄糖苷酶 筛选 发酵条件优化
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丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究及应用 被引量：7
3
作者 张梅 朱柞铭 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第3期240-244,共5页
丝氨酸蛋白酶抑制剂（ｓｅｒｐｉｎ）是一类结构、序列同源的蛋白酶抑制剂，它是体内许多蛋白水解级联反应的调节因子，其遗传性结构或分泌异常将导致许多疾病．因此对于其结构及作用机理的研究将为临床应用提供依据．
关键词 丝氨酸蛋白酶 抑制剂 结构 临床应用
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表面电荷突变与胰蛋白酶底物专一性的改造 被引量：3
4
作者 文华 张庭芳 张龙翔 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期649-654,共6页
分别利用酶切重组和“３＋１”引物ＰＣＲ定点突变的方法构建了三个胰蛋白酶表面电荷双突变体：Ｒ６２Ｄ＋Ｋ９７Ｅ、Ｒ６２Ｄ＋Ｋ１７５Ｅ和Ｋ９７Ｅ＋Ｋ１７５Ｅ．对三者在Ｅ．ｃｏｌｉＸ－９０菌中的表达产物进行了动力学测定，分别... 分别利用酶切重组和“３＋１”引物ＰＣＲ定点突变的方法构建了三个胰蛋白酶表面电荷双突变体：Ｒ６２Ｄ＋Ｋ９７Ｅ、Ｒ６２Ｄ＋Ｋ１７５Ｅ和Ｋ９７Ｅ＋Ｋ１７５Ｅ．对三者在Ｅ．ｃｏｌｉＸ－９０菌中的表达产物进行了动力学测定，分别得到了三种双突变体在两种ｐＨ条件下，水解ＴＡＭＥ、ＴＬＭＥ两种底物的动力学数据．结果表明，Ｒ６２Ｄ＋Ｋ１７５Ｅ和Ｋ９７Ｅ＋Ｋ１７５Ｅ在ｐＨ６．８５时，对两种底物的催化活性与野生型相比下降了２～３个数量级，当ｐＨ升高至８．８５时，它们的活性基本丧失；双突变体Ｒ６２Ｄ＋Ｋ９７Ｅ虽然催化活性也有所降低，但随着ｐＨ的升高，它对Ｌｙｓ底物的特异性（选择性系数２５倍于Ａｒｇ底物）转变为对Ａｒｇ底物略高的特异性，基本符合分子设计．实验结果还表明，各种双突变体催化活性的降低主要是由于酶和底物的亲和力降低引起的． 展开更多
关键词 胰蛋白酶突变体 底物专一性 表面电荷
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