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重组人蛋白激酶CK 2α亚基的原核表达、纯化与鉴定 被引量：17
1
作者 刘新光 梁念慈 马涧泉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第1期17-22,共6页
将构建成功的人蛋白激酶 CK2 α亚基 c DNA的重组质粒 ,转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,IPTG诱导后获特异高效表达 ,表达蛋白占菌体总蛋白的 30 % ,但大多数重组蛋白以不溶形式存在 .表达产物依次进行 DE- 5 2、P1 1磷酸纤维素和肝素 - Sep... 将构建成功的人蛋白激酶 CK2 α亚基 c DNA的重组质粒 ,转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,IPTG诱导后获特异高效表达 ,表达蛋白占菌体总蛋白的 30 % ,但大多数重组蛋白以不溶形式存在 .表达产物依次进行 DE- 5 2、P1 1磷酸纤维素和肝素 - Sepharose柱层析分离 ,最后从 30 9mg可溶性蛋白质中得到 6.1 mg纯化蛋白 . SDS- PAGE显示纯化的蛋白质为一分子量 4 2 k D的单一蛋白带 .Western- blot的结果证明 :纯化的表达产物与抗人 CK2α抗体可发生特异性免疫反应 . CK2α和β亚基等摩尔分子混合可组成有完全活性的全酶 .重组的 CK2全酶的性质和功能与该酶的已知特性一致 .这些结果证明重组蛋白是人蛋白激酶 CK2 展开更多
关键词 人蛋白激酶CK2α亚基 原核表达 纯化 鉴定
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肌酸激酶同工酶及其亚型的快速测定方法 被引量：1
2
作者 王玻 杨振华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第2期173-176,178,共5页
用琼脂糖凝胶电泳法同时测定肌酸激酶（ＣＫ）同工酶及其亚型（ＣＫ－ＭＢ亚型、ＣＫ－ＭＭ亚型），其特点是以不连续缓冲液体系为基础，在较低电压条件下，３０ｍｉｎ完成分离过程，能同时报告ＣＫ－ＭＢ同工酶，ＣＫ－ＭＢ＿１，ＣＫ... 用琼脂糖凝胶电泳法同时测定肌酸激酶（ＣＫ）同工酶及其亚型（ＣＫ－ＭＢ亚型、ＣＫ－ＭＭ亚型），其特点是以不连续缓冲液体系为基础，在较低电压条件下，３０ｍｉｎ完成分离过程，能同时报告ＣＫ－ＭＢ同工酶，ＣＫ－ＭＢ＿１，ＣＫ－ＭＢ＿２以及ＣＫ－ＭＭ＿１，ＣＫ－ＭＭ＿２，ＣＫ－ＭＭ＿３的百分含量。ＣＫ－ＭＢ和ＣＫ－ＭＭ同工酶的亚型最低检出限分别为２．２Ｕ／Ｌ，３．２Ｕ／Ｌ。该法具有快速、灵敏度高、重复性好、无需特殊仪器、操作简单等优点。 展开更多
关键词 肌酸激酶 同工酶 亚型 测定
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磷酸－Tyr－Sepharose吸附法测定HL－60细胞中磷脂酰肌醇－3－激酶
3
作者 黄才 梁念慈 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第4期495-497,共3页
磷酸－Ｔｙｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ吸附法测定ＨＬ－６０细胞中磷脂酰肌醇－３－激酶黄才，梁念慈（广东医学院医用生化研究所，湛江５２４０２３）磷脂酰肌醇－３－激酶（ＰＩ－３－Ｋ）催化磷脂酰肌醇（ＰＩ）和磷脂酰肌醇－４－磷酸... 磷酸－Ｔｙｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ吸附法测定ＨＬ－６０细胞中磷脂酰肌醇－３－激酶黄才，梁念慈（广东医学院医用生化研究所，湛江５２４０２３）磷脂酰肌醇－３－激酶（ＰＩ－３－Ｋ）催化磷脂酰肌醇（ＰＩ）和磷脂酰肌醇－４－磷酸（ＰＩ－４－Ｐ）的磷酸化分别生成磷... 展开更多
关键词 白血病 HL-60 细胞 磷酯酰肌醇激酶 吸附法
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