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DNA依赖蛋白激酶研究进展 被引量:3
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作者 江国春 袁丽珍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第6期531-534,共4页
DNA依赖蛋白激酶由Ku 异二聚体和DNAPKcs 组成, 结合Ku 蛋白后, DNAPK激酶活性激活, DNA依赖蛋白激酶具有多功能性, 参与DNA修复、基因重组以及复制、转录等多种细胞学过程.
关键词 DNA修复 DNA-PK 生化特性 基因重组 辐射损伤e
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蛋白激酶的相互作用促进τ的阿尔茨海默样磷酸化 被引量:1
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作者 王建枝 GRUNDKEIQBALI SMITHAIQBALK 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第6期574-577,共4页
cAMP依赖性蛋白激酶(PKA) 的预处理可显著增强糖原合成酶激酶3 (GSK3) 对τ蛋白的磷酸化作用.将磷酸化的τ蛋白经胰蛋白酶消化, FeCl3 亲和柱分离及C18 反相高压液相层析纯化后, 再用高压电泳, 手工E... cAMP依赖性蛋白激酶(PKA) 的预处理可显著增强糖原合成酶激酶3 (GSK3) 对τ蛋白的磷酸化作用.将磷酸化的τ蛋白经胰蛋白酶消化, FeCl3 亲和柱分离及C18 反相高压液相层析纯化后, 再用高压电泳, 手工Edman 降解及自动氨基酸序列分析等技术, 对其磷酸化位点进行鉴定. 结果发现: GSK3 可使PKA 预处理的τ至少在丝氨酸(Ser) 195 , Ser198 , Ser199 , Ser202 , Ser235 , Ser262 , Ser356 , Ser404 , 苏氨酸( Thr) 205 和Thr231 等10 个位点发生磷酸化. 其中Ser198 , Ser199 , Ser202 , Ser235 , Ser262 , Ser404 , Thr205和Thr231 为Alzheimer 病(AD) τ蛋白的异常磷酸化位点. 上述磷酸化作用高度抑制τ的生物学活性, 提示:ADτ的生物学功能的抑制与Ser198 , Ser199 , Ser202 , Ser235 , Ser262 , Thr205 和Thr231 的磷酸化密切相关, PKA 和GSK3 的相互作用可能在AD 展开更多
关键词 Τ蛋白 阿尔茨海默氏病 异常磷酸化 PKA GSK-3
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PKC对小鼠受精卵发育的调控作用 被引量:8
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作者 刘莹 张杰 +2 位作者 武迪迪 宗志红 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第3期368-371,共4页
为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 ... 为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1 展开更多
关键词 受精卵 早期发育 MPF PK TPA 调控作用
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p38蛋白激酶在热损伤诱导单核细胞Raw264.7凋亡中的作用 被引量:3
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作者 张璐 张琳 +1 位作者 姜勇 赵克森 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期987-991,共5页
为探讨p38蛋白激酶在热损伤诱导单核细胞株Raw 264.7凋亡中的调控作用.应用流式细胞检测术、透射电镜技术、DNA 凝胶电泳、Western blot、激酶活性测定检测p38蛋白激酶在热损伤诱导细胞凋亡中的作用.结... 为探讨p38蛋白激酶在热损伤诱导单核细胞株Raw 264.7凋亡中的调控作用.应用流式细胞检测术、透射电镜技术、DNA 凝胶电泳、Western blot、激酶活性测定检测p38蛋白激酶在热损伤诱导细胞凋亡中的作用.结果显示,热损伤后5 m in,p38即被激活,30 m in 时达到最高水平,然后逐渐下降,2 h 达基底水平;热损伤后3 h 细胞凋亡率开始明显增高,p38蛋白激酶活性增高是细胞凋亡发生之前的事件;进一步观察了p38特异性抑制剂FHPI对细胞凋亡的影响,发现FHPI可以抑制热损伤诱导的细胞凋亡.上述结果提示,p38参与介导热损伤诱导的Raw 264.7细胞凋亡. 展开更多
关键词 P38蛋白激酶 热损伤 细胞凋亡 调控
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PKC_γ过表达诱导C_3H_(10)T_(1/2)细胞生长失控的初探 被引量:2
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作者 赵霞 柳惠图 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第6期569-573,共5页
通过DNA 重组构建蛋白激酶Cγ(PKCγ) 亚类的重组质粒并经基因转染技术和DNA 印迹、蛋白质印迹与PKC活性分析, 获得了过表达PKCγ的C3 H10 T1/2 细胞———NCP4 . NCP4 细胞生长速率提高, 流式... 通过DNA 重组构建蛋白激酶Cγ(PKCγ) 亚类的重组质粒并经基因转染技术和DNA 印迹、蛋白质印迹与PKC活性分析, 获得了过表达PKCγ的C3 H10 T1/2 细胞———NCP4 . NCP4 细胞生长速率提高, 流式细胞光度术检测表明, NCP4 细胞G1 期百分率下降, S期和G2 + M 期百分率升高, 与对照组细胞相比, 血清依赖性明显下降, 贴壁依赖性降低, 在软琼脂中形成小集落, 出现部分转化表型. 进一步检测, 首次观察到NCP4 细胞中癌基因csis 表达明显增强, 这可能是NCP4 细胞血清依赖性下降的分子机理之一. 实验表明, 在正常C3 H10 T1/2 细胞中PKCγ的过表达可直接导致细胞增殖加速并可诱导出现部分转化特征. 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞转化 PKCΓ C3H10T1/2 调控
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